結(jié)合逐步敲入策略與制劑工藝過程的腎寶片復(fù)雜成分辨識(shí)

陸 萌，賈曉斌，郭舒臣，易 歡，段龍強(qiáng)，耿 炤*，封 亮*

1.中國藥科大學(xué)中藥學(xué)院，江蘇 南京 211198

2.江西匯仁藥業(yè)股份有限公司 技術(shù)中心，江西 南昌 330052

腎寶片由淫羊藿、紅參、肉蓯蓉等22味中藥組成，具有調(diào)和陰陽、溫陽補(bǔ)腎、扶正固本的功效，可用于治療腰腿酸痛、精神不振、夜尿頻多、畏寒怕冷等癥[1]。腎寶片的原劑型腎寶合劑在治療遺尿方面具有很好的療效[2]，并具有助陽的功效與改善性功能的藥理作用[3]。腎寶片是內(nèi)科常用補(bǔ)益中成藥[4]，但其藥效物質(zhì)基礎(chǔ)仍不明確，現(xiàn)有研究大多是針對(duì)腎寶片中某一單味中藥中的化學(xué)成分進(jìn)行測定[5-7]，缺乏系統(tǒng)的物質(zhì)基礎(chǔ)研究。腎寶片與腎寶合劑制劑工藝不同，部分化學(xué)成分可能會(huì)發(fā)生變化。已有研究中主要測定了腎寶合劑中的淫羊藿苷、補(bǔ)骨脂素、異補(bǔ)骨脂素及蛇床子素[8]，本研究擬通過對(duì)腎寶片化學(xué)成分進(jìn)行進(jìn)一步辨識(shí)，對(duì)可能的新產(chǎn)生成分進(jìn)行解析，有助于對(duì)腎寶片制劑工藝過程的理解、認(rèn)識(shí)和進(jìn)一步的質(zhì)量控制。

中藥復(fù)方藥效物質(zhì)基礎(chǔ)研究一直是中藥現(xiàn)代化研究的重點(diǎn)內(nèi)容之一，而對(duì)復(fù)方中藥進(jìn)行系統(tǒng)的化學(xué)成分表征研究是闡明其藥效物質(zhì)基礎(chǔ)的前提。中藥復(fù)方具有多組分、多靶點(diǎn)、整體性的特點(diǎn)，其藥味眾多、成分復(fù)雜，是大復(fù)方物質(zhì)基礎(chǔ)解析的主要難點(diǎn)[9]。近年來對(duì)于中藥復(fù)方物質(zhì)基礎(chǔ)的研究，發(fā)展出了諸如中藥血清藥物化學(xué)研究[10]、譜效相關(guān)的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)研究[11]、中藥整體藥代動(dòng)力學(xué)研究[12]等方法，這些方法在闡釋中藥物質(zhì)基礎(chǔ)方面起到了一定的積極作用。本研究為系統(tǒng)表征腎寶片制劑工藝過程中得到的各提取物的化學(xué)成分，采用逐步敲入策略，利用超高效液相色譜（UPLC）與超高效液相色譜-四極桿-飛行時(shí)間質(zhì)譜（UPLC-Q-TOF-MS）解析各浸膏的化學(xué)成分，實(shí)現(xiàn)化學(xué)成分定性與分類，為腎寶片質(zhì)量控制提供依據(jù)。

按照腎寶片制劑工藝分別得到腎寶片浸膏1、2與全浸膏，采用UPLC重點(diǎn)分析表征浸膏1、2與全浸膏，并按照逐步敲入浸膏1、2的方法，驗(yàn)證全浸膏中的成分。在初步歸屬全浸膏譜中21個(gè)成分后，采用UPLC-Q-TOF-MS技術(shù)對(duì)腎寶片各提取物（浸膏）化學(xué)成分進(jìn)行定性分析，建立化學(xué)成分快速鑒定方法，結(jié)合對(duì)照品與各單味中藥的相關(guān)文獻(xiàn)，快速鑒定未知成分。整體技術(shù)路線圖見圖1。該方法較為全面系統(tǒng)地表征了腎寶片提取物的化學(xué)成分，為腎寶片的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)研究及質(zhì)量控制方法的建立提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)，對(duì)藥味組成復(fù)雜的中藥大復(fù)方物質(zhì)基礎(chǔ)解析具有廣泛的應(yīng)用價(jià)值。

圖1 結(jié)合逐步敲入策略與制劑工藝過程的腎寶片復(fù)雜成分辨識(shí)技術(shù)路線圖Fig.1 Diagram of identification of complex components of Shenbao Pian based on stepwise knock-in strategy and preparation process

1 儀器與材料

1.1 儀器

Acquity UPLC H-Class超高效液相色譜儀、Waters Xevo G2-XS QTof質(zhì)譜儀［配有電噴霧電離源（ESI）］、數(shù)據(jù)處理軟件MassLynx V 4.2和UNIFI，美國Waters公司；KH-300TDB型高頻數(shù)控超聲波清洗器，昆山禾創(chuàng)超聲儀器有限公司；Metter-Toledo GmbH XPR2電子分析天平，梅特勒-托利多儀器有限公司；Milli-Q純水系統(tǒng)，美國Millipore公司。

1.2 試藥與試劑

對(duì)照品人參皂苷Rg1（批號(hào)G16S10Y97436）、人參皂苷Re（批號(hào)B04D9S76499）、人參皂苷Rb1（批號(hào) Z20S9X70603）、金絲桃苷（批號(hào)Y08N9X74602）、槲皮素（批號(hào)C09S8Y43412）、蛇床子素（批號(hào)T08M8B30733）、類葉升麻苷（批號(hào)Y21A9H59554）、補(bǔ)骨脂素（批號(hào)C22A9Q68562）、異補(bǔ)骨脂素（批號(hào)C05M10Q82078）、大黃素（批號(hào)C18F8Q29652）、大黃素甲醚（批號(hào)T26A8F34784）、阿魏酸（批號(hào)L03A9D57744）、松果菊苷（批號(hào)Y29M10H84490）、五味子醇甲（批號(hào)Y30N10H104712）均購于上海源葉生物科技有限公司；對(duì)照品朝藿定A（批號(hào)19072204）、朝藿定B（批號(hào)18011604）、朝藿定C（批號(hào)19072404）、淫羊藿苷（批號(hào)18012906）、寶藿苷I（批號(hào)19083008）均購于成都普菲德生物技術(shù)有限公司；對(duì)照品人參皂苷Ro（批號(hào)19012811）、四羥基二苯乙烯葡萄糖苷（批號(hào)19012803）均購于維克奇生物科技有限公司；各對(duì)照品質(zhì)量分?jǐn)?shù)均≥98%。

腎寶片及其中間品浸膏1、浸膏2與全浸膏，批號(hào)均為T1909156，江西匯仁股份有限公司。乙腈、甲醇為質(zhì)譜純，德國Merck公司；其余試劑均為色譜級(jí)。

2 方法

2.1 對(duì)照品溶液的制備

取金絲桃苷、槲皮素、朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、淫羊藿苷、寶藿苷I、人參皂苷Rg1、人參皂苷Ro、人參皂苷Rb1、人參皂苷Re對(duì)照品適量，精密稱定，加50%乙腈分別制成質(zhì)量濃度為116.5、219.7、199.2、201.6、164.6、215.4、204.2、217.2、199.0、196.0、165.6 μg/mL的混合對(duì)照品溶液，標(biāo)記為混合對(duì)照品溶液1。

取蛇床子素、毛蕊花糖苷、補(bǔ)骨脂素、2,3,5,4-四羥基二苯乙烯葡萄糖苷、異補(bǔ)骨脂素、大黃素、大黃素甲醚、阿魏酸、松果菊苷、五味子醇甲對(duì)照品適量，精密稱定，加50%乙腈分別制成質(zhì)量濃度為105.5、196.4、208.3、116.2、207.4、209.0、251.2、190.5、219.7、217.3 μg/mL的混合對(duì)照品溶液，標(biāo)記為混合對(duì)照品溶液2，混合對(duì)照品溶液1、2用于UPLC分析。

分別取朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、淫羊藿苷、寶藿苷I對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇分別制成含各成分5～15 μg/mL的混合對(duì)照品溶液，標(biāo)記為混合對(duì)照品溶液3。

分別取人參皂苷Rg1、人參皂苷Ro、人參皂苷Rb1、人參皂苷Re對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇分別制成含各成分5～15 μg/mL的混合對(duì)照品溶液，標(biāo)記為混合對(duì)照品溶液4。

分別取松果菊苷、毛蕊花糖苷、異毛蕊花糖苷、2,3,5,4-四羥基二苯乙烯葡萄糖苷、補(bǔ)骨脂素、異補(bǔ)骨脂素對(duì)照品適量，精密稱定，加50%乙腈分別制成含各成分1～5 μg/mL的混合對(duì)照品溶液，標(biāo)記為混合對(duì)照品溶液5。

分別取沒食子酸、槲皮素、山柰酚、大黃素、大黃素甲醚、甘草苷、異甘草素對(duì)照品適量，精密稱定，加50%乙腈分別制成含各成分1～5 μg/mL的混合對(duì)照品溶液，標(biāo)記為混合對(duì)照品溶液6，混合對(duì)照品溶液3～6用于UPLC-Q-TOF-MS分析。

2.2 供試品溶液的制備

分別取浸膏1、2和全浸膏各1 g，精密稱定，置于25 mL量瓶中，加適量50%乙腈超聲溶解，冷卻至室溫，加50%乙腈定容至刻度，用0.22 μm微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液作為浸膏1、2和全浸膏供試品溶液；分別吸取浸膏1、2供試品溶液各1 mL，等體積混合，0.22 μm微孔濾膜濾過，即得浸膏1＋浸膏2供試品溶液；取腎寶片3片，除去包衣，研細(xì)，取2 g，精密稱定，置于25 mL量瓶中，加適量50%乙腈超聲溶解，冷卻至室溫，加50%乙腈定容至刻度，0.22 μm微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液作為腎寶片供試品溶液；50%乙腈作為空白供試品溶液。

2.3 液相色譜條件1

Waters H-class液相色譜儀；色譜柱為Acquity UPLC BEH C18柱（100 mm×2.1 mm，1.7 μm）；流動(dòng)相為0.1%磷酸水溶液-乙腈；梯度洗脫：0～20 min，10%～20%乙腈；20～20.1 min，20%～24%乙腈；20.1～32 min，24%乙腈；32～32.1 min，24%～30%乙腈；32.1～38 min，30%～38%乙腈；38～42 min，38%～50%乙腈；42～50 min，50%～95%乙腈；50～57 min，95%乙腈；57～65 min，95%～10%乙腈；體積流量0.2 mL/min；柱溫30 ℃；檢測波長203、270 nm；進(jìn)樣量1 μL。

2.4 液相色譜條件2

Waters H-class液相色譜儀；色譜柱為Acquity UPLC BEH C18柱（100 mm×2.1 mm，1.7 μm）；流動(dòng)相為0.1%磷酸水溶液-乙腈；梯度洗脫：0～10 min，5%～15%乙腈；10～15 min，15%～24%乙腈；15～25 min，24%乙腈；25～40 min，24%～60%乙腈；40～45 min，60%～73%乙腈；45～52 min，73%～95%乙腈；52～60 min，95%～5%乙腈；體積流量0.2 mL/min；柱溫30 ℃；檢測波長254 nm；進(jìn)樣量1 μL。

2.5 液相色譜條件3

Waters I-class液相色譜儀；色譜柱為Acquity UPLC HSS T3柱（100 mm×2.1 mm，1.8 μm）；流動(dòng)相為0.1%甲酸水溶液-乙腈；梯度洗脫：0～0.5 min，22%乙腈；0.5～10 min，22%～95%乙腈；10～12 min，95%乙腈；12～12.5 min，95%～22%乙腈；12.5～14 min，22%乙腈；體積流量0.4 mL/min；柱溫40 ℃；進(jìn)樣量為2 μL；2D檢測波長203、270 nm；用于UPLC-Q-TOF-MS分析浸膏1和全浸膏。

2.6 液相色譜條件4

Waters I-class液相色譜儀；色譜柱為Acquity UPLC HSS T3柱（100 mm×2.1 mm，1.8 μm）；流動(dòng)相為0.1%甲酸水溶液-乙腈；梯度洗脫：0～0.5 min，5%乙腈；0.5～10 min，5%～50%乙腈；10～10.5 min，50%～95%乙腈；10.5～12 min，95%乙腈；12～12.5 min，95%～5%乙腈；12.5～14 min，5%乙腈；體積流量0.4 mL/min；柱溫40 ℃；進(jìn)樣量2 μL；2D檢測波長260、300 nm；用于UPLC-Q-TOFMS分析浸膏2和全浸膏。

2.7 質(zhì)譜條件

電噴霧離子源（ESI）正、負(fù)離子模式分別進(jìn)行MSE掃描；低碰撞電壓6 V；高碰撞電壓30～70 V；采集質(zhì)量范圍m/z50～1200；毛細(xì)管電壓3 kV（ESI+）和2.5 kV（ESI-）；錐孔電壓40 V；脫溶劑氣溫度500 ℃；脫溶劑氣體積流量1000 L/h；掃描時(shí)間14 min；亮氨酸腦啡肽（LE）實(shí)時(shí)校準(zhǔn)質(zhì)量數(shù)，正離子為m/z556.277 1，負(fù)離子為m/z554.261 5。

2.8 質(zhì)譜數(shù)據(jù)分析

使用Masslynx V4.2和以中藥數(shù)據(jù)庫為基礎(chǔ)的UNIFI軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)采集與分析。利用Waters Traditional Medicine Library成分庫搜索各單味中藥的化學(xué)成分，基于UNIFI在線軟件進(jìn)行化學(xué)成分鑒定與匹配，具體參數(shù)設(shè)置如下：在查找3D峰模塊勾選采用Lockmass進(jìn)行校正，高能通道強(qiáng)度閾值設(shè)為50 counts，低能通道強(qiáng)度閾值設(shè)為200 counts，勾選“Target by Retention time”，Target match tolerance設(shè)為5×10-3；Lockmass校正質(zhì)量數(shù)：正離子為m/z556.276 6，負(fù)離子為m/z554.262 0。通過人工校驗(yàn)與核實(shí)各化合物的精確相對(duì)分子質(zhì)量以及碎片離子，確定浸膏1、2與全浸膏的化學(xué)成分。

3 結(jié)果與分析

3.1 逐步敲入浸膏1、2驗(yàn)證全浸膏中的成分

腎寶片成分復(fù)雜，根據(jù)不同成分的特點(diǎn)，分別采用液相色譜條件1和2對(duì)浸膏1、浸膏2、浸膏1＋2、全浸膏以及混合對(duì)照品溶液1、2與腎寶片進(jìn)行分析，按照逐步敲入浸膏1、2的方法，對(duì)全浸膏中的成分及來源進(jìn)行驗(yàn)證。

在液相色譜條件1下重點(diǎn)分析了浸膏1中淫羊藿黃酮組分與人參皂苷組分，利用PDA檢測器設(shè)置雙波長，分別在270 nm下分析黃酮成分，在203 nm下分析皂苷成分，色譜圖見圖2、3。由圖2可推測腎寶片全浸膏中含有朝藿定A、B、C、淫羊藿苷及寶藿苷I、槲皮素與金絲桃苷，其中朝藿定A、B、C、淫羊藿苷及寶藿苷I來自浸膏1，槲皮素與金絲桃苷可能來自浸膏2。由圖3可知，僅通過保留時(shí)間較難推測全浸膏中是否含有人參皂苷Rg1、Re、Ro與Rb1，為進(jìn)一步驗(yàn)證浸膏1、2和全浸膏中是否含有上述成分，將利用LC-MS對(duì)各浸膏成分進(jìn)行鑒定。

圖2 驗(yàn)證全浸膏中成分色譜圖 (液相色譜條件1, PDA: 270 nm)Fig.2 Validation of chromatogram of components in total extractum (liquid chromatography conditions1, PDA: 270 nm)

圖3 驗(yàn)證全浸膏中成分色譜圖 (液相色譜條件1, PDA: 203 nm)Fig.3 Validation of chromatogram of components in total extractum (liquid chromatography conditions1, PDA: 203 nm)

通過對(duì)色譜條件的摸索，在液相色譜條件2下重點(diǎn)分析了浸膏2中的成分，色譜圖見圖4。由于主要成分在前40 min出峰，因此，選取前40 min的色譜圖進(jìn)行對(duì)比，由圖4可推測全浸膏中含有阿魏酸、松果菊苷、二苯乙烯苷、毛蕊花糖苷、補(bǔ)骨脂素、異補(bǔ)骨脂素、五味子醇甲、大黃素、蛇床子素9個(gè)成分，其中阿魏酸、松果菊苷、二苯乙烯苷、毛蕊花糖苷、補(bǔ)骨脂素、異補(bǔ)骨脂素、大黃素來自于浸膏2，且浸膏1對(duì)其無干擾，五味子醇甲、蛇床子素在浸膏2中的響應(yīng)很低，需進(jìn)一步通過液質(zhì)分析進(jìn)行驗(yàn)證。

圖4 驗(yàn)證全浸膏中成分色譜圖 (液相色譜條件2)Fig.4 Validation of chromatogram of components in the whole infusion (liquid chromatography conditions 2)

3.2 UPLC-Q-TOF-MS分析浸膏1、2與全浸膏中的成分

為進(jìn)一步驗(yàn)證全浸膏中是否含有上述21個(gè)成分，實(shí)現(xiàn)浸膏1、2與全浸膏的化學(xué)成分表征，利用UPLC-Q-TOF-MS對(duì)各浸膏進(jìn)行分析。由于浸膏1與浸膏2成分差別較大，因此，分別針對(duì)浸膏1與浸膏2建立2個(gè)色譜條件，以進(jìn)行浸膏1與浸膏2的成分特征性分析，浸膏1、2和全浸膏與混合對(duì)照品溶液正、負(fù)離子模式下基峰離子流圖見圖5、6。由于混合對(duì)照品溶液3中主要是淫羊藿黃酮類成分，在正離子模式下響應(yīng)較好，因此，僅在正離子模式下對(duì)其進(jìn)行分析，混合對(duì)照品溶液4中主要是紅參皂苷類成分，在負(fù)離子模式下響應(yīng)較好，因此，僅在負(fù)離子模式下對(duì)其進(jìn)行分析。

圖5 浸膏1、全浸膏基峰離子流圖Fig.5 Base peak intensity (BPI) of extractum 1 and total extractum

圖6 浸膏2、全浸膏基峰離子流圖Fig.6 Base peak intensity (BPI) of extractum 2 and total extractum

由圖5、6可知，各浸膏在對(duì)應(yīng)的色譜及質(zhì)譜條件下均較好的分離，將該原始數(shù)據(jù)導(dǎo)入U(xiǎn)NIFI軟件中，對(duì)比參考文獻(xiàn)與對(duì)照品，對(duì)成分進(jìn)行鑒定，鑒定結(jié)果見表1～4。最終在浸膏1中檢測到17個(gè)成分，浸膏2中檢測到58個(gè)成分，在全浸膏中檢測到82個(gè)成分，實(shí)現(xiàn)了各浸膏的復(fù)雜成分表征。

表1 浸膏1中化學(xué)成分的鑒定 (液相色譜條件3)Table 1 Components identification of extractum 1 (liquid chromatography conditions 3)

4 討論

腎寶片由22味中藥組成，化學(xué)成分復(fù)雜，分析時(shí)各成分之間容易產(chǎn)生干擾，因此，在建立UPLC針對(duì)各浸膏建立指紋圖譜時(shí)對(duì)色譜條件以及溶解樣品的溶劑進(jìn)行了優(yōu)化。

考察了流動(dòng)相中的有機(jī)相，乙腈與甲醇相比，腎寶片全浸膏的信噪比有明顯改善，因此，選擇乙腈作為有機(jī)相。并采用PDA全波長掃描，選擇最優(yōu)波長，針對(duì)浸膏1中的皂苷及黃酮成分，最終將檢測波長定為270 nm與203 nm，針對(duì)浸膏2中松果菊苷、補(bǔ)骨脂素等成分，檢測波長設(shè)為254 nm，混合對(duì)照品溶液2及浸膏中各成分的響應(yīng)均較好。由于浸膏中各成分溶解度差異較大，因此，分別考察了水、50%乙腈、75%乙腈以及乙腈作為溶解樣品的溶劑，50%乙腈對(duì)各成分的溶解性較好。并對(duì)梯度洗脫程序進(jìn)行了優(yōu)化，建立了在同一色譜條件下對(duì)浸膏中多個(gè)成分分析的色譜條件。

表2 全浸膏化學(xué)成分的鑒定 (液相色譜條件3)Table 2 Components identification of total extractum (liquid chromatography conditions 3)

續(xù)表2

表3 浸膏2化學(xué)成分的鑒定 (液相色譜條件4)Table 3 Components identification of extractum 2 (liquid chromatography conditions 4)

續(xù)表3

結(jié)合腎寶片制劑處方中各單味藥的用量，最終選擇21個(gè)成分對(duì)浸膏1、2以及全浸膏進(jìn)行分析，按照浸膏1、2逐步敲入的方式，驗(yàn)證全浸膏中的成分。在UPLC分析的基礎(chǔ)上，利用UPLC-Q-TOFMS對(duì)各浸膏中的成分進(jìn)行鑒定，由于前期基于多成分分析時(shí)建立的UPLC色譜條件分析時(shí)間較長，因此，以縮短分析時(shí)間、保證分離度為目標(biāo)，對(duì)梯度洗脫程序進(jìn)行進(jìn)一步優(yōu)化。

表4 全浸膏化學(xué)成分的鑒定 (液相色譜條件4)Table 4 Components identification of total extractum (liquid chromatography conditions 4)

續(xù)表4

續(xù)表4

通過對(duì)浸膏1色譜條件的優(yōu)化，將浸膏1的色譜條件優(yōu)化至14 min。最終，在浸膏1中檢測到17個(gè)化合物，所測成分中有9個(gè)化合物經(jīng)與對(duì)照品比對(duì)得到鑒定；在相同條件下對(duì)全浸膏進(jìn)行分析，在全浸膏中檢測到15個(gè)化合物，其中7個(gè)化合物經(jīng)與對(duì)照品比對(duì)得到鑒定，將此結(jié)果與浸膏1成分鑒定結(jié)果進(jìn)行比較，全浸膏中15個(gè)成分均在浸膏1中檢測到，即此15個(gè)成分均來自浸膏1。

在浸膏2中檢測到58個(gè)化合物，其中6個(gè)化合物經(jīng)與對(duì)照品比對(duì)確認(rèn)。浸膏2中檢測到的成分主要包括：（1）肉蓯蓉苯乙醇苷組分：松果菊苷、毛蕊花糖苷、異毛蕊花糖苷；（2）黃芪皂苷組分：黃芪皂苷II、黃芪皂苷III、異黃芪皂苷IV、agroastragaloside II、agroastragaloside IV；（3）補(bǔ)骨脂香豆素組分：補(bǔ)骨脂素、異補(bǔ)骨脂素；（4）制何首烏中蒽醌組分：大黃素、大黃素甲醚-8-O-β-D-葡萄糖苷；（5）甘草黃酮組分：異甘草呋喃糖苷、甘草苷；（6）胡蘆巴皂苷組分：胡蘆巴皂苷Ib、胡蘆巴皂苷Ia、胡蘆巴皂苷Ⅱa；（7）黃芪黃酮組分：異槲皮苷、毛蕊異黃酮等。

在相同色譜及質(zhì)譜條件下對(duì)全浸膏進(jìn)行分析，并對(duì)22味中藥的化學(xué)成分進(jìn)行搜索，通過對(duì)正、負(fù)離子模式下全浸膏成分鑒定結(jié)果進(jìn)行整理，共定性了82個(gè)化學(xué)成分，涵蓋了腎寶片中22味中藥，其中12個(gè)化學(xué)成分來自浸膏1，其余70個(gè)成分來自浸膏2，主要包括制何首烏中二苯乙烯苷組分和蒽醌組分、黃芪皂苷組分、補(bǔ)骨脂香豆素組分、胡蘆巴皂苷組分以及甘草黃酮組分等。

本研究利用UPLC建立了各浸膏的指紋圖譜，基于逐步敲入策略以驗(yàn)證全浸膏中的成分，并利用UPLC-Q-TOF-MS快速、方便、有效地對(duì)腎寶片全浸膏化學(xué)成分進(jìn)行定性分析，結(jié)合UNIFI中藥數(shù)據(jù)庫、二級(jí)碎片離子信息以及對(duì)照品比對(duì)，實(shí)現(xiàn)了腎寶片各浸膏中復(fù)雜成分的快速辨識(shí)與歸屬，為腎寶片制劑工藝過程的質(zhì)量控制提供了實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。

利益沖突所有作者均聲明不存在利益沖突