代謝組學(xué)在中醫(yī)證型中的應(yīng)用探析＊

胡星遙，劉紅寧，嚴小軍，張 潔，尚廣彬

(江西中醫(yī)藥大學(xué)中醫(yī)基礎(chǔ)理論分化發(fā)展研究中心/江西省中醫(yī)病因生物學(xué)重點實驗室 南昌 330004)

代謝組學(xué)著眼于揭示生物體內(nèi)相對分子量小于1000的代謝物變化情況，并對代謝物進行定量和定性分析研究，廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，是系統(tǒng)生物學(xué)的組成部分，同時也是精準醫(yī)學(xué)用于疾病早期診斷的主要方法[1,2]。代謝組學(xué)的分析技術(shù)包括核磁共振(NMR)和液相色譜質(zhì)譜(HPLC-MS，UPLC-MS/MS)、氣相色譜質(zhì)譜(GC-MS，GC-MS/MS)、液相-核磁-質(zhì)譜(HPLC-NMR-MS)、電泳-質(zhì)譜(CE-MS)、以及等離子體質(zhì)譜(ICP-MS)等聯(lián)用技術(shù)[3-6]。其常用的生物學(xué)樣本有血液、尿液、組織、腦脊液、頭發(fā)、唾液、糞便和呼出氣體等[7-10]，具有待測樣品損失小、樣品處理高通量、代謝物易檢出、檢測結(jié)果信息量大等優(yōu)勢[11]。在醫(yī)學(xué)研究中，代謝組學(xué)技術(shù)常與轉(zhuǎn)錄組學(xué)、蛋白組學(xué)、基因組學(xué)等其他技術(shù)聯(lián)合應(yīng)用，辨析病理性反應(yīng)過程中形成的相關(guān)代謝產(chǎn)物，鑒定出有顯著變化的代謝物，并分析它們之間的整體關(guān)聯(lián)性，對疾病發(fā)生發(fā)展中的關(guān)鍵途徑進行分析闡釋，探索疾病的病因生物學(xué)機制，有助于開創(chuàng)新的疾病診療模式[12-14]。

近年來，中醫(yī)證型標(biāo)準化研究的成果頗豐，代謝組學(xué)技術(shù)已成為中醫(yī)證侯學(xué)研究的新技術(shù)[15]。中醫(yī)證型包含了病因、病位、病性以及病勢的關(guān)系，是疾病發(fā)展過程中某一階段的病理性概括，是機體受不同的內(nèi)外環(huán)境影響而引起體內(nèi)氣血陰陽變化，從而導(dǎo)致機體呈現(xiàn)出不同的疾病狀態(tài)，且隨著疾病的發(fā)生發(fā)展而發(fā)生相應(yīng)的變化[16]。辨證論治是中醫(yī)診治疾病的特殊方法，是指導(dǎo)中醫(yī)臨床正確辨證分型、合理用藥治療疾病的基本原則[17]。然而，由于中醫(yī)證型的診斷要審時度勢，根據(jù)患者體征和癥狀的不同，依據(jù)不同醫(yī)生的臨床經(jīng)驗、不同版本的教材和診療指南等進行辨證分型，主觀性較大，故其診斷的量化和客觀化、證候的規(guī)范化和標(biāo)準化研究是難點和重點。而代謝組學(xué)具有整體性、動態(tài)性的特點，與中醫(yī)的整體觀、辨證論治的特性相吻合，差異代謝物可以探查致病因素作用于機體后內(nèi)環(huán)境的變化情況，是對整體病程中某一階段的病理性變化的客觀反映[18]。將兩者相結(jié)合，糅合成中醫(yī)證候代謝組學(xué)研究技術(shù)，即在對疾病進行中醫(yī)辨證分型后采集生物學(xué)樣本，通過代謝組學(xué)的方法找出中醫(yī)不同證型間的標(biāo)志性代謝物及其所在的相關(guān)代謝通路，以明確不同證型間相關(guān)物質(zhì)的變化，確定中醫(yī)證型相關(guān)代謝譜群，為中醫(yī)藥理論客觀性研究提供新的方法和思路[19,20]。

1 代謝組學(xué)在五臟疾病中醫(yī)證型中的研究

在中醫(yī)基礎(chǔ)理論中，人體生命活動的動力是元真之氣，《素問·平人氣象論》中有云：“臟真散于肝，肝藏筋膜之氣也……臟真通于心，心藏血脈之氣也……臟真濡于脾，脾藏肌肉之氣也……臟真高于肺，以行榮衛(wèi)陰陽也……臟真下于腎，腎藏骨髓之氣也?！北砻魅梭w的五臟調(diào)和離不開真氣的充沛，它是五臟維持正常生理功能的物質(zhì)基礎(chǔ)和能量基礎(chǔ)[21]。現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明[22]，中醫(yī)證型均涉及多指標(biāo)、多系統(tǒng)、多層次的物質(zhì)變化，五臟之間有共同的遞質(zhì)、激素、細胞因子等傳遞信息的物質(zhì)，對人體各系統(tǒng)、器官、組織、細胞進行代謝調(diào)節(jié)。從整體觀而言，代謝組學(xué)技術(shù)能夠從微觀層面分析和探討五臟各自的生理功能和病理特點，把握疾病的整體變化，探索五臟疾病中醫(yī)證型的衍變機制。

1.1 肝系疾病中醫(yī)證型的代謝組學(xué)研究

現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的肝硬化、肝腹水、肝炎、肝癌等屬于中醫(yī)肝系疾病“積聚”“鼓脹”“脅痛”以及“肝癌”等范疇。肝者主疏泄、主藏血。若疏泄不暢，易致肝郁、肝陽上亢等證；若藏血不佳，易致肝血虛、肝腎陰虛等證。周玄等人的研究顯示[23]，肝系疾病中具有診斷潛能的生物標(biāo)記主要集中在脂類、氨基酸類和膽汁酸類等物質(zhì)。

代謝組學(xué)技術(shù)在肝硬化、黃疸、肝炎臨床常見肝系疾病應(yīng)用較多，Song等[24]利用代謝組學(xué)方法對扶正化瘀方改善肝硬化的機制研究中發(fā)現(xiàn)肝腎陰虛證患者體內(nèi)排毒能力和對谷胱甘肽代謝的調(diào)節(jié)能力均有所增強，表明扶正化瘀方治療此證型患者的機制可能涉及抗氧化劑途徑的調(diào)節(jié)和自由基的清除。而肝郁證患者出現(xiàn)能量代謝途徑顯著變化，表明扶正化瘀方治療肝硬化肝郁證的機制存在糖酵解和脂肪酸代謝的調(diào)節(jié)。Wang等[25]對黃疸不同證型患者的代謝組學(xué)研究結(jié)果顯示區(qū)別陽黃證患者與健康人的內(nèi)源性代謝物主要有激動素、膽色素原、吲哚丙烯酸等，參與的代謝途徑主要涉及維生素B6(Vitamin B6)代謝，色氨酸、脯氨酸和精氨酸代謝；區(qū)別陰黃證患者與健康人的內(nèi)源性代謝物主要有2-辛烯二酸(2-octenedioic acid)，焦谷氨酸，α-N-苯基乙?；?1-谷氨酰胺(α-N-phenylacetyl-1-glutamine)等，參與的代謝途徑主要涉及類固醇激素和原代膽汁酸生物合成，半胱氨酸和蛋氨酸代謝。李維薇等[26]對嬰兒巨細胞病毒肝炎不同證型的代謝組學(xué)進行探討，研究提示脾虛濕困證患兒出現(xiàn)丁酸、馬尿酸、氨基丙二酸、3-氨基異丁酸(3-Aminoiseobutyric acid)等腸道菌群相關(guān)的代謝物紊亂；濕熱內(nèi)蘊證患兒出現(xiàn)檸檬酸、D-麥芽糖(D-Maltose)和D-葡萄糖(D-Glucose)等能量相關(guān)代謝物紊亂；氣滯血瘀證患兒除了出現(xiàn)氨基酸代謝通路之外，還存在檸檬酸循環(huán)、乙醛酸和二羧酸代謝等能量相關(guān)代謝通路的異常。

1.2 心系疾病中醫(yī)證型的代謝組學(xué)研究

現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的冠心病、高血壓病、高脂血癥等屬于中醫(yī)心系疾病“心悸”“眩暈”等范疇。心者主血脈、主神明。若心血不足、心脈不通，易致心血虛、痰凝血瘀等證；若藏神不佳，易致心腎不交、心火亢盛等證。心系疾病的發(fā)生機制主要涉及糖代謝、脂代謝、氨基酸代謝和部分能量代謝[27]。

代謝組學(xué)在冠心病中的研究主要集中在痰凝血瘀證和氣陰兩虛證等證，在高血壓病的研究主要是肝陽上亢證和痰濕壅盛證等證，在血脂異常癥的研究主要是腎陽虛證和痰濕阻滯證等證。不同證型的冠心病代謝組學(xué)研究表明[28]：痰凝血瘀證患者糖代謝明顯增加，主要涉及賴氨酸降解；氣陰兩虛證患者機體中的肌酐和琥珀酸含量明顯降低，能量代謝紊亂，原因是三羧酸循環(huán)受到抑制，涉及的主要通路為色氨酸、精氨酸和脯氨酸代謝。韋桌等[29]基于文獻計量學(xué)研究發(fā)現(xiàn)高血壓肝陽上亢證形成過程涉及氨基酸的轉(zhuǎn)運和氧自由基的清除，以及維生素、蛋白質(zhì)、一氧化氮、多巴胺、腎上腺素、去甲腎上腺素等物質(zhì)的合成。此外，吳天敏等[30]的研究發(fā)現(xiàn)在中青年高血壓痰濕壅盛證病人體內(nèi)出現(xiàn)了氨基酸、脂蛋白和糖代謝異常。利用該研究結(jié)果，通過代謝組學(xué)技術(shù)方法能準確、快速的從普通人群或高血壓患者中鑒別出痰濕壅盛證高血壓病人。不同證型血脂異常癥的代謝組學(xué)研究顯示[31]：腎陽虛證和痰濕阻滯證患者谷氨酰胺、膽堿、丙氨酸和谷氨酸濃度均低于健康對照組，在氧化與炎癥反應(yīng)、肝臟和能量代謝等方有差異，涉及了丙酮酸代謝途徑和甘油酯代謝途徑，甘氨酸、絲氨酸和蘇氨酸的代謝途徑，谷氨酰胺和谷氨酸代謝途徑，丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸的代謝途徑。其中，腎陽虛證患者的關(guān)鍵代謝物有甘氨酸和絲氨酸，差異性代謝途徑有甘油酯代謝；痰濕阻滯證患者關(guān)鍵代謝物有谷氨酰胺、纈氨酸和異亮氨酸，差異性代謝途徑有甘氨酸、絲氨酸、蘇氨酸代謝。

1.3 脾系疾病中醫(yī)證型的代謝組學(xué)研究

現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的胃炎、腹瀉、胃癌和腸癌等屬于中醫(yī)脾系疾病“胃痛”“痞滿”“泄瀉”以及“胃癌”和“腸癌”等范疇。脾者主運化、主升清、主統(tǒng)血。若運化不利，易致脾虛水泛、痰濕壅盛等證；若清陽不升，易致脾氣虛、脾氣下陷等證；若統(tǒng)血不佳，易致肝脾不和、心脾血虛等證。脾主運化的功能與糖代謝、脂代謝、能量代謝密切相關(guān)[32]。

代謝組學(xué)技術(shù)在對脾系疾病中應(yīng)用集中在脾胃濕熱證、脾胃虛寒證、脾虛證等。慢性萎縮性胃炎代謝組學(xué)研究結(jié)果顯示脾胃濕熱證中乳果糖、纈氨酸含量的水平比脾胃虛寒證高，但其肌肽、甲酸和異丁酸的含量低于脾胃虛寒證中的含量，表明慢性萎縮性胃炎的兩種證型在脂代謝、糖代謝、核酸和氨基酸代謝方面有差異[33]。在結(jié)直腸癌術(shù)后研究中，利用代謝組學(xué)技術(shù)可以區(qū)分濕熱浸淫證、脾虛證、肝腎陰虛證。其中，肌酐和氨基酸升高可能與濕熱浸淫證的形成有關(guān)；D-色氨酸(D-tryptophan)降低可能與脾虛證相關(guān)；在肝腎陰虛證中，則表現(xiàn)為D-半乳糖(D-galactose)增加，而1，2，3-丙三羧酸(1，2，3-propanetricarboxylic acid)、L-脯氨酸(L-proline)和2-吲哚羧酸(2-indolecarboxylic acid)減少[34]。

1.4 肺系疾病中醫(yī)證型的代謝組學(xué)研究

現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的哮喘、肺結(jié)核、肺炎、肺癌等屬于中醫(yī)肺系疾病“哮病”“肺癆”“喘病”以及“肺癌”等范疇。肺者主氣、主行水、主治節(jié)、主宣肅。若氣機不暢、宣肅不順，易致肺氣虛、肺陰虛、肝火犯肺等證；若行水不利、治節(jié)不佳，易致痰濁阻肺、濕熱蘊肺等證。肺的宣發(fā)肅降功能和氨基酸代謝、脂代謝、能量代謝息息相關(guān)[35]。

代謝組學(xué)技術(shù)在肺癌實證和虛證、支氣管哮喘肺虛證和腎虛證等研究中應(yīng)用較多。Ma等[36]對非小細胞肺癌不同證型進行代謝組學(xué)研究顯示：實證組與虛證組有10個化合物差異顯著，以乳酸、肌醇、葡萄糖和磷酸膽堿最為敏感，其中實證組谷氨酰胺、纈氨酸和葡萄糖含量比虛證組高；虛證組乳酸、肌醇、檸檬酸、丙酮酸、丙氨酸以及磷酸膽堿和甘油磷酸膽堿含量較實證組高。在對支氣管哮喘緩解期中醫(yī)證型的代謝組研究中發(fā)現(xiàn)肺虛組和腎虛組能有明顯的差異。腎虛組血漿中的纈氨酸、亮氨酸、檸檬酸、丙氨酸、乳酸、肌酸等代謝物相較肺虛組顯著下降；乙酰乙酸和丙酮等代謝物含量則顯著增加，這些差異與哮喘的氣道過敏、炎癥和重塑密切相關(guān)[37]。

1.5 腎系疾病中醫(yī)證型的代謝組學(xué)研究

現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的腎病、腎炎、腎癌等屬于中醫(yī)腎系疾病“水腫”以及“腎癌”等范疇。腎者藏精、主水、主納氣。若不能藏精納氣，易致腎不納氣、腎精虛等證；若水液運行失常、津液代謝失司、陰陽失調(diào)，易致風(fēng)水泛濫、肝腎陰虛、脾腎陽虛、腎陰陽兩虛等證。代謝組學(xué)研究中發(fā)現(xiàn)，腎病患者的鞘脂類、類固醇類、膽紅素循環(huán)等代謝通路有異常[38]。

將代謝組學(xué)技術(shù)應(yīng)用在慢性腎病脾腎氣虛證和脾腎陽虛證、兒童紫癜性腎炎熱傷腎絡(luò)證中，可以挖掘出如下信息：慢性腎病脾腎氣虛證和脾腎陽虛證的代謝產(chǎn)物有顯著性差異，其主要差異標(biāo)記物有氨基酸、鞘脂類、脂肪酸等，主要涉及氨基酸代謝、鞘脂類代謝、脂肪酸代謝等[39]。針對兒童紫癜性腎炎的熱傷腎絡(luò)證進行代謝組學(xué)研究，其差異標(biāo)志物中，醛固酮、同型半胱氨酸硫內(nèi)酯、均聚L-精氨酸(Homopoly-Larginine)升高，苯丙精氨酸、色氨酰蛋氨酸、L-蛋氨酸(L-methionine)和雌酮降低[40]。

表1展示了代謝組學(xué)在五臟疾病中醫(yī)證型中的部分研究結(jié)果，主要是利用代謝組學(xué)技術(shù)對病人和健康人，以及某疾病的不同證型進行鑒別，以此可探究疾病狀態(tài)下不同證型的發(fā)病機制。除此之外，亦有對中醫(yī)藥治療疾病的療效進行代謝組學(xué)的研究，可為中醫(yī)選方配藥的合理化和整合化提供啟發(fā)性的指導(dǎo)。當(dāng)然，目前研究過程中存在中醫(yī)證型的樣本量較少，存在著辨證的差異性以及檢測的誤差等缺陷，故而仍需要進一步反復(fù)的深入研究來驗證。

1.6 中醫(yī)證型中常見代謝通路的研究

常見的代謝通路有糖代謝、脂代謝、氨基酸代謝等，結(jié)合中醫(yī)證型的代謝組學(xué)研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)特定的生物標(biāo)記群作為中醫(yī)證型的鑒定輔助，這些代謝通路的異常亦可以解釋不同中醫(yī)證型發(fā)生發(fā)展的機制，為疾病診療帶來新的風(fēng)向標(biāo)。

糖為水谷之精微，是機體生命活動不可或缺的物質(zhì)，由脾運輸，疏布于心肺，經(jīng)肝貯藏，腎代謝[41]。若在糖代謝過程中，某一代謝環(huán)節(jié)出現(xiàn)異常，可反映出某個或某些臟器出現(xiàn)疾患，糖代謝的異常也能加快疾病的進展。研究顯示[42]非小細胞肺癌中痰瘀毒結(jié)型復(fù)發(fā)率最高，糖代謝異常能促使細胞侵襲轉(zhuǎn)移的能力增強，導(dǎo)致余毒死灰復(fù)燃、癌毒走竄復(fù)發(fā)。由此可見，改善糖代謝可以成為治療痰瘀毒結(jié)型非小細胞肺癌一種治療策略。脂質(zhì)涉及了機體大量生物學(xué)結(jié)構(gòu)的組成，參與了人體各種功能的正常發(fā)揮，并能在細胞中保持動態(tài)平衡，脂代謝異常已被證明與各種常見的代謝性疾病密切相關(guān)[43]。研究證實[44]非酒精性脂肪肝肝郁脾虛證中糖代謝障礙會使葡萄糖利用率下降，脂代謝障礙導(dǎo)致肝臟脂肪沉積增多，糖脂貯積加重了痰濕的瘀積，致使肝氣之郁，脾氣不行。氨基酸作為蛋白組的基本單位，是氨基和羧基的有機化合物[45]。氨基酸代謝的紊亂會嚴重影響機體的新陳代謝，打破營養(yǎng)輸入、合成與能量需求、供給之間的平衡[46]。有研究報道指出[47]抗生素相關(guān)性腹瀉脾陽虛證與糖代謝、脂代謝、氨基酸代謝等代謝通路的異常相關(guān)，機體能量供給不足，故出現(xiàn)活動減弱等陽氣不足的現(xiàn)象。

2 代謝組學(xué)在動物模型中醫(yī)證型中的研究

在現(xiàn)代醫(yī)學(xué)動物實驗中發(fā)現(xiàn)，雖然人和動物的機體、機理有所不同，但對動物模型中醫(yī)證型進行研究并不是為了單純的復(fù)制人類疾病的中醫(yī)證型，主要目的是探索中醫(yī)證型的發(fā)生機制，以期更好的服務(wù)于臨床疾病的辨證施治。因此，許多研究者應(yīng)用代謝組學(xué)的技術(shù)研究動物模型中醫(yī)證型，已然取得了一定的成效。

代謝組學(xué)在動物模型中醫(yī)證型的研究存在以下特征[48]：①實驗動物大多有品種、雌雄、年齡、體重等不同，但最多選用的實驗動物是雄性大鼠；②中醫(yī)證型的造模方法存在差別，即使是同種中醫(yī)證型模型，研究結(jié)果亦略有不同；③代謝組學(xué)的技術(shù)平臺、待檢測樣本有所不一，超高壓液相色譜-飛行時間質(zhì)譜聯(lián)用在代謝組學(xué)的分析技術(shù)中最常用[49]，中醫(yī)證型研究代謝組學(xué)樣本最常選取的是血液和尿液。不同分析技術(shù)會帶來結(jié)果的差別，但即便在同一實驗下不同樣本也會使代謝差異物不同[50]；④在不同實驗條件和方法下，對同一中醫(yī)證型進行研究：可以找到實驗結(jié)果相同的部分差異代謝標(biāo)志物，這意味著對中醫(yī)證型研究的重復(fù)性是有意義的，有利于提高中醫(yī)辨證分型的統(tǒng)一化和標(biāo)準化；⑤對不同時間段的代謝樣品進行檢測，或發(fā)現(xiàn)差異標(biāo)各不相同，或有的同一差異標(biāo)志物在不同時間會呈現(xiàn)相反的趨勢，有利于推進對中醫(yī)證型動態(tài)變化的研究。如表2所示，總結(jié)了部分動物模型中醫(yī)證型研究的代謝組學(xué)結(jié)果，其中包括實驗動物種類、中醫(yī)證型、檢測樣品、分析技術(shù)、主要的生物標(biāo)志物和關(guān)鍵代謝途徑等。

表2 代謝組學(xué)在動物模型中醫(yī)證型中的研究特征

由表可知，①在動物模型中醫(yī)證型中與肝脾相關(guān)的證型，如肝陽上亢證、脾氣虛證等多涉及膽汁酸和脂肪酸代謝。膽汁為肝之余氣，膽汁排泄異常會影響肝臟和胃腸的正常生理功能，臨床研究表明肝硬化肝腎陰虛證患者的初級膽汁酸水平顯著升高，濕熱蘊結(jié)證患者的次級膽汁酸水平顯著升高，從改善膽汁酸代謝入手治療，可能對阻止肝硬化發(fā)展有意義[62]。②與血瘀有關(guān)的證型多出現(xiàn)氨基酸代謝和能量代謝紊亂的結(jié)果。徐利云的研究指出[63]與氣滯血瘀證相關(guān)性最高的是氨基酸代謝的異常，經(jīng)藥物治療后氨基酸代謝紊亂可以得到改善，使因三磷酸腺苷(Adenosine triphosphate,ATP)合成不足導(dǎo)致能量代謝異常的情況得到緩解，使因能量運輸障礙導(dǎo)致氣血運行不暢的癥狀有所緩解。③與腎虛相關(guān)的證型中可見花生四烯酸代謝異常。腎臟中花生四烯酸代謝的調(diào)節(jié)，基于環(huán)氧合酶途徑、脂氧合酶途徑、細胞色素P450(cytochrome P450，CYP450)途徑這3種代謝途徑，轉(zhuǎn)化為多種觸發(fā)腎臟不同炎癥反應(yīng)的代謝物，這些代謝物通過自分泌和旁分泌產(chǎn)生的生物活性介質(zhì)，來參與機體各種生理和病理過程[64]。

3 中醫(yī)證型中代謝組學(xué)與其他組學(xué)技術(shù)的結(jié)合

現(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn)，多組學(xué)結(jié)合能夠提供更多的生物學(xué)信息。近年來，多組學(xué)結(jié)合應(yīng)用在各個方面應(yīng)用廣泛，但在中醫(yī)證型的研究中代謝組學(xué)與其他組學(xué)結(jié)合的研究仍相對較少。中醫(yī)證型研究的復(fù)雜性以及各種生物分子代謝產(chǎn)物表達的差異性，更使得許多中醫(yī)證型的調(diào)節(jié)機制和信號通路仍處于有待研究的階段。所以系統(tǒng)地整合從基因組學(xué)、轉(zhuǎn)錄組學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)等和代謝組學(xué)收集的信息，有利于探索中醫(yī)證型的發(fā)病機制，為未來的研究和臨床實踐尋找相關(guān)生物標(biāo)志物、基因和蛋白等[65]。

3.1 中醫(yī)證型中代謝組學(xué)與蛋白組學(xué)聯(lián)合

Jiang等[66]報道了糖尿病腎陰虛證代謝組學(xué)和蛋白質(zhì)組學(xué)的聯(lián)合分析，結(jié)果顯示腎陰虛證組中苯丙氨酸代謝、酪氨酸代謝、蛋白質(zhì)和兒茶酚胺生物合成這三個細胞過程差異最顯著，主要涉及的代謝途徑有?；撬岷团；悄懰岽x、甘氨酸代謝、絲氨酸和蘇氨酸代謝以及苯丙氨酸的代謝。張淼等[67]對艾滋病肺脾氣虛證進行代謝組學(xué)和蛋白質(zhì)組學(xué)研究分析發(fā)現(xiàn)患者血清中甘油三酯和載脂蛋白A-II(Apolipoprotein AII，APOA-II)升高，鋅-α-2-糖蛋白1(Zinc alpha-2 glycoprotein 1，AZGP1)和載脂蛋白B(Apolipoprotein B，APOB)降低，表明艾滋病肺脾氣虛證患者存在脂代謝異常。閆清華[68]聯(lián)合代謝組學(xué)和蛋白組學(xué)分析，發(fā)現(xiàn)四君子湯對干預(yù)脾虛證均涉及了脂肪酸代謝。

3.2 中醫(yī)證型中代謝組學(xué)與基因組學(xué)聯(lián)合

汪洋[69]從代謝組學(xué)和基因組學(xué)出發(fā)，研究類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎脾虛證發(fā)現(xiàn)其潛在生物標(biāo)記物有苯丙氨酸、亮氨酸、甘氨酸、丙酸，兩組學(xué)聯(lián)合分析表明在感染、炎癥、蛋白質(zhì)代謝等通路上存在關(guān)聯(lián)。汪梅姣[70]應(yīng)用代謝組學(xué)和基因組學(xué)技術(shù)探討痛風(fēng)脾虛證，結(jié)果發(fā)現(xiàn)其潛在生物標(biāo)記物有異亮氨酸、亮氨酸、甘氨酸，兩組學(xué)聯(lián)合分析發(fā)現(xiàn)該病證主要改變集中于脂質(zhì)代謝、藥物代謝、炎癥和免疫系統(tǒng)相關(guān)方面。

4 小結(jié)與展望

中醫(yī)施治注重整體觀，其多從宏觀角度出發(fā)去認識疾病，對微觀特征的細節(jié)描述客觀性欠佳。然西方醫(yī)學(xué)主要依賴于現(xiàn)代生物化學(xué)檢測技術(shù)，從微觀角度對疾病進行量化診斷。代謝組學(xué)在中醫(yī)證型中的研究，將兩者相結(jié)合，對不同中醫(yī)證型機體內(nèi)的代謝物進行分析，找到不同證型的差異標(biāo)志物，尋求共性，完善中醫(yī)辨證分型的微觀辨證，明確中醫(yī)證型的判別標(biāo)準。在特定條件下，探究中醫(yī)藥對不同證型治療效果的定性定量研究或聯(lián)系疾病的病因和發(fā)病機制等開展代謝網(wǎng)絡(luò)的探索。

未來研究應(yīng)注重對中醫(yī)證型開展深層次、多樣本、全方面的研究：一是以中醫(yī)基礎(chǔ)理論為中心思想，加強中醫(yī)證型的鑒定標(biāo)準，以確立中醫(yī)證型的中西結(jié)合的動態(tài)化、規(guī)范化的診斷標(biāo)準，明確疾病變化的機制；二是以現(xiàn)代醫(yī)學(xué)代謝組學(xué)技術(shù)為基礎(chǔ)，加強對大量樣本數(shù)據(jù)的挖掘，篩選不同證型的特異性代謝物，以提高中醫(yī)證型辨證分型的客觀化、科學(xué)化；三是代謝組學(xué)與其他組學(xué)技術(shù)和學(xué)科相結(jié)合來研究中醫(yī)證型，加強研究結(jié)果的說服力、可信度。四是在中醫(yī)證型動物模型的研究應(yīng)逐漸完善各中醫(yī)證型動物模型的最佳造模法，包括動物選擇、方法結(jié)合、藥物配比、時間選定等各方面，以及模型成功的判定標(biāo)準，建立起統(tǒng)一規(guī)范的中醫(yī)證型動物模型造模方法和標(biāo)準體系。以期推動將科研成果轉(zhuǎn)化為臨床指導(dǎo)，進而更好的應(yīng)用于疾病的辨證施治，為疾病診療提供新思路、新方法。