光照對貴州黃雞主要生殖器官發(fā)育和生殖激素的影響

李冬光，朱麗莉，陶宇航，張福平，韓 雪，徐景峨，楊粵黔，張林鑫，蒲 齡，伍革民*

(1.貴州省農(nóng)業(yè)科學院 畜牧獸醫(yī)研究所，貴州 貴陽 550005；2.貴州大學，貴州 貴陽 550025)

【研究意義】貴州黃雞是以貴州地方雞種威寧雞為母本，新漢夏和金黃洛克為第1、2父本進行三元雜交育成的蛋肉兼用品種。該雞具有抗逆性強、早期生長發(fā)育快、產(chǎn)蛋多、肉質(zhì)好、羽毛色澤美觀等特點。探究不同光照周期下貴州黃雞繁殖機能的差異性，為充分發(fā)揮其生產(chǎn)潛力、提高其生產(chǎn)性能具有重要的學術(shù)價值和實際應用價值?！厩叭搜芯窟M展】家禽繁殖活動是由多因素調(diào)控的復雜過程，主要受遺傳、環(huán)境、營養(yǎng)等因素綜合影響，其中遺傳為決定性因素，環(huán)境和營養(yǎng)則可在一定程度上挖掘或限制生產(chǎn)潛能。在環(huán)境因子與繁殖性能互作關(guān)系研究中發(fā)現(xiàn)，光照對家禽繁殖生理的影響和相關(guān)作用機制具有重要作用[1]。在現(xiàn)代生產(chǎn)中，光照調(diào)節(jié)家禽的生長發(fā)育、生產(chǎn)和繁殖已成為一種提高生產(chǎn)效率的重要方法。Lewisp等[2]研究表明，蛋雞或蛋種雞產(chǎn)蛋期光照時長為16 h 或17 h；Renema等[3-4]研究表明，肉種雞的光照時長一般短于蛋雞，多為14 h或15 h?！颈狙芯壳腥朦c】貴州黃雞產(chǎn)蛋率較低是否與光照管理、雞的生殖器官發(fā)育和組織學結(jié)構(gòu)有關(guān)，目前未見系統(tǒng)報道?！緮M解決的關(guān)鍵問題】在半舍飼養(yǎng)殖模式下，研究增加光照對不同生長發(fā)育期貴州黃雞卵巢、輸卵管形態(tài)結(jié)構(gòu)和主要生殖激素的影響。

1 材料與方法

1.1 試驗雞

雛雞和青年雞采用舍內(nèi)網(wǎng)上平養(yǎng)，公母混合飼養(yǎng)，10周齡分組并采用圈舍+運動場的半舍飼養(yǎng)，選取體重相近的母雞216只用于試驗。

1.2 試驗設(shè)計

將選出的216只母雞隨機分為2組(Ⅰ組和Ⅱ組)，每組設(shè)3個重復，每個重復36只雞。試驗Ⅰ組采用自然光照(CK)，Ⅱ組早晚各增加光照1 h(試驗組)。整個階段均采用定時喂料、自由采食和飲水，割刈青綠飼草投喂，雞只的日糧配方、免疫程序、采食飲水、清糞消毒等日常飼養(yǎng)管理均相同。于產(chǎn)蛋初期(140齡)、高峰期(200日齡)及后期(480日齡)進行生殖激素、主要生殖器官的發(fā)育情況及生殖器官組織學特征觀察。

1.3 測定項目及方法

1.3.1 血液生化指標檢測 140、200和480日齡隨機采集試驗組和對照組各9只雞空腹翅下靜脈采血5 mL，靜置 30 min，于4 ℃下以3000 r/min迅速離心15 min，吸取上層血清，分裝到小離心管中，-20 ℃ 保存。采用酶聯(lián)免疫吸附測定法(ELISA試劑盒)檢測自然光照組、增光組個體生長發(fā)育階段貴州黃雞血清中卵泡刺激素(FSH)、黃體生成素(LH)和雌二醇(E2)激素水平。

1.3.2 主要生殖器官測定 140、200和480日齡隨機屠宰試驗組和對照組各9只雞，參照NY/T 823-2004 家禽生產(chǎn)性能名詞術(shù)語和度量統(tǒng)計方法[5]和《家禽實體解剖學圖譜》[6]測定貴州黃雞主要生殖器官的發(fā)育情況，包括卵巢重、輸卵管重、輸卵管長、最大卵泡直徑、大黃卵泡數(shù)和小黃卵泡數(shù)。

1.3.3 生殖器官組織學特征觀察 試驗雞屠宰后，取卵巢和輸卵管組織流水沖洗，于4%多聚甲醛中固定24 h。修整卵巢、輸卵管組織塊，常規(guī)梯度酒精脫水，二甲苯透明，石蠟包埋，切片，片厚5～8 μm。參考姜曉龍等[7]的方法進行蘇木精-伊紅(Hematoxy-lin-eosin，HE)染色。用Nikon顯微鏡進行觀察并攝影。

1.4 數(shù)據(jù)分析

數(shù)據(jù)應用 SPSS18.0 進行分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 貴州黃雞主要生殖器官的發(fā)育情況

貴州黃雞僅左側(cè)卵巢和輸卵管發(fā)育正常，右側(cè)退化。其卵巢呈黑色，位于腎的頭端，表面呈桑椹狀，凹凸不平，以短的卵巢系膜懸吊于腹腔頂壁和背系膜左側(cè)。140日齡開始產(chǎn)蛋，卵巢外觀光澤勻稱，布滿葡萄樣小卵泡，零星可見直徑3 mm左右卵泡；200日齡為產(chǎn)蛋高峰期，卵巢外觀豐滿，可見體積依次遞增的卵泡，卵巢腹面有諸多葡萄樣小卵泡，以短柄與卵巢連接；480日齡產(chǎn)蛋后期，卵巢個別外觀萎縮，未見與卵巢連接的卵泡。

輸卵管起自于卵巢后方，終止于泄殖腔。根據(jù)形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能特點，由前向后可分5段：漏斗部、蛋白分泌部、峽部、子宮部、陰道部和泄殖腔。140日齡開產(chǎn)期輸卵管較發(fā)達，子宮部管壁厚，管腔較大，皺褶較大。200日齡產(chǎn)蛋高峰期輸卵管發(fā)達，子宮部管壁厚，肌肉多，管腔大，皺褶肥大。480日齡產(chǎn)蛋后期，輸卵管皺縮，子宮部管壁薄，管腔小，皺褶小。

從表1看出，隨著時間的推移，貴州黃雞卵巢和輸卵管各指標均呈先增后降的生長趨勢。140日齡卵巢重和輸卵管重均是增加光照處理低于自然光照處理，輸卵管長、最大卵泡直徑、大黃卵泡數(shù)和小黃卵泡數(shù)則是增加光照處理均高于自然光照處理，除輸卵管重、最大卵泡直徑2處理間差異顯著外，其余指標2處理間差異均不顯著。200日齡增加光照處理的輸卵管重、輸卵管長、大黃卵泡數(shù)和小黃卵泡數(shù)均顯著高于自然光照處理，卵巢重和最大卵泡直徑2處理間差異不顯著。480日齡的卵巢重和大黃卵泡數(shù)為增加光照處理略高于自然光照處理，差異不顯著；輸卵管重、輸卵管長、最大卵泡直徑和小黃卵泡數(shù)則是增加光照處理低于自然光照處理，除輸卵管重2處理間差異顯著外，其余指標間差異均不顯著。

表1 不同日齡各處理間貴州黃雞卵巢和輸卵管發(fā)育指標

2.2 貴州黃雞的主要生殖器官組織學特征

2.2.1 卵泡發(fā)育情況 從圖 1看出，140日齡產(chǎn)蛋高峰期卵巢上卵泡發(fā)育良好，卵巢上緊湊排列著小黃卵泡(6～8 mm)和大白卵泡(3～5 mm)，開產(chǎn)期雞卵巢上密布著諸多小白卵泡(<2 mm)，而480日齡產(chǎn)蛋晚期雞卵巢上以小黃卵泡和大白卵泡為主，且數(shù)量少排布疏松。開產(chǎn)期和產(chǎn)蛋高峰期雞卵泡膜層較厚，內(nèi)外膜分界明顯；產(chǎn)蛋晚期雞卵泡膜層和顆粒層較薄，內(nèi)外膜層分界不明顯。由此可見，不同生理階段貴州黃雞卵巢在組織結(jié)構(gòu)上存在明顯差異，但增加光照對雞卵巢組織結(jié)構(gòu)無明顯影響。

圖1 貴州黃雞不同日齡卵巢的HE染色切片(100 倍鏡)

2.2.2 輸卵管子宮部發(fā)育情況 從圖2看出，140日齡開產(chǎn)期和200日齡產(chǎn)蛋高峰期輸卵管子宮部皺襞分布緊密，且皺襞長而復雜，呈葉片狀，有較多分支，發(fā)達，多為縱行，間有螺旋狀，黏膜皺襞間有橫行或斜行的溝，隔成不規(guī)則的間隙(100倍)；子宮部固有膜增厚，管狀腺發(fā)達且量多(400倍)；其中增光組較自然光照組葉片狀皺襞分支更為發(fā)達，黏膜皺襞間隙更深更多。480日齡產(chǎn)蛋后期輸卵管子宮部皺襞呈葉片狀，短，分支少，分布較分散，且大多數(shù)呈縱行；子宮部固有膜薄，管狀腺量少。

圖2 貴州黃雞不同日齡卵管的HE染色切片

2.3 貴州黃雞血液激素水平

從圖3看出，貴州黃雞的卵泡刺激素(FSH)和雌二醇(E2)含量均隨日齡的增加呈先升后降的趨勢，均以200日齡最高，140和200日齡增光處理顯著高于自然光處理，480日齡時2處理間均差異不顯著；黃體生成素(LH)隨日齡增加呈下降趨勢，其中140和480日齡2處理間差異不顯著，200日齡時自然光處理顯著高于增光處理。

D為自然光照，Z為增加光照；*為處理間差異達顯著水平(P<0.05)

3 討 論

光照對禽類而言是最重要且復雜的生態(tài)因子之一，能直接或間接影響雞的生長發(fā)育、繁殖性能、營養(yǎng)需求及死淘率等[8]。Joseph等[9]研究發(fā)現(xiàn)，光照刺激會加速母禽性腺發(fā)育，促進卵巢增大輸卵管增重。李佳宜等[10]研究發(fā)現(xiàn)，東鄉(xiāng)綠殼蛋雞高產(chǎn)組卵巢卵泡豐富，卵泡光滑而無塌陷。王巖等[11]研究發(fā)現(xiàn)，高產(chǎn)烏雞組卵巢卵泡較多，而低產(chǎn)組初級卵泡數(shù)量占多數(shù)。本試驗中不同生理階段貴州黃雞卵巢在組織結(jié)構(gòu)上存在明顯差異，但未見光照周期對雞卵巢組織結(jié)構(gòu)有明顯影響。王翠菊等[12]研究增方光式和光照周期都對輸卵管形態(tài)發(fā)育影響發(fā)現(xiàn)，光照周期對輸卵管重量有顯著影響。張楠楠等[13]研究發(fā)現(xiàn)，14 周齡海蘭灰蛋雞卵巢相同單位面積的卵泡數(shù)量和直徑與 18 周齡的差異顯著(P<0.05)。王錢保等[14]研究發(fā)現(xiàn)，不同光照制度下14 周齡優(yōu)質(zhì)肉雞的輸卵管長度、卵巢重量差異顯著，16周齡小黃卵泡差異顯著。本試驗中光照周期對輸卵管重影響差異顯著(P<0.05)，這與王翠菊等[12]的研究結(jié)果一致。產(chǎn)蛋高峰期卵巢和輸卵管形態(tài)發(fā)育最好，尤其是增光組的體重、卵巢重、輸卵管重、輸卵管長、最大卵泡直徑和數(shù)量均是最高值，可見，早晚各增光1 h有利于主要生殖器官發(fā)育，利于卵泡增值發(fā)育，進而提高產(chǎn)蛋量。因而，在生產(chǎn)實踐中采取合適的光照周期有重要生產(chǎn)意義。

生殖軸激素是調(diào)控家禽卵巢發(fā)育及其產(chǎn)蛋性能的主要內(nèi)分泌因子，其中 FSH、LH、E2和P4等是調(diào)控卵泡發(fā)育及排卵過程的主要激素[15]。張蕾等[16]研究發(fā)現(xiàn)，高產(chǎn)雙黃蛋高郵鴨血清中FSH、E2和P4 的含量均顯著高于低產(chǎn)雙黃蛋高郵鴨(P<0.05)，而 LH 和TEST 無顯著差異。程文佳等[17]研究發(fā)現(xiàn)，連產(chǎn)雞的激素水平都顯著高于非連產(chǎn)雞。黃仁錄等[18]研究發(fā)現(xiàn)，禽體內(nèi)激素的分泌規(guī)律并不與光照周期呈正相關(guān)，以緩增光條件下每日光照11 h處理組的FSH和LH含量最高，而E2含量最低且在整個產(chǎn)蛋期含量幾乎無變化。耿建軍[19]研究發(fā)現(xiàn)，281日齡雞血清FSH、E2含量極顯著或顯著高于63、100和481日齡，63日齡含量顯著低于100和481日齡，100日齡含量和481日齡含量差異不顯著。FSH、E2從小日齡到高日齡有由低到高再到低的動態(tài)變化。本研究表明，F(xiàn)SH和E2隨日齡增加呈先上升后再下降的動態(tài)變化，在產(chǎn)蛋高峰期達最高值，而LH在開產(chǎn)時最高，后為緩慢下降趨勢。增光組的FSH和E2含量分別在140和200日齡顯著高于自然光照組(P<0.05)，而480日齡的FSH、LH和E2 在兩組之間均無顯著差異(P>0.05)。該結(jié)果與耿建軍研究結(jié)果一致，與黃仁錄的結(jié)果有偏離。有關(guān)家禽性激素的詳細作用機理、不同發(fā)育時期各性激素變化規(guī)律以及受機體外和機體內(nèi)各種因素影響的動態(tài)變化，均有待于進一步研究。

4 結(jié) 論

早晚各增光1 h有利于貴州黃雞主要生殖器官發(fā)育和卵泡增值發(fā)育，進而提高產(chǎn)蛋量。因而，在生產(chǎn)中可適當增加光照提高貴州黃雞的生產(chǎn)性能。