不同品種茶樹(shù)果內(nèi)含物質(zhì)分析及抗氧化活性研究

何碧云，楊張靜，何忠偉，陳春嵐，殷佳雅，潘中田

（賀州學(xué)院食品與生物工程學(xué)院，廣西 賀州 542899）

茶樹(shù)（Camellia sinensis）是一種多生長(zhǎng)于我國(guó)亞熱帶常綠闊葉雨林中的耐蔭木本植物，屬山茶科（Theaceae）山茶屬，具有喜光、單產(chǎn)高的特點(diǎn)，是我國(guó)主要出口的農(nóng)產(chǎn)品之一。近年來(lái)，其種植面積、產(chǎn)量均不斷增長(zhǎng)，2017年全國(guó)茶園面積達(dá)284.9萬(wàn)公頃，茶葉產(chǎn)量約246萬(wàn)噸，生產(chǎn)的茶樹(shù)果約25.9萬(wàn)噸。茶樹(shù)果（Tea Tree Fruit）為蒴果，是茶樹(shù)的生殖器官，果殼顏色大多數(shù)為棕褐色，種子為黑褐色。有科研生產(chǎn)部門(mén)研究發(fā)現(xiàn)，茶樹(shù)果中含有大量活性物質(zhì)，如茶多酚、茶皂素、黃酮等，具有抗氧化、抗病毒、防癌抗癌、防紫外線等作用，證明研究茶樹(shù)果實(shí)內(nèi)含物質(zhì)的含量及抗氧化能力對(duì)于茶樹(shù)新品種選育、育苗、茶樹(shù)種質(zhì)資源的研究及其利用具有重要意義，其開(kāi)發(fā)利用前景十分廣闊。

本研究以幾個(gè)不同品種的茶樹(shù)果為研究對(duì)象，將晾曬至足干的茶樹(shù)果剝離成果皮、種殼及種仁三個(gè)部分，再分別粉碎過(guò)篩、保存?zhèn)溆?，測(cè)定不同品種不同部分的內(nèi)含物質(zhì)含量并進(jìn)行比對(duì)分析，了解其組成，研究開(kāi)發(fā)其抗氧化方面的活性和實(shí)用價(jià)值。可為茶樹(shù)果資源的開(kāi)發(fā)利用提供了基礎(chǔ)的數(shù)據(jù)支持及理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

本實(shí)驗(yàn)材料的選擇分別是廣西賀州市的福云六號(hào)、桂青品種和廣東省英德市清遠(yuǎn)區(qū)的英紅九號(hào)、黃旦品種的茶樹(shù)果。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 固樣。將采摘后的茶樹(shù)果去梗后攤放至通風(fēng)處晾曬至足干，將種仁、果皮、種殼剝離，粉碎機(jī)粉碎過(guò)篩網(wǎng)，每個(gè)品種依次編號(hào)，裝袋密封避光置于冰箱中保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.2 內(nèi)含物質(zhì)測(cè)定方法。干物質(zhì)含量測(cè)定參照國(guó)標(biāo)GB/T 8303—2013執(zhí)行，采用120℃烘干法測(cè)定；水浸出物參照國(guó)標(biāo) GB/T 8305—2013執(zhí)行；茶多酚參照國(guó)標(biāo)GB/T 8313—2018執(zhí)行，采用福林酚法測(cè)定；氨基酸參照國(guó)標(biāo)GB/T8314-2013執(zhí)行，采用茚三酮法測(cè)定；可溶性糖采用蒽酮比色法測(cè)定；總黃酮采用三氯化鋁比色法測(cè)定。各標(biāo)品以濃度為橫坐標(biāo)，以標(biāo)品吸光度為縱坐標(biāo)，R2均大于0.99（見(jiàn)表1）。

表1 各標(biāo)品的標(biāo)準(zhǔn)曲線方程

1.2.3 抗氧化活性測(cè)定方法。采用測(cè)定清除羥自由基活性和清除 DPPH自由基活性為研究方法。稱(chēng)取1.5 g各樣品粉末，加入20mL蒸餾水，90℃水浴30 min，每10min搖一次，提取后冷卻，4200r/min離心機(jī)離心15min，取上清液加蒸餾水定容到25mL作為樣品提取液。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同品種茶樹(shù)果不同部分內(nèi)含物質(zhì)測(cè)定分析

不同品種茶樹(shù)果三個(gè)不同部分的內(nèi)含物質(zhì)平均含量結(jié)果見(jiàn)表2。通過(guò)分析發(fā)現(xiàn)，茶樹(shù)果的三個(gè)部分中種仁的水浸出物（70.31%）、可溶性糖（22.69%）、總黃酮（9.80mg/g）的平均含量以及果皮的茶多酚（7.41%）、氨基酸（1.41%）的平均含量明顯高于茶樹(shù)果其它部分，說(shuō)明不同品種茶樹(shù)果中果皮、種殼、種仁三個(gè)部分的內(nèi)含物質(zhì)含量各不相同，種仁具有高水浸出物、高氨基酸、高可溶性糖、高總黃酮的特點(diǎn)，果皮則具有高茶多酚含量的特點(diǎn)。

表2 不同品種茶樹(shù)果不同部分內(nèi)含物質(zhì)平均含量

2.2 不同品種茶樹(shù)果不同部分內(nèi)含物質(zhì)差異性分析

2.2.1 水浸出物。據(jù)實(shí)驗(yàn)可得，不同品種的水浸出物含量由高到低，果皮：英紅九號(hào)＞桂青種＞黃旦＞福云六號(hào)；種殼：桂青種＞英紅九號(hào)＞福云六號(hào)＞黃旦；種仁：桂青種＞黃旦＞福云六號(hào)＞英紅九號(hào)。且不同品種種仁的水浸出物含量范圍在60%以上，顯著高于種殼和果皮；其次是果皮，范圍為20%～30%；種殼最低，范圍為0%～10%。說(shuō)明種仁水浸出物含量最高，浸出速率最快。綜合來(lái)看，品種對(duì)茶樹(shù)果的水浸出物含量并沒(méi)有太大的影響。

2.2.2 茶多酚。據(jù)實(shí)驗(yàn)可得，不同品種的茶多酚含量由高到低，果皮：英紅九號(hào)＞桂青種＞福云六號(hào)＞黃旦；種殼：英紅九號(hào)＞桂青種＞黃旦＞福云六號(hào)；種仁：黃旦＞桂青種＞英紅九號(hào)＞福云六號(hào)。英紅九號(hào)、桂青種、福云六號(hào)茶樹(shù)果果皮的茶多酚含量顯著高于種殼和果仁，黃旦茶樹(shù)果果皮和種殼茶多酚含量相差不大。由測(cè)定結(jié)果發(fā)現(xiàn)，不同品種果皮的茶多酚含量明顯比種殼和種仁的高，范圍為4%～12%，平均含量為7.41%；種殼次之，范圍為1%～8%，平均3.78%；種仁最低，范圍為0%～2%，平均1.02%。

2.2.3 氨基酸。蛋白質(zhì)是由氨基酸組成的，不同茶樹(shù)果部分的平均氨基酸含量由高到低為：種仁（2.35%）＞果皮（1.41%）＞種殼（0.39%），從總體上看茶樹(shù)果的氨基酸及蛋白質(zhì)含量并不高。相比之下，種仁具有氨基酸含量高的特點(diǎn)，其蛋白質(zhì)的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值也較高。許玉蘭等用15N標(biāo)記法證明氨基酸分子可直接被植物從土壤中吸收，但氨基酸對(duì)植物的影響則因所處部分和植物品種不同而異。據(jù)實(shí)驗(yàn)可得，不同品種的氨基酸含量由高到低，果皮：福云六號(hào)＞英紅九號(hào)＞桂青種＞黃旦；種殼：英紅九號(hào)＞桂青種＞黃旦＞福云六號(hào)；種仁：英紅九號(hào)＞桂青種＞黃旦＞福云六號(hào)。其中產(chǎn)于廣東英德的英紅九號(hào)種仁氨基酸含量較高、產(chǎn)于廣西的福云六號(hào)種殼氨基酸含量較低，證實(shí)氨基酸對(duì)茶樹(shù)果的效應(yīng)也因地域和植物品種不同而不同。

2.2.4 可溶性糖。據(jù)實(shí)驗(yàn)可得福云六號(hào)果皮和種仁、英紅九號(hào)種殼的可溶性糖含量最高，英紅九號(hào)和桂青種的果皮、桂青種的種殼、桂青種和黃旦的種仁可溶性糖含量次之，而黃旦的果皮、黃旦和福云六號(hào)的種殼、英紅九號(hào)的種仁的最低。不同品種茶樹(shù)果果皮的可溶性糖含量范圍為2%～10%，種殼的范圍為0%～2%，種仁的范圍為10%～30%。據(jù)已有研究表明油茶餅粕約含有30%～50%的糖類(lèi)物質(zhì)，本測(cè)定結(jié)果中的種仁可溶性糖含量最接近。其中英紅九號(hào)茶樹(shù)果的可溶性糖含量較低，可能受茶果成熟期差異的影響。

2.2.5 總黃酮。據(jù)實(shí)驗(yàn)可得，不同品種的總黃酮含量由高到低，果皮：黃旦＞英紅九號(hào)＞福云六號(hào)＞桂青種；種殼：英紅九號(hào)＞福云六號(hào)＞桂青種＞黃旦；種仁：英紅九號(hào)＞黃旦＞桂青種＞福云六號(hào)。不同品種間種仁的總黃酮含量均明顯高于果皮和種殼，平均含量為7.72%；果皮和種殼的含量不相上下，分別為3.46%、3.15%。果皮與種殼的總黃酮含量平均范圍都在2%～6%內(nèi)，是一般茶葉總黃酮含量的正常值。四個(gè)品種的茶樹(shù)果總黃酮含量存在一定差異，總黃酮含量與茶多酚含量呈負(fù)相關(guān)，這可能是由于黃酮類(lèi)化合物和茶多酚都屬于多酚類(lèi)物質(zhì)。

2.3 不同品種茶樹(shù)果抗氧化活性研究

2.3.1 不同品種茶樹(shù)果清除羥自由基活性研究。由表4測(cè)定結(jié)果可以發(fā)現(xiàn)，茶樹(shù)果的羥自由基清除率由高到低，果皮：福云六號(hào)＞桂青種＞英紅九號(hào)＞黃旦；種殼：桂青種＞福云六號(hào)＞黃旦＞英紅九號(hào)；種仁：英紅九號(hào)＞福云六號(hào)＞黃旦＞桂青種。種仁的羥自由基清除率明顯比果皮和種殼的高，四個(gè)品種中種仁的清除率均在90%以上，平均清除率為95.93%，其次是果皮為83.37%，最低是種殼為80.84%，結(jié)果表明茶樹(shù)果種仁的清除率更好。通過(guò)對(duì)不同品種的羥自由基清除率進(jìn)行比較還發(fā)現(xiàn)，福云六號(hào)、桂青種品種三個(gè)部分的清除性能較接近，整體清除率范圍為80%～95%，說(shuō)明采于廣西地區(qū)的茶樹(shù)果清除羥自由基能力更高。

2.3.2 不同品種茶樹(shù)果清除DPPH自由基活性研究。由表3對(duì)DPPH自由基清除率測(cè)定結(jié)果進(jìn)行方差分析可知，四個(gè)品種的12個(gè)樣品均具有清除DPPH自由基的能力。果皮的DPPH自由基清除率由高到低為：英紅九號(hào)＞黃旦＞福云六號(hào)＞桂青種；種殼為：英紅九號(hào)＞福云六號(hào)＞桂青種＞黃旦；種仁為：福云六號(hào)＞黃旦＞桂青種＞英紅九號(hào)。說(shuō)明茶樹(shù)果清除DPPH自由基的能力會(huì)因品種不同而存在一定的差異性。

表3 不同品種茶樹(shù)果羥自由基和 DPPH 自由基清除能力參數(shù)

對(duì)四個(gè)品種茶樹(shù)果清除DPPH自由基活性的比較發(fā)現(xiàn)，茶樹(shù)果種殼的均值最高，為92.81%，且各品種清除率均在90%以上，證明茶樹(shù)果種殼具有很好的清除DPPH自由基能力，抗氧化活性很強(qiáng)。其次是果皮（86.82%），四個(gè)品種的清除率均在80%以上，最低是種仁（84.95%）。英紅九號(hào)種殼清除DPPH自由基的清除率最高，這可能與英紅九號(hào)具有高茶多酚含量、高總黃酮含量有關(guān)。

3 結(jié)論

茶樹(shù)在生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中會(huì)受到區(qū)域氣候條件、立地條件、品種以及茶樹(shù)體營(yíng)養(yǎng)等的影響，使得不同品種茶樹(shù)果的內(nèi)含物質(zhì)含量及抗氧化活性存在有一定的差異性。本研究通過(guò)對(duì)不同品種的茶樹(shù)果內(nèi)含物質(zhì)進(jìn)行比較得出，英紅九號(hào)果皮的水浸出物和茶多酚以及種仁的總黃酮和氨基酸含量最高，英紅九號(hào)種仁果羥自由基和種殼DPPH自由基的清除率最大。在四個(gè)茶樹(shù)果品種中，英紅九號(hào)品種具有高茶多酚含量、高氨基酸含量、高總黃酮含量、強(qiáng)抗氧化活性、可溶性糖含量相對(duì)較低的特點(diǎn)。因此，可以根據(jù)不同品種不同部分的差異將茶樹(shù)果作為原料繼續(xù)深入的研究開(kāi)發(fā)成不同的茶成品。