人血清附睪蛋白4和糖類抗原125在卵巢癌診斷中的應(yīng)用

黃震英 孫靜

作者單位：300121 天津，天津市人民醫(yī)院檢驗科

卵巢癌是發(fā)生在卵巢的惡性腫瘤，由于其早期癥狀不明顯，大部分（約70%）患者發(fā)現(xiàn)時已處于晚期［1］。對卵巢癌盡早做出診斷并采取干預(yù)措施，能夠極大地提高患者的有效生存率。目前應(yīng)用最為廣泛的一項檢測指標(biāo)是糖類抗原125（carbohydrate antigen 125，CA125），與卵巢癌的病理分期和病情嚴(yán)重程度相關(guān)［2］，但敏感度和特異度均有限。人附睪分泌蛋白4（human epididymis protein 4，HE4）是繼CA125之后在臨床上認(rèn)可度很高的卵巢癌腫瘤標(biāo)志物，在卵巢癌患者體內(nèi)表達(dá)水平較高［3］。本研究通過測定目標(biāo)受試者血清HE4和CA125水平，追蹤上述指標(biāo)在惡性腫瘤術(shù)后患者體內(nèi)的變化，探討二者在卵巢癌診斷和惡性腫瘤預(yù)后預(yù)測方面的意義。

1 資料與方法

1.1研究對象與分組 選擇2018年1月1日至2019年4月1日天津市人民醫(yī)院收治的盆腔腫塊擬進行手術(shù)患者96例作為研究對象，根據(jù)手術(shù)后的病理報告將其分為卵巢癌組（56例）和良性腫塊組（40例）；根據(jù)病理分期不同，將卵巢癌組患者分為早期組（Ⅰ～Ⅱ期，24例）和晚期組（Ⅲ～Ⅳ期，32例）。另外選擇同期在本院體檢中心進行體檢的50名健康女性作為健康對照組。排除標(biāo)準(zhǔn)：排除有心、肺、肝、胃等重要器官損傷和疾病以及存在腫瘤家族病史者。

1.2研究方法

1.2.1儀器與試劑 使用瑞士帝肯公司生產(chǎn)的全自動酶聯(lián)免疫分析儀（Tecan Freedom EVOlyzer-2150）測定HE4，試劑盒為瑞典康乃格公司生產(chǎn)；使用美國雅培公司生產(chǎn)的i2000 SR全自動化學(xué)發(fā)光分析儀測定CA125，試劑盒為原裝配套試劑。

1.2.2收集血標(biāo)本 使用分離凝膠真空采血管采集所有受檢者空腹靜脈血3 mL，以3 000 r/min（離心半徑13.5 cm）離心10 min分離血清，保存于-80 ℃冰箱中待測。

1.2.3檢測指標(biāo)臨界值 HE4臨界值為150 pmol/L；CA125臨界值為35 kU/L。

1.3倫理學(xué) 本研究符合醫(yī)學(xué)倫理學(xué)標(biāo)準(zhǔn)，并通過本院醫(yī)學(xué)倫理委員會審批（審批號：2021-B17），所有檢測均獲得過受試者或家屬的知情同意。

1.4統(tǒng)計學(xué)分析 采用SPSS 20.0統(tǒng)計軟件分析數(shù)據(jù)。對數(shù)據(jù)進行K-S正態(tài)性檢驗，符合正態(tài)分布的計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（）表示；非正態(tài)分布的計量資料以中位數(shù)（四分位數(shù)）〔M（QL，QU）〕表示。本研究3組數(shù)據(jù)呈偏態(tài)分布，比較時采用非參數(shù)Kruskal-Wallis檢驗；兩組間比較采用非參數(shù)Mann-Whitney秩和檢驗。繪制交叉表計算敏感度、特異度、準(zhǔn)確度；繪制受試者工作特征曲線（receiver operating characteristic curve，ROC曲線）并計算曲線下面積（area under curve，AUC），評價診斷效率。

2 結(jié)果

2.1一般資料 卵巢癌組共納入56例患者，年齡32～87歲，平均（57.21±11.37）歲；臨床病理分期為Ⅰ期17例，Ⅱ期7例，Ⅲ期13例，Ⅳ期19例。良性腫塊組共納入40例患者，年齡21～79歲，平均（49.03±13.71）歲；其中卵巢囊腫22例，炎性包塊8例，子宮內(nèi)膜異位癥7例，畸胎瘤3例。健康對照組50名體檢者年齡33～85歲，平均（57.60±12.96）歲。

2.2各組血清HE4、CA125水平比較 測定3組血清中HE4、CA125水平，兩項指標(biāo)在卵巢癌組中均明顯高于良性腫塊組和健康對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（均P＜0.05）。見表1。

表1 不同腫瘤患者血清HE4和CA125水平與健康對照組的比較〔M（QL，QU）〕

2.3HE4、CA125單獨檢測與聯(lián)合檢測的診斷效能比較 計算HE4、CA125單獨檢測以及二者串聯(lián)和并聯(lián)檢測對卵巢癌診斷的敏感度、特異度及準(zhǔn)確度，CA125診斷的特異度和準(zhǔn)確度均低于HE4。當(dāng)使用HE4+CA125串聯(lián)檢測時，診斷卵巢癌的敏感度較單獨檢測降低，但特異度升高，準(zhǔn)確度亦高于單獨檢測；將二者并聯(lián)檢測，診斷的敏感度較單獨檢測升高，但特異度有所下降，準(zhǔn)確度亦低于HE4、CA125單獨檢測。見表2。

表2 HE4和CA125單獨檢測與聯(lián)合檢測的診斷效能比較

2.4HE4、CA125檢測診斷卵巢癌ROC曲線分析HE4、CA125聯(lián)合檢測AUC為0.988〔95%可信區(qū)間（95%CI）為0.977～0.996〕，高于HE4、CA125單獨檢測（AUC分別為0.968、0.913，95%CI分別為0.942～0.990、0.861～0.965），HE4的AUC高于CA125，表明HE4對卵巢癌的診斷效能比CA125更高。見表3，圖1。

表3 HE4、CA125單獨和聯(lián)合檢測對卵巢癌的診斷效能

圖1 HE4和CA125檢測診斷卵巢癌的ROC曲線

2.5卵巢癌組不同分期患者的血清HE4和CA125水平以及陽性率比較 本研究納入56例卵巢癌患者中，晚期組的HE4和CA125水平和陽性檢出率均明顯高于早期組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（均P＜0.05）。比較早期卵巢癌患者不同指標(biāo)的陽性檢出率，可見HE4的陽性率明顯高于CA125，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。見表4。

表4 不同分期卵巢癌患者血清HE4和CA125水平以及陽性率比較

2.6卵巢癌組患者手術(shù)前后血清HE4和CA125水平比較 將卵巢癌組患者術(shù)前2～3 d血清HE4、CA125水平與術(shù)后1 d進行比較，術(shù)后1 d的HE4和CA125水平較術(shù)前均明顯降低（均P＜0.05）。見表5。

表5 卵巢癌組患者手術(shù)前后HE4和CA125水平比較〔M（QL，QU）〕

3 討論

近年來，我國卵巢癌的發(fā)病率呈逐年上升的趨勢，其具有發(fā)現(xiàn)遲、轉(zhuǎn)移快、治療較為困難的特點。因此，疾病早期的明確診斷極為重要。傳統(tǒng)的卵巢癌篩查方法主要為婦科檢查、影像學(xué)檢查以及腫瘤標(biāo)志物測定。婦科盆腔檢查一般用于較大病灶的卵巢癌，而超聲檢查對于良性卵巢腫物和卵巢癌的區(qū)分有一定困難［4］。CA125和HE4是目前用于診斷卵巢癌的很有意義的腫瘤標(biāo)志物。

CA125是一種來源于體腔上皮細(xì)胞的高分子質(zhì)量跨膜糖蛋白，一般情況下在體內(nèi)分泌較少或不分泌，當(dāng)卵巢出現(xiàn)惡性病變時會急劇升高［5-6］，在盆腔良性腫物、肺癌、乳腺癌等患者的血清中亦會升高。單獨檢測CA125的敏感度較低，對診斷卵巢癌的特異度亦不十分理想［7-8］。HE4是一種小分子蛋白酶抑制劑，是近幾年剛應(yīng)用于臨床的腫瘤標(biāo)志物。該指標(biāo)在正常組織以及良性腫瘤中表達(dá)程度極低，在卵巢癌患者的血清中顯著升高。此外，隨著患者年齡的增加，HE4的血清表達(dá)水平亦會升高，絕經(jīng)期婦女的HE4水平普遍高于未絕經(jīng)婦女，但HE4并不受月經(jīng)周期的影響［9］。

本研究結(jié)果顯示，卵巢癌組的HE4和CA125水平均明顯高于健康對照組和良性腫塊組，表明HE4和CA125可作為卵巢癌診斷的腫瘤標(biāo)志物，用于卵巢癌與其他良性盆腔腫塊類疾病的鑒別，效果較好。

本研究還分析了HE4、CA125對卵巢癌篩查檢測結(jié)果的敏感度、特異度及準(zhǔn)確度，并繪制相應(yīng)的ROC曲線。結(jié)果顯示，HE4診斷卵巢癌的特異度和準(zhǔn)確度均高于CA125，與張善弟等［10］研究結(jié)果相符。將二者進行并聯(lián)檢測對提高卵巢惡性腫瘤的檢出率有重要意義；而將兩項指標(biāo)串聯(lián)檢測對提高卵巢癌的確診水平有臨床應(yīng)用價值。

本研究中56例卵巢癌患者按國際婦產(chǎn)科聯(lián)盟（International Federation of Gynecology and Obstetrics，F(xiàn)IGO）標(biāo)準(zhǔn)分期進行分組，通過對數(shù)據(jù)的研究分析發(fā)現(xiàn)，在卵巢癌早期，HE4的表達(dá)水平和陽性檢出率均高于CA125，因此HE4對卵巢癌的早期診斷有更高的臨床應(yīng)用價值。卵巢癌晚期患者的血清HE4和CA125水平均明顯高于早期患者，充分證實HE4和CA125水平與患者的病情嚴(yán)重程度有關(guān)，與劉秀梅等［11］和付立業(yè)等［12］研究結(jié)果相符，表明血清HE4和CA125也可作為病情發(fā)展的觀察指標(biāo)。

另外，本研究對經(jīng)手術(shù)病理金標(biāo)準(zhǔn)確診卵巢癌的患者進行了術(shù)后HE4和CA125水平的追蹤。結(jié)果表明HE4和CA125在評估手術(shù)效果以及疾病預(yù)后方面具有重要臨床價值。

綜上所述，血清HE4和CA125檢測在卵巢良惡性腫瘤的診斷和鑒別中有重要的臨床應(yīng)用價值。血清HE4和CA125并聯(lián)檢測診斷卵巢癌的敏感度較高，可用來對盆腔腫物患者進行早期篩查，而二者串聯(lián)檢測由于特異度和準(zhǔn)確度均較高，可應(yīng)用于臨床，輔助病理學(xué)診斷明確卵巢腫物的良惡性。此外，二者水平在不同病理分期的診斷陽性率及手術(shù)前后比較中差異明顯，可作為評價手術(shù)效果及預(yù)后觀測的較好指標(biāo)廣泛應(yīng)用。

利益沖突所有作者均聲明不存在利益沖突