• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    酵母過氧化物酶體的形成機(jī)制

    2021-06-30 03:18:56周靖垚張建國
    微生物學(xué)雜志 2021年1期
    關(guān)鍵詞:體膜過氧化物酵母

    周靖垚, 張建國

    (上海理工大學(xué)醫(yī)療器械與食品學(xué)院 食品科學(xué)與工程研究所,上海 200093)

    真核細(xì)胞的單膜細(xì)胞器過氧化物酶體的形成和吞噬是當(dāng)前的研究熱點(diǎn)[1-2]。與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體、溶酶體等單膜細(xì)胞器單獨(dú)能合成蛋白質(zhì)不同,過氧化物酶體則需從細(xì)胞質(zhì)中獲取基質(zhì)蛋白和膜蛋白。過氧化物酶體的最大直徑為1 μm[3],不僅在多種代謝途徑中發(fā)揮重要作用,而且其功能和形態(tài)會(huì)根據(jù)外部環(huán)境和自身需求的改變而變化[4-6]。過氧化物酶體最具代表性的功能為脂肪酸β-氧化和過氧化氫的酶解[5]。過氧化物酶體的必需基因pex編碼的過氧化物酶蛋白(Peroxins,不包括轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子)與過氧化物酶體的生成密切相關(guān)。由于人細(xì)胞中過氧化物酶體的pex基因會(huì)發(fā)生突變從而引起多種疾病,如過氧化物酶體生成障礙(PBDs)[7-9]。酵母具有過氧化物酶體含量高、穩(wěn)定性好、成本低等優(yōu)點(diǎn)是研究過氧化物酶體的良好模型。因此,以酵母為模型進(jìn)行過氧化物酶體突變體研究對多種與過氧化物酶體相關(guān)疾病的預(yù)防和治療有重要意義。目前已鑒定的36個(gè)pex基因(表1)的功能大致分為三類:基質(zhì)蛋白導(dǎo)入、過氧化物酶體生長、調(diào)節(jié)過氧化物酶體的大小或豐度[3-4,7]。酵母的大多數(shù)過氧化物酶體突變體,如pex1、pex2、pex6、pex8、pex13、pex14等,仍含有過氧化物酶體殘留物[5,8,10]。這是由于部分過氧化物酶體膜(含有膜蛋白PMP)被運(yùn)輸?shù)竭^氧化物酶體中,形成殘?bào)w。而pex3突變體和pex19突變體沒有過氧化物酶體膜殘留[11],并且回補(bǔ)pex3和pex19后細(xì)胞可重新生成功能化的過氧化物酶體[12-13]。這說明細(xì)胞不僅通過生長和分裂的方式增加過氧化物酶體數(shù)量,還可通過自身從頭合成的方式形成新的過氧化物酶體。因此,pex3和pex19被確定為過氧化物酶體膜早期合成的關(guān)鍵基因?;谶^氧化物酶體的形成取得了大量研究成果,本文總結(jié)了過氧化物酶體的起源和細(xì)胞生成過氧化物酶體的研究進(jìn)展,初步闡述過氧化物酶體的形成機(jī)制,為預(yù)防和治療與過氧化物酶體相關(guān)的疾病提供參考。

    表1 pex基因在過氧化物酶體的作用

    1 過氧化物酶體起源

    傳統(tǒng)意義上認(rèn)為過氧化物酶體起源于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)(Endoplasmic reticulum,ER)和線粒體(Mitochondrion),并逐步發(fā)展為成熟的過氧化物酶體[14]。過氧化物酶體的形成過程先由內(nèi)質(zhì)網(wǎng)芽生,再以小泡形式運(yùn)送至高爾基復(fù)合體進(jìn)行加工和分選,最后在高爾基的反面(成熟面)以分泌泡的形式釋放而成。Agrawal等[15]和Novikoff等[16]在過氧化物酶體附著于豚鼠腎小管細(xì)胞中的某個(gè)特定區(qū)域發(fā)現(xiàn)了光滑的ER莖狀結(jié)構(gòu),其實(shí)是囊泡狀的過氧化物酶體與ER相連,證實(shí)過氧化物酶體生成與ER有關(guān)。在酵母和哺乳動(dòng)物細(xì)胞中有多種過氧化物酶體膜蛋白(PMP)通過ER運(yùn)至過氧化物酶體[17]。大多數(shù)過氧化物酶體膜脂質(zhì)在ER中合成,由ER轉(zhuǎn)運(yùn)或者通過泡囊運(yùn)輸至過氧化物酶體[18-19]。David等[20]提出過氧化物酶體膜通過ER上含PMP的囊泡出芽,并且ER形狀也影響過氧化物酶體繁殖,pex30位于與過氧化物酶體緊密關(guān)聯(lián)的ER亞結(jié)構(gòu)中。 在ER亞結(jié)構(gòu)域中建立與過氧化物酶體的接觸位點(diǎn),過氧化物酶體增殖依賴于管狀的完整性,因此ER亞結(jié)構(gòu)的形狀也會(huì)影響過氧化物酶體繁殖。ER亞結(jié)構(gòu)會(huì)逐步形成新的過氧化物酶體。畢赤酵母在只有少量葡萄糖或甘油的培養(yǎng)基中,只會(huì)產(chǎn)生幾個(gè)體積很小的過氧化物酶體。當(dāng)碳源轉(zhuǎn)為甲基營養(yǎng)物時(shí),過氧化物酶體會(huì)進(jìn)一步組裝、分裂并且成為占有80%細(xì)胞體積的細(xì)胞器。過氧化物酶體作為受體接受過氧化物酶體分裂和組裝過程的PMP和內(nèi)容物,使過氧化物酶體成熟并能代謝甲基營養(yǎng)物(圖1)。由圖1可見,前過氧化物酶體囊泡從ER出芽,協(xié)同線粒體相關(guān)蛋白(DRP)和線粒體動(dòng)力樣蛋白(DLP)等相關(guān)因子,它們提供動(dòng)力等作用,在pex3、pex19共同作用下形成過氧化物酶體。畢赤酵母在利用甲醇發(fā)酵過程中,與基質(zhì)蛋白導(dǎo)入作用相關(guān)的基因進(jìn)行作用,過氧化物酶體變大,并進(jìn)行甲醇代謝。

    圖1 畢赤酵母過氧化物酶體的成熟過程Fig.1 Maturation of peroxisome in Pichia pastoris

    2 過氧化物酶體生成方式

    過氧化物酶體的生成方式有以下兩種模型。第一種模型為過氧化物酶體通過ER生成,并發(fā)展為成熟的過氧化物酶體[21],稱為從頭合成方式;第二種模型為細(xì)胞內(nèi)現(xiàn)存的過氧化物酶體吸收由ER提供的脂質(zhì)等物質(zhì)進(jìn)行生長再進(jìn)行分裂[22],稱為分裂方式。

    2.1 從頭合成方式

    基于解脂耶氏酵母(Yarrowialipolytica),研究者首次提出通過ER從頭合成過氧化物酶體的方式是由囊泡運(yùn)輸系統(tǒng)完成的[21]。當(dāng)過氧化物酶體以從頭合成的方式從ER出芽時(shí),是以前過氧化物酶體囊泡(Pre-peroxisomal vesicles,ppVs)的狀態(tài)出現(xiàn)的,新產(chǎn)生的ppVs之間互相發(fā)生融合,融合后產(chǎn)生新的過氧化物酶體囊泡,融合前的囊泡和融合后的囊泡含有不同的蛋白亞群,這個(gè)結(jié)果也在釀酒酵母(Saccharomycescerevisiae)中得到了驗(yàn)證[23]。這兩類囊泡揭示了蛋白質(zhì)分選機(jī)制的存在。分選機(jī)制通過控制基質(zhì)蛋白進(jìn)入過氧化物酶體,直至出芽完成。ER的蛋白質(zhì)組成決定其形成前過氧化物酶體囊泡的蛋白質(zhì)成分。ER上的蛋白需要蛋白復(fù)合體的幫助先到達(dá)ppVs再由ppVs向過氧化物酶體進(jìn)行輸送,蛋白復(fù)合體由識別ER蛋白質(zhì)組分(例如PEX1、PEX5、PEX7)和RING(鋅指型結(jié)構(gòu)域,例如PEX2、PEX10、PEX12組成的泛素化復(fù)合物)構(gòu)成。新產(chǎn)生囊泡融合后形成具備運(yùn)輸能力的過氧化物酶體。融合過程中,前過氧化物酶體囊泡不能與成熟過氧化物酶體融合,這保證了成熟過氧化物酶體中有正確的蛋白質(zhì)組分。過氧化物酶體中AAA型ATPase PEX1/PEX6復(fù)合物負(fù)責(zé)基質(zhì)蛋白進(jìn)入前過氧化物酶體囊泡[24]。因?yàn)檫@種多途徑運(yùn)輸機(jī)制也參與其他功能性復(fù)合物的組裝[25-26],途徑多變、功能復(fù)雜,還可能是一種廣泛性的機(jī)制,PEX蛋白是如何影響過氧化物酶體生物發(fā)生途徑還需要進(jìn)行繼續(xù)研究。可以依靠檢測蛋白質(zhì)相互作用的方法來進(jìn)行研究,例如采用可視化多色BiFC方法來比較蛋白質(zhì)之間的相互作用網(wǎng)絡(luò),可視化的方法能夠反映在正常生理環(huán)境下生物發(fā)生途徑中蛋白質(zhì)之間的相互作用并且利用亞細(xì)胞進(jìn)行定位。

    缺乏pex3或pex19的馬兜鈴歐格氏霉(Ogataeapolymorpha)的ppVs與ER(pn-ER)之間存在網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)[27],這些ppVs在具有pex3或pex19的細(xì)胞中未被檢測到,表明缺少pex3和ATG1(自噬相關(guān)1)或pex19和ATG1的細(xì)胞也存在ppVs。當(dāng)缺乏pex3的細(xì)胞重新引入pex3并表達(dá)時(shí),胞內(nèi)的ppVs可以成熟為功能性過氧化物酶體[28-29]。然而缺乏ppVs的細(xì)胞是如何形成新的過氧化物酶體,以及細(xì)胞由于缺乏ppVs時(shí)如何強(qiáng)制性地將不對稱過氧化物酶體分到子細(xì)胞中從而形成新的過氧化物酶體等現(xiàn)象還無法說明,需要繼續(xù)研究?;谝陨闲畔ⅲ^氧化物酶體通過內(nèi)質(zhì)網(wǎng)從頭合成過程分為五步:①將PMP導(dǎo)入ER;②PMP到特定的pn-ER域內(nèi)分選;③包裝PMP和發(fā)芽到囊泡載體中;④攜帶了1組特定的互補(bǔ)PMP囊泡載體進(jìn)行融合;⑤組裝重要的復(fù)合體,然后導(dǎo)入基質(zhì)蛋白(圖2)。

    2.2 分裂方式

    通過對酵母過氧化物酶體突變體研究證實(shí),過氧化物酶體也能通過分裂的方式增殖[23,26-29]。過氧化物酶體通過基質(zhì)蛋白和膜組分的加入而體積變大,當(dāng)達(dá)到一定體積時(shí),過氧化物酶體進(jìn)行不對稱分裂,形成兩個(gè)新的過氧化物酶體[21,30-32]。其中較小的過氧化物酶體繼續(xù)生長,導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)異質(zhì)化的過氧化物酶體群[19]。過氧化物酶體生長通過裂變協(xié)調(diào),再通過囊泡將內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移到成熟的過氧化物酶體中。從頭合成過程中的囊泡不能與成熟的過氧化物酶體融合,所以分裂方式所使用的囊泡與從頭合成的囊泡截然不同。

    過氧化物酶體的分裂增殖分為五步[23]:①過氧化物酶體結(jié)構(gòu)發(fā)生變化,膜加速生長,體積變大;②過氧化物酶體膜的一側(cè)突出;③過氧化物酶體突出膜伸長;④基質(zhì)蛋白進(jìn)入伸長的膜;⑤原有的過氧化物酶體通過裂解方式形成單個(gè)過氧化物酶體(圖2)。

    圖2 過氧化物酶體生物發(fā)生過程示意圖Fig.2 Schematic diagram of peroxisome biogenesis

    首先,pex11介導(dǎo)過氧化物酶體裂變。裂變過程還需要線粒體相關(guān)蛋白(DRP)和線粒體動(dòng)力樣蛋白(DLP)等相關(guān)因子提供動(dòng)力[33]。裂變中,激活的pex11介導(dǎo)過氧化物酶體形態(tài)微管化,具備膜錨定功能的動(dòng)力相關(guān)蛋白在膜伸長的部位富集,然后過氧化物酶體膜收縮,DRP被招募到細(xì)胞質(zhì)中促進(jìn)膜分裂形成新的過氧化物酶體。雖然裂變在分子水平上尚未得到良好的表征,但在酵母中PEX11確實(shí)與FIS1(fission 1)發(fā)生相互作用,進(jìn)行磷酸化調(diào)節(jié)[26,28,34],并且PEX11的寡聚狀態(tài)(單體與二聚體)對氧化還原反應(yīng)十分敏感,可以對成熟的過氧化物酶體分裂進(jìn)行協(xié)調(diào)[32]。

    釀酒酵母(Saccharomycescerevisiae,Sc)、巴斯德畢赤酵母(Pichiapastoris,Pp)和多形漢遜酵母(Hansenulapolymorpha)都在同源位置S165/S173/S174出現(xiàn)Pex11磷酸化。在過氧化物酶體增殖情況下,Sc和Pp的pex11p磷酸化增加[27]。除了這些觀察結(jié)果外,酵母中pex11p的產(chǎn)生通過pex11基因的轉(zhuǎn)錄進(jìn)行調(diào)控并且與過氧化物酶體生物發(fā)生有著緊密聯(lián)系,但仍不清楚是否以及如何通過快速信號傳導(dǎo)調(diào)節(jié)pex11p活性。有研究者提出,ScPex11在ER進(jìn)行磷酸化,而其他研究者通過研究過氧化物酶體形成中的作用,發(fā)現(xiàn)PpPex11磷酸化與裂變因子的募集有關(guān)[24,28]。除Pex11外,過氧化物酶體動(dòng)力相關(guān)蛋白DLP1/DRP1及其線粒體裂變因子Mff(mitochondrial fission factor)均已被磷酸化[25-26]。

    過氧化物酶體的從頭合成模型和分裂增殖模型的主要區(qū)別在于,過氧化物酶體由內(nèi)質(zhì)網(wǎng)產(chǎn)生還是通過自身的裂變產(chǎn)生。雖然這兩種途徑都能形成新的過氧化物酶體,但它們的不同點(diǎn)在于從頭生成方式動(dòng)力學(xué)較慢,但新產(chǎn)生的過氧化物酶體包含所有“新”物質(zhì);而分裂方式動(dòng)力學(xué)更快,但細(xì)胞內(nèi)需要預(yù)先存在過氧化物酶體。

    3過氧化物酶體兩種生長機(jī)制的協(xié)調(diào)

    考慮到碳源代謝和活性氧在過氧化物酶體生成中會(huì)有一定作用,會(huì)破壞蛋白質(zhì)和脂質(zhì),因此新生成的過氧化物酶體會(huì)受到細(xì)胞狀態(tài)和環(huán)境的影響。這些蛋白質(zhì)和脂質(zhì)的破壞影響了過氧化物酶體起源的研究,導(dǎo)致持續(xù)性地存在差異。例如,過氧化物酶體從頭合成和分裂方式的共存問題[35-37]。多形漢遜酵母pex25、pex11雙缺失菌株阻斷了從頭生成和裂變,不能形成過氧化物酶[9,38]。雙缺失菌株分別回補(bǔ)pex25、pex11基因并分別恢復(fù)了過氧化物酶體的從頭合成和裂變方式。說明多形漢遜酵母擁有這兩種獨(dú)立的過氧化物酶體形成方式。這兩種方式分別受到遺傳和環(huán)境擾動(dòng)的影響[39-40]。

    4 展 望

    隨著研究的深入,酵母過氧化物酶體的兩種形成機(jī)制已經(jīng)被證實(shí):從頭合成和分裂方式形成。但是,與過氧化物酶體形態(tài)和生長繁殖相關(guān)的蛋白的作用和協(xié)調(diào)關(guān)系還有待于進(jìn)一步研究。目前,多種相似模式系統(tǒng)中的基因和蛋白質(zhì)分析表明跨物種甚至同一物種內(nèi)部的過氧化物酶體相關(guān)基因和蛋白質(zhì)的作用均存在差異,可見過氧化物酶體的形成過程非常復(fù)雜,尤其內(nèi)部協(xié)調(diào)過程(包括從頭開始)、調(diào)節(jié)過氧化物酶體起始、裂變、輸入、蛋白質(zhì)降解和遺傳的活動(dòng)。近幾年來,已經(jīng)通過酵母與其他細(xì)胞合作并產(chǎn)生了關(guān)于過氧化物酶體動(dòng)力學(xué)過程的數(shù)據(jù)集[41-43],有助于建立廣泛的過氧化物酶體通信的預(yù)測網(wǎng)絡(luò)模型。利用網(wǎng)絡(luò)模型建立蛋白質(zhì)相互作用模型,現(xiàn)階段研究者已經(jīng)可以利用酵母雙雜交系統(tǒng)、G蛋白偶聯(lián)受體(GPCR 和 G Protein)方法、雙分子熒光互補(bǔ)(Bimolecular Fluorescent Complimentary, BiFC)等可視化技術(shù)為確立蛋白質(zhì)相互作用網(wǎng)絡(luò)提供了可能。另外,酵母菌的pex基因突變與過氧化物酶體形態(tài)之間的關(guān)系還有待進(jìn)一步完善?,F(xiàn)階段的酵母菌過氧化物酶體研究主要集中在pex基因突變的篩選、過氧化物酶體形態(tài)的控制、過氧化物酶體的形成動(dòng)力學(xué)和其形成的關(guān)鍵分子確認(rèn)。近年來,研究者們對過氧化物酶的結(jié)構(gòu)和功能的了解影響了對過氧化物酶體蛋白質(zhì)進(jìn)口機(jī)制的組成和結(jié)構(gòu)的看法。但是,對折疊甚至寡聚狀態(tài)下的蛋白質(zhì)如何跨過氧化物酶體膜轉(zhuǎn)運(yùn)的詳細(xì)機(jī)制仍需要進(jìn)一步研究。在過氧化物酶體膜中發(fā)現(xiàn)了足夠大并且可以容納折疊蛋白的蛋白質(zhì)通道[44],可能為寡聚蛋白質(zhì)的轉(zhuǎn)運(yùn)提供初步思路和今后的研究方向。青霉素的合成過程涉及4個(gè)基因,其中ACVS(δ-(l-α-aminoadipyl)-l-cysteinyl-d-valine (ACV) synthetase)和IPNS(isopenicillin N synthase)編碼胞質(zhì)蛋白質(zhì)。pex3是過氧化物酶體定位所需要的基因,Dnm1是細(xì)胞器增殖需要的基因。產(chǎn)黃青霉的4個(gè)合成青霉素基因在多形漢遜酵母中表達(dá)后,成功合成青霉素。pex3突變導(dǎo)致青霉素合成量顯著下降[45]。而且pex11也影響青霉素的生成[46]。將這些發(fā)現(xiàn)綜合到過氧化物酶體生成的數(shù)學(xué)模型中,可以為生物過程控制和藥物開發(fā)提供依據(jù)。鑒于現(xiàn)階段建立PEX與酵母過氧化物酶體的體積之間的數(shù)學(xué)模型仍具有挑戰(zhàn)性,因此,需要發(fā)現(xiàn)更多的與過氧化物酶體形成相關(guān)的蛋白質(zhì)。隨著基因工程技術(shù)的發(fā)展將有助于更精確闡述過氧化物酶體的形成機(jī)制,為預(yù)防過氧化物酶體相關(guān)疾病服務(wù)。

    猜你喜歡
    體膜過氧化物酵母
    銀納米團(tuán)簇的過氧化物模擬酶性質(zhì)及應(yīng)用
    Co3O4納米酶的制備及其類過氧化物酶活性
    放射治療專用熱塑體膜打孔器的初步臨床應(yīng)用研究
    一種放療恒溫水箱的設(shè)計(jì)及臨床應(yīng)用
    酵母抽提物的研究概況
    酵母魔術(shù)師
    人CyclinD1在畢赤酵母中的表達(dá)
    過氧化物交聯(lián)改性PE—HD/EVA防水材料的研究
    中國塑料(2016年3期)2016-06-15 20:30:00
    熱塑體膜在放射治療應(yīng)用中對患者情緒影響的研究
    提高有機(jī)過氧化物熱穩(wěn)定性的方法
    亚洲成人精品中文字幕电影| 97人妻精品一区二区三区麻豆| 一a级毛片在线观看| 亚洲18禁久久av| 深爱激情五月婷婷| 最近2019中文字幕mv第一页| 午夜精品一区二区三区免费看| 久久久久久久久久成人| 波多野结衣高清无吗| 亚洲av.av天堂| 精品免费久久久久久久清纯| 极品教师在线视频| 国产精品一区二区三区四区免费观看 | av在线观看视频网站免费| 国产欧美日韩精品亚洲av| 俺也久久电影网| 成人亚洲精品av一区二区| 亚洲成av人片在线播放无| 老熟妇仑乱视频hdxx| 99久久中文字幕三级久久日本| 丝袜美腿在线中文| 亚洲国产精品久久男人天堂| 欧美日韩综合久久久久久| 美女大奶头视频| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 大又大粗又爽又黄少妇毛片口| 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| 国产男人的电影天堂91| 99在线视频只有这里精品首页| 老师上课跳d突然被开到最大视频| 欧美不卡视频在线免费观看| eeuss影院久久| 免费观看人在逋| a级毛色黄片| 亚洲中文日韩欧美视频| 最好的美女福利视频网| 观看美女的网站| 秋霞在线观看毛片| 国产精品99久久久久久久久| 精华霜和精华液先用哪个| 在线观看美女被高潮喷水网站| 麻豆乱淫一区二区| 日本熟妇午夜| 一区福利在线观看| 最后的刺客免费高清国语| 色尼玛亚洲综合影院| 91在线观看av| 搡老岳熟女国产| 日韩成人av中文字幕在线观看 | 久久精品久久久久久噜噜老黄 | 久久久精品欧美日韩精品| 久久久久性生活片| 亚洲无线观看免费| 亚洲成人中文字幕在线播放| 亚洲av熟女| 久久精品国产99精品国产亚洲性色| 亚洲精华国产精华液的使用体验 | 亚洲性夜色夜夜综合| 午夜激情福利司机影院| 91在线观看av| 日本 av在线| 丝袜美腿在线中文| 国产高清三级在线| 国产爱豆传媒在线观看| 欧美性感艳星| 国产91av在线免费观看| 国产视频一区二区在线看| 国产精品av视频在线免费观看| 黄色视频,在线免费观看| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 美女内射精品一级片tv| 男人舔女人下体高潮全视频| 色吧在线观看| 免费高清视频大片| 国产高清视频在线观看网站| 成年女人看的毛片在线观看| 久久久久久九九精品二区国产| 国产男靠女视频免费网站| 少妇丰满av| 天堂动漫精品| 长腿黑丝高跟| 亚洲高清免费不卡视频| 51国产日韩欧美| 欧美丝袜亚洲另类| 中出人妻视频一区二区| 国产av一区在线观看免费| 啦啦啦韩国在线观看视频| 波多野结衣巨乳人妻| 久久精品国产亚洲av涩爱 | 亚洲欧美日韩东京热| 你懂的网址亚洲精品在线观看 | 国产精品永久免费网站| 人人妻人人看人人澡| 此物有八面人人有两片| 观看美女的网站| 老司机福利观看| 黄色日韩在线| 国产欧美日韩精品亚洲av| 亚洲人与动物交配视频| 久久久久国产网址| 亚洲av免费在线观看| 久久久色成人| 亚洲av中文字字幕乱码综合| 国产黄片美女视频| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 国产一区二区在线av高清观看| 精品无人区乱码1区二区| 搡老熟女国产l中国老女人| 色在线成人网| 一区二区三区四区激情视频 | 久久精品国产亚洲av涩爱 | 亚洲五月天丁香| 日韩欧美国产在线观看| 午夜福利在线在线| 天天躁日日操中文字幕| 99热精品在线国产| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 一级av片app| 大香蕉久久网| 99热只有精品国产| 午夜精品在线福利| av黄色大香蕉| 国产伦在线观看视频一区| 欧美一区二区精品小视频在线| 婷婷六月久久综合丁香| 中文字幕熟女人妻在线| 高清毛片免费观看视频网站| 欧美3d第一页| 中文在线观看免费www的网站| 91在线观看av| 亚洲电影在线观看av| 国产精品无大码| 亚洲av成人av| 成人午夜高清在线视频| 国产片特级美女逼逼视频| 亚洲美女搞黄在线观看 | 欧美性感艳星| 少妇人妻精品综合一区二区 | 男人狂女人下面高潮的视频| 一级毛片aaaaaa免费看小| 国产精品亚洲一级av第二区| 成人三级黄色视频| 色综合站精品国产| 免费观看的影片在线观看| 国产精品永久免费网站| 91狼人影院| 91久久精品电影网| av免费在线看不卡| 亚洲国产精品成人综合色| 最近在线观看免费完整版| 午夜精品国产一区二区电影 | 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 91精品国产九色| 精品少妇黑人巨大在线播放 | 精品久久久噜噜| 亚洲专区国产一区二区| 亚洲成人中文字幕在线播放| 亚洲性夜色夜夜综合| 久久久国产成人免费| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 国产欧美日韩精品亚洲av| 午夜免费激情av| 晚上一个人看的免费电影| 亚洲欧美成人精品一区二区| 91久久精品电影网| 国产精品人妻久久久影院| 成人无遮挡网站| 欧美成人精品欧美一级黄| 午夜免费男女啪啪视频观看 | 久久久国产成人免费| 最近最新中文字幕大全电影3| 久久久久国产精品人妻aⅴ院| 欧美又色又爽又黄视频| 国产成人福利小说| 日本一二三区视频观看| 亚洲第一电影网av| 人妻制服诱惑在线中文字幕| 亚洲精品在线观看二区| 亚洲无线在线观看| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 久久久a久久爽久久v久久| 白带黄色成豆腐渣| 丰满的人妻完整版| 在线观看一区二区三区| 亚洲内射少妇av| 久久久国产成人免费| 乱码一卡2卡4卡精品| 又黄又爽又免费观看的视频| 男人舔奶头视频| 国产精品爽爽va在线观看网站| 久久国内精品自在自线图片| 99久久成人亚洲精品观看| 日本成人三级电影网站| 国产精品一区二区三区四区久久| 性插视频无遮挡在线免费观看| 校园春色视频在线观看| 特级一级黄色大片| 日本与韩国留学比较| 国产精品日韩av在线免费观看| 最近在线观看免费完整版| 成人综合一区亚洲| 国产一级毛片七仙女欲春2| 国产成人91sexporn| 天天躁日日操中文字幕| 亚洲久久久久久中文字幕| 欧美人与善性xxx| 午夜影院日韩av| 久久久精品欧美日韩精品| 日韩 亚洲 欧美在线| 国产色婷婷99| 国产午夜福利久久久久久| 精品午夜福利在线看| 观看美女的网站| 成人鲁丝片一二三区免费| 观看免费一级毛片| 欧美区成人在线视频| 免费电影在线观看免费观看| videossex国产| 尤物成人国产欧美一区二区三区| 亚洲专区国产一区二区| 丰满的人妻完整版| 日韩高清综合在线| 高清毛片免费看| 变态另类成人亚洲欧美熟女| 亚洲美女视频黄频| 一边摸一边抽搐一进一小说| 日本在线视频免费播放| 女同久久另类99精品国产91| 99久久中文字幕三级久久日本| 最近手机中文字幕大全| 丝袜喷水一区| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线 | 能在线免费观看的黄片| 看黄色毛片网站| 最好的美女福利视频网| 日韩欧美免费精品| 成人鲁丝片一二三区免费| 日韩,欧美,国产一区二区三区 | a级一级毛片免费在线观看| 国产高潮美女av| 91久久精品国产一区二区三区| 人妻少妇偷人精品九色| 赤兔流量卡办理| 人人妻人人澡欧美一区二区| 观看美女的网站| 亚洲av电影不卡..在线观看| 婷婷精品国产亚洲av| www.色视频.com| 精品欧美国产一区二区三| 精品国内亚洲2022精品成人| 大型黄色视频在线免费观看| 激情 狠狠 欧美| 夜夜夜夜夜久久久久| 国产探花极品一区二区| 色在线成人网| 久久综合国产亚洲精品| 色视频www国产| 日韩在线高清观看一区二区三区| 久久热精品热| 色综合站精品国产| 成人性生交大片免费视频hd| 99精品在免费线老司机午夜| 色哟哟哟哟哟哟| 哪里可以看免费的av片| 日本一二三区视频观看| 青春草视频在线免费观看| 欧美三级亚洲精品| 亚洲18禁久久av| 熟女人妻精品中文字幕| 国产激情偷乱视频一区二区| 精品一区二区三区视频在线观看免费| 天堂动漫精品| 国产日本99.免费观看| 大香蕉久久网| 国产精品免费一区二区三区在线| 麻豆乱淫一区二区| 在线观看66精品国产| 色综合站精品国产| 极品教师在线视频| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 最近手机中文字幕大全| 亚洲,欧美,日韩| 国产精品免费一区二区三区在线| 99热全是精品| 国产精品不卡视频一区二区| 成人国产麻豆网| 97热精品久久久久久| 免费观看精品视频网站| 国产精品福利在线免费观看| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 亚洲图色成人| 久久精品91蜜桃| 嫩草影院精品99| 男人狂女人下面高潮的视频| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 国产精品久久久久久精品电影| 久久久色成人| 久久久欧美国产精品| 美女免费视频网站| 亚洲精品影视一区二区三区av| 99热这里只有是精品50| 久久欧美精品欧美久久欧美| 日韩av在线大香蕉| 亚洲在线观看片| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 一夜夜www| 天堂影院成人在线观看| 亚洲精品日韩在线中文字幕 | 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 日本五十路高清| 国产精品精品国产色婷婷| 晚上一个人看的免费电影| 国产精品一区二区三区四区免费观看 | 啦啦啦韩国在线观看视频| av天堂在线播放| 91久久精品国产一区二区成人| 国产成人a区在线观看| 又粗又爽又猛毛片免费看| 亚洲av熟女| 精品一区二区三区av网在线观看| 蜜臀久久99精品久久宅男| 夜夜爽天天搞| 啦啦啦观看免费观看视频高清| 婷婷精品国产亚洲av在线| av视频在线观看入口| 又黄又爽又刺激的免费视频.| 久久精品人妻少妇| 欧美日韩乱码在线| 国产大屁股一区二区在线视频| 国产女主播在线喷水免费视频网站 | 最近视频中文字幕2019在线8| 亚洲成a人片在线一区二区| av天堂中文字幕网| 久久久久久大精品| 亚洲国产精品久久男人天堂| 欧美一区二区精品小视频在线| 日日干狠狠操夜夜爽| 国产色婷婷99| 欧美bdsm另类| 男人的好看免费观看在线视频| 中国美白少妇内射xxxbb| 婷婷六月久久综合丁香| 六月丁香七月| 天堂av国产一区二区熟女人妻| 婷婷色综合大香蕉| 亚洲精品影视一区二区三区av| 亚洲丝袜综合中文字幕| 国产高清激情床上av| av女优亚洲男人天堂| 日本熟妇午夜| 天堂√8在线中文| 国产v大片淫在线免费观看| 成年女人看的毛片在线观看| 日韩成人av中文字幕在线观看 | АⅤ资源中文在线天堂| 亚洲欧美精品综合久久99| 国产午夜福利久久久久久| 一级毛片久久久久久久久女| 丝袜喷水一区| 成人三级黄色视频| 麻豆国产av国片精品| 看免费成人av毛片| 国产高清视频在线观看网站| 久久精品国产99精品国产亚洲性色| 亚洲电影在线观看av| 日本免费a在线| 国内精品久久久久精免费| 18禁黄网站禁片免费观看直播| 麻豆成人午夜福利视频| 老熟妇乱子伦视频在线观看| 91麻豆精品激情在线观看国产| 美女黄网站色视频| 亚洲精品粉嫩美女一区| 亚洲欧美日韩高清专用| 久久久久国产精品人妻aⅴ院| 97在线视频观看| 日韩欧美国产在线观看| 一级a爱片免费观看的视频| 久久国内精品自在自线图片| 在线国产一区二区在线| 少妇丰满av| 三级毛片av免费| 亚洲专区国产一区二区| 欧美性感艳星| 亚洲在线观看片| 亚洲av中文字字幕乱码综合| 波多野结衣高清无吗| 毛片女人毛片| 成人欧美大片| 日韩制服骚丝袜av| 97超级碰碰碰精品色视频在线观看| 午夜免费男女啪啪视频观看 | 午夜爱爱视频在线播放| av福利片在线观看| 一夜夜www| 亚洲欧美成人精品一区二区| 在线免费观看的www视频| 国产91av在线免费观看| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 亚洲欧美日韩高清专用| 高清午夜精品一区二区三区 | 国产片特级美女逼逼视频| 亚洲经典国产精华液单| 欧美性感艳星| 国产精品野战在线观看| 精品国产三级普通话版| 麻豆av噜噜一区二区三区| 亚洲一区二区三区色噜噜| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放| 少妇的逼水好多| 国产高清视频在线观看网站| 亚洲国产精品久久男人天堂| 国产真实伦视频高清在线观看| 国产精品美女特级片免费视频播放器| 九九在线视频观看精品| 欧美在线一区亚洲| 赤兔流量卡办理| 免费高清视频大片| 级片在线观看| 色噜噜av男人的天堂激情| 一级黄片播放器| 不卡一级毛片| 亚洲高清免费不卡视频| 天天一区二区日本电影三级| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 国产探花在线观看一区二区| 99久久精品热视频| 亚洲人成网站在线播| 亚洲欧美日韩无卡精品| 欧美xxxx性猛交bbbb| 亚洲一区二区三区色噜噜| 日韩高清综合在线| 亚洲经典国产精华液单| 亚洲七黄色美女视频| 中文资源天堂在线| 国产精品三级大全| 人妻丰满熟妇av一区二区三区| 国产私拍福利视频在线观看| 国产精品久久电影中文字幕| 亚洲精品日韩av片在线观看| 在线免费观看不下载黄p国产| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线 | 亚洲国产色片| 欧美最新免费一区二区三区| 搡老妇女老女人老熟妇| 日韩一区二区视频免费看| 高清日韩中文字幕在线| 晚上一个人看的免费电影| 国产精品福利在线免费观看| 最近2019中文字幕mv第一页| 亚洲成人av在线免费| 嫩草影院新地址| 一级毛片aaaaaa免费看小| 久久精品国产清高在天天线| 亚洲av不卡在线观看| 久久久午夜欧美精品| 国产精品美女特级片免费视频播放器| 黑人高潮一二区| 久久精品国产99精品国产亚洲性色| 国产高清激情床上av| 精品久久久噜噜| 最近视频中文字幕2019在线8| 黄色一级大片看看| 老司机影院成人| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 九九爱精品视频在线观看| 国产精品人妻久久久影院| 国产精品人妻久久久久久| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放| 中文亚洲av片在线观看爽| 禁无遮挡网站| 人人妻人人澡欧美一区二区| 国产乱人偷精品视频| 色哟哟·www| 国产免费男女视频| 国产精华一区二区三区| 人人妻人人澡欧美一区二区| 又爽又黄a免费视频| 久久人人爽人人爽人人片va| 搡老熟女国产l中国老女人| 国产精品久久久久久av不卡| 色哟哟哟哟哟哟| 啦啦啦啦在线视频资源| 国产精品av视频在线免费观看| 国内精品久久久久精免费| 18禁在线播放成人免费| 在线观看免费视频日本深夜| 亚洲国产精品成人久久小说 | 日日干狠狠操夜夜爽| 日本黄色视频三级网站网址| 久久久久性生活片| 国产成人91sexporn| 国产 一区 欧美 日韩| 美女黄网站色视频| 精品一区二区三区av网在线观看| 大型黄色视频在线免费观看| 亚洲一区二区三区色噜噜| 麻豆成人午夜福利视频| 男女啪啪激烈高潮av片| 秋霞在线观看毛片| 午夜福利在线在线| 午夜激情福利司机影院| 亚洲美女黄片视频| 精品久久久久久成人av| 久久99热这里只有精品18| 精品人妻一区二区三区麻豆 | 性插视频无遮挡在线免费观看| 婷婷亚洲欧美| 女人十人毛片免费观看3o分钟| 伦精品一区二区三区| 亚洲最大成人av| 18+在线观看网站| 亚洲国产欧美人成| 精品久久久久久久久久免费视频| 日韩制服骚丝袜av| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美| 国产私拍福利视频在线观看| 国产综合懂色| 天堂动漫精品| av专区在线播放| 麻豆国产97在线/欧美| 国产av麻豆久久久久久久| 97在线视频观看| 日韩在线高清观看一区二区三区| 偷拍熟女少妇极品色| 精品少妇黑人巨大在线播放 | 午夜福利在线在线| 成人鲁丝片一二三区免费| 日本色播在线视频| 免费黄网站久久成人精品| 久久久久久伊人网av| 成人美女网站在线观看视频| 精品久久国产蜜桃| 在线国产一区二区在线| 男女边吃奶边做爰视频| 在线观看午夜福利视频| 少妇高潮的动态图| 精品免费久久久久久久清纯| 国产精品国产高清国产av| 久久韩国三级中文字幕| 国产亚洲精品久久久久久毛片| 97热精品久久久久久| 日本黄大片高清| 99热全是精品| 一a级毛片在线观看| 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 草草在线视频免费看| 乱码一卡2卡4卡精品| 日日撸夜夜添| 久久久久精品国产欧美久久久| 丰满人妻一区二区三区视频av| 久久久精品大字幕| 十八禁网站免费在线| 中文字幕久久专区| 免费高清视频大片| 中文字幕av在线有码专区| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 亚洲无线观看免费| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 亚洲国产精品合色在线| 卡戴珊不雅视频在线播放| 波野结衣二区三区在线| 最后的刺客免费高清国语| 久久久久久久久大av| 久久精品国产99精品国产亚洲性色| 久久久午夜欧美精品| 老司机午夜福利在线观看视频| 色在线成人网| 成人亚洲精品av一区二区| 热99在线观看视频| 一本精品99久久精品77| 美女黄网站色视频| 日本一本二区三区精品| 国产黄a三级三级三级人| 国产精品人妻久久久久久| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 亚洲av熟女| 亚洲成人av在线免费| 亚洲av免费高清在线观看| 国产爱豆传媒在线观看| 国产精品一二三区在线看| 日韩欧美精品v在线| 欧美极品一区二区三区四区| 在线观看一区二区三区| 亚洲美女搞黄在线观看 | 精品一区二区三区视频在线| 久久热精品热| 日本黄色片子视频| 一a级毛片在线观看| 国产大屁股一区二区在线视频| 高清日韩中文字幕在线| 啦啦啦观看免费观看视频高清| 久久久精品欧美日韩精品| 人妻制服诱惑在线中文字幕| 午夜福利在线观看吧| 日本黄大片高清| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 国产精品无大码| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 我的女老师完整版在线观看| 欧美一级a爱片免费观看看| 亚洲精品国产成人久久av| 亚洲,欧美,日韩| 成人无遮挡网站| 亚洲国产高清在线一区二区三| 国产人妻一区二区三区在| 国产精品福利在线免费观看| 中文字幕免费在线视频6| 色综合亚洲欧美另类图片|