鵝圓環(huán)病毒研究進(jìn)展

趙 敏 李家玉 何海斌 黃 瑜 萬春和,3＊

（1.福建農(nóng)林大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院 福州 350002；2.福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所/福建省畜禽疫病防治工程技術(shù)研究中心/福建省禽病防治重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 福州 350013；3.龍巖學(xué)院/預(yù)防獸醫(yī)學(xué)與生物技術(shù)福建省高校重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 福建龍巖364012）

鵝圓環(huán)病毒（Goose circovirus，GoCV）屬于圓環(huán)病毒科（Circoviridae）圓環(huán)病毒屬（Circovirus）[1]，圓環(huán)病毒科因其成員具有共價(jià)閉合環(huán)狀DNA而得名。根據(jù)國際病毒分類委員會(huì)（International Committee on Taxonomy of Viruses，ICTV）最新分類，圓環(huán)病毒科分為兩個(gè)屬（genera）：圓環(huán)病毒屬和Cyclovirus（建議命名為圓圈病毒屬，中文名尚未明確）。其中，圓環(huán)病毒屬有49個(gè)病毒種（species），Cyclovirus屬有52個(gè)病毒種。當(dāng)前，研究熱點(diǎn)主要集中在圓環(huán)病毒屬，如豬圓環(huán)病毒1型（PCV1）[2]、豬圓環(huán)病毒2型（PCV2）[3]、鸚鵡喙羽病毒（BFDV）[4]、鵝圓環(huán)病毒（GoCV）[5]、鴿圓環(huán)病毒（PiCV）[6]、雀圓環(huán)病毒（FiCV）[1]、鷗圓環(huán)病毒（GuCV）[7]、鴨圓環(huán)病毒（DuCV）、八哥圓環(huán)病毒（StCV）、天鵝圓環(huán)病毒（SwCV）[8]、斑鳩圓環(huán)病毒[9]和鴕鳥圓環(huán)病毒[10]等。

1 流行病學(xué)特點(diǎn)

GoCV感染最早是由德國學(xué)者Soike在1999年德國勃蘭登南部地區(qū)一群發(fā)育遲緩的鵝中發(fā)現(xiàn)[5]。我國臺(tái)灣學(xué)者Chen等[11]對21個(gè)臺(tái)灣地區(qū)鵝場進(jìn)行GoCV檢測，發(fā)現(xiàn)有16個(gè)鵝場存在GoCV感染。匈牙利學(xué)者Ball等[12]對來自76個(gè)鵝場的病死鵝血清進(jìn)行GoCV檢測，陽性率高達(dá)48.1%。余旭平等[13]在浙江永康禽流感病死鵝中檢測到GoCV。英國學(xué)者Scott等[14]對28個(gè)鵝場進(jìn)行血清學(xué)調(diào)查，GoCV陽性率高達(dá)88.6%。楊曉偉等[15]應(yīng)用PCR方法在重慶地區(qū)也檢測到GoCV。萬春和等[16]在江西省朗德鵝中檢測到GoCV。張敏等[17]從山東濰坊朗德鵝場中毛囊出血的鵝體內(nèi)檢測到GoCV。吳方達(dá)[18]在福建一例生長消瘦鵝中，檢測到GoCV。陳濟(jì)鐺等[19]對廣東232份鵝組織進(jìn)行GoCV感染檢測，發(fā)現(xiàn)陽性率為44%。蘭世捷等[20]從齊齊哈爾52日齡白鵝體內(nèi)檢測到GoCV。Niu等[21]從中國11個(gè)省采集了478個(gè)鵝組織進(jìn)行鵝常見病原監(jiān)測，發(fā)現(xiàn)H9禽流感和GoCV檢出率最高，且在春季和冬季流行更嚴(yán)重。此外，影響該病毒流行的其中一個(gè)因素就是鵝的飼養(yǎng)方式。郭婧[22]對圈養(yǎng)鵝和散養(yǎng)鵝開展GoCV流行病學(xué)調(diào)查發(fā)現(xiàn)，圈養(yǎng)鵝比散養(yǎng)鵝GoCV陽性率更高，提示不同飼養(yǎng)模式可能會(huì)影響GoCV傳播。大量的流行病學(xué)研究揭示，GoCV在世界多地鵝群中廣泛流行[23]。

2 基因組特征

GoCV基因組為共價(jià)閉合環(huán)狀、單股負(fù)鏈DNA。目前，基因組大小分三種，分別為：1820 nt（僅2株，GenBank登錄號(hào)AF536939和AF536938）、1821 nt和1822 nt（僅1株，GenBank登錄號(hào)KT207809）。

2.1 編碼區(qū) GoCV基因組編碼4個(gè)大的主要開放閱讀框（ORF）：V1（nt72/73-953）、C1（nt1760/1761-1008）、V2（nt1612/1613-1725）和C2（nt426/427-127）。V1位于病毒正義鏈上，編碼復(fù)制相關(guān)蛋白（Rep）；C1位于病毒負(fù)義鏈上，編碼病毒的核衣殼蛋白（Cap）。與其它圓環(huán)病毒屬病原類似，GoCV的Rep蛋白存在很多保守基序，如FRLNN、HLQ、WWDGY、DDFYGWLP、YCSK等，其中有3個(gè)保守基序（FRLNN、HLQG和YCSK）推測與病毒的滾環(huán)復(fù)制有關(guān)。

圖1 鵝圓環(huán)基因線性結(jié)構(gòu)圖

2.2 基因間區(qū) GoCV在編碼序列V1-ORF與C1-ORF間5'端基因間區(qū)含有保守的九堿基序列（TATTATTAC），研究發(fā)現(xiàn)其它代表株該序列頂部的第1位和第3位堿基的保守堿基序列存在特征性差異，具有種屬特異性[24]。而5'端基因間區(qū)在莖環(huán)附近，有兩個(gè)七堿基序列（GTACTCC）正向重復(fù)，該序列可能與滾環(huán)復(fù)制有關(guān)。

2.3 遺傳進(jìn)化分析 遺傳進(jìn)化分析發(fā)現(xiàn)，GoCV可以被劃分為3個(gè)類群，即I群和II群和III群。其中，I群和II群分別包含兩個(gè)亞群：I1群（臺(tái)灣株TW1/2/3/4/5/7/10/11）、I2群 （中國浙江株xs2/3/4）、IIl群（臺(tái)灣株TW6/8/9）、II2群（中國浙江株xs5/6）；III群包含德國株、中國浙江株yk1/2/3/4及xsl[22]。

3 致病性

鵝感染GoCV后，主要表現(xiàn)為發(fā)育不良、羽毛凌亂、消瘦，同時(shí)伴有精神沉郁，嚴(yán)重者還會(huì)出現(xiàn)羽毛脫落和羽毛囊壞死現(xiàn)象，且這些癥狀的產(chǎn)生可能與感染年齡、病毒毒力和繼發(fā)感染等因素有關(guān)[25-27]。Ting等[26]在研究我國臺(tái)灣地區(qū)鵝群羽毛脫落征與GoCV之間的關(guān)系時(shí)發(fā)現(xiàn)，用純化后的GoCV對雛鵝進(jìn)行人工感染，觀察到雛鵝出現(xiàn)腹瀉、生長遲緩和羽毛生長障礙，通過PCR檢測GoCV時(shí)，法氏囊、胸腺、脾腺、十二指腸和肝均呈現(xiàn)陽性。

病理組織學(xué)檢查結(jié)果表明，鵝感染GoCV后主要表現(xiàn)為法氏囊、胸腺和脾等組織的淋巴細(xì)胞減少，肝臟發(fā)生病變同時(shí)出現(xiàn)空泡，脾臟有間質(zhì)性肺炎和出血，中央靜脈周圍大多被炎性細(xì)胞大部分浸潤，法氏囊結(jié)構(gòu)遭到破壞，并觀察到嗜堿性的包涵體[28]。也有研究發(fā)現(xiàn)GoCV與其它病毒進(jìn)行共感染，會(huì)導(dǎo)致高死亡率[29]。

4 診斷方法

血清學(xué)檢測是檢測鵝圓環(huán)病毒的方法之一，近年來也有很多學(xué)者對該方法進(jìn)行了研究。2006年，英國學(xué)者Scott等[14]建立了熒光抗體檢測方法。2008年，余旭平等[30]通過開展不包含核定位信號(hào)序列編碼區(qū)的核衣殼蛋白基因（Cap）的融合表達(dá)研究，為建立鵝圓環(huán)病毒ELISA檢測方法奠定了重要的基礎(chǔ)。2013年，姜珂冉等[31]建立了鵝圓環(huán)病毒抗體間接ELISA檢測方法，該方法具有較好的特異性和重復(fù)性，有利于大面積地開展GoCV感染的流行病學(xué)普查。

關(guān)于GoCV病原學(xué)檢測見有如下報(bào)道。2001年，Todd等[32]根據(jù)V1 ORF保守序列設(shè)計(jì)簡并引物。2003年，臺(tái)灣學(xué)者Chen等[11]通過設(shè)計(jì)Cap蛋白保守區(qū)引物建立了GoCV PCR方法。Halami等[8]于2007年建立了巢氏PCR（nested PCR）方法。2012年，萬春和等[33]建立了鵝圓環(huán)病毒TaqMan實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法。2013年，林蕾等[34]建立了GoCV競爭PCR檢測方法。2015年，曹慧慧等[35]建立了雙重PCR檢測方法，可同時(shí)檢測并區(qū)分DuCV和GoCV。此外，還建有同時(shí)檢測鵝群中GPV、GHPV和GoCV感染的三重PCR方法DNA[36]。

5 展 望

目前，研究人員在GoCV的流行病學(xué)、基因組特征、致病性和診斷技術(shù)上取得了一定的研究進(jìn)展，但由于GoCV純培養(yǎng)技術(shù)方法尚未見報(bào)道，導(dǎo)致GoCV致病機(jī)理、對宿主免疫系統(tǒng)的影響均無法進(jìn)行深入研究，極大限制了對該病的科學(xué)防控。