噬菌體對肉雞生長性能、血液特征和微生物脫落的影響

卓國榮，付學智，丁麗軍，趙莎莎，李 玲

（1.江蘇農(nóng)牧科技職業(yè)學院，江蘇泰州 225300；2.正大蛋業(yè)（湖北）有限公司，湖北黃岡 438800）

與食用家禽產(chǎn)品有關的沙門氏菌感染在經(jīng)濟和公共衛(wèi)生方面的嚴重性凸顯了控制沙門氏菌的必要性。飼料添加劑對肉雞生長性能和沙門氏菌定植都有有益影響，這將引起家禽業(yè)的興起，并成為控制肉雞沙門氏菌感染的重要工具（馮軍廠，2016）。噬菌體是一種可以感染細菌并在細菌中繁殖的病毒，它已經(jīng)被用于預防和治療細菌疾病，并使其成為抗生素的有效替代品（袁玉玉等，2017）。通常，噬菌體是專性的胞內(nèi)寄生蟲，它們利用宿主的部分或全部合成機制在細菌內(nèi)繁殖，當噬菌體融入細胞后便開始復制，直至細菌解體。已有研究報道，噬菌體的加入成功減少雞內(nèi)臟和糞便中沙門氏菌數(shù)量或家禽產(chǎn)品中的沙門氏菌數(shù)量（Toro等，2005）。Atterbury等（2007）評估了3種水平噬菌體對雞病原體的影響，結果發(fā)現(xiàn)，提高噬菌體水平可有效降低肉雞中沙門氏菌的定植水平。Zhao等（2012）研究報道，噬菌體的加入有利于蛋雞產(chǎn)蛋和雞蛋質(zhì)量。但相關研究報道是在細菌感染條件下進行的，關于機體正常狀態(tài)下的研究有限。因此，本試驗旨在探究不受細菌感染情況下，僅加入噬菌體是否能對沙門氏菌進行有效控制，并且是否能對肉雞生長性能產(chǎn)生有益影響。

1 試驗材料與方法

1.1 試驗動物和日糧試驗將672只平均初始體重為（45±2.03）g 的1日齡肉雞隨機分為4組，每組6個重復，每個重復28只。4組肉雞分別飼喂基礎日糧（表1），基礎日糧+50 mg/kg桿菌肽鋅、基礎日糧+0.25和0.5 g/kg噬菌體。本研究中使用的噬菌體包含雞沙門氏菌、鼠傷寒和腸炎沙門氏菌，比例為3∶3∶4。噬菌體的濃度為每克108個菌斑。

表1 試驗肉雞日糧組成

1.2 采樣和測定每周記錄采食量，并對肉雞進行稱重，以此計算日增重、日采食量和料重比。試驗第24 天，在肉雞日糧中添加0.2%氧化鉻作為難消化標記物，28 d時連續(xù)收集3 d的糞便樣品，采用國標法測定干物質(zhì)、總能和氮的表觀消化率。試驗結束當天，每組隨機選擇體重接近的4只雞，利用翅下靜脈采血，使用自動血液分析儀分析白細胞、紅細胞數(shù)量和淋巴細胞百分率。之后將雞屠宰，分離肝臟、脾臟、法氏囊、胸肌、腹脂和肌胃，稱重后以其與活重的百分比作為相對重量。胸肌用于測定肉色。

第32 天收集每個重復的糞便樣本，-4℃保存，參考李在建等（2016）的方法測定糞中大腸桿菌、沙門氏菌和乳酸桿菌數(shù)量。

1.3 統(tǒng)計分析數(shù)據(jù)采用SAS 軟件一般線性模型（GLM）進行方差分析，以重復為實驗單位。采用Duncan’s法進行多重比較，P＜0.05表示差異顯著。

2 結果與分析

2.1 噬菌體對肉雞生長性能和營養(yǎng)物質(zhì)消化率的影響抗生素組和不同水平的噬菌體組對生長后期（15～32 d）及全期（1～32 d）肉雞的平均日增重、平均日采食量和料重比的影響無顯著差異（P＞0.05）（表2）。但與對照組相比，0.5 g/kg噬菌體組1～14 d肉雞料重比顯著降低7.07%（P＜0.05）。各組肉雞干物質(zhì)、氮和總能表觀消化率無顯著差異（P＞0.05）。

表2 噬菌體對肉雞生長性能和營養(yǎng)物質(zhì)消化率的影響

2.2 噬菌體對肉雞器官相對重量及肌肉顏色的影響肉雞日糧添加抗生素或噬菌體對肌肉顏色如亮度（L）、紅度（a）和黃度（b）以及pH的影響無顯著差異（P＞0.05）（表3）。同時，各組肉雞免疫器官（脾臟、法氏囊和胸）、腹脂和肌胃的相對重量無顯著差異（P＞0.05）。0.25 g/kg噬菌體組肉雞肝臟相對重量顯著提高11.00%（P＜0.05）。

表3 噬菌體對肉雞器官相對重量及肌肉顏色的影響

2.3 噬菌體對肉雞血細胞計數(shù)和糞便微生物含量的影響由表4可知，各組肉雞血液紅細胞、白細胞計數(shù)和淋巴細胞百分比無顯著差異（P＞0.05）（表4）。對照組、0.25 g/kg噬菌體組和抗生素組對糞便乳酸桿菌含量的影響無顯著差異（P＞0.05），但0.5 g/kg噬菌體組糞便乳酸桿菌數(shù)量較對照組和抗生素組顯著提高5.33%和5.66%（P＜0.05）。對照組糞便中大腸桿菌和沙門氏菌含量最高，糞便大腸桿菌數(shù)量分別較其他組顯著提高6.80%、5.80%和7.48%（P＜0.05），糞便沙門氏菌數(shù)量分別較其他組提高了26.56%、16.13%和22.73%（P＜0.05）。

表4 噬菌體對肉雞血細胞計數(shù)和糞便微生物含量的影響

3 討論

本研究評估了正常生理條件下日糧添加不同濃度噬菌體對肉雞生長性能、血液特征和微生物脫落的影響。結果表明，加入抗生素和噬菌體并沒有影響肉雞的日增重、采食量和養(yǎng)分消化，這與Huff等（2002）的研究結果一致。但本研究飼料效率在1～14 d有所提高，且這種效果隨著雛雞年齡增加而減弱，同時添加0.5 g/kg噬菌體的日增重有大于對照組的趨勢，這可能是因為年幼的雛雞更容易受到病原體的影響，對能抑制環(huán)境中潛在病原體的添加劑也更敏感。噬菌體的存在使年幼雛雞克服了潛在病原體，并且這些病原體對生長并沒有負面作用。日糧處理對營養(yǎng)物質(zhì)消化率無顯著差異，提示噬菌體對營養(yǎng)物質(zhì)消化沒有影響，但還有待進一步證實。

另外，本研究發(fā)現(xiàn)，補充噬菌體可增加糞便中乳酸菌的數(shù)量，降低大腸桿菌和沙門氏菌的數(shù)量。此外，Lee和Harris（2001）報道，沙門氏菌特異性溶菌噬菌體可作為一種潛在的方法來減少家畜沙門氏菌。Atterbury等（2007）研究表明，添加噬菌體可以減少肉雞盲腸沙門氏菌的定植。Huff等（2004）提出，噬菌體的加入可以減少大腸桿菌在肉雞中的定植。因此，我們推測，噬菌體的有益作用可能是由于肉雞中微生物生態(tài)系統(tǒng)的改善，本次試驗結果中對糞便微生物脫落的研究結果也支持這一假設。

本研究日糧對胸肌肉色和pH無顯著影響。一般來說，肉的顏色與pH密切相關。因此，對肉色缺乏反應可能是由于各處理組之間的pH相同，這說明日糧中添加抗生素或噬菌體并不會影響肉的顏色和胸肌pH。此外，與對照組相比，噬菌體的加入增加了肝臟相對重。肝臟是最大的代謝和免疫器官，因此，早期肝臟發(fā)育有利于雛雞正常的免疫功能。

4 結論

綜上所述，全價料中補充0.5 g/kg噬菌體可提高肉雞生長早期的飼料效率和肝臟相對重量，但對胸肌顏色無顯著影響，具有抑制肉雞病原體脫落的作用。