乙肝肝硬化患者口腔內(nèi)唾液菌群菌落數(shù)與胃黏膜病變的關(guān)系*

劉紅萍，吳 江，呂飛飛，王 芬，趙明才，劉家瑞

1.遂寧市中心醫(yī)院檢驗(yàn)科，四川遂寧 629000;2.浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院檢驗(yàn)科，浙江杭州 310000

作為常見的慢性疾病，乙肝肝硬化患者常出現(xiàn)腹脹、腹痛等多種消化道癥狀，多數(shù)患者伴有較高的胃黏膜病變風(fēng)險(xiǎn)[1]。研究指出，乙肝肝硬化患者病情嚴(yán)重程度與胃黏膜病變程度呈正相關(guān)[2]，故早期準(zhǔn)確預(yù)測乙肝肝硬化患者胃黏膜病變風(fēng)險(xiǎn)并及時(shí)干預(yù)尤為重要。細(xì)菌菌群不僅參與了機(jī)體免疫系統(tǒng)的成熟過程，還可調(diào)節(jié)胃腸道神經(jīng)功能與內(nèi)分泌功能[3]。當(dāng)機(jī)體受到外界環(huán)境刺激時(shí)，腸道菌群失衡，合成大量的脂多糖及相關(guān)代謝產(chǎn)物，引起神經(jīng)、循環(huán)、內(nèi)分泌系統(tǒng)的多種疾病[4]。肝臟是與腸道密切相關(guān)的器官，較其他器官更易接觸多種細(xì)菌及代謝產(chǎn)物，腸道菌群失調(diào)引起的肝臟疾病發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)更高[5]。口腔是消化道的開端，是腸道菌群的儲(chǔ)存庫，口腔內(nèi)的菌群能夠異位定植到腸道內(nèi)，且其異位定植被認(rèn)為與肝臟疾病的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)[6]。目前，關(guān)于口腔內(nèi)唾液菌群與乙肝肝硬化胃黏膜病變的關(guān)系及相關(guān)機(jī)制研究較少，本研究觀察了乙肝肝硬化患者口腔內(nèi)唾液菌群菌落數(shù)及胃黏膜病變的發(fā)生情況，以期為臨床診斷與治療提供參考。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2015年4月至2020年4月于遂寧市中心醫(yī)院接受治療的200例乙肝肝硬化患者作為研究對象。納入標(biāo)準(zhǔn)：肝硬化符合《現(xiàn)代肝硬化診斷治療學(xué)》[7]中的相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)；乙肝符合《慢性乙型肝炎防治指南(2010年版)》[8]中的相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)；接受肝穿刺檢查。排除標(biāo)準(zhǔn)：合并重要器官功能不全；合并精神異常，無法配合研究；服用可能影響胃黏膜病變評估結(jié)果的藥物；合并惡性腫瘤；在乙肝肝硬化發(fā)生前已經(jīng)存在胃黏膜病變。本研究經(jīng)遂寧市中心醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)同意后實(shí)施，患者及家屬知曉本研究內(nèi)容，并簽署知情同意書。

1.2方法 (1)口腔內(nèi)唾液菌群菌落數(shù)檢測：于入院第2天清晨刷牙前留取唾液于無菌Bijou管中，并在1 h內(nèi)送檢，參照文獻(xiàn)[9]，經(jīng)細(xì)菌培養(yǎng)檢測口腔內(nèi)唾液菌群菌落數(shù)，包括厚壁菌門(乳酸桿菌屬、梭菌屬)、擬桿菌門(普氏菌屬、擬桿菌屬)及放線菌門(雙歧桿菌屬)。(2)胃黏膜病變評估方法：經(jīng)胃鏡下取胃黏膜組織，使用10%甲醛固定后包埋，制成切片，厚度為4 μm，經(jīng)蘇木精-伊紅染色后進(jìn)行評估。所有操作均由同一名醫(yī)生實(shí)施，評估標(biāo)準(zhǔn)參照文獻(xiàn)[10]。(3)基線資料收集方法：使用遂寧市中心醫(yī)院自制基線資料調(diào)查問卷(Cronbach′s α系數(shù)為0.86，重測效度為0.88)收集患者的基線資料，包括年齡、性別、吸煙史(吸煙指數(shù)≥400，吸煙指數(shù)=每日吸煙支數(shù)×吸煙年數(shù))及肝硬化病程。(4)心理應(yīng)激障礙評估方法：分別使用焦慮自評量表(SAS)及抑郁自評量表(SDS)評估乙肝肝硬化患者心理應(yīng)激障礙情況，將SAS評分>50分和(或)SDS評分>53分判斷為有心理應(yīng)激障礙[11]。

2 結(jié) 果

2.1研究對象胃黏膜病變情況 200例乙肝肝硬化患者中，發(fā)生胃黏膜病變的有172例，發(fā)生率為86.00%(172/200)，其中慢性淺表性胃炎59例，占34.30%(59/172)；慢性萎縮性胃炎51例，占29.65%(51/172)；腸上皮化生26例，占15.12%(26/172)；腺上皮異型增生23例，占13.37%(23/172)；胃潰瘍10例，占5.81%(10/172)；胃癌3例，占1.74%(3/172)。

2.2乙肝肝硬化患者發(fā)生胃黏膜病變的單因素分析結(jié)果 單因素分析結(jié)果顯示，年齡、性別、病程與乙肝肝硬化患者發(fā)生胃黏膜病變無關(guān)(P>0.05)；吸煙史、心理應(yīng)激障礙、口腔內(nèi)唾液菌群(乳酸桿菌屬、梭菌屬、普氏菌屬、擬桿菌屬、雙歧桿菌屬)菌落數(shù)是乙肝肝硬化患者發(fā)生胃黏膜病變的影響因素(P<0.05)。見表1。

表1 乙肝肝硬化患者發(fā)生胃黏膜病變的單因素分析結(jié)果

續(xù)表1 乙肝肝硬化患者發(fā)生胃黏膜病變的單因素分析結(jié)果

2.3乙肝肝硬化患者發(fā)生胃黏膜病變的多因素Logistic回歸分析結(jié)果 將單因素分析中的影響因素[吸煙史、心理應(yīng)激障礙、口腔內(nèi)唾液菌群(乳酸桿菌屬、梭菌屬、普氏菌屬、擬桿菌屬、雙歧桿菌屬)菌落數(shù)]納入多因素Logistic回歸分析模型，結(jié)果顯示，口腔內(nèi)唾液菌群菌落數(shù)異常、心理應(yīng)激障礙、吸煙史是乙肝肝硬化患者發(fā)生胃黏膜病變的獨(dú)立危險(xiǎn)因素(P<0.05)。見表2。

表2 乙肝肝硬化患者發(fā)生胃黏膜病變的多因素Logistic回歸分析結(jié)果

2.4口腔內(nèi)唾液菌群菌落數(shù)對乙肝肝硬化患者發(fā)生胃黏膜病變的預(yù)測效能 將乙肝肝硬化患者口腔內(nèi)唾液菌群菌落數(shù)分別作為檢驗(yàn)變量，胃黏膜病變情況作為狀態(tài)變量(1=有病變，0=無病變)，繪制ROC曲線，結(jié)果顯示，口腔內(nèi)唾液菌群菌落數(shù)預(yù)測乙肝肝硬化患者發(fā)生胃黏膜病變的曲線下面積(AUC)均>0.800，預(yù)測價(jià)值較高，其中以擬桿菌屬的預(yù)測效能最高，AUC為0.864。見表3，圖1、2。

表3 口腔內(nèi)唾液菌群菌落數(shù)對乙肝肝硬化患者發(fā)生胃黏膜病變的預(yù)測效能

圖1 厚壁菌門菌落數(shù)預(yù)測乙肝肝硬化患者發(fā)生胃黏膜病變的ROC曲線

圖2 擬桿菌門、放線菌門菌落數(shù)預(yù)測乙肝肝硬化患者發(fā)生胃黏膜病變的ROC曲線

3 討 論

乙肝肝硬化患者均伴有門靜脈高壓，而門靜脈高壓是胃黏膜病變發(fā)生的相關(guān)因素[12]。相關(guān)報(bào)道顯示，嚴(yán)重的肝纖維化可加重肝臟組織受損程度，而肝臟組織受損程度與胃黏膜病變程度呈正相關(guān)[13]。早期評估患者胃黏膜病變情況，指導(dǎo)臨床早期干預(yù)，是改善乙肝肝硬化患者預(yù)后的關(guān)鍵。

乙肝病毒可導(dǎo)致胃部內(nèi)環(huán)境紊亂，引發(fā)胃黏膜屏障功能異常，增加胃黏膜病變風(fēng)險(xiǎn)。本研究200例乙肝肝硬化患者胃黏膜病變的發(fā)生率為86.00%，表明乙肝肝硬化患者胃黏膜病變風(fēng)險(xiǎn)高。究其原因，乙肝病毒能夠穿過胃黏膜屏障，導(dǎo)致胃黏液分泌障礙，黏液層動(dòng)態(tài)失衡，繼而加重胃黏膜損傷[14]。有研究表明，不良的生活習(xí)慣、心理應(yīng)激障礙等均可增加胃黏膜病變風(fēng)險(xiǎn)[15]。本研究發(fā)現(xiàn)，吸煙史、心理應(yīng)激障礙是乙肝肝硬化患者發(fā)生胃黏膜病變的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，其可能參與了乙肝肝硬化胃黏膜病變的發(fā)生與發(fā)展過程。分析其原因如下：煙草中含有大量尼古丁，尼古丁可導(dǎo)致幽門括約肌功能紊亂，致使膽汁反流，進(jìn)而引起或加重胃黏膜損傷[16]；心理應(yīng)激障礙可導(dǎo)致中樞神經(jīng)系統(tǒng)異常，進(jìn)而導(dǎo)致神經(jīng)功能紊亂，致使胃平滑肌緊張壓迫血管，增加胃黏膜缺血風(fēng)險(xiǎn)，誘發(fā)胃黏膜損傷[17]。但需要注意的是，吸煙史、心理應(yīng)激障礙等情況在評估期間有較強(qiáng)的主觀性，評估結(jié)果的準(zhǔn)確性易受外界多種因素的影響，單獨(dú)依靠其來評估乙肝肝硬化患者的胃黏膜病變風(fēng)險(xiǎn)具有一定的局限性。

腸道內(nèi)菌群與多種消化道疾病的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)。有研究指出，口腔內(nèi)菌群可侵入腸道，且約有54%的肝硬化患者腸道內(nèi)菌群來源于口腔，故推測口腔內(nèi)菌群異?？蓪?dǎo)致腸道內(nèi)菌群紊亂，進(jìn)而引發(fā)消化道疾病[3]?？谇粌?nèi)唾液菌群菌落數(shù)不易受其他因素影響，檢測結(jié)果更為準(zhǔn)確，故本研究將其作為主要的觀察指標(biāo)進(jìn)行分析。乳酸桿菌屬需要大量氧分子進(jìn)行代謝活動(dòng)，且在代謝過程中能分泌過氧化氫、超氧化物等對機(jī)體組織具有損傷作用的氧自由基，進(jìn)而增加胃黏膜病變風(fēng)險(xiǎn)。梭菌屬中所含丁酸激酶能夠分泌大量丁酸，而研究顯示，丁酸可導(dǎo)致其他菌群紊亂，影響消化道內(nèi)受損組織的自我修復(fù)能力[18]。此外，乳酸桿菌屬、梭菌屬均可影響脂質(zhì)代謝，增加饑餓感，使機(jī)體攝入大量食物，增加脂質(zhì)儲(chǔ)存量，加重肝臟負(fù)擔(dān)，進(jìn)一步增加胃黏膜病變風(fēng)險(xiǎn)[19]。作為口腔中的益生菌群之一，普氏菌屬的減少可導(dǎo)致其他菌群的過度生長，引發(fā)菌群紊亂，增加消化道病變風(fēng)險(xiǎn)[20]。大部分的擬桿菌屬中均含有膽汁酸鹽水解酶，這種酶可與膽固醇、膽鹽等多種物質(zhì)直接結(jié)合，進(jìn)而達(dá)到降低機(jī)體內(nèi)膽固醇水平的作用[21]，故擬桿菌屬的減少可增加乙肝肝硬化患者高血脂的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)，加重肝臟組織損傷，進(jìn)而增加胃黏膜病變風(fēng)險(xiǎn)。雙歧桿菌屬作為一種益生菌，對核因子-κB通路具有調(diào)節(jié)作用，可減輕炎性反應(yīng)，從而減輕胃黏膜受損程度[22]。此外，雙歧桿菌屬還能夠降低腫瘤壞死因子-α及脂多糖水平，進(jìn)而減輕胃腸道內(nèi)的炎性反應(yīng)，達(dá)到減輕胃腸道負(fù)擔(dān)的作用[23]。為了進(jìn)一步明確口腔內(nèi)唾液菌群菌落數(shù)與乙肝肝硬化患者發(fā)生胃黏膜病變的關(guān)系，本研究通過ROC曲線分析發(fā)現(xiàn)，口腔內(nèi)唾液菌群菌落數(shù)預(yù)測乙肝肝硬化患者發(fā)生胃黏膜病變的AUC均>0.800，預(yù)測價(jià)值較高，且以擬桿菌屬預(yù)測效能最高。上述結(jié)果證實(shí)，口腔內(nèi)唾液菌群菌落數(shù)與乙肝肝硬化患者發(fā)生胃黏膜病變有關(guān)，可作為乙肝肝硬化患者胃黏膜病變風(fēng)險(xiǎn)的預(yù)測指標(biāo)。

綜上所述，乙肝肝硬化患者發(fā)生胃黏膜病變可能與口腔內(nèi)唾液菌群菌落數(shù)異常有關(guān)，臨床可通過檢測患者口腔內(nèi)唾液菌群菌落數(shù)來輔助評價(jià)其胃黏膜病變情況，以指導(dǎo)早期防治，從而降低乙肝肝硬化患者胃黏膜病變的發(fā)生率。