酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)和電化學(xué)發(fā)光免疫法檢測(cè)孕婦乙型肝炎表面抗原結(jié)果的比較

費(fèi)靜

（沈陽市婦幼保健院檢驗(yàn)科 遼寧沈陽 110000）

1 前言

乙型肝炎表面抗原是診斷乙型肝炎主要標(biāo)志物，也是評(píng)估乙型肝炎治療效果、預(yù)后質(zhì)量的重要指標(biāo)[1]。當(dāng)前我國乙肝表面抗原總攜帶率約為7.18%，其攜帶率呈逐年增加趨勢(shì)[2]。乙型肝炎病毒主要是經(jīng)血液、母嬰垂直、性行為等方式進(jìn)行傳播，但僅根據(jù)病灶定性檢測(cè)，檢測(cè)率較低，無法為臨床治療提供依據(jù)[3]。另外母嬰傳播是乙型肝炎的主要途徑，準(zhǔn)確判斷乙型肝炎感染，直接影響到新生兒是否需要接受乙肝疫苗免疫接種[4]。因此提高乙型肝炎表面抗原結(jié)果的篩查率，降低乙肝病毒感染風(fēng)險(xiǎn)十分必要。酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)和電化學(xué)發(fā)光免疫法是目前篩查乙型肝炎病毒的主要方法，臨床檢測(cè)低濃度標(biāo)本，影響因素多，需要選擇一種診斷效能高的檢測(cè)方法?，F(xiàn)本研究比較兩種不同檢測(cè)方法對(duì)孕婦乙型肝炎表面抗原結(jié)果的檢出效果，報(bào)道如下。

2 資料與方法

2.1 臨床資料

選取在2018年5月—2020年5月期間于我院產(chǎn)前健康保健3600例活產(chǎn)兒分娩孕婦，收集孕婦人口學(xué)特征，年齡20～36歲，平均（28.68±2.91）歲；孕周36～41周，平均（38.34±0.51）周。納入標(biāo)準(zhǔn)：入組孕婦均在我院分娩；活產(chǎn)兒；孕婦及家屬知情研究，簽署同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：伴全身感染、凝血機(jī)制異常；拒絕參與此次研究者；臨床資料不完整者。該研究符合本院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審批標(biāo)準(zhǔn)，且審核通過。

2.2 檢查方法

所有孕婦于入院第2天知情同意，采集外周靜脈血5 mL，室溫靜置60 min，4 000r/min，離心15 min，吸取足量上清液，分別置入A、B滅菌管，置入-80℃保存?zhèn)錂z。安圖多功能酶標(biāo)儀及配套試劑，乙型肝炎病毒表面抗體試劑盒（上海科華生物技術(shù)有限公司），cobas6000電化學(xué)發(fā)光儀及配套試劑（德國羅氏公司）。酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定血標(biāo)本，按照說明書操作，以酶標(biāo)儀讀取吸光度，檢測(cè)乙型肝炎病毒HBsAg、HBsAb、HBeAb、HBeAg、HBcAb五項(xiàng)標(biāo)志物，計(jì)算臨界值，陽性：臨界值>1；陰性：臨界值≤1。電化學(xué)發(fā)光免疫法測(cè)定血標(biāo)本，按照說明書操作，采用雙抗體夾心法測(cè)定乙型肝炎病毒抗原，陽性：臨界值<1；陰性：≥1。

2.3 觀察指標(biāo)

（1）比較酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)和電化學(xué)發(fā)光免疫法對(duì)乙型肝炎表面抗原陽性率檢出率；

（2）比較2種檢測(cè)方法的診斷敏感性、特異性及準(zhǔn)確性。

2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

SPSS23.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件。計(jì)數(shù)資料經(jīng)百分比率（%）表示，采取χ2檢驗(yàn)；P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 結(jié)果

3.1 比較酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)和電化學(xué)發(fā)光免疫法對(duì)乙型肝炎表面抗原陽性率檢出率

酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)乙型肝炎表面抗原陽性率1.36%，與電化學(xué)發(fā)光免疫法陽性率1.31%相比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），見表1。

表1 比較酶聯(lián)免疫吸附法和電化學(xué)發(fā)光免疫法對(duì)乙型肝炎表面抗原陽性率[n（%）]

3.2 比較2種檢測(cè)方法陽性檢出一致率

2種檢測(cè)方法陽性檢出一致率為96.88%，一致率高，見表2。

表2 比較2種檢測(cè)方法陽性檢出一致率

3.3 比較2種檢測(cè)方法的診斷敏感性、特異性及準(zhǔn)確性

2種檢測(cè)方法結(jié)合檢出陽性例數(shù)48例，陽性率1.33%；酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)乙型肝炎表面抗原的診斷敏感性97.92%、特異性99.94%、準(zhǔn)確性99.92%；電化學(xué)發(fā)光免疫法診斷敏感性93.75%、特異性99.94%、準(zhǔn)確性99.86%；差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），見表3。

表3 酶聯(lián)免疫吸附法診斷敏感性、特異性及準(zhǔn)確性

表4 電化學(xué)發(fā)光免疫法診斷敏感性、特異性及準(zhǔn)確性

4 討論

乙型肝炎是社會(huì)公共衛(wèi)生中的常見問題，母嬰傳播是乙型肝炎病毒感染的主要途徑。因此必須準(zhǔn)確篩查乙型肝炎病毒，做好感染干預(yù)策略，使新生兒及時(shí)接受乙型肝炎疫苗的免疫治療，確保胎兒安全。酶聯(lián)免疫吸附法是檢測(cè)乙型肝炎表面抗原的主要試劑分析方法，尤其是醫(yī)療水平的發(fā)展，各種試劑盒應(yīng)用日漸廣泛，并拓寬了各種檢測(cè)試劑盒的應(yīng)用范圍[5]。但血清同時(shí)存在HBsAg、HBsAb陽性時(shí)，容易造成ABsAb漏檢。可能是血清內(nèi)HBsAg顆粒會(huì)包裹ABsAb，無法充分暴露ABsAb，難以結(jié)合該試劑盒的固相載體表面的抗原，使ABsAb濃度降低，檢測(cè)率下降[6]；酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定ABsAb時(shí)，采用基因重組乙肝表面抗原，與天然血源性表面抗原不同，會(huì)相應(yīng)降低其結(jié)合能力，使陽性檢出率下降[7]。隨著諸多檢驗(yàn)技術(shù)的發(fā)展，電化學(xué)發(fā)光免疫法是一種新型檢測(cè)技術(shù)，敏感度、準(zhǔn)確度高、特異性明顯、具有微定量及自動(dòng)化診斷技術(shù)。該檢測(cè)技術(shù)結(jié)合了電化學(xué)發(fā)光技術(shù)及免疫測(cè)定技術(shù)，重復(fù)性高，其標(biāo)準(zhǔn)差及均值比例低于5.0%，對(duì)同一樣本進(jìn)行重復(fù)檢測(cè)，減少干擾因素對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響[8]；同時(shí)可以利用全自動(dòng)檢測(cè)儀器自主完成乙型肝炎表面抗原的檢測(cè)，檢測(cè)效率明顯提高[9]。

本組研究中，酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)乙型肝炎表面抗原陽性率1.36%，電化學(xué)發(fā)光免疫法陽性率1.31%，酶聯(lián)免疫吸附法診斷敏感性97.92%、特異性99.94%、準(zhǔn)確性99.92%；電化學(xué)發(fā)光免疫法診斷敏感性93.75%、特異性99.94%、準(zhǔn)確性99.86%；差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。其結(jié)果與張葉鋒等[10]研究相一致，酶聯(lián)免疫檢測(cè)敏感度0.97、特異度0.99、準(zhǔn)確度0.98，較電化學(xué)發(fā)光免疫法檢測(cè)敏感度0.98、0.99、0.99，2種方法比較（P>0.05）。結(jié)果表明，2種檢測(cè)方法對(duì)乙型肝炎表面抗原均有較高的檢測(cè)價(jià)值，而且2種檢測(cè)方法陽性檢出一致率為96.88%，一致率高。因此在孕婦乙型肝炎表面抗原陽性篩查時(shí)，電化學(xué)發(fā)光免疫法均能在孕期陽性抗原篩查中獲得理想效果，且定量檢測(cè)技術(shù)不受黃疸、脂質(zhì)、溶血、抗病毒等藥物的影響；酶聯(lián)免疫吸附法能夠篩查較低濃度的HBeAg；因此2種檢測(cè)技術(shù)存在相應(yīng)的假陽性反應(yīng)，現(xiàn)有的酶聯(lián)免疫吸附法的敏感度、準(zhǔn)確度存在一定局限，需進(jìn)一步對(duì)檢測(cè)技術(shù)進(jìn)行改進(jìn)。

綜上所述，酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)和電化學(xué)發(fā)光免疫法對(duì)孕婦乙型肝炎表面抗原標(biāo)志物的檢出率高，必要時(shí)應(yīng)當(dāng)優(yōu)化檢測(cè)程序，相互聯(lián)合，提高其檢出率。一般有條件的實(shí)驗(yàn)室，先采用酶聯(lián)免疫吸附法對(duì)乙型肝炎病毒進(jìn)行初次篩查，再采用電化學(xué)發(fā)光免疫法對(duì)部分項(xiàng)目進(jìn)行重新篩查，以此提高檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。