嬰兒感染性腹瀉后腸道菌群合成代謝產(chǎn)物變化及臨床治療指導(dǎo)效能

關(guān)江偉，陳艷紅，黃麗麗，陳倩兒

東莞市萬江醫(yī)院兒科，廣東東莞 523505

腸道菌群在人體內(nèi)屬于一類寄存于腸道部位的微生物，其對人體的消化和吸收、抵御感染以及自體免疫疾病等方面產(chǎn)生影響[1]。同時對機體反應(yīng)癌癥治療藥物具有關(guān)鍵性作用，此外其可以依據(jù)機體情況提供必要的營養(yǎng)素[2]。臨床上，感染性腹瀉主要發(fā)生于嬰幼兒群體，感染源感染機體后，可侵入腸道進(jìn)而對腸部位產(chǎn)生損害，對嬰幼兒群體的生命健康產(chǎn)生威脅[3]。以往臨床無明確的診斷指標(biāo)和機制，極易延誤診斷時間，錯過最佳救治時間，經(jīng)病原體以及藥物治療后患兒機體極易產(chǎn)生腸道菌群多態(tài)性變化，因此，檢測合成代謝產(chǎn)物的水平可以為臨床診斷、治療提供具有科學(xué)性、可靠性的參考依據(jù)[4]。因此，該院對2017年12月—2020年4月收治的52例嬰兒感染性腹瀉者實施腸道菌群合成代謝產(chǎn)物的檢測，以此獲取其變化情況，進(jìn)一步對臨床治療進(jìn)行有效指導(dǎo)?，F(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

方便選取該院收治的嬰兒感染性腹瀉者52例作為研究組，將同時期的健康嬰兒52名作為對照組。對照組男23名，女29名；年齡6個月～2歲，平均年齡（1.5±0.3）歲；體質(zhì)量6.0～15.0 kg，平均（10.5±1.6）kg。研究組52例，男22例，女30例；年齡7個月～2歲，平均年齡（1.6±0.3）歲；體質(zhì)量5.9～15.2 kg，平均（10.7±1.5）kg。兩組研究對象的一般資料對比，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。納入標(biāo)準(zhǔn)：①0～2歲兒童；②研究組符合臨床上對嬰兒感染性腹瀉的臨床診斷標(biāo)準(zhǔn)；對照組均為健康體檢嬰兒；③研究對象家屬知情且同意參該次研究并書面簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：①慢性腹瀉癥狀的患兒；②遺傳代謝性障礙的患兒；③治療前接受過復(fù)合維生素制劑治療患兒；④存在明確病因的貧血、營養(yǎng)不良患兒。該研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)。

1.2 方法

全部感染性腹瀉患兒和同時期的健康嬰兒均在入院后第一時間采集其大便標(biāo)本進(jìn)行腸道菌群檢測，另外采集患兒在治療后1、3個月時的大便標(biāo)本進(jìn)行檢測，兩組均應(yīng)用液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀對嬰兒體內(nèi)的腸道菌群情況進(jìn)行檢測。利用無菌器皿適量留取患兒采集的新鮮糞便，首先用肉眼對其外觀顏色、形狀等進(jìn)行觀察。將大便直接涂抹在潔凈的玻片上，應(yīng)該注意糞便不能稀釋從而避免細(xì)菌出現(xiàn)變形，標(biāo)本應(yīng)該要求保持新鮮，涂片厚薄適宜。等到自然干燥后實施固定，進(jìn)行革蘭染色，應(yīng)用100（物鏡）×10（目鏡）倍顯微鏡對其變化進(jìn)行觀察記錄。操作期間應(yīng)該注意診斷準(zhǔn)確成功的關(guān)鍵是染色技術(shù)，革蘭陽性菌、革蘭陰性菌兩種菌種應(yīng)該進(jìn)行鮮明對比。同時采集早晨機體空腹?fàn)顟B(tài)下的靜脈血，并將其送檢，將血清分離出來，放置于低溫下待測。檢測時利用Hypersil SiO2（250 mm×4.6 mm）柱，進(jìn)行等度洗脫，將柱溫維持在25℃內(nèi)。利用紫外光度檢測器（型號：UV1001）對正己烷-異丙烷進(jìn)行檢測，其波長為325 nm。利用全自動生化儀（型號：BIOBASE）對血清淀粉蛋白進(jìn)行檢測，同時短鏈脂肪酸、細(xì)菌多糖均利用全自動五分類血細(xì)胞分析儀（型號：SC-6000）檢測。

檢測結(jié)束后，對研究組患兒進(jìn)行益生元（批準(zhǔn)文號：國食健字G20110390；規(guī)格：3 g/袋）治療，1袋/次，1次/d，溫開水沖食，1個月為1個療程，服用1、3個療程后檢測。

1.3 觀察指標(biāo)

對比兩組的腸道菌群組成情況；對比感染性腹瀉嬰兒應(yīng)用益生元進(jìn)行治療后1、3個月的腸道菌群情況；對比兩組的合成代謝產(chǎn)物濃度變化情況。

1.4 統(tǒng)計方法

采用SPSS 22.0統(tǒng)計學(xué)軟件分析數(shù)據(jù)，計量資料的表達(dá)方式為（±s），采用t檢驗,P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組腸道菌群測定情況對比

研究組的腸桿菌、腸球菌、酵母菌指標(biāo)水平均高于對照組，雙歧桿菌、乳桿菌、擬桿菌和消化球菌指標(biāo)水平均低于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），見表1。

表1 兩組腸道菌群測定情況對比[（±s）,LogN/g濕便]

表1 兩組腸道菌群測定情況對比[（±s）,LogN/g濕便]

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2.2 研究組患兒治療后不同時間的腸道菌群測定情況對比

研究組患兒治療后1個月的腸桿菌、腸球菌、酵母菌指標(biāo)水平均高于治療后3個月，雙歧桿菌、乳桿菌、擬桿菌和消化球菌指標(biāo)水平均低于治療后3個月，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），見表2。

表2 研究組患兒治療后不同時間的腸道菌群測定情況對比[（±s）,LogN/g濕便]

表2 研究組患兒治療后不同時間的腸道菌群測定情況對比[（±s）,LogN/g濕便]

時間腸桿菌腸球菌酵母菌雙歧桿菌乳桿菌擬桿菌 消化球菌治療后1個月（n=52）治療后3個月（n=52）t值P值9.0±0.7 8.5±0.8 3.392＜0.05 8.1±0.7 7.4±0.9 4.427＜0.05 4.5±0.3 4.2±1.1 1.897＜0.05 7.5±0.6 8.4±1.1 5.180＜0.05 6.0±0.7 6.5±1.0 2.954＜0.05 7.9±1.4 9.3±1.2 5.475＜0.05 5.2±0.4 5.8±0.8 4.837＜0.05

2.3 兩組腸道菌群合成代謝產(chǎn)物濃度對比

研究組的短鏈脂肪酸濃度明顯低于對照組，細(xì)菌多糖、血清淀粉蛋白A濃度明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），見表3。

表3 兩組腸道菌群合成代謝產(chǎn)物濃度對比（±s）

表3 兩組腸道菌群合成代謝產(chǎn)物濃度對比（±s）

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3 討論

人類機體內(nèi)的腸道菌群具有數(shù)量多且構(gòu)成復(fù)雜的特點[5-6]。大腸內(nèi)存在50多種細(xì)菌,其中以專性厭氧菌為主,而需氧菌較少[7]。腸道通過持續(xù)不斷的運動對食物進(jìn)行持續(xù)性的消化、吸收和排泄,腸道菌群則在此狀態(tài)下進(jìn)行細(xì)菌增殖和排出[8-9]。因此腸道菌群具有動態(tài)性,保持其水平處于一定范圍內(nèi)，其微生態(tài)對嬰兒疾病的發(fā)生產(chǎn)生直接性影響[10-11]。

臨床上嬰兒感染性腹瀉發(fā)生后機體內(nèi)的腸道菌群發(fā)生比較明顯的變化，處于失調(diào)狀態(tài)，因此腸道菌群合成代謝產(chǎn)物也出現(xiàn)異常變化[12]。該研究顯示治療后1個月研究組的腸桿菌（9.3±0.8）LogN/g濕便、腸球菌（8.3±1.0）LogN/g濕便、酵母菌（4.7±1.1）LogN/g濕便指標(biāo)水平均高于對照組，雙歧桿菌（7.2±0.4）LogN/g濕便、乳桿菌（5.8±1.0）LogN/g濕便、擬桿菌（7.4±1.5）LogN/g濕便、消化球菌（5.0±0.7）LogN/g濕便指標(biāo)水平均低于對照組（P＜0.05）；治療后1個月研究組的短鏈脂肪酸濃度（49.1±20.0）mmol/L明顯低于對照組，細(xì)菌多糖（20.9±1.5）mg/L、血清淀粉蛋白A濃度（19.5±1.0）mg/L明顯高于對照組（P＜0.05），說明嬰兒感染性腹瀉癥狀發(fā)作時出現(xiàn)腸道菌群失衡和合成代謝產(chǎn)物濃度發(fā)生異常。因為嬰兒的腸道部位極易受外界因素的影響，厭氧細(xì)菌可以提高機體的免疫功能，而需氧細(xì)菌增多則進(jìn)一步惡化腸內(nèi)環(huán)境，最終產(chǎn)生感染性腹瀉[13]。另外，患兒腸道菌群合成代謝產(chǎn)物變化為嬰兒感染性腹瀉癥狀的臨床診斷和治療提供比較有價值的參考依據(jù)，具有比較理想的指導(dǎo)效能?？总驳萚14]學(xué)者也做過相似的研究，其研究表明：治療后1個月研究組的腸桿菌（9.2±0.7）LogN/g濕便、腸球菌（8.4±1.2）LogN/g濕便、酵母菌（4.6±1.3）LogN/g濕便等需氧菌指標(biāo)水平均高于對照組，雙歧桿菌（7.3±0.5）LogN/g濕便、乳桿菌（5.7±1.1）LogN/g濕便、擬桿菌 （7.5±1.4）LogN/g濕便和消化球菌 （5.1±0.8）LogN/g濕便等厭氧菌指標(biāo)水平均低于對照組（P＜0.05）；治療后1個月研究組的短鏈脂肪酸濃度（57.1±21.0）mmol/L明顯低于對照組（P＜0.05），且治療后1個月研究組的細(xì)菌多糖（20.8±1.4）mg/L、血清淀粉蛋白A濃度（19.3±1.2）mg/L明顯高于對照組（P＜0.05），其結(jié)果與該研究相一致。

經(jīng)研究結(jié)果表明，益生元治療后1個月的腸桿菌（9.0±0.7）LogN/g、腸球菌（8.1±0.7）LogN/g、酵母菌（4.5±0.3 7.5±0.6）LogN/g濕便指標(biāo)水平均高于治療后3個月（8.5±0.8）、（7.4±0.9）、（4.2±1.1）LogN/g濕便，雙歧桿菌（7.5±0.6）LogN/g濕便、乳桿菌（5.8±1.0）LogN/g濕便、擬桿菌（7.9±1.4）LogN/g濕便、消化球菌（5.2±0.4）LogN/g濕便指標(biāo)水平均低于治療后3個月（8.4±1.1）、（6.5±1.0）、（9.3±1.2）、（5.8±0.8）LogN/g濕便（P＜0.05），說明實施益生元治療后，腸道菌群水平趨于正常。因為益生元能夠?qū)γ庖呦到y(tǒng)進(jìn)行調(diào)節(jié)，同時可發(fā)揮拮抗病原菌等作用，從而對感染性腹瀉進(jìn)行防治，明顯縮短臨床診斷時間和提高其治療效果[15]。季欣欣等[16]學(xué)者做過類似研究，其結(jié)果為：益生元治療后1個月的腸桿菌（9.4±0.7）LogN/g濕便、腸球菌（8.4±1.1）、酵母菌（4.8±1.2）LogN/g濕便等需氧菌指標(biāo)水平均高于治療后3個月（8.6±0.9）、（7.5±1.0）、（4.3±1.2）LogN/g濕便（P＜0.05），雙歧桿菌（7.3±0.5）、乳桿菌（5.9±1.1）、擬桿菌（7.5±1.6）、消化球菌（5.1±0.8）LogN/g濕便等厭氧菌指標(biāo)水平均低于治療后3個月 （8.5±1.2）、（6.6±1.1）、（9.4±1.3）、（5.9±0.9）LogN/g濕便（P＜0.05），其結(jié)果與該文相同。

綜上所述，感染性腹瀉嬰兒機體內(nèi)的腸道菌群處于紊亂狀態(tài)，其經(jīng)過益生元治療后腸道菌群情況得到有效改善，對其腸道菌群的合成代謝產(chǎn)物濃度可能會產(chǎn)生一定程度的影響，為之后實施臨床治療，提供重要的參考依據(jù)和重要指導(dǎo)。