不同產(chǎn)地、采收期、種植條件對覆盆子有效成分含量的影響研究

付彩群，黃道明，鄭露盼，張曉云，毛坤軍，周燕霞

1.上饒市食品藥品檢驗(yàn)檢測中心，江西 上饒 334000；2.九江市食品藥品檢驗(yàn)所，江西 九江 332000；3.江西醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校，江西 上饒 334099

覆盆子為薔薇科植物華東覆盆子Rubus chingiiHu 的干燥果實(shí)，收載于2020 年版《中國藥典》，別名掌葉覆盆子。夏初果實(shí)由綠變綠黃時(shí)采收，除去梗、葉，置沸水中略燙或略蒸，取出，干燥。其性味甘、酸、溫，具有益腎固精縮、養(yǎng)肝明目之功效，主要用于遺精滑精、遺尿尿頻、目暗昏花［1］。目前，國內(nèi)外對覆盆子的研究主要集中在資源調(diào)查、偽品鑒別、成分分離、質(zhì)量控制及藥理作用等方面［2-11］，未見對不同產(chǎn)地、采收期、種植條件下的成分差異研究。研究表明，中藥藥材質(zhì)量的好壞既與藥材本身品種來源、遺傳變異相關(guān)，也受氣候土壤、光照水分等地理因素影響，還與生產(chǎn)產(chǎn)地、采收加工等因素相關(guān)［12-19］。本研究按照《中國藥典》2015 年版一部規(guī)定，對不同產(chǎn)地、采收期和種植條件的覆盆子中鞣花酸、山柰酚-3-0-蕓香糖苷含量進(jìn)行研究，為覆盆子藥材的采收加工以及資源開發(fā)利用提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 儀器

Waters 2695 高效液相色譜儀；Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C18 色譜柱；sartorius BS-124S 電子天平；電熱恒溫水浴鍋。

1.2 試劑

鞣花酸對照品（批號為111959-201602，含量以89.3%計(jì)，購自中國藥品生物制品檢定所），山柰酚-3-0-蕓香糖苷（批號為112007-201602，含量以 90.8% 計(jì)，購自中國藥品生物制品檢定所）。所用試劑均為分析純，實(shí)驗(yàn)用水均為去離子水。

1.3 藥材

不同采摘期、不同種植條件的覆盆子均為2018年至2020 年在江西德興覆盆子種植基地采摘，其他產(chǎn)地的覆盆子藥材購買于各市場，經(jīng)上饒市食品藥品檢驗(yàn)檢測中心黃道明副主任藥師鑒定為薔薇科植物華東覆盆子Rubus chingiiHu 的干燥果實(shí)。具體產(chǎn)地及批次見表1。

表1 覆盆子藥材產(chǎn)地及批號

2 方法與結(jié)果

2.1 標(biāo)準(zhǔn)品溶液的制備

2.1.1 鞣花酸標(biāo)準(zhǔn)品溶液的制備 取鞣花酸對照品11.50 mg，精密稱定，至50 mL 容量瓶中，加70%甲醇溶解，稀釋至刻度，搖勻，精密吸取1 mL 溶液至50 mL 容量瓶中，加70%甲醇溶解，稀釋至刻度，搖勻，即得。

2.1.2 山柰酚-3-0-蕓香糖苷標(biāo)準(zhǔn)品溶液的制備 取山柰酚-3-O-蕓香糖苷對照品9.63 mg，精密稱定，至100 mL容量瓶中，加甲醇溶解，稀釋至刻度，搖勻，即得。

2.2 供試品溶液的制備

按照《中國藥典》（2015 年版）一部覆盆子品種項(xiàng)下鞣花酸、山柰酚-3-0-蕓香糖苷含量測定方法的樣品制備方法制備樣品。

2.3 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)

2.3.1 鞣花酸 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-0.2%磷酸溶液（15∶85）為流動(dòng)相；檢測波長為254 nm。理論板數(shù)按鞣花酸峰計(jì)算應(yīng)不低于3 000。色譜圖見圖1。

圖1 HPLC色譜圖：A鞣花酸對照品，B覆盆子供試品

2.3.2 山柰酚-3-0-蕓香糖苷 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-0.2%磷酸溶液（15∶85）為流動(dòng)相；檢測波長為344 nm。理論板數(shù)按山柰酚-3-O-蕓香糖苷峰計(jì)算應(yīng)不低于3 000。色譜圖見圖2。

圖2 HPLC色譜圖：A.山柰酚-3-0-蕓香糖苷對照品，B.覆盆子供試品

2.4 含量測定結(jié)果

2.4.1 不同產(chǎn)地的含量測定結(jié)果 按照上述HPLC 含量測定方法，對不同產(chǎn)地覆盆子中鞣花酸和山柰酚-3-0-蕓香糖苷進(jìn)行含量測定，結(jié)果見表2。

表2 不同產(chǎn)地之間的含量結(jié)果

2.4.2 不同采收期的含量測定結(jié)果 按照上述HPLC含量測定方法，對不同采收期覆盆子中鞣花酸和山柰酚-3-0-蕓香糖苷進(jìn)行含量測定，結(jié)果見表3。

表3 不同采收期的含量結(jié)果

2.4.3 不同種植條件的含量測定結(jié)果 按照上述HPLC含量測定方法，對不同種植條件覆盆子中鞣花酸和山柰酚-3-0-蕓香糖苷進(jìn)行含量測定，結(jié)果見表4。

表4 不同種植條件的含量結(jié)果

3 討論

3.1 不同產(chǎn)地對有效成分的影響

從表2 可以看出，不同產(chǎn)地的覆盆子中鞣花酸和山柰酚-3-0-蕓香糖苷含量差異較大，浙江產(chǎn)的鞣花酸含量均高于江西產(chǎn)，表明產(chǎn)地對藥材質(zhì)量有顯著影響。

3.2 不同采收期對有效成分的影響

從表3 可以看出，覆盆子青果的鞣花酸含量和山柰酚-3-0-蕓香糖苷含量均比黃果更高，說明不同采收期的藥材質(zhì)量也有差異，故應(yīng)盡量控制覆盆子采收時(shí)間，避免覆盆子因成熟而含量下降。

3.3 不同種植條件對有效成分的影響

從表4 可以看出，不同種植條件下覆盆子中有效成分含量差異不大，但背陽的覆盆子中鞣花酸含量均高于向陽，而向陽條件下的山柰酚-3-0-蕓香糖苷含量會(huì)更高。這可能是因?yàn)楣庹漳艽龠M(jìn)果實(shí)中糖分的積累，從而使酸性物質(zhì)減少。

4 小結(jié)

藥材質(zhì)量的優(yōu)劣除與藥材品種、品質(zhì)密切相關(guān)外，其有效成分在體內(nèi)的形成和積累與產(chǎn)地、種植條件以及采收期等均相關(guān)。本研究參照《中國藥典》中覆盆子的質(zhì)量控制方法，對不同產(chǎn)地、采收期、種植條件下覆盆子有效成分鞣花酸和山柰酚-3-0-蕓香糖苷的含量進(jìn)行測定，初步闡明了不同產(chǎn)地、采收期、種植條件下有效成分的含量差異，為覆盆子臨床藥用的選擇，推動(dòng)覆盆子的種植規(guī)范化、產(chǎn)業(yè)化和質(zhì)量評價(jià)提供科學(xué)依據(jù)，為覆盆子資源的進(jìn)一步開發(fā)利用奠定了基礎(chǔ)。