血清VEGF、Hcy與2型糖尿病下肢動脈病變的關(guān)系研究

謝文靜，江裕，陳溶微，林丹琪

福州市第二醫(yī)院檢驗科，福建福州 350007

2型糖尿病(T2DM)是非胰島素依賴性糖尿病，多發(fā)于中老年人或肥胖者，其病因及發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，尚未有明確定論，在我國發(fā)病率呈逐年上升趨勢[1]。T2DM為慢性終身疾病，患者在其漫長病程中可因長期代謝失常出現(xiàn)一系列微血管并發(fā)癥，下肢動脈病變(LEAD)為常見并發(fā)癥之一[2]。研究顯示，LEAD的發(fā)生發(fā)展與慢性炎癥反應(yīng)、促新生血管生成、血管內(nèi)皮功能紊亂等密切相關(guān)[3]。血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)為血管內(nèi)皮促分裂因子，可誘導(dǎo)血管增生，并可作為炎癥因子參與動脈粥樣硬化斑塊的形成和失穩(wěn)定性，Moshfeghi等[4]研究發(fā)現(xiàn)，VEGF與糖尿病微血管病變的發(fā)生密切相關(guān)。同型半胱氨酸(Hcy)為半胱氨酸、蛋氨酸代謝的中間產(chǎn)物，其血清水平過高會損傷血管，大幅增加冠心病、外周血管疾病及腦血管疾病的發(fā)病風(fēng)險，也有研究顯示其與T2DM血管病變具一定相關(guān)性[5]。目前，VEGF和Hcy與T2DM血管病變關(guān)系研究多在腎、視網(wǎng)膜病變上[6-7]，針對其與LEAD的關(guān)系研究較為少見?；诖?，該研究選取該院2018年1月—2020年12月收治的173例T2DM患者為研究對象，對合并或不合并LEAD的T2DM患者血清學(xué)指標(biāo)進(jìn)行分析比較，進(jìn)一步探究血清VEGF、Hcy與T2DM并發(fā)LEAD的關(guān)系。現(xiàn)報道如下。

1 對象與方法

1.1 研究對象

以該院收治的173例T2DM患者為研究對象，作病例組。納入標(biāo)準(zhǔn)：符合T2DM診斷標(biāo)準(zhǔn)；年齡＞18歲；入院前未接受過其他下肢動脈病變治療；無壞疽或足潰瘍；臨床資料清晰完整。排除標(biāo)準(zhǔn)：具下肢手術(shù)史者；合并其他糖尿病嚴(yán)重并發(fā)癥者；合并急性感染、自身免疫性疾病、肝腎功能不全、腦卒中、冠心病、精神病、惡性腫瘤者。按是否發(fā)生下肢動脈病變分為T2DM+LEAD組和T2DM組。另選取同期40名行體檢的健康者作對照組(NC)。其中T2DM+LEAD組患者依據(jù)下肢血管病變嚴(yán)重程度分為A級(輕)、B級(中)、C級(重)。該研究為回顧性研究，符合《世界醫(yī)學(xué)協(xié)會赫爾辛基宣言》相關(guān)要求。

1.2 方法

收集所有受試對象的一般資料如性別、年齡、病史等，檢測并比較血清VEGF、Hcy、糖化血紅蛋白(HbA1c)、白蛋白(ALB)、三酰甘油(TG)、總膽固醇(TC)水平。其中，VEGF采用全自動化學(xué)發(fā)光免疫分析儀(HTFG-001)進(jìn)行檢測，Hcy、HbA1c、ALB、TG、TC均采用全自動生化分析儀(AU5800)進(jìn)行檢測。血樣為空腹外周靜脈血，所有檢測均在規(guī)定時間內(nèi)嚴(yán)格按照試劑盒及儀器操作說明書進(jìn)行。

1.3 統(tǒng)計方法

采用SPSS 22.0統(tǒng)計學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和分析，計量資料的表達(dá)方式為（±s），使用單因素方差分析作多組間比較，進(jìn)一步兩兩比較行LSD-t檢驗，計數(shù)資料的表達(dá)方式為[n(%)]，采用χ2檢驗，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 3組研究對象一般資料比較

病例組共入組173例，其中71例合并下肢動脈病變、102例未合并下肢動脈病變。3組性別、BMI及是否有吸煙史、飲酒史、高血壓等一般資料比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)；T2DM+LEAD組的年齡更高、病程更長，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。見表1。

表1 3組一般資料比較

2.2 生化指標(biāo)比較

3組血清生化指標(biāo)水平比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。與NC組相比，T2DM+LEAD組和T2DM組血清VEGF、Hcy、HbA1c、TG、TC水平明顯更高，血清ALB水平更低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)；且T2DM+LEAD組較T2DM組，血清VEGF、Hcy、HbA1c、TG、TC水平更高，而ALB水平更低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。見表2。

表2 3組生化指標(biāo)比較（±s）

表2 3組生化指標(biāo)比較（±s）

注：與NC組相比，a P＜0.05；與T2DM組相比，b P＜0.05

組別VEGF(ng/mL)Hcy(μmol/L)HbA1c(%)ALB(g/L)TG(mmol/L) TC(mmol/L)T2DM+LEAD組（n=71）T2DM組（n=102）NC組（n=40）F值P值（116.42±23.67）ab（84.37±17.85）a 74.59±15.67102.354＜0.001（13.18±3.45）ab（11.24±2.31）a 10.39±2.0868.547＜0.001（9.58±1.46）ab（8.57±1.30）a 5.94±0.73118.431＜0.001（34.31±4.15）ab（39.43±4.39）a 44.87±6.2779.866＜0.001（1.73±0.24）ab（1.49±0.18）a 1.05±0.2053.234＜0.001（5.21±0.64）ab（4.83±0.57）a 4.41±0.4662.345＜0.001

2.3 不同分級T2DM合并LEAD患者血清VEGF、Hcy水平比較

T2DM+LEAD組中，A級22例、B級29例、C級20例，各級患者血清VEGF、Hcy水平比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。與A級患者相比，B級和C級患者血清VEGF、Hcy水平均更高；且C級患者血清VEGF、Hcy水平較B級更高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。見表3。

表3 不同分級T2DM合并LEAD患者血清VEGF、Hcy水平比較（±s）

表3 不同分級T2DM合并LEAD患者血清VEGF、Hcy水平比較（±s）

注：與A級相比，P＜0.05；與B級相比，P＜0.05

分級VEGF(ng/mL) Hcy(μmol/L)A級（n=22）B級（n=29）C級（n=20）F值P值96.49±20.83（117.79±18.32）*（136.36±17.15）*#112.554＜0.00112.17±2.35（13.07±2.46）*（14.45±2.14）*#87.967＜0.001*#

2.4 Logistic多因素回歸分析

以T2DM患者是否發(fā)生LEAD為因變量，以單因素分析中具有統(tǒng)計學(xué)意義的因素為自變量，行Logistic回歸分析，結(jié)果顯示，VEGF(OR=2.273)、Hcy(OR=1.982)、HbA1c(OR=1.799)、ALB(OR=0.401)、TG(OR=3.200)、TC(OR=4.899)、病程(OR=1.550)均是T2DM患者發(fā)生LEAD的影響因素(P＜0.05)。見表4。

表4 T2DM患者發(fā)生LEAD影響因素的Logistic回歸分析

3 討論

T2DM由遺傳及環(huán)境因素共同作用引發(fā)，屬慢性代謝性疾病，以持續(xù)高血糖水平為主要特征，其慢性并發(fā)癥可遍及全身重要器官，嚴(yán)重影響患者生命質(zhì)量，LEAD為常見并發(fā)癥之一。該癥常表現(xiàn)為下肢端缺血、麻木、疼痛、跛行、潰爛等，可誘發(fā)糖尿病足，嚴(yán)重者可導(dǎo)致截肢，是以動脈粥樣硬化為病理基礎(chǔ)的大血管病變，因而早期診治十分重要[8]。血管造影為LEAD診斷金標(biāo)準(zhǔn)，但其作為侵入性檢查存在一定風(fēng)險，且有可能造成腎臟受損、過敏等，臨床應(yīng)用受限，故尋找更簡便有效、無創(chuàng)的早期預(yù)測或診斷指標(biāo)具臨床意義[9]。

T2DM患者發(fā)生LEAD的具體機(jī)制尚不明確，但學(xué)者普遍認(rèn)同，高血糖水平導(dǎo)致的血管損傷將增加機(jī)體氧自由基水平、擾亂血管內(nèi)皮功能、誘發(fā)胰島素抵抗(IR)，均可影響血管功能，增加大血管病變的發(fā)生風(fēng)險[10]。既往研究稱，VEGF、Hcy可能參與T2DM患者的血管損傷[11]。該研究對各組的血清VEGF、Hcy水平分析后發(fā)現(xiàn)，對照組、T2DM組、T2DM+LEAD組的血清VEGF、Hcy水平依次升高，提示VEGF、Hcy可能參與了LEAD的形成和發(fā)展過程，與既往研究結(jié)果類似[12]。VEGF參與多種血管生成依賴性疾病的發(fā)病及進(jìn)展，一方面可特異性與血管內(nèi)皮生長因子受體結(jié)合從而誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞增生，另一方面可通過細(xì)胞小囊泡器增強血管通透性。當(dāng)機(jī)體的組織或細(xì)胞發(fā)生炎性損傷或增生時，血清中VEGF水平隨之上調(diào)，進(jìn)而會刺激新血管增生，最后誘發(fā)動脈血管病變[13]。Hcy是動脈粥樣硬化的主要危險因子，研究顯示[14]，每當(dāng)血清中Hcy水平上調(diào)5 mmol/L時，發(fā)生動脈粥樣硬化的比率即增加60%～80%。Hcy可通過降低CpG二核苷酸甲基化來刺激P66shc表達(dá)[15]，進(jìn)而擾亂血管內(nèi)皮功能并造成損傷，還可提高基質(zhì)金屬蛋白酶2(MMP-2)、MMP-9水平來促進(jìn)血管平滑肌細(xì)胞增生，既往研究也證實，T2DM患者多因血糖波動、IR等因素血清Hcy水平普遍較正常人群更高，增加了外周血管疾病的發(fā)生風(fēng)險[16]。

該研究還對T2DM+LEAD組中不同分級患者的血清VEGF、Hcy水平進(jìn)行分析，結(jié)果顯示，A級、B級、C級患者血清VEGF、Hcy水平均依次增高，進(jìn)一步證實了VEGF、Hcy與T2DM患者并發(fā)LEAD密切相關(guān)，且其水平與病情嚴(yán)重程度也具一定關(guān)聯(lián)。Meta分析顯示，高Hcy是動脈血管粥樣硬化性病變的獨立危險因素[17]。Hcy在氧化時產(chǎn)生的中間產(chǎn)物會破壞血管內(nèi)皮功能和凝血-纖溶平衡，誘發(fā)血管炎癥，增加血管病變風(fēng)險及加重病情程度。另外，該研究中，T2DM+LEAD組的血清HbA1c、TG、TC水平均較組更高，Logistic回歸分析顯示，上述血清指標(biāo)均是T2DM患者發(fā)生LEAD的影響因素，提示VEGF、Hcy、HbA1c、TG、TC在T2DM患者的LEAD進(jìn)展中不僅作為獨立危險因素，還可能其相互協(xié)同作用，共同促進(jìn)了LEAD的發(fā)生、發(fā)展[18]。

綜上所述，VEGF、Hcy與T2DM并發(fā)LEAD密切相關(guān)，且其血清水平可一定程度上反映病情嚴(yán)重程度，提示其可能作為T2DM并發(fā)LEAD潛在的早期預(yù)測、診斷、病情監(jiān)測的血清學(xué)指標(biāo)。