急性缺血性腦卒中患者血清A-FABP、GAL3和MCP-1水平變化及臨床意義

張靜，岳磊，李富強(qiáng)

（南陽醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校第一附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科，河南 南陽 473000）

急性缺血性腦卒中（cerebral ischemic stroke，CIS）又稱腦梗死，是由于腦組織在頸動(dòng)脈、椎動(dòng)脈等腦供血支脈狹窄或閉塞的情況下缺乏充足的血流供應(yīng)導(dǎo)致的腦組織的梗死，因其常伴隨著神經(jīng)元、星形膠質(zhì)細(xì)胞、少突膠質(zhì)細(xì)胞的損傷，所以CIS被稱為是當(dāng)今社會(huì)中導(dǎo)致致死和致殘的最重要且最多的中樞神經(jīng)系統(tǒng)血管事件[1,2]。有研究表明急性缺血性腦卒中與動(dòng)脈粥樣硬化和炎性反應(yīng)有關(guān)。脂肪型脂肪酸結(jié)合蛋白（adipose fatty acid binding protein,A-FABP）是細(xì)胞內(nèi)重要的脂肪轉(zhuǎn)移蛋白，其與動(dòng)脈粥樣硬化密切相關(guān)；半乳糖凝集素3（galectin-3,GAL3）屬于B一半乳糖苷動(dòng)物凝集素，其主要發(fā)布在上皮細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和免疫細(xì)胞，其作用是參與細(xì)胞的炎性反應(yīng)；單核細(xì)胞趨化蛋白1（monocyte chemoattractant protein-1，MCP-1）是一種趨化因子，一般情況下MCP-1含量很低，但是當(dāng)急性缺血性腦卒中發(fā)作時(shí)，患者的大腦缺氧缺血，在在自由基的介導(dǎo)下患者的神經(jīng)元、內(nèi)皮細(xì)胞及巨噬細(xì)胞分泌大量的MCP-1并刺激黏附分子表達(dá)，MCP-1會(huì)進(jìn)行性的造成大腦缺血。本實(shí)驗(yàn)通過探究急性缺血性腦卒中患者血清脂肪型脂肪酸結(jié)合蛋白（adipocyte fatty-acid binding protein,AFABP）、半乳糖凝集素3（galectin-3,GAL3）和單核細(xì)胞趨化蛋白1（monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1）水平變化及臨床意義，旨在為急性缺血性腦卒中的預(yù)后提供診斷依據(jù)[3]。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2017年4月-2020年4月來我院就診的100例急性缺血性腦卒中患者作為研究組;另選取同一時(shí)期我院接受的100例健康體檢人員作為對(duì)照組。其中研究組男53人,女47人；平均年齡68.17±4.63歲。對(duì)照組男57人,女43人；平均年齡68.17±4.63歲；兩組研究人員一般資料(年齡、性別等)比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。納入標(biāo)準(zhǔn)：⑴符合美國(guó)心臟/卒中學(xué)會(huì)在2018年1月發(fā)布的《2018年急性缺血性腦卒中早期處理指南》診斷標(biāo)準(zhǔn)[4]；⑵發(fā)病后24h內(nèi)入院；⑶初次發(fā)病者；⑷患者或家屬同意患者參加此次研究，且簽署了知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：⑴有先天性心臟病??；慢性腎炎或肝功能不全的患者[5]；⑵有腦卒中病史的患者；⑶認(rèn)知障礙或感覺障礙的患者。

1.2 研究方法 ⑴標(biāo)本采集：采集兩組患者清晨空腹肘靜脈血5ml，以3000r/min離心10min，分離上層血清后將其放置在-20℃冰箱內(nèi)儲(chǔ)存待用。使用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（nzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）檢 測(cè) 患 者 血 清A-FABP、GAL3和MCP-1水平，試劑盒均購(gòu)自上海酶聯(lián)生物有限公司，所有檢測(cè)過程均嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行。⑵超聲心電圖檢查：利用超聲測(cè)距原理使用脈沖超聲波透過胸壁、軟組織測(cè)量其下各心壁、心室及瓣膜等結(jié)構(gòu)，在顯示器上顯示為各結(jié)構(gòu)相應(yīng)的活動(dòng)和時(shí)間之間的關(guān)系曲線,用記錄儀記錄這些曲線，并計(jì)算無梗死面積。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用SPSS22.0統(tǒng)計(jì)軟件行數(shù)據(jù)分析。計(jì)數(shù)資料用（n，%）表示，行χ2檢驗(yàn)；計(jì)量資料用（）表示，組間差異比較行獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，采用ROC曲線分析血清A-FABP、GAL3和MCP-1水平對(duì)急性缺血性腦卒中預(yù)后的預(yù)測(cè)價(jià)值。P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組的血清A-FABP、GAL3和MCP-1水平比較 研究組的血清A-FABP、GAL3和MCP-1水平明顯大于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表1。

表1 兩組的血清A-FABP、GAL3和MCP-1水平比較（）

表1 兩組的血清A-FABP、GAL3和MCP-1水平比較（）

組別 n研究組對(duì)照組t值P值100 100 A-FABP（μg/L）GAL3（ng/ml）35.60±5.31 20.55±2.62 25.417<0.001 15.56±6.74 8.17±2.63 10.214<0.001 MCP-1（μg/L）215.98±18.24 85.21±11.80 60.196<0.001

2.2 不同病理特征腦梗死患者的A-FABP、GAL3和MCP-1水平比較 研究組中患者血清AFABP、GAL3和MCP-1水平與梗死面積>4cm2、有高血壓、NIHSS評(píng)分>15、GCS評(píng)分>8有關(guān)，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表2。

表2 不同病理特征患者的A-FABP、GAL3和MCP-1水平比較（）

表2 不同病理特征患者的A-FABP、GAL3和MCP-1水平比較（）

組別例數(shù)A-FABP（μg/L）GAL3（ng/ml）MCP-1（μg/L）梗死面積 ≤4cm2>4cm2 67 33 t值P值高血壓病史有無35 65 t值P值NIHSS評(píng)分≤15>15 40 60 t值P值GCS評(píng)分 ≤8>8 38 62 t值P值32.81±5.98 41.03±5.51 6.629<0.001 37.88±5.64 33.82±5.13 3.645<0.001 30.17±4.24 39.48±5.09 9.562<0.001 30.39±5.74 38.83±4.85 7.872<0.001 11.39±3.98 19.98±6.34 8.281<0.001 17.58±6.35 14.26±5.98 2.591 0.011 13.59±4.74 17.86±6.94 3.396 0.001 14.16±5.14 17.65±6.13 2.933 0.004 210.41±16.74 220.51±19.21 2.701 0.008 220.12±19.12 212.51±16.21 2.101 0.038 211.29±17.94 220.11±18.75 2.344 0.021 211.21±17.54 220.64±19.01 2.478 0.015

2.4 預(yù)后情況分析 隨訪3個(gè)月后，發(fā)現(xiàn)患者預(yù)后良好79人，預(yù)后不良21人。其中預(yù)后不良的患者血清A-FABP、GAL3和MCP-1水平均高于預(yù)后良好的患者，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表3。

表3 血清A-FABP、GAL3和MCP-1對(duì)急性缺血性腦卒中患者的預(yù)后價(jià)值（）

表3 血清A-FABP、GAL3和MCP-1對(duì)急性缺血性腦卒中患者的預(yù)后價(jià)值（）

組別預(yù)后良好預(yù)后不良t值P值79 21 A-FABP（μg/L）GAL3（ng/ml）31.15±6.69 39.77±4.53 5.565<0.001 11.74±4.49 18.35±6.09 5.54<0.001 MCP-1（μg/L）221.14±15.34 256.76±22.52 8.508<0.001

2.5 血清A-FABP、GAL3和MCP-1水平預(yù)測(cè)急性缺血性腦卒中患者的預(yù)后價(jià)值。（roc曲線分析）ROC曲線分析顯示，AFABP、GAL3、MCP-1、聯(lián)合a在非參數(shù)式假設(shè)下b空值假設(shè)：true區(qū)域=0.5預(yù)測(cè)急性缺血性腦卒中患者的預(yù)后不良的AUC分別為0.849、0.782、0.899、0.947將AFABP、GAL3、MC P-1、常數(shù)納入Logistic回歸分析，根據(jù)回歸結(jié)果中的回歸系數(shù)值擬合三項(xiàng)聯(lián)合診斷的數(shù)值計(jì)算公式：三 項(xiàng) 聯(lián) 合=AFABP+（0.055/0.015)*GAL3+（0.097/0.015)*MCP1,經(jīng)SPSS22.0統(tǒng)計(jì)得出聯(lián)合數(shù)據(jù)；進(jìn)一步分析顯示，三項(xiàng)聯(lián)合預(yù)測(cè)急性缺血性腦卒中患者的預(yù)后不良的AUC為0.978，預(yù)測(cè)急性缺血性腦卒中患者的預(yù)后不良準(zhǔn)確性高。

依據(jù)AUC及標(biāo)準(zhǔn)誤,采用Z檢驗(yàn)AUC差異。如GAL3與AFABP的AUC比較：Z=(0.782-0.849)/(0.056*0.056+0.043*0.043)^（0.5）P值=[1-NORMSDIST（-0.949）]*2=0.343。 檢 驗(yàn) 顯 示：MCP1與GAL3AUC比較：Z=1.558,P=0.119；MCP1與AFAB PAUC比較：Z=0.758,P=0.448；根據(jù)最佳臨界值,當(dāng)AFABP高于29.765 μg/L時(shí),其敏感度為48.1%，特異度為100%；當(dāng)GAL3高于37.695 mg/L時(shí)，其敏感度為86.1%,特異度為71.4%；當(dāng)MCP1低于238.355 μg/L時(shí),其敏感度為93.7%,特異度為85.7%;當(dāng)聯(lián)合高于16.06 mg/L時(shí),其敏感度為84.8%，特異度為52.4%，特異度為76.2%。綜上所述，血清A-FABP、GAL3和MCP-1能預(yù)測(cè)急性缺血性腦卒中患者的預(yù)后情況。見圖1，表4。

表4 AFABP、GAL3、MCP-1及三項(xiàng)聯(lián)合對(duì)預(yù)后的預(yù)測(cè)價(jià)值

圖1 血清A-FABP、GAL3和MCP-1水平預(yù)測(cè)急性缺血性腦卒中患者預(yù)后的roc曲線

3 討論

CIS是當(dāng)今社會(huì)中導(dǎo)致致死和致殘的最多且最重要的中樞神經(jīng)系統(tǒng)血管事件之一[6]。其特點(diǎn)是發(fā)病急，病情過程發(fā)展快。當(dāng)患者突發(fā)CIS時(shí)，如不及時(shí)處理，患者的致殘、致死率極高[7]。目前臨床上一般采用臨床診治、顱腦CT和磁共振來診斷急性缺血性腦卒中,但因部分患者病情過輕或影像學(xué)診斷不明顯，所以經(jīng)常導(dǎo)致誤診、漏診[8]。所以找到一種更為簡(jiǎn)便、可靠、準(zhǔn)確率高的新診斷方法是極其必要的。

本研究表明研究組的血清A-FABP、GAL3和MCP-1水平顯著高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），究其原因在于：A-FABP是一種細(xì)胞脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白[9]，其主要是通過自行分泌或旁分泌來使患者的機(jī)體產(chǎn)生炎癥反應(yīng),會(huì)導(dǎo)致心臟功能異常、內(nèi)皮細(xì)胞功能紊亂且促進(jìn)動(dòng)脈粥樣硬化，其水平在研究組中表現(xiàn)出較高水平表示A-FABP與急性缺血性腦卒中有著重大關(guān)聯(lián),可能參與急性缺血性腦卒中的發(fā)生；GAL3是半乳糖凝集素家族成員之一[10]，其作用是參與細(xì)胞的增殖、遷移、黏附、分化、凋亡和炎癥反應(yīng)等過程，本研究其水平在研究組中過高可能是因?yàn)楫?dāng)發(fā)生缺血性腦卒中的時(shí)候，患者腦組織因缺血進(jìn)而受到損傷，神經(jīng)元及相關(guān)細(xì)胞損壞，GAL3大量出現(xiàn),從而進(jìn)入人體血液循環(huán)中，表達(dá)量上升，當(dāng)患者病情進(jìn)展越嚴(yán)重其水平越高，預(yù)示著神經(jīng)損傷嚴(yán)重，不利于預(yù)后；MCP-1是一種趨化因子,其在腦血管疾病發(fā)生過程與介導(dǎo)炎癥反應(yīng)及誘導(dǎo)炎癥介質(zhì)生成過程中起到重要的作用[11,12],一般情況下MCP-1在人體內(nèi)含量很低，但是當(dāng)急性缺血性腦卒中發(fā)作時(shí),患者的大腦缺氧缺血，在自由基的介導(dǎo)下患者的神經(jīng)元、內(nèi)皮細(xì)胞及巨噬細(xì)胞分泌大量的MCP-1并刺激黏附分子表達(dá)，從而影響腦組織血供，進(jìn)一步加重腦組織缺血性損傷，造成惡性循環(huán)。由此得出，急性缺血性腦卒中患者血清A-FABP、GAL3和MCP-1表達(dá)量較高，提示檢測(cè)血清A-FABP、GAL3和MCP-1水平有助于診斷急性缺血性腦卒中患者病情進(jìn)展。臨床中常用NIHSS評(píng)分與GCS評(píng)分來表現(xiàn)神經(jīng)功能缺損程度、昏迷程度[13,14]。國(guó)內(nèi)研究也曾表明，預(yù)后較好的腦梗死患者與高血壓、GCS評(píng)分及NHISS評(píng)分有關(guān)[15]。與本研究的研究結(jié)果一致，進(jìn)一步提示高血壓病史、梗死面積、NIHSS評(píng)分、GCS評(píng)分會(huì)影響CIS的病情。

另外,本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)預(yù)后不良的患者血清A-FABP、GAL3和MCP-1水平均高于預(yù)后良好的患者，ROC曲線顯示AFABP、GAL3、MCP-1及三項(xiàng)聯(lián)合預(yù)測(cè)急性缺血性腦卒中患者的預(yù)后不良的診斷價(jià)值均較高,提示血清A-FABP、GAL3和MCP-1水平能預(yù)測(cè)急性缺血性腦卒中患者的預(yù)后情況，在臨床中應(yīng)該對(duì)以上幾項(xiàng)指標(biāo)加以監(jiān)測(cè)，利于判斷患者病情及為其預(yù)后良好保駕護(hù)航。

綜 上 所 述，CIS患 者 血 清A-FABP、GAL3和MCP-1水平顯著上升；血清A-FABP、GAL3和MC P-1水平可以幫助診斷急性缺血性腦卒中；高血壓病史、梗死面積、NIHSS評(píng)分、GCS評(píng)分會(huì)影響急性缺血性腦卒中的病情；CIS嚴(yán)重程度與血清AFABP、GAL3和MCP-1水平有關(guān)，急性缺血性腦卒中病情越嚴(yán)重血清A-FABP、GAL3和MCP-1水平越高；血清A-FABP、GAL3和MCP-1水平有預(yù)測(cè)CIS預(yù)后價(jià)值。