氣相色譜法中內(nèi)標(biāo)法和外標(biāo)法檢測(cè)甲醇的對(duì)比分析

陸溶艷 陳偉潔 陀揚(yáng)陽 莫志斌

（中華人民共和國梧州海關(guān) 廣西梧州 543002）

1 前言

現(xiàn)如今市售酒的種類越來越多，酒類的質(zhì)量安全關(guān)系到消費(fèi)者的健康。甲醇是酒類檢測(cè)中的一項(xiàng)重要指標(biāo)，因此，國家對(duì)其含量有嚴(yán)格規(guī)定[2]，甲醇的檢測(cè)方法有很多，例如氣相色譜法頂空測(cè)定、內(nèi)標(biāo)法或外標(biāo)法測(cè)定，其中毛細(xì)管柱氣相色譜法因其快速、高效的特點(diǎn)被廣泛應(yīng)用于白酒樣品成分的檢測(cè)中[3]，本文主要對(duì)內(nèi)標(biāo)法和外標(biāo)法測(cè)定甲醇的方法進(jìn)行分析，通過對(duì)這2種方法的濃度范圍及精密度、準(zhǔn)確度（回收率實(shí)驗(yàn)）進(jìn)行研究來進(jìn)行評(píng)價(jià)[4]。

2 實(shí)驗(yàn)原理

蒸餾去除發(fā)酵酒中的不揮發(fā)性物質(zhì)，加入內(nèi)標(biāo)（酒精、蒸餾酒及其配制酒直接加入內(nèi)標(biāo)），經(jīng)氣相色譜法分離、氫火焰離子化檢測(cè)器檢測(cè)，以保證保留時(shí)間定性，外標(biāo)法定量[1]。

3 實(shí)驗(yàn)過程

3.1 儀器與試劑

安捷倫GC9000氣相色譜儀（美國安捷倫公司）；G4513A自動(dòng)進(jìn)樣器；安捷倫超高惰性襯管（5190—3165）；FPD檢測(cè)器；甲醇：TEDIA，99.8%；叔戊醇：麥克林，99.0%；乙醇：色譜純。

3.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線及樣品的制備

3.2.1內(nèi)標(biāo)法

標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備：分別吸取0.5、1.0、2.0、4.0、5.0 mL甲醇標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液（5 038.9 mg/L）于5個(gè)25 mL容量瓶中，用乙醇溶液定容至刻度，依次配制成甲醇含量為100.8、201.6、403.2、806.4、1008.0 mg/L；標(biāo)曲與樣品分別取10.0 mL于試管中，加入0.10 mL叔戊醇標(biāo)準(zhǔn)溶液，混勻，備用。

3.2.2外標(biāo)法

標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備：分別吸取0.5、1.0、2.0、4.0、5.0mL甲醇標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液（5 038.9 mg/L）于5個(gè)25 mL容量瓶中，用乙醇溶液定容至刻度，依次配制成甲醇含量為100.8、201.6、403.2、806.4、1008.0 mg/L；標(biāo)曲與樣品直接取樣進(jìn)樣。

3.3 儀器條件

詳見表1。

表1 儀器條件

4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析

本次實(shí)驗(yàn)分別用內(nèi)標(biāo)法和外標(biāo)法進(jìn)行精密度與加標(biāo)回收率的比較，精密度進(jìn)行6次平行測(cè)定，對(duì)不同濃度加標(biāo)回收，對(duì)其進(jìn)行計(jì)算平均值、標(biāo)準(zhǔn)偏差（S）和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD），具體結(jié)果見表2、表3。

4.1 圖譜

見圖1。

圖1

4.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線（甲醇標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液：5 038.9 mg/L），見圖2。

圖2

內(nèi)標(biāo)法：線性方程：Y=41.0068X+0.0061；

線性范圍：100.8～1 008 mg/L；

相關(guān)系數(shù)：0.99994

外標(biāo)法：線性方程：Y=0.1528X+0.6281；

線性范圍：100.8～1 008 mg/L；

相關(guān)系數(shù)：0.99992

4.3 精密度實(shí)驗(yàn)結(jié)果

結(jié)果詳見表2。

表2 內(nèi)標(biāo)法與外標(biāo)法測(cè)實(shí)際樣品精密度結(jié)果

甲醇保留時(shí)間：4.076 min；叔戊醇保留時(shí)間：5.848 min；甲醇保留時(shí)間：4.078 min。

4.4 加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)結(jié)果

4.4.1內(nèi)標(biāo)法

分別吸取已配制的5038.9mg/L甲醇溶液0.25、0.50、1.0、1.5、1.7 mL于10 mL容量瓶中，用樣品定容至刻度，再加入0.10 mL叔戊醇標(biāo)準(zhǔn)溶液，混勻，進(jìn)樣。

4.4.2外標(biāo)法

分別吸取已配制的5038.9 mg/L甲醇溶液0.25、0.50、1.0、1.5、1.7 mL于10 mL容量瓶中，用樣品定容至刻度，混勻，進(jìn)樣；結(jié)果詳見表3。

表3 內(nèi)標(biāo)法與外標(biāo)法加標(biāo)回收率結(jié)果

5 結(jié)果討論

測(cè)試結(jié)果表明內(nèi)標(biāo)法和外標(biāo)法測(cè)定酒中甲醇的精密度結(jié)果相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）值分別為0.16%、0.23%，符合GB 5009.266-2016食品中甲醇的測(cè)定在重復(fù)測(cè)定條件下獲得的2次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)差值不超過其算術(shù)平均值±10%[1]的要求。其中用內(nèi)標(biāo)法測(cè)定不同濃度范圍的回收率的結(jié)果分別為118.45%、107.86%、103.00%、102.79%、101.63%，平均回收率為106.7%，標(biāo)準(zhǔn)偏差為6.97%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為6.53%；而用外標(biāo)法測(cè)定不同濃度范圍的回收率的結(jié)果分別為110.95%、95.04%、102.13%、101.58%、101.53%，平均回收率為102.2%，標(biāo)準(zhǔn)偏差為5.67%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為5.55%；總體來看內(nèi)標(biāo)法與外標(biāo)法回收率結(jié)果相差不大。

6 結(jié)論

通過比較這2種方法測(cè)定結(jié)果可以看出，外標(biāo)法與內(nèi)標(biāo)法對(duì)于定性定量數(shù)值相差不大，這2種方法對(duì)檢測(cè)樣品的結(jié)果的重現(xiàn)性也很好，這2種方法對(duì)低濃度加標(biāo)回收率較差，而中高濃度加標(biāo)回收率較好，但外標(biāo)法操作更簡(jiǎn)單，誤差相對(duì)較少，這2種方法均值得推薦使用。