子癇前期孕婦血清中輔助性T細(xì)胞17相關(guān)細(xì)胞因子的表達(dá)水平及其相關(guān)性研究

郭霞

（濮陽市婦幼保健院 產(chǎn)科，河南 濮陽 457000）

據(jù)統(tǒng)計，孕婦發(fā)生子癇前期的概率為10%，是妊娠期的特有疾病，一旦發(fā)病就會累及多種器官功能，從而引發(fā)一系列并發(fā)癥，國內(nèi)外研究認(rèn)為子癇前期是導(dǎo)致孕產(chǎn)婦不良妊娠結(jié)局或死亡的主要原因之一［1-2］。隨著臨床對該疾病研究的不斷深入，醫(yī)學(xué)者發(fā)現(xiàn)其發(fā)生與免疫因素具有密切聯(lián)系，輔助性T 細(xì)胞17（Th17）屬于介導(dǎo)炎性反應(yīng)的細(xì)胞亞群，可分泌出IL-17、IL-21、IL-23 等多種細(xì)胞因子，通過大量釋放活性物質(zhì)（如過氧化氫、氧自由基等）損害血管內(nèi)皮細(xì)胞，由此可以推測出在子癇前期孕婦的發(fā)病及發(fā)展過程中，Th17 可能參與了炎性病理機(jī)制［3］。但目前對于子癇前期孕婦血清中Th17 相關(guān)細(xì)胞因子的變化與發(fā)病機(jī)制的關(guān)系尚未明確，因此，本文通過研究檢測，分析了子癇前期孕婦血清中Th17 相關(guān)細(xì)胞因子的表達(dá)水平與病情發(fā)展的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇濮陽市婦幼保健院產(chǎn)科2018 年10 月至2020 年6 月收治的90 例子癇前期孕婦作為此次研究的觀察組。納入標(biāo)準(zhǔn)：經(jīng)診斷確診為子癇前期者；單胎妊娠者；對此次研究的目的、方法、過程均有清晰了解并自主參與研究者。排除標(biāo)準(zhǔn)：合并免疫系統(tǒng)疾病、高血壓、糖尿病、心臟系統(tǒng)疾病、惡性腫瘤、慢性血管疾病或其他產(chǎn)科并發(fā)癥者；存在慢性肝腎功能不全者；存在腹痛、見紅、陰道流血等癥狀者；多胎或胎兒畸形者；胎兒染色體數(shù)目存在異常者；以往存在免疫治療史、器官移植史者。再分別選擇同期入院進(jìn)行孕檢的健康孕婦和體檢的健康女性作為對照組1、對照組2，各80 例。本次研究已獲得本院倫理委員會批準(zhǔn)。觀察組年齡23～31 歲，平均（27.36±1.22）歲；孕周27～37 周，平均（31.69±2.33）周；體重指數(shù)（BMI）24～30 kg/m2，平均（27.30±2.59）kg/m2；初產(chǎn)婦71 例。對照組1 年齡23～32 歲，平均（27.69±1.58）歲；孕周26～37 周，平均（31.41±2.07）周；BMI 25～31 kg/m2，平 均（27.67±2.87）kg/m2；初產(chǎn)婦63 例。對照組2 年齡23～32歲，平均（28.13±1.50）歲；BMI 20～24 kg/m2，平均（22.38±1.61）kg/m2；均未生育。經(jīng)比較，觀察組與對照組1、對照組2 的年齡比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），觀察組與對照組1 的孕周、BMI及初產(chǎn)婦例數(shù)比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。

1.2 方法

抽取所有入選受試者清晨空腹?fàn)顟B(tài)下靜脈血，并以3 000 r/min 速度離心后取血清樣本，置于零下80℃冰箱保存；然后由同一位技術(shù)人員采用酶聯(lián)免疫吸附定量試驗法（ELISA）檢測受試者血清中的白細(xì)胞介素（IL）-17、IL-21、IL-23、轉(zhuǎn)化生長因子-β（TGF-β）水平。具體步驟如下：使用ELISA 試劑將樣本連續(xù)稀釋后產(chǎn)生7 個點的標(biāo)準(zhǔn)曲線，將樣本加入每個孔中孵育過夜，溫度設(shè)置為4℃；經(jīng)孵育、洗滌后，在每個孔中加入預(yù)混合的檢測抗體，于室溫下溫育2 h，經(jīng)再次洗滌后于各孔中加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記鏈霉親和素，20 min 后終止溫育；將終止溶液加入各孔中，使用酶標(biāo)儀對各孔的光密度進(jìn)行測定，酶標(biāo)儀設(shè)置為450 nm，最終獲得IL-17、IL-21、IL-23、TGF-β 含量。

1.3 觀察指標(biāo)

詳細(xì)記錄并比較3 組受試者的IL-17、IL-21、IL-23、TGF-β 水平，同時根據(jù)子癇前期患者的病情嚴(yán)重程度劃分為輕、重度，對比輕、重度患者的上述指標(biāo)，分析IL-17 與IL-21、IL-23、TGF-β水平的相關(guān)性。其中，若子癇前期孕婦的血壓水平>140/90 mmHg（1 mmHg=0.133 kPa），且尿蛋白定量>300 mg，尿蛋白/肌酐比>0.3，或隨機(jī)尿蛋白>300 mg/L，則判斷為輕度。若子癇前期孕婦符合以下1 條或以上條件，則判斷為重度：①存在頭暈、頭痛、視力模糊或中樞神經(jīng)系統(tǒng)異常，或腹部不適等情況；②血清轉(zhuǎn)氨酶升高；③血壓水平>160/110 mmHg；④血小板<100×109/L，24 h 尿蛋白定量>2 g，24 h 尿量<500 mL；⑤存在血管內(nèi)溶血、肺水腫、腦血管意外、凝血功能障礙、嬰兒生長受限等情況［4］。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

使用SPSS 22.0 統(tǒng)計學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。符合正態(tài)分布的計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（）表示，采用t檢驗；計數(shù)資料以百分率（%）表示，采用χ2檢驗；相關(guān)性分析采用Spearman 進(jìn)行。P<0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 3 組的IL-17、IL-21、IL-23、TGF-β 水平比較

3 組的IL-17、IL-21、IL-23、TGF-β 水平如表1所示，觀察組的IL-17、IL-21、TGF-β 均高于對照組1、對照組2，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），而對照組1、對照組2 比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）；觀察組的IL-23 水平與對照組1 比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），但明顯低于對照組2，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。

表1 3 組的IL-17、IL-21、IL-23、TGF-β 水平比較（）

表1 3 組的IL-17、IL-21、IL-23、TGF-β 水平比較（）

注：?與觀察組比較，P<0.05。

2.2 輕、重度子癇前期患者的IL-17、IL-21、IL-23、TGF-β 水平比較

輕、重度子癇前期患者的IL-17、IL-21、IL-23、TGF-β 水平如表2 所示，輕度患者的IL-17、TGF-β均低于重度患者，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），輕、重度患者的IL-21、IL-23 水平差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。

表2 輕、重度患者的IL-17、IL-21、IL-23、TGF-β 水平比較（）

表2 輕、重度患者的IL-17、IL-21、IL-23、TGF-β 水平比較（）

2.3 相關(guān)性分析

由表2 可知，子癇前期患者的血清IL-17 與IL-21、IL-23 無相關(guān)性（r=0.08、0.11,P=0.521）；IL-17 與TGF-β 呈正相關(guān)（r=0.57,P=0.006）。

3 討論

子癇前期是一種母體與胎盤之間的免疫失衡反應(yīng)，以往認(rèn)為免疫答應(yīng)所介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)是被母體的Th1/Th2 失衡所介導(dǎo)，而本文研究結(jié)果顯示，通過對比子癇前期患者、健康孕婦和健康女性的IL-17、IL-21、IL-23、TGF-β 水平，發(fā)現(xiàn)觀察組的IL-17 水平均高于對照組1、對照組2，由此可見，Th17 細(xì)胞亞群與子癇前期的發(fā)生、發(fā)展有關(guān)。此外，本文結(jié)果還顯示，輕度子癇前期患者的IL-17 水平低于重度患者，說明Th17 還可反映子癇前期患者的病情嚴(yán)重程度。子癇前期患者的IL-17 與TGF-β 呈正相關(guān)，表明患者的Th17 功能主要由TGF-β 介導(dǎo)。有研究發(fā)現(xiàn)［5］，在子癇前期患者的臨床檢測中，IL-17 水平提升會促進(jìn)廣泛性血管內(nèi)炎癥反應(yīng)的發(fā)展，從而將該指標(biāo)作為診斷子癇前期的主要指標(biāo)。因為IL-17 水平升高會使炎癥效應(yīng)因子、細(xì)胞因子的表達(dá)抗原、多種趨化因子等細(xì)胞因子也隨之升高，相互之間發(fā)揮作用，形成促炎狀態(tài)。以往研究也表示［6］，子癇前期患者血液中的多種促炎癥相關(guān)因子均有所升高，所以由此得出，子癇前期患者的炎癥反應(yīng)在發(fā)展過程中有IL-17 的參與。TGF-β 因子是促使Th17 細(xì)胞誘導(dǎo)、分化的主要刺激，這可能是兩者呈正相關(guān)的主要機(jī)制與原因。在本次研究中，雖然子癇前期患者的IL-21 水平較對照組1、對照組2 高，但是卻與患者的病情嚴(yán)重程度無關(guān)，雖然IL-21 水平在某些疾病中可以對CD4+細(xì)胞中的IL-17 進(jìn)行誘導(dǎo)，但在本次研究中，IL-21 并未參與到Th17細(xì)胞的調(diào)控中。子癇前期患者和健康孕婦的IL-23水平均低于對照組2，以往有研究表明該指標(biāo)水平下降可能是因為孕婦在孕期的Th2 細(xì)胞發(fā)揮主導(dǎo)功能，從而產(chǎn)生反應(yīng)，但是并未參與到子癇前期的病情發(fā)生、發(fā)展中［7-8］。

綜上所述，在孕婦子癇前期的發(fā)病和發(fā)展過程中，血清中的Th17 相關(guān)細(xì)胞因子發(fā)揮了重要作用，TGF-β 升高會促使IL-17 升高，兩者呈正相關(guān)，從而促進(jìn)Th17 活化，并參與到子癇前期孕婦的炎癥反應(yīng)中，是導(dǎo)致疾病發(fā)生的主要原因。