妊娠期糖尿病患者血漿Betatrophin、Visfatin、NF-κB表達及臨床意義

吳麗娟，陳 煒

妊娠期糖尿病(gestational diabetes mellitus, GDM)指妊娠期出現(xiàn)的胰島素抵抗和糖代謝紊亂狀態(tài)，是一種多基因遺傳內(nèi)分泌代謝性疾病[1]。GDM的病因較為復雜，其具體的發(fā)病機制至今尚未完全清楚。目前，較為公認的機制是GDM的發(fā)生與妊娠期出現(xiàn)胰島β細胞分泌缺陷和胰島素抵抗相關(guān)，且胰島素抵抗是疾病發(fā)生的主要機制[2]。重組β細胞營養(yǎng)因子(Betatrophin)是近年來在胰島素抵抗小鼠模型中發(fā)現(xiàn)的細胞因子，相關(guān)研究結(jié)果表明，Betatrophin與糖尿病患者糖代謝和脂代謝相關(guān)[3]。脂肪細胞因子參與妊娠過程中的人體代謝調(diào)節(jié)，內(nèi)脂素(Visfatin)主要在人體內(nèi)臟的脂肪組織中呈現(xiàn)高表達，與機體代謝關(guān)系密切，具有模擬胰島素的作用，可促使胰島β細胞的增殖[4]。此外，核因子-κB(NF-κB)是轉(zhuǎn)錄因子家族成員，與糖尿病的病理生理機制關(guān)系密切，高血糖狀態(tài)可誘導激活應(yīng)激信號轉(zhuǎn)導通路，NF-κB的激活作為原始信號激活事件，是高血糖與氧化應(yīng)激發(fā)生的一個重要細胞內(nèi)靶點[5]。本研究分析GDM患者血漿Betatrophin、Visfatin、NF-κB表達情況，并探討其臨床意義，具體報告如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2018年11月—2019年11月咸寧市中醫(yī)醫(yī)院收治的60例GDM作為GDM組，另選取60例同期糖耐量正常孕婦作為對照組。兩組年齡、孕前體質(zhì)量指數(shù)、產(chǎn)次、采血孕周等一般資料比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，具有可比性。見表1。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學倫理委員會批準通過。

表1 妊娠期糖尿病患者和糖耐量正常孕婦兩組的一般資料比較

1.2納入與排除標準 ①納入標準：妊娠24～28周進行口服葡萄糖耐量試驗；年齡20～35歲；自然受孕，且為單胎妊娠；孕婦及家屬均知情同意，且簽署知情同意書。②排除標準：孕婦年齡>35歲；孕前已確診為糖尿病患者；妊娠前合并慢性高血壓病史；合并心腦血管疾病、風濕性疾病、免疫性疾病等；存在胎盤前置、胎盤早剝、胎兒生長受限等其他妊娠期并發(fā)癥；合并惡性腫瘤、感染性疾??；長期使用糖皮質(zhì)激素；合并嚴重臟器功能障礙。

1.3GDM診斷標準 依據(jù)2011美國糖尿病學會頒布的GDM診斷標準[6]，妊娠24～28周對孕婦進行75 g口服葡萄糖耐量試驗，若符合下列任意1項或以上即可診斷為GDM：①空腹血糖(FPG)>5.1 mmol/L；②口服葡萄糖耐量試驗1 h血糖>10.0 mmol/L；③口服葡萄糖耐量試驗2 h血糖>8.5 mmol/L。

1.4方法 所有孕婦均于妊娠24～28周，清晨采集空腹肘靜脈血5 ml，3 ml置于促凝管，2 ml置于EDTA抗凝管，離心分離血清和血漿，分別置于-70℃低溫冰箱保存待測。①血清標本檢測FPG、空腹胰島素(FINS)，胰島素抵抗情況應(yīng)用穩(wěn)態(tài)模型胰島素抵抗指數(shù)(HOMA-IR)評估，HOMA-IR=FINS×FPG/22.5。②血漿Betatrophin、Visfatin檢測采用酶聯(lián)免疫吸附試驗，試劑盒購自北京愛迪博生物科技有限公司；NF-κB檢測也采用酶聯(lián)免疫吸附試驗，試劑盒購自上?；鶢栴D生物科技有限公司。

1.5觀察指標 ①比較GDM組與對照組血漿Betatrophin、Visfatin、NF-κB表達差異。②分析血漿Betatrophin、Visfatin、NF-κB對于GDM的診斷效能。③比較GDM組與對照組血糖指標FPG、FINS、HOMA-IR差異。④分析GDM患者血漿Betatrophin、Visfatin、NF-κB與血糖指標的相關(guān)性。

2 結(jié)果

2.1血漿Betatrophin、Visfatin、NF-κB表達水平比較 GDM組血漿Betatrophin、Visfatin及NF-κB表達水平均高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。見表2。

2.2血漿Betatrophin、Visfatin、NF-κB評估GDM效能分析 ROC曲線分析結(jié)果顯示，血漿Betatrophin、Visfatin、NF-κB聯(lián)合檢測評估GDM發(fā)生的曲線下面積(AUC)為0.934、敏感度為80.00%、特異度為93.30%。聯(lián)合檢測的AUC大于Betatrophin、Visfatin、NF-κB單獨檢測，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表3和圖1。

表2 妊娠期糖尿病患者和糖耐量正常孕婦兩組血漿Betatrophin、Visfatin、NF-κB水平比較

表3 血漿Betatrophin、Visfatin、NF-κB評估妊娠期糖尿病效能分析

圖1 血漿Betatrophin、Visfatin、NF-κB評估妊娠期糖尿病的ROC曲線

2.3血糖指標比較 GDM組FPG、FINS、HOMA-IR水平均高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。見表4。

表4 妊娠期糖尿病患者和糖耐量正常孕婦兩組FPG、FINS、HOMA-IR水平比較

2.4GDM患者血漿Betatrophin、Visfatin、NF-κB與血糖指標相關(guān)性分析 GDM患者血漿Betatrophin與HOMA-IR呈正相關(guān)(P<0.01)；Visfatin與FINS呈負相關(guān)(P<0.05)；NF-κB與FPG、HOMA-IR呈正相關(guān)(P<0.01)。見表5。

表5 妊娠期糖尿病患者血漿Betatrophin、Visfatin、NF-κB與血糖指標相關(guān)性分析

3 討論

近年來，隨著人民生活水平提高，GDM的發(fā)生率也在不斷提高，其發(fā)生率為妊娠女性的1.0%～14.0%[7]。GDM的發(fā)生和多種孕婦及胎兒并發(fā)癥相關(guān)，對母嬰危害極大，可導致巨大兒、胎兒宮內(nèi)窘迫、胎盤早剝、子癇等一系列并發(fā)癥的發(fā)生，增加子代成年后代謝綜合征患病風險[8-11]。

Betatrophin主要在肝臟中表達，少量于腦組織、脂肪組織、心肌組織、直腸表達，參與機體的糖代謝和脂代謝[12]。本研究通過對GDM及正常妊娠婦女進行分析，發(fā)現(xiàn)GDM患者血漿Betatropihn表達水平高于正常孕婦，與張遠遠等[13]研究結(jié)果一致。同時本研究發(fā)現(xiàn)Betatropihn水平與患者HOMA-IR呈現(xiàn)正相關(guān)，而與FPG和FINS無相關(guān)性。陳龍等[14]通過動物實驗研究表明，胰島素抵抗可造成肝臟Betatrophin的分泌增加，而高血糖本身并不誘導Betatrophin表達升高，提示血清Betatrophin升高和胰島素抵抗有關(guān)。周春蘭和何世梅[15]研究發(fā)現(xiàn)血清Betatrophin高水平可增強胰島素抑制糖異生途徑，此外Betatrophin還可通過Akt-GSK3β、Akt-FoxO1通路，在一定程度上減輕胰島素抵抗?；诖耍狙芯客茰y血漿Betatrophin水平增高可能是機體對胰島素抵抗的一種代償保護，即為了改善胰島素抵抗，患者肝臟分泌高濃度Betatrophin。本研究通過ROC曲線評估血漿Betatrophin對GDM發(fā)生的價值，其AUC為0.827，預(yù)測效能較高。

Visfatin具有類似胰島素的生物效應(yīng)，可促進脂肪細胞分化，抑制肝糖原釋放，促進血管平滑肌細胞的成熟過程。Visfatin可通過激活胰島素信號控制機體葡萄糖攝取，抑制肝糖原釋放，作用與胰島素類似，推測其可能通過與胰島素受體結(jié)合，產(chǎn)生和胰島素類似的信號通路，從而降低血糖水平[16-17]。還有研究表明，GDM患者血清Visfatin水平較糖耐量處于正常水平的妊娠婦女明顯升高，并認為血清Visfatin異常升高可能和妊娠期糖耐量異常有關(guān)[18]。本研究中GDM組血漿Visfatin表達水平高于對照組，與上述研究結(jié)果一致。本研究中Visfatin與FINS呈負相關(guān)，Visfatin增加是機體對高血糖應(yīng)激產(chǎn)生的代償反應(yīng)，胰島素絕對不足狀態(tài)下呈現(xiàn)代償增加，可能對GDM患者具有一定的保護作用。評估血漿Visfatin對GDM發(fā)生的價值發(fā)現(xiàn)，AUC為0.717，其預(yù)測效能低于Betatrophin與NF-κB。

近年來研究發(fā)現(xiàn),NF-κB 在糖尿病發(fā)生的始動環(huán)節(jié)發(fā)揮重要作用，能夠介導血管平滑肌細胞生長、增殖、遷移，且各種炎癥因子共同作用下觸發(fā)的氧化應(yīng)激反應(yīng)是造成胰島素抵抗的關(guān)鍵[19-20]。本研究中GDM患者NF-κB 表達水平高于正常孕婦，NF-κB作為高血糖與氧化應(yīng)激主要靶點，調(diào)控多種與炎癥反應(yīng)、細胞增生、細胞分化相關(guān)基因的表達。本研究中NF-κB與FPG水平呈正相關(guān)，血糖水平越高，則患者NF-κB表達水平也越高，說明高血糖狀態(tài)下NF-κB活性越強，同時本研究也發(fā)現(xiàn)NF-κB與HOMA-IR呈現(xiàn)正相關(guān)，其機制可能是高血糖狀態(tài)下，葡萄糖氧化、糖基化終產(chǎn)物、多元醇途徑活性改變可引起體內(nèi)氧自由基的增加，發(fā)生氧化還原失衡，導致NF-κB信號通路激活，產(chǎn)生造成細胞損傷的產(chǎn)物，引起相關(guān)病理改變；與此同時活化后的產(chǎn)物，例如炎性因子，又可激活NF-κB，進一步增加炎性因子表達，導致胰島素的敏感性降低[21-22]。評估血漿NF-κB對GDM發(fā)生的價值發(fā)現(xiàn)，AUC為0.804，同時本研究分析三項指標聯(lián)合檢測評價GDM發(fā)生的AUC達到0.934，進一步說明三項指標聯(lián)合對于GDM具有較高的評估價值。

綜上所述，GDM患者血漿Betatrophin、Visfatin、NF-κB表達水平明顯升高，且Betatrophin與胰島素抵抗呈正相關(guān)，Visfatin與胰島素呈負相關(guān)，NF-κB與血糖及胰島素抵抗呈正相關(guān)，三項指標聯(lián)合檢測對GDM具有較高的評估價值。