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    不同滲透時間對窩溝封閉邊緣封閉性能的影響

    2021-08-11 03:22:22周紅艷張曉旻梅予鋒
    口腔醫(yī)學(xué) 2021年7期
    關(guān)鍵詞:滲透深度原子力封閉劑

    周紅艷,張曉旻,曹 靈,王 玨,梅予鋒

    1 材料與方法

    1.1 材料和儀器

    Estiseal F光固化窩溝封閉劑、35%GLUMA釉質(zhì)酸蝕凝膠(Heraeus,德國);37 ℃恒溫培養(yǎng)箱(精宏,中國上海);4 ℃冰箱(海爾,中國山東);抗酸指甲油(Maybelline,美國);低速切割機(jī)(Isomet 1000,美國);體視顯微鏡XTB-1型(江南光學(xué)儀器廠);低速杯狀刷(TPC,美國);高速1/2球鉆(FG1/2,DENSPLY,美國);原子力顯微鏡(Veeco,Autopbobe CP-R型,美國)。

    1.2 方法

    1.2.1 標(biāo)本選擇 2017年7月—10月在南京醫(yī)科大學(xué)附屬口腔醫(yī)院頜面外科收集50顆因阻生拔除的下頜第三磨牙。納入標(biāo)準(zhǔn):牙體完整,無齲壞,無磨耗,無隱裂,無染色,無釉質(zhì)發(fā)育不良,深窩溝明顯。4 ℃生理鹽水浸泡保存。深窩溝的標(biāo)準(zhǔn)為:肉眼觀察離體牙,看不到窩溝底部,可以插入或卡住探針[4]。

    1.2.2 樣本分組與操作方法 將50 顆離體牙隨機(jī)編號分組,每組10顆,共5組。使用1/2球鉆對窩溝進(jìn)行釉質(zhì)成形[5],35%磷酸酸蝕30 s,沖洗后干燥,涂封閉劑,組1即刻光照40 s 使其固化。組2、3、4、5組標(biāo)本分別停留15 s、30 s、45 s、60 s后光固化40 s。

    窩溝封閉完成后要求所有深窩溝均被窩溝封閉劑覆蓋,并探診光滑,無氣泡。然后將樣本浸泡于37 ℃生理鹽水中24 h,分別浸入5 ℃和55 ℃蒸餾水中進(jìn)行500個溫度循環(huán),每個溫度停留30 s。用浸蠟法包裹整個牙根,對距封閉劑邊緣1.0 mm外的牙冠涂布3層指甲油,待指甲油干燥后,將樣本浸泡于37 ℃ 1%的亞甲基藍(lán)溶液中24 h后取出,流水沖洗24 h,于4 ℃蒸餾水中儲存。截除牙根,用蠟塊固定牙冠,用低速切割機(jī)沿近遠(yuǎn)中[6]窩溝片切標(biāo)本,每個樣本得到2個切片,共100個切片。

    1.2.3 滲透率和微滲漏測定 分別由兩位檢查者在帶測微器目鏡的體視顯微鏡( ×30)下,對每個切片進(jìn)行檢測,Kappa 值為0.87。測量方法參考Bahar法[7]。測量并記錄切片中最深窩溝內(nèi)封閉劑滲透深度的網(wǎng)格數(shù)(e)、窩溝深度的網(wǎng)格數(shù)(e+f)及染料滲漏的網(wǎng)格數(shù)(a+c)、封閉劑與窩溝交界面的網(wǎng)格數(shù)(b+d)[8](圖1)。封閉劑滲透率=e÷(e+f)×100%,微滲漏率=(a+c)÷(b+d)×100%。

    圖1 測量方法示意圖Fig.1 Schematic diagram of measurement method

    1周后,重復(fù)測定,每個切片經(jīng)過2次評估共有4次測定值,記錄其平均值。

    1.2.4 原子力顯微鏡的超微結(jié)構(gòu)觀察 根據(jù)體視顯微鏡結(jié)果選取即刻組及30 s組切片固定于硬組織切片機(jī)上,平行切片,切成約1 mm厚硬幣大小,徹底干燥保存。將樣品固定在原子力顯微鏡XY掃描臺上,用監(jiān)視器定位樣本的封閉劑-釉質(zhì)交界面,在大氣中進(jìn)行掃描成像。儀器工作方式為輕敲式,MPP-11123-10硅探針,所用的微懸臂力常數(shù)為20~80 N/m, 掃描長度為5 μm。利用儀器自帶的軟件(Image Processing Software Version 2.1)進(jìn)行圖像數(shù)據(jù)的采集。

    1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

    數(shù)據(jù)采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,使用K個獨(dú)立樣本非參數(shù)檢驗(yàn),檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。

    2 結(jié) 果

    2.1 滲透及微滲漏情況

    窩溝封閉不同滲透時間組的滲透率與邊緣微滲漏率見(表1)。隨著滲透時間的增長,封閉劑的滲透率明顯增加,在30 s時達(dá)到高峰,45 s及60 s時滲透率又平緩下降。K個獨(dú)立樣本非參數(shù)檢驗(yàn)顯示,5組的滲透率有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P=0.031),即刻固化組與30 s、45 s及60 s組均有顯著差異(P<0.05),其余各組之間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。而各組的邊緣微滲漏率無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。

    表1 不同滲透時間組封閉劑的滲透率及微滲漏率 Tab.1 Penetration rates and microleakage rates of sealant in different groups

    2.2 原子力顯微鏡觀察結(jié)果

    即刻組及停留30 s組的二維圖像均顯示明顯的樹脂突,清晰規(guī)則,三維圖像顯示樹脂突密集排列,樹脂突長度無顯著差異。見圖2、3。

    3 討 論

    窩溝封閉作為預(yù)防窩溝齲的一種有效方法已被許多研究證實(shí),并被臨床廣泛接受[9-11]。窩溝封閉通過保護(hù)牙釉質(zhì)不受細(xì)菌及代謝產(chǎn)物的侵蝕,以及斷絕原來存在于窩溝中細(xì)菌的營養(yǎng)來源這兩種作用機(jī)制,有效預(yù)防乳、恒牙窩溝齲的發(fā)生[12]。

    樹脂類窩溝封閉劑是一種高分子材料,具有良好的流動性,可以滲入狹窄的窩溝底部[13]。理論上,流動時間延長, 窩溝封閉劑滲透的深度應(yīng)增加。本研究結(jié)果表明光照之前停留滲透30 s可以使封閉劑的滲透深度及封閉劑與牙面之間的密合性達(dá)到最優(yōu)化,滲透30 s以上封閉劑的滲透深度并沒有繼續(xù)明顯增加,微滲漏率也并沒有顯著減少;相反,隨著滲透時間的增加,其滲透深度的平均值略有降低,微滲漏率也略有升高,但是與滲透30 s組的實(shí)驗(yàn)結(jié)果并沒有顯著差異。

    1987年Chosack等[14]研究了光照之前滲透時間分別為0.5 s、5.0 s、10.0 s及20.0 s的樹脂突長度,結(jié)果發(fā)現(xiàn)滲透20.0 s可以使封閉劑形成的樹脂突達(dá)到最長。Meyer-Lueckel等[15]在2006年研究了5種粘結(jié)劑及1種封閉劑分別在滲透15、30 s后滲透進(jìn)牛牙釉質(zhì)表面損害的能力,他們的研究結(jié)果顯示滲透時間增加,其材料的滲透深度及均一性均顯著增加。

    A:二維圖,顯示明顯的樹脂突,清晰規(guī)則;B:三維圖,顯示樹脂突密集排列,長度一致

    A:二維圖,顯示樹脂突明顯清晰,排列規(guī)則均勻;B:三維圖,顯示樹脂突長度一致,排列密集

    窩溝封閉劑被特定波長的光源照射后,很快聚合固化,失去流動性。如果光照之前窩溝封閉劑有足夠的時間來滲透,則其滲透深度可達(dá)到最大化,不會產(chǎn)生與牙面之間的縫隙,與牙面達(dá)到良好的密合性,即不會產(chǎn)生微滲漏。因?yàn)楣夤袒瘶渲┞队诃h(huán)境光線中較長時間時也會逐漸固化[16]。同理臨床操作時,如果滲透時間延長,由于環(huán)境光源的影響,樹脂類封閉劑表層也會緩慢固化,影響了封閉劑的流動,導(dǎo)致表層下的封閉劑固化不全或固化不均勻,使深窩溝最底處封閉不全且密合不良;同時臨床操作時滲透時間延長,增加了唾液污染的風(fēng)險(xiǎn),并不能產(chǎn)生理論上最大的滲透深度與最小的微滲漏。Hosseinipour、張曉曉等均研究證實(shí)唾液污染后窩溝封閉的微滲漏明顯增加[17-18]。Gawali等[19]研究發(fā)現(xiàn)唾液污染后疏水性封閉劑材料滲透深度明顯減少。

    Chosack等[14]通過觀察發(fā)現(xiàn)臨床使用光固化封閉劑通常不超過5 s即光照,并且由于兒童配合程度的影響,幾乎都是即刻光照。光固化封閉劑因易控制,操作時間短,縮短了對幼兒控制唾液污染的時間等優(yōu)點(diǎn)在臨床廣受歡迎。臨床中如果為了獲得最佳的滲透深度而使?jié)B透時間延長,同時又要防止唾液污染,則必須保證完全的隔濕與干燥。

    原子力顯微鏡一般有3種工作模式:接觸模式(contact mode)、非接觸模式(non-contact mode)和敲擊模式(tapping mode)[20]。3種模式各有特點(diǎn),可根據(jù)樣品性質(zhì)及實(shí)驗(yàn)需求選擇不同模式。其中敲擊模式不僅減少了接觸模式下掃描時針尖對樣品表面的影響,又具有比非接觸模式高的分辨率,適合樹脂突超微結(jié)構(gòu)研究,因此本研究選擇了敲擊模式。關(guān)于掃描電鏡觀察口腔科材料超微結(jié)構(gòu)的文獻(xiàn)很多,原子力顯微鏡在口腔研究中的應(yīng)用逐漸廣泛,Tuncay等[21]利用原子力顯微鏡研究樹脂根管封閉劑表面硬度,Keinan等[22]用原子力顯微鏡觀察牙釉質(zhì)的形態(tài)結(jié)構(gòu),但是關(guān)于原子力顯微鏡觀察封閉劑樹脂突的實(shí)驗(yàn)較少,因此本實(shí)驗(yàn)嘗試用原子力顯微鏡觀察封閉劑樹脂突的形成情況。

    本實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示,臨床操作窩溝封閉中,光照之前使封閉劑有最佳的滲透時間,可以獲得良好的邊緣封閉性能,期待進(jìn)一步研究證實(shí),以望臨床應(yīng)用。

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