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    選用科研素材 培養(yǎng)科學(xué)思維
    ——以“植物激素調(diào)節(jié)的研究方法”教學(xué)設(shè)計(jì)為例?

    2021-07-01 03:26:50閆新霞
    生物學(xué)通報(bào) 2021年7期
    關(guān)鍵詞:頂芽生長素突變體

    閆新霞 戴 亞

    (中國人民大學(xué)附屬中學(xué) 北京 100080)

    科學(xué)思維是指尊重事實(shí)和證據(jù),崇尚嚴(yán)謹(jǐn)和務(wù)實(shí)的求知態(tài)度,運(yùn)用科學(xué)的思維方法認(rèn)識事物、解決實(shí)際問題的思維習(xí)慣和能力[1]。科學(xué)探究是指能發(fā)現(xiàn)現(xiàn)實(shí)世界中的生物學(xué)問題,針對特定的生物學(xué)現(xiàn)象,進(jìn)行觀察、提問、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)、方案實(shí)施,以及對結(jié)果的交流與討論的能力[1]??茖W(xué)思維和科學(xué)探究是高中生物學(xué)學(xué)科核心素養(yǎng)的重要組成,二者高度相關(guān)。

    經(jīng)過新課學(xué)習(xí),學(xué)生已形成了基本的學(xué)科思維,但在解決實(shí)際問題時,依然難以理清研究思路,原因是尚未形成良好的思維習(xí)慣。教師有必要在高三生物學(xué)復(fù)習(xí)中,為學(xué)生提供真實(shí)的研究素材,對生物學(xué)實(shí)驗(yàn)研究的思想方法進(jìn)行總結(jié)。學(xué)生在探究過程中發(fā)展科學(xué)思維,領(lǐng)會科學(xué)研究的基本思路。

    植物激素調(diào)節(jié)是植物生理學(xué)的重要研究領(lǐng)域,近年來積累了豐富的研究成果。本節(jié)內(nèi)容是單元復(fù)習(xí)結(jié)束前的一節(jié)思想方法總結(jié)課,筆者精選科研素材,與教材內(nèi)容有機(jī)整合,通過實(shí)驗(yàn)分析總結(jié)植物激素調(diào)節(jié)的研究方法。所涉及的知識內(nèi)容是生長素的極性運(yùn)輸和頂端優(yōu)勢原理,所選科研素材來自筆者之一在中國科學(xué)院遺傳與發(fā)育生物學(xué)研究所時的科研工作——對擬南芥插入突變體進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究、認(rèn)識bud1基因的功能。

    1 教學(xué)目標(biāo)

    1)設(shè)計(jì)和分析“頂芽產(chǎn)生生長素抑制側(cè)芽運(yùn)輸”的實(shí)驗(yàn),初步領(lǐng)會受控對比實(shí)驗(yàn)的設(shè)計(jì)思路和技術(shù)的應(yīng)用價值。

    2)探討插入突變對表型影響的2 種情況,體會分子生物學(xué)技術(shù)的應(yīng)用價值。

    3)設(shè)計(jì)和分析bud1突變體的系列實(shí)驗(yàn),研究bud1功能,發(fā)展假說-演繹的科學(xué)思維。

    2 科學(xué)思維框架

    結(jié)合課上內(nèi)容,以板書形式逐步呈現(xiàn)本節(jié)課的科學(xué)思維框架(圖1)。

    圖1 板書設(shè)計(jì)

    3 教學(xué)過程

    本節(jié)課的教學(xué)流程見圖2。

    圖2 教學(xué)流程

    3.1 實(shí)例1:菜豆實(shí)驗(yàn)分析 以學(xué)生熟悉的實(shí)驗(yàn),總結(jié)植物激素調(diào)節(jié)的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)思想和實(shí)驗(yàn)技術(shù)應(yīng)用。經(jīng)導(dǎo)入環(huán)節(jié)后,教師展示教材實(shí)例1——菜豆實(shí)驗(yàn)(圖3)。

    圖3 菜豆實(shí)驗(yàn)分析

    教師設(shè)問:頂芽的存在為什么會抑制側(cè)芽生長?根據(jù)已有知識,學(xué)生能很快答出“頂芽產(chǎn)生的生長素抑制側(cè)芽生長”。教師僅展示A、B 組實(shí)驗(yàn),提問這2 組實(shí)驗(yàn)?zāi)芊褡C明這一結(jié)論?該問題能引導(dǎo)學(xué)生將實(shí)驗(yàn)處理和結(jié)果的差異對應(yīng)分析:“A 有頂芽,側(cè)芽受抑制,B 去掉頂芽,側(cè)芽生長”,確定A、B 2 組對比僅能說明頂芽的存在抑制了側(cè)芽的生長,并不能確定是頂芽產(chǎn)生的生長素抑制了側(cè)芽生長。教師讓學(xué)生完善實(shí)驗(yàn)方案。學(xué)生經(jīng)思考后能答出:頂芽中含有很多物質(zhì),并不知道是頂芽產(chǎn)生的生長素影響到了側(cè)芽生長,需要補(bǔ)充一組實(shí)驗(yàn),在去頂切面上涂抹生長素,如果側(cè)芽生長也受抑制,則說明生長素替代頂芽抑制了側(cè)芽生長,可得出“頂芽能產(chǎn)生生長素抑制側(cè)芽生長”的結(jié)論。

    復(fù)習(xí)完教材實(shí)驗(yàn)后,教師結(jié)合實(shí)驗(yàn),帶學(xué)生總結(jié)植物激素調(diào)節(jié)的研究方法(圖1)。

    實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的思路:1)假說-演繹:在解決問題的過程中,先提出假說(頂芽產(chǎn)生生長素抑制側(cè)芽生長),再根據(jù)假說設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)并預(yù)測結(jié)果(A、B、C 3 組),如果實(shí)驗(yàn)結(jié)果與預(yù)期相符,則證明假說正確。2)受控對比實(shí)驗(yàn):設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)時,以常態(tài)為對照組,實(shí)驗(yàn)組外加一個因素(加法實(shí)驗(yàn)),或去掉一個因素(減法實(shí)驗(yàn)),對比各組結(jié)果,可知此因素與檢測指標(biāo)之間的關(guān)系。

    實(shí)驗(yàn)技術(shù)應(yīng)用:切除結(jié)構(gòu)(去除頂芽)或阻斷運(yùn)輸(例如,生長素發(fā)現(xiàn)過程中的詹森波森實(shí)驗(yàn))的操作可用作減法實(shí)驗(yàn),施加外源激素的操作可用作加法實(shí)驗(yàn)。與常態(tài)對照組相比可知頂芽及生長素的作用。

    3.2 實(shí)例2:bud1突變體實(shí)驗(yàn)研究 以挑戰(zhàn)性科研素材讓學(xué)生親歷科學(xué)探究、發(fā)展科學(xué)思維。教師以2 個問題過渡到第3 個環(huán)節(jié):頂端優(yōu)勢的產(chǎn)生機(jī)理是什么?即如何從細(xì)胞水平和分子水平解釋頂端優(yōu)勢產(chǎn)生的原因?

    3.2.1 介紹分子遺傳學(xué)的模式生物——擬南芥

    教師提供擬南芥的圖片及文字介紹(圖4)[2],讓學(xué)生閱讀并回答:為什么擬南芥被稱為植物界中的果蠅?學(xué)生能分析得出擬南芥和果蠅類似的特點(diǎn):“易于栽培、實(shí)驗(yàn)周期短、易于觀察、易于做統(tǒng)計(jì)學(xué)分析”等,也能關(guān)注到“大多數(shù)基因與其他植物具有很高的同源性”,這使得研究成果具有代表性,但不太理解“基因組測序結(jié)果”意味著什么。教師再進(jìn)一步點(diǎn)明,基因組測序工作使得人們了解了基因的數(shù)目、基因在染色體上的位置、基因的堿基對排序,但不知道基因的功能。利用T-DNA 插入基因內(nèi)部等方法獲得插入突變體、再比較突變體與野生型的差異,是研究被插入基因功能的重要方法。

    圖4 擬南芥簡介

    3.2.2bud1突變體實(shí)驗(yàn)研究 在充分了解擬南芥后,教師介紹本節(jié)課的擴(kuò)展素材:來自本校戴亞老師及其實(shí)驗(yàn)室在十幾年前的科研論文——對擬南芥矮小叢生突變體的研究。

    對于bud1突變體的研究包括2 個方面:突變體分子鑒定和BUD1 功能分析。分子水平和細(xì)胞水平的研究微觀且抽象難懂,在呈現(xiàn)過程中,教師以圖片展示研究重點(diǎn),配以必要的講解和啟發(fā)性的提問,讓學(xué)生理解基本的研究思路。

    1)突變體分子鑒定。突變體出現(xiàn)矮小叢生的性狀,是由什么原因引起的?首先是突變體分子鑒定。本項(xiàng)研究中,使用的T-DNA 上帶有增強(qiáng)轉(zhuǎn)錄的序列,該T-DNA 若插入到編碼區(qū),會引起被插入基因失活,突變體表現(xiàn)出基因功能缺失的表型;若插入到了非編碼區(qū),則會使基因的表達(dá)量增加,突變體表現(xiàn)出基因功能增強(qiáng)的表型。即在研究被插入基因的功能時,對過表達(dá)突變體和失活突變體進(jìn)行研究得出的結(jié)論是相反的,因此,首先需要通過確定基因插入的位置鑒定突變體類型。突變體鑒定用到的分子生物學(xué)技術(shù)包括基因表達(dá)量測定和基因測序[3-4]。本項(xiàng)研究中,bud1突變體發(fā)生的是過表達(dá)突變。

    如何讓學(xué)生理解突變體類型的鑒定方法?筆者以圖片引導(dǎo)學(xué)生分析,T-DNA 隨機(jī)插入到基因時,有可能是哪些位置?對表型有什么影響?學(xué)生思考、討論后認(rèn)識到,如果T-DNA 插入到編碼區(qū),得到失活突變體,基因的功能喪失;如果插入到啟動子附近,得到過表達(dá)突變體,基因的功能增強(qiáng)(圖5)。

    圖5 突變體的分子鑒定

    如何確定bud1突變體是失活突變還是過表達(dá)突變?此問題涉及分子水平變化的檢測方法,有一定難度。學(xué)生的第一反應(yīng)是比較突變體和野生型的表型差異,但這無法反映二者的分子水平差異。經(jīng)思考,學(xué)生能分析得出,通過檢測突變體細(xì)胞中bud1基因mRNA 的量可了解基因表達(dá)情況,如此,技術(shù)手段與要解決的問題相匹配了。教師再呈現(xiàn)實(shí)際的RNA 量檢測結(jié)果[3],突變體的RNA 量顯著高于野生型,說明突變體發(fā)生了過表達(dá)突變。測序結(jié)果也支持這一認(rèn)識。在該環(huán)節(jié)的教學(xué)組織中,重在技術(shù)如何解決問題,弱化技術(shù)操作細(xì)節(jié)。讓學(xué)生體會到技術(shù)為解決問題服務(wù)。

    2)bud1基因功能研究。從實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)分析,bud1過表達(dá)突變體相當(dāng)于加法實(shí)驗(yàn),通過對比野生型和bud1突變體的差異,可認(rèn)識到bud1基因表達(dá)產(chǎn)物的功能。教師引導(dǎo)學(xué)生觀察、思考、設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)、分析結(jié)果,層層遞進(jìn)地分析每一個實(shí)驗(yàn)。

    首先是形態(tài)差異分析。以圖片呈現(xiàn)過表達(dá)突變體的表型:矮小、分枝多,頂端優(yōu)勢明顯喪失[3-4],說明BUD1 能抑制頂端優(yōu)勢的出現(xiàn),這是結(jié)論1,學(xué)生可較輕松地得出此結(jié)論(圖6)。

    圖6 比較突變體與野生型的表型差異

    該抑制作用是如何實(shí)現(xiàn)的?教師啟發(fā)學(xué)生思考。學(xué)生已知頂端優(yōu)勢由生長素的極性運(yùn)輸引起,能提出“BUD1 抑制了生長素的極性運(yùn)輸”這一假設(shè)。教師展示擬南芥下胚軸的圖,讓學(xué)生考慮用什么方法可檢測生長素的極性運(yùn)輸。經(jīng)討論,學(xué)生能提出“測定突變體和野生型的下胚軸下部生長素量差異”的思路,有的學(xué)生還能想到使用同位素標(biāo)記法。此時,教師再展示科研人員的方案:在下胚軸頂端施加放射性的IAA,4 h 后檢測基部的放射性[5]。數(shù)據(jù)顯示,突變體的相對運(yùn)輸速率顯著低于野生型[5],說明BUD1 能抑制生長素的極性運(yùn)輸,實(shí)驗(yàn)證據(jù)為假設(shè)提供了支持,順利得出結(jié)論2(圖7)。

    圖7 測定突變體的極性運(yùn)輸能力

    教師再次設(shè)問:BUD1 怎樣抑制生長素的極性運(yùn)輸?這需要補(bǔ)充相關(guān)知識[6],教師以圖片(圖8)展示IAA 極性運(yùn)輸機(jī)理:IAA 輸入載體和輸出載體PIN 在細(xì)胞膜兩端的分布,PIN 的合成、囊泡運(yùn)輸和嵌入膜上的過程。提問:你可提出哪些假設(shè)?

    圖8 生長素的極性運(yùn)輸需要載體

    學(xué)生思考后回答,可能是生長素輸出載體的合成受阻、運(yùn)輸受阻或囊泡嵌入細(xì)胞膜受阻。也有學(xué)生補(bǔ)充到,可能是輸入載體的數(shù)量減少。教師充分肯定學(xué)生的想法,讓學(xué)生認(rèn)識到,只要合乎邏輯,對于待解決問題可提出多個合理假設(shè),大膽假設(shè)后才可能設(shè)計(jì)有針對性的實(shí)驗(yàn),無論證實(shí)還是證偽,有了讓人信服的實(shí)驗(yàn)證據(jù),才能形成新的認(rèn)識。

    之后,教師通過圖片展示實(shí)驗(yàn)結(jié)果。研究人員用熒光染料對細(xì)胞內(nèi)的輸出載體PIN 進(jìn)行染色,用熒光顯微鏡等時間間隔觀察囊泡在細(xì)胞內(nèi)的位置[5]。為了很好地呈現(xiàn)結(jié)果,教師在圖片上圈出了目標(biāo)囊泡、以線條標(biāo)出囊泡起始位置,鮮明地呈現(xiàn)野生型和突變體的結(jié)果對比(圖9)。如此,學(xué)生能較輕松地得出結(jié)論3:BUD1 能降低細(xì)胞內(nèi)PIN 囊泡運(yùn)輸?shù)乃俣取?/p>

    圖9 測定突變體的囊泡運(yùn)輸速度

    最后,教師引導(dǎo)學(xué)生用規(guī)范的語言對bud1的功能進(jìn)行科學(xué)表述。BUD1 通過降低細(xì)胞內(nèi)PIN載體囊泡的運(yùn)輸速率抑制生長素的極性運(yùn)輸、進(jìn)而抑制頂端優(yōu)勢的出現(xiàn)。

    這樣,通過由宏觀到微觀、由表及里的深入分析,揭示了bud1和頂端優(yōu)勢的關(guān)系,教師再板書總結(jié)(圖1),轉(zhuǎn)基因技術(shù)的應(yīng)用使得人們能對生命現(xiàn)象進(jìn)行分子水平的揭秘,但從實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)分析,其自變量控制的加、減法思路是不變的,即:T-DNA 插入突變通過基因的過表達(dá)創(chuàng)設(shè)加法實(shí)驗(yàn),通過插入失活創(chuàng)設(shè)減法實(shí)驗(yàn),比較實(shí)驗(yàn)組和常態(tài)對照組的差異可明確這一基因的功能。同位素示蹤技術(shù)和熒光技術(shù)呈現(xiàn)了物質(zhì)運(yùn)輸?shù)倪^程,這些技術(shù)的應(yīng)用與傳統(tǒng)實(shí)驗(yàn)技術(shù)都實(shí)現(xiàn)了同樣的效果,即將不可見的過程轉(zhuǎn)化為可觀察檢測的現(xiàn)象。

    最后的總結(jié)讓學(xué)生對植物激素調(diào)節(jié)的研究方法有全面認(rèn)識,通過實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì),找出解決問題的思路,技術(shù)的應(yīng)用讓想法轉(zhuǎn)變?yōu)樾袆?,為大膽假設(shè)提供各種實(shí)證,科學(xué)在思考和實(shí)踐中不斷創(chuàng)新。

    4 總結(jié)與反思

    1)以教材實(shí)驗(yàn)和科研文獻(xiàn)為素材,向?qū)W生提出與頂端優(yōu)勢相關(guān)的真實(shí)生物學(xué)問題,用解決問題的研究過程串起整節(jié)課的主線。引導(dǎo)學(xué)生作出假設(shè)、設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)、分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果、得出實(shí)驗(yàn)結(jié)論,體現(xiàn)“教學(xué)過程重實(shí)踐”的課程理念,落實(shí)“科學(xué)探究”的核心素養(yǎng)。

    2)以邏輯清晰的板書對植物激素調(diào)節(jié)的研究方法進(jìn)行總結(jié)凝練,讓學(xué)生領(lǐng)會假說-演繹、受控對比實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)思想,并認(rèn)識到傳統(tǒng)和現(xiàn)代生物技術(shù)都是在實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)思想的統(tǒng)領(lǐng)下得到應(yīng)用,將看不見的過程轉(zhuǎn)化為可觀察檢測的現(xiàn)象,為解決問題提供實(shí)驗(yàn)證據(jù)。高度的概括讓學(xué)生獲得思維水平的提升,落實(shí)“科學(xué)思維”的核心素養(yǎng)。

    3)以層層遞進(jìn)、精心設(shè)計(jì)的問題串調(diào)動學(xué)生思維,為學(xué)生提供充足的思考時間和展示機(jī)會,在分析解決問題的過程中,發(fā)展科學(xué)思維。

    4)科研素材選自本校教師的科研實(shí)踐,拉近了學(xué)生與科學(xué)研究的距離,培養(yǎng)學(xué)生對科研的興趣。

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