阿米卡星在1例EDTA依賴性血小板減少癥中的應(yīng)用

侯兵兵,趙紅麗，王玉曉

臨床進行血常規(guī)檢測時，發(fā)生乙二胺四乙酸(EDTA)依賴性血小板聚集導(dǎo)致血小板假性減少的現(xiàn)象時有發(fā)生，常規(guī)解決辦法為采集枸櫞酸抗凝血或稀釋標(biāo)本對血小板重新檢測，患者均需再次采集標(biāo)本。武警河北總隊醫(yī)院檢驗科對1例出現(xiàn)血小板聚集引起血小板假性減少患者，采取一種新型檢測方法，無需重新采集標(biāo)本即可得到準(zhǔn)確的血小板計數(shù)結(jié)果。

1 臨床資料

1.1 一般資料 患者，女，53歲，因“發(fā)熱，咳嗽，體溫38.1 ℃”于2019-04-20至武警河北總隊醫(yī)院就診，診斷為“上呼吸道感染”，使用EDTA-K2真空采血管(上海碧迪醫(yī)療器械有限公司)采集靜脈血3 ml進行血常規(guī)檢查。采用全自動血細胞分析儀(SysmexXE-2100)進行血常規(guī)檢測時，儀器出現(xiàn)異常報警，信息顯示“血小板聚集、血小板分布異常、血液凝集”。血涂片瑞-吉姆薩染色鏡檢結(jié)果：大量血小板成團聚集(圖1A )，確定為EDTA依賴性假性血小板減少。

圖1 EDTA-K2抗凝血加入阿米卡星前后的血涂片

1.2 方法 筆者參考相關(guān)文獻[1-3] ，取患者原始EDTA-K2抗凝血標(biāo)本1 ml于EP管中，然后加入阿米卡星(成都天臺山制藥有限公司)6.5 mg，混勻后放入37 ℃水浴箱孵育120 min，采用全自動血細胞分析儀和牛鮑計數(shù)板同時對加入阿米卡星的EDTA-K2抗凝血的血小板含量進行檢測，并將加入阿米卡星后的EDTA-K2抗凝血進行推片、瑞-吉姆薩染色后鏡檢。

1.3 結(jié)果 記錄采用牛鮑計數(shù)板對加入阿米卡星后的EDTA-K2抗凝血的血小板計數(shù)，結(jié)果為274×109/L；全自動血細胞分析儀上血小板檢測結(jié)果為268×109/L，并且儀器未出現(xiàn)報警信息；血涂片鏡檢結(jié)果：可見血小板形態(tài)正常呈單個散在分布且未見血小板聚集現(xiàn)象(圖1B)，根據(jù)血涂片估算血小板數(shù)量方法[4](PLT=一個油鏡視野中PLT平均數(shù)×15×109/L)，得出血小板估算值為270×109/L。綜合以上結(jié)果可確定，加入阿米卡星后全自動血細胞分析儀測得血小板結(jié)果準(zhǔn)確。

2 討 論

乙二胺四乙酸依賴性血小板減少癥(ethyenediamine tetra-acetic aciddependent pseudothrombocytopenia，EDTA-PTCP)是由于EDTA 誘導(dǎo)血小板發(fā)生聚集，使血細胞分析儀在檢測時出現(xiàn)血小板假性減少的現(xiàn)象，發(fā)生率為0.07%～2.00%[2]。Gowland 等[5]于1969年首次報道，國內(nèi)外均有相關(guān)報道[6，7]。當(dāng)出現(xiàn)此類情況時，若不糾正，容易造成誤診，嚴重時可能發(fā)生醫(yī)療事故。筆者查閱相關(guān)文獻發(fā)現(xiàn)，多項研究認為，氨基糖苷類藥物(如阿米卡星)可以在不影響其他血細胞形態(tài)的前提下，既可抑制EDTA誘導(dǎo)血小板發(fā)生聚集，又可以使已經(jīng)發(fā)生聚集的血小板解聚[2,8,9]。因此，本研究采用阿米卡星嘗試對聚集血小板進行解聚，結(jié)果顯示標(biāo)本在阿米卡星處理后儀器檢測結(jié)果、鏡下血小板估計值及牛鮑計數(shù)板計數(shù)結(jié)果相符合，與文獻[2]報道一致。

EDTA-PTCP的產(chǎn)生機制和原因主要包括兩方面：(1)在EDTA誘導(dǎo)下或修飾下導(dǎo)致血小板表面表達的某些抗原或受體(如GPⅠa/Ⅱa、GPⅡb /Ⅲa、磷脂、纖維蛋白受體等)的結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，導(dǎo)致與體內(nèi)某些抗體或物質(zhì)發(fā)生反應(yīng)，從而發(fā)生血小板聚集現(xiàn)象[2，3]。(2)體內(nèi)某些抗體在EDTA 誘導(dǎo)或修飾下與血小板膜表面抗原(如GPⅡb 與GPⅢa)或磷脂發(fā)生抗原抗體反應(yīng)，從而發(fā)生血小板聚集[1]。而阿米卡星可抑制血小板發(fā)生聚集或者使已經(jīng)發(fā)生聚集的血小板解聚的原因可能是：阿米卡星可影響血小板表面糖蛋白(如CD62p、CD63、GMPI40等)表達從而抑制血小板活化[1]。血液中阿米卡星濃度越高對血小板的活化抑制作用越強，聚集的血小板解聚時間越短[7]。 值得注意的是，筆者在查閱文獻過程中未發(fā)現(xiàn)阿米卡星對血常規(guī)其他項目(白細胞計數(shù)、紅細胞計數(shù)、血紅蛋白等)檢測準(zhǔn)確性有影響的報道。因此，筆者認為，簽發(fā)EDTA-PTCP患者血常規(guī)報告時，最好將原始標(biāo)本(除血小板相應(yīng)項目外)與加入阿米卡星后測得的血小板相應(yīng)檢測參數(shù)進行綜合報告，并在報告單上備注“血小板EDTA拮抗，結(jié)果已糾正”等提示性文字，最后簽發(fā)報告。

在檢驗中，當(dāng)遇到血小板聚集導(dǎo)致血小板計數(shù)假性減少情況時，一般會采取重新采集枸櫞酸抗凝血或采集稀釋模式末梢血標(biāo)本重新檢測等方法進行糾正，也有報道稱草酸鉀/氟化鈉抗凝血也可測得準(zhǔn)確的血小板計數(shù)[1]。但是這些方法均需要重新采集標(biāo)本。另外，對枸櫞酸鈉、EDTA、肝素、草酸鉀/氟化鈉等多種抗凝藥依賴性假性血小板減少情況的報道[9]，此時患者可能需要3次或者更多次采血。本研究采用阿米卡星將聚集的血小板重新解聚，無需重新采集標(biāo)本仍可得到準(zhǔn)確結(jié)果，建議臨床推廣。