愈創(chuàng)木酚甘油醚對家兔血漿莫西沙星藥動學(xué)的影響

張 瑤，趙宣平，張 磊

（平頂山學(xué)院，河南 平頂山 467000）

莫西沙星（Moxifloxacin）是第四代氟喹諾酮類抗菌藥物[1]。該藥具有半衰期長、生物利用度高、組織穿透力強及生物活性強等優(yōu)點[2]。莫西沙星可抑制細(xì)菌的DNA回旋酶和拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅳ，從而起到抗菌的作用[3]。與使用左氧氟沙星相比，使用莫西沙星治療肺結(jié)核的效果更好。愈創(chuàng)木酚甘油醚是一種惡心性祛痰藥。該藥可刺激患者的胃黏膜，引起輕微的惡心，反射性地增強支氣管腺體的分泌功能，稀釋痰液，降低痰液的黏稠度，起到祛痰的作用[4-5]。目前已有很多關(guān)于愈創(chuàng)木酚甘油醚或莫西沙星在家兔體內(nèi)藥動學(xué)的研究[1,6]。但鮮有研究探討愈創(chuàng)木酚甘油醚對家兔體內(nèi)莫西沙星藥動學(xué)的影響。本文主要是探討愈創(chuàng)木酚甘油醚對家兔血漿莫西沙星藥動學(xué)的影響，為臨床用藥提供參考。

1 研究資料

1.1 儀器與試劑

儀器：高效液相色譜儀（型號：LC-551，生產(chǎn)廠家：陜西華信環(huán)保工程有限公司），高速離心機（型號：TG16X-Ⅱ，生產(chǎn)廠家：長沙東旺儀器有限公司），超聲清洗機（型號：SYU-22-600DT，生產(chǎn)廠家：鄭州生元儀器有限公司），加熱兔臺（型號：JR-20，生產(chǎn)廠家：泰盟醫(yī)藥集團）。試劑：愈創(chuàng)木酚甘油醚（生產(chǎn)廠家：湖北遠(yuǎn)成賽創(chuàng)科技有限公司），莫西沙星（生產(chǎn)廠家：湖北欣瑩合化工有限公司），高氯酸（生產(chǎn)廠家：杭州邦易有限公司），四丁基硫酸氫銨（生產(chǎn)廠家：華夏化學(xué)北京公司），磷酸二氫鉀（生產(chǎn)廠家：深圳市江源商貿(mào)有限公司）。其中，四丁基硫酸氫銨和磷酸二氫鉀用于配置流動相。

1.2 研究對象

選取12只健康家兔作為研究對象。隨機將12只家兔分為單用組和聯(lián)用組。

2 方法與結(jié)果

2.1 給藥及采血方法

對家兔禁食24 h。在家兔禁食24 h后的9：00am為6只單用組家兔使用200 mg/kg的莫西沙星灌胃；為6只聯(lián)用組家兔先使用200 mg/kg的愈創(chuàng)木酚甘油醚灌胃，2 h后再使用200 mg/kg的莫西沙星灌胃[6]。在給藥前（0 h）及給藥后0.5 h、1 h、1.5 h 、2 h 、2.5 h 、3 h 、3.5 h、4 h分別經(jīng)家兔心臟取血2 mL。在加熱兔臺上進行灌藥和采血操作。使用超聲清洗機清洗試驗設(shè)備。

2.2 空白血漿的制備和預(yù)處理方法

將血液注入離心管（已預(yù)先注入肝素鈉）中，混合均勻。將離心管放入離心機中，以6000 r/min的速度離心10 min。將上層清液（約0.4mL）保存在-20℃的環(huán)境中待測。將血漿過濾，放入高效液相色譜儀，記錄色譜圖。

2.3 線性關(guān)系考察

分 別 配 置1 mL濃 度 為10 μg/mL、20 μg/mL、30 μg/mL、40 μg/mL、50 μg/mL及60 μg/mL的莫西沙星標(biāo)準(zhǔn)溶液。將溶液放入離心管中，加入2 mL的空白血漿和2 mL濃度為10%的高氯酸，得到濃度為2 μg/mL、4 μg/mL、6 μg/mL、8 μg/mL、10 μg/mL及12 μg/mL的血漿藥物溶液。將血漿藥物溶液放入離心機中，以6000 r/min的速度離心10 min。留取上層清液。進樣。用高效液相色譜儀記錄峰面積，并計算標(biāo)準(zhǔn)曲線。計算結(jié)果顯示，標(biāo)準(zhǔn)曲線為A=16.596C+3.2113（R2=0.9936）。不同濃度血漿藥物溶液的峰面積見表1。

表1 不同濃度血漿藥物溶液的峰面積

2.4 精密度實驗

取100 μl濃度為20 μg/mL的莫西沙星標(biāo)準(zhǔn)溶液，分5次進樣，每次進樣20 μl。將每次進樣按順序分別標(biāo)注為1～5號。得到5組莫西沙星的峰面積。根據(jù)5組莫西沙星的峰面積計算出相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（relative standard deviation，RSD）。計算結(jié)果顯示，RSD小于5%。詳細(xì)的精密度實驗數(shù)據(jù)見表2。

表2 精密度實驗數(shù)據(jù)（n=5）

2.5 回收率實驗

分別將5 mL濃度為2 μg/mL、6 μg/mL、12 μg/mL的血漿藥物溶液（配置方法與線性關(guān)系考察中相同）分成5次進樣，每次進樣1 mL。根據(jù)測得濃度計算回收率?；厥章剩?）=測得濃度值/加入濃度值×100%。詳細(xì)的回收率實驗數(shù)據(jù)見表3。

2.6 穩(wěn)定性實驗

將5 mL濃度為2 μg/mL、6 μg/mL、12 μg/mL的血漿藥物溶液（配置方法與線性關(guān)系考察中相同）放置在室溫下，并在放置0 h、1 h、1.5 h、2 h及2.5 h時分別測量莫西沙星的峰面積。根據(jù)莫西沙星的峰面積計算RSD。計算結(jié)果顯示，RSD為3.640%。

表3 回收率實驗數(shù)據(jù)

2.7 血藥濃度的測定

使用高效液相色譜儀分析兩組家兔用藥后不同時間點的血漿樣本，得到莫西沙星的峰面積。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程計算這些家兔血漿莫西沙星的濃度。兩組家兔血漿莫西沙星的平均血藥濃度—時間曲線見圖1。

圖1 兩組家兔血漿莫西沙星的平均血藥濃度—時間曲線

2.8 房室模型

將本研究中的數(shù)據(jù)采用DAS2.0藥動學(xué)軟件進行分析，并使用赤池信息量（Akaike‘s Information Criterion，AIC）進行判斷。結(jié)果顯示，單室模型的AIC最小，故取單室模型的藥動學(xué)參數(shù)進行研究。藥動學(xué)參數(shù)包括：吸收速率常數(shù)（Ka），半衰期（t1/2），峰濃度（Cmax），達(dá)峰時間（Tmax），從開始時間至所選擇的最后一個時間點的血藥濃度時間曲線下面積〔AUC（0-t）〕，從開始時間至無窮大時間的血藥濃度時間曲線下面積〔AUC（0-∞）〕，根據(jù)AUC（0-t）計算出的藥物分子駐留時間〔MRT（0-t）〕，根據(jù)AUC（0-∞）計算出的藥物分子駐留時間〔MRT（0-∞）〕。

2.9 兩組家兔血漿莫西沙星的主要藥動學(xué)參數(shù)

采用藥動學(xué)軟件DAS2.0對兩組家兔血漿莫西沙星血藥濃度與峰面積進行分析，得到主要藥動學(xué)參數(shù)見表4。采用SPSS 22.0統(tǒng)計軟件對兩組家兔血漿莫西沙星的藥動學(xué)參數(shù)進行處理，計量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，采用t檢驗，以P＜0.05為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。統(tǒng)計學(xué)處理的結(jié)果顯示，聯(lián)用組家兔血漿莫西沙星的Ka、Cmax、AUC(0-t)、AUC(0-∞)及t1/2均高于單用組家兔，P＜0.05。

表4 兩組家兔血漿莫西沙星的主要藥動學(xué)參數(shù)（n=6）

3 討論

本次研究中，我們?yōu)榧彝貌杉獦拥姆绞綖樾呐K取血，測定莫西沙星血藥濃度的方法為高效液相色譜法。相關(guān)的研究結(jié)果顯示，與使用紫外分光光度法相比，使用高效液相色譜法檢測藥物含量的操作更簡便，檢測結(jié)果更準(zhǔn)確[7]。本次研究中，我們使用高效液相色譜法測定家兔血漿中莫西沙星在最大波長下的峰面積，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程和DAS2.0軟件進行了房室模型判斷，得出了兩組家兔體內(nèi)莫西沙星的主要藥動學(xué)參數(shù)。在線性關(guān)系考察中，得到的標(biāo)準(zhǔn)曲線為A=16.596C+3.2113（R2=0.9936）。這說明，莫西沙星在濃度為10～60 μg/mL的范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。在精密度實驗、回收率試驗和穩(wěn)定型中，莫西沙星血漿藥物溶液在不同進樣次數(shù)、不同濃度及不同時間的條件下，RSD均小于5%，且回收率在100%左右，符合數(shù)據(jù)分析的要求。RSD可用于檢測實驗數(shù)據(jù)的精密度和重復(fù)性。若某實驗所得的數(shù)據(jù)精密度高、重復(fù)性好，則該實驗所得的數(shù)據(jù)可信度較高。

綜上所述，愈創(chuàng)木酚甘油醚對家兔血漿莫西沙星的藥動學(xué)影響顯著。與使用莫西沙星灌胃的家兔相比，使用愈創(chuàng)木酚甘油醚灌胃后再使用莫西沙星灌胃的家兔血漿莫西沙星的t1/2更長，其Cmax更高，其Ka、AUC(0-t)及AUC(0-∞)更大。臨床上不可將這兩種藥物合用，在必須合用這兩種藥物時應(yīng)注意調(diào)整用藥的劑量。