中性粒細(xì)胞CD64和降鈣素原檢測(cè)在新生兒黃疸治療前后的變化及臨床價(jià)值

卜雪瑞，徐莉娟

（1.鄭州市婦幼保健院檢驗(yàn)科，河南 鄭州 450000；2.鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科，河南 鄭州 45005）

新生兒黃疸是新生兒期最常見的疾病之一，是一種因膽紅素代謝異常引起的血清膽紅素升高的臨床常見的新生兒疾病，新生兒黃疸病因復(fù)雜，主要包括感染、溶血、圍生期窒息、先天性膽道畸形以及溶血等[1],其中感染性黃疸所占比例相當(dāng)高，但感染的早期癥狀不明顯,如果治療不及時(shí)嚴(yán)重者可引起膽紅素腦病,會(huì)對(duì)患兒造成嚴(yán)重的神經(jīng)系統(tǒng)后遺癥甚至引起患兒死亡。因此，靈敏度高、特異性強(qiáng)的早期炎癥標(biāo)志物的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)對(duì)于感染性黃疸的早期診治非常重要,本研究旨在中性粒細(xì)胞CD64與PCT在新生兒感染性黃疸治療前后中的變化及臨床價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取我院2015年10月-2017年5月住院治療的新生兒感染性黃疸共92例，其中男52例，女40例，日齡2～12d，平均日齡5.46±2.61d，體重2.8～4.6kg，平均體重3.32±0.51kg;所有患兒均符合《實(shí)用新生兒學(xué)》新生兒感染性黃疸診斷標(biāo)準(zhǔn)[2]：新生兒黃疸根據(jù)黃疸出現(xiàn)時(shí)間、消退時(shí)間、血清膽紅素水平和伴隨癥狀進(jìn)行確診（上述患兒的血清膽紅素水平均大于221μmol/L）。新生兒感染性黃疸在新生兒黃疸確診的基礎(chǔ)上經(jīng)病史、血常規(guī)、血培養(yǎng)、X射線及大小便常規(guī)檢查確診。根據(jù)患兒癥狀及白細(xì)胞總數(shù)將其分為輕度感染患兒42例，中度感染29例，重度感染21例；92例感染性黃疸患兒中肺炎32例，腸炎19例，臍炎20例，尿路感染21例。同時(shí)選取正常體檢的新生兒35例作為健康對(duì)照組，其中男22例，女13例，日齡2～11d，平均日齡5.27±2.35d，體重2.7～4.8kg，平均體重3.5±0.49kg。各組患兒在胎齡、日齡、體重、出生情況方面差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。

1.2 方法 患兒入院當(dāng)日未使用抗生素前抽血檢測(cè)中性粒細(xì)胞CD64、PCT、總膽紅素、直接膽紅素，治療一周后復(fù)查中性粒細(xì)胞CD64、PCT、總膽紅素、直接膽紅素水平。同時(shí)采集靜脈血5ml，分裝入1管EDTA抗凝管2ml，用于中性粒細(xì)胞CD64表達(dá)水平；另3ml于干燥管分離血清，用于檢測(cè)血清PCT濃度，血清PCT利用羅氏Cobase 601采用化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)。

1.3 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè) 中性粒細(xì)胞CD64表達(dá)水平采用貝克曼FC500檢測(cè)。流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)中性粒細(xì)胞CD64表達(dá)水平取80μl EDTA抗凝全血于流式檢測(cè)管底部,加入CD64－PE和CD45－FITC抗體各8μl，充分混勻，避光孵育20min；加600μl紅細(xì)胞裂解液充分混勻后避光15min；1200r/min 5min離心，去上清；加2mlPBS，1200r/min 5min離心，去上清；加500μl PBS，混懸，上機(jī)檢測(cè)。實(shí)驗(yàn)所得數(shù)據(jù)采用CXP Cytometer采集并分析。CD64指數(shù)=粒細(xì)胞CD64平均熒光強(qiáng)度/淋巴細(xì)胞CD64平均熒光強(qiáng)度。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料以()表示，多組間均數(shù)比較采用單因素方差分析，兩組間均數(shù)比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，相關(guān)性分析采用Person相關(guān)性分析，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組治療前中性粒細(xì)胞CD64、PCT、總膽紅素及直接膽紅素水平的比較 新生兒黃疸組患兒治療前中性粒細(xì)胞CD64、PCT、總膽紅素、直接膽紅素水平顯著高于健康對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)，并且各組間中性粒細(xì)胞CD64、PCT、總膽紅素、直接膽紅素水平差異顯著，重度組患兒最高,其次是中度組和輕度組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。

表1 各組治療前中性粒細(xì)胞CD64、PCT、總膽紅素及直接膽紅素水平的比較

2.2 新生兒感染性黃疸患兒治療后中性粒細(xì)胞CD64、PCT、總膽紅素及直接膽紅素水平的比較，見表2。

表2 新生兒感染性黃疸患兒治療后血清各項(xiàng)指標(biāo)水平的比較

2.3 中性粒細(xì)胞CD64和PCT與總膽紅素、直接膽紅素之間的相關(guān)性分析Penson相關(guān)性分析表明中性粒細(xì)胞CD64和PCT與總膽紅素、直接膽紅素之間均呈正相關(guān)(P＜0.05)。

3 討論

新生兒期由于各種因素影響造成膽紅素的生成增加而引起新生兒高膽紅素血癥[3]，而高膽紅素血癥會(huì)對(duì)新生兒智力、聽力及神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)育造成巨大損傷。雖然新生兒黃疸產(chǎn)生的病因較多，但主要病因仍然是感染因素，新生兒感染初期，并不會(huì)有發(fā)熱、白細(xì)胞升高等感染指征出現(xiàn)，新生兒感染性黃疸的早期診斷有一定難度[4]。因此早期對(duì)新生兒感染性黃疸進(jìn)行診斷對(duì)于早期發(fā)現(xiàn)感染、合理應(yīng)用抗生素治療具有重要的臨床價(jià)值。

CD64是IgG Fc段高親和受體，屬免疫球蛋白超家族成員，可通過(guò)抗體依賴性細(xì)胞毒作用、細(xì)胞吞噬作用和免疫復(fù)合物清除作用實(shí)現(xiàn)對(duì)病原微生物的清除[5，6]。非疾病狀態(tài)其在中性粒細(xì)胞表面表達(dá)水平較低,而細(xì)菌感染時(shí)細(xì)菌細(xì)胞壁脂多糖成分和粒細(xì)胞集落刺激因子等會(huì)誘發(fā)CD64高水平表達(dá)[7，8]。一般情況下,機(jī)體感染或內(nèi)毒素入侵時(shí)CD 64在刺激后4～6h即可升高[9]。大量研究表明非感染性和病毒感染疾病患者中中性粒細(xì)胞CD64指數(shù)水平較低，而在細(xì)菌感染患者中明顯上調(diào)，因而可作為識(shí)別細(xì)菌感染的一種簡(jiǎn)單有效的臨床指標(biāo)[10,11]。本研究中發(fā)現(xiàn)新生兒感染性黃疸患兒CD64指數(shù)明顯高于健康對(duì)照組,且其與疾病嚴(yán)重程度密切相關(guān)，表明CD64指數(shù)可作為早期新生兒感染性黃疸患兒診斷指標(biāo)。

降鈣素原為降鈣素(cMcitonin)的前體，而當(dāng)機(jī)體發(fā)生感染時(shí)，肝臟、肺等組織的的巨噬細(xì)胞、單核細(xì)胞及內(nèi)分泌細(xì)胞等會(huì)受細(xì)菌等引起的炎癥反應(yīng)刺激后合成及分泌PCT,并隨著感染程度的加深而顯著增加[12]。有研究表明，血清PCT在新生兒感染性黃疸升高水平較非感染性黃疸升高幅度大[13]，并且PCT較其他炎性因子出現(xiàn)都早，特別是受細(xì)菌感染的患者。因此在實(shí)驗(yàn)室診斷中，PCT是一種能特異性區(qū)分細(xì)菌感染和其它原因?qū)е碌难仔苑磻?yīng)的重要標(biāo)志物[14]。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)新生兒黃疸組患兒治療前血清PCT水平顯著高于健康對(duì)照組，因此，根據(jù)血清PCT水平可初步區(qū)分新生兒黃疸組患兒的類別。此外，血清PCT在重癥患兒中濃度進(jìn)一步升高，提示血清PCT可用于早期診斷且與新生兒感染性黃疸嚴(yán)重程度相關(guān)。

此外，Penson相關(guān)性分析表明中性粒細(xì)胞CD64和PCT和血清總膽紅素、直接膽紅素之間均呈正相關(guān),并且新生兒感染性黃疸患兒治療后中性粒細(xì)胞CD64、PCT、總膽紅素、直接膽紅素水平明顯下降，表明感染是造成新生兒黃疸直接因素，其治療前后檢測(cè)中性粒細(xì)胞CD64和PCT對(duì)新生兒感染性黃疸病情監(jiān)測(cè)、預(yù)后及治療具有重要的臨床價(jià)值。

綜上所述，本研究發(fā)現(xiàn)，在新生兒感染性黃疸患兒中，中性粒細(xì)胞CD64和PCT均顯著升高，并于與患兒疾病程度相關(guān)，經(jīng)治療后水平顯著下降，表明檢測(cè)中性粒細(xì)胞CD64和PCT水平對(duì)新生兒感染性黃疸病情監(jiān)測(cè)、預(yù)后及治療具有重要的臨床價(jià)值。