內(nèi)蒙古中西部綿羊弓形蟲病血清學(xué)調(diào)查

閆鑫磊，韓汶熒，韓 笑，雒 帥，汪 洋

(內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院，內(nèi)蒙古 呼和浩特 010018)

弓形蟲是一種細(xì)胞內(nèi)寄生的人獸共患寄生蟲，可感染所有的溫血動物的有核細(xì)胞[1-2]。內(nèi)蒙古自治區(qū)是我國畜牧業(yè)大省，其中綿羊養(yǎng)殖占據(jù)重要地位[3]。羊感染弓形蟲后，會出現(xiàn)腦炎、眼病和胎盤炎等嚴(yán)重癥狀，母羊患病可導(dǎo)致流產(chǎn)、死胎及非正常生產(chǎn)[4]，給畜牧業(yè)生產(chǎn)造成較大損失 ； 人感染弓形蟲的一個重要原因是食用未煮熟的含有弓形蟲包囊的肉，目前已有在羊肉及羊奶中分離出弓形蟲活體的報(bào)道[5]。本試驗(yàn)通過對內(nèi)蒙古自治區(qū)中西部地區(qū)代表性牧業(yè)地區(qū)的放牧及舍飼綿羊展開血清學(xué)檢測，以期為該地區(qū)畜牧業(yè)發(fā)展、居民食品安全水平提高及人獸共患病防治等方面提供數(shù)據(jù)參考。

1 材料與方法

1.1 樣品采集及血清制備 本試驗(yàn)所用綿羊血樣分別采集于呼和浩特市、烏蘭察布市、鄂爾多斯市和巴彥淖爾市的15個旗縣，共計(jì)641份。血液樣品5 000 r/min離心15 min，取上清轉(zhuǎn)入經(jīng)高壓滅菌的1.5 mL離心管中，編號后于-20 ℃冰箱保存待用。

1.2 試驗(yàn)試劑及方法 綿羊弓形蟲(Tox)間接ELISA抗體檢測試劑盒，購自泉州市睿信生物科技有限公司，試驗(yàn)操作按試劑盒說明書要求進(jìn)行。

1.3 結(jié)果判定 在陽性對照樣本OD值≥1且陰性對照樣本OD值≤0.15的條件下，判定結(jié)果的臨界值=陰性對照樣本的平均OD值+0.15，若被測樣的OD值>臨界值，則被測樣為陽性，反之則為陰性。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì) 采用SPSS 19.0軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行卡方檢驗(yàn)，當(dāng)P<0.05時差異顯著，P<0.01時差異極顯著。

2 結(jié)果

2.1 各地區(qū)綿羊弓形蟲血清抗體檢測 本試驗(yàn)從內(nèi)蒙古中西部4個地級市15個旗縣(區(qū))采集樣品641份，經(jīng)弓形蟲抗體檢測，總體陽性率為21.84%。高于總體陽性率的有10個旗縣，其中最高為和林格爾縣(29.63%)；低于總體陽性率的有5個旗縣，其中最低為伊金霍勒旗(11.11%)，見表1。

表1 弓形蟲血清抗體陽性率檢測結(jié)果

2.2 不同飼養(yǎng)方式綿羊弓形蟲血清抗體檢測 由表2可知，在所檢測的494份舍飼的樣品中，弓形蟲血清抗體陽性率為24.49%；放牧綿羊的陽性率為12.93%。對二者陽性率進(jìn)行卡方檢驗(yàn)，差異極顯著(P<0.01)。

表2 不同飼養(yǎng)方式綿羊弓形蟲血清陽性率

2.3 不同性別綿羊弓形蟲血清抗體檢測 由表3可知，所檢測282份雄性綿羊的血清中，檢測結(jié)果為陽性的有72份，陽性率為25.53%；雌性綿羊的359份被檢樣品中，陽性樣品為68份，陽性率為18.94%。雄性綿羊陽性率大于雌性綿羊，經(jīng)卡方檢驗(yàn)分析，二者無顯著性差異(P>0.05)。

表3 不同性別綿羊弓形蟲血清陽性率

2.4 不同年齡綿羊弓形蟲血清抗體檢測 以12月齡及以上的綿羊?yàn)槌赡暄颍?2月齡以下為未成年羊。結(jié)果顯示，成年羊的陽性率為33.21%；未成年羊的陽性率為13.83%。成年的綿羊弓形蟲血清抗體陽性率大于未成年綿羊，且二者差異極顯著(P<0.01)， 結(jié)果見表4。

表4 不同年齡綿羊弓形蟲血清陽性率

2.5 不同月份綿羊弓形蟲病流行病學(xué)調(diào)查情況 結(jié)果由表5可知，全年每個月份均有陽性樣品檢出。其中8月份感染率最高(28.57%)，1月份最低(14.29%)。綜合分析發(fā)現(xiàn)，綿羊弓形蟲感染率呈現(xiàn)春冬季節(jié)較低，夏秋季節(jié)較高的趨勢，但各月份間感染率不存在顯著性差異(P>0.05)。

表5 不同月份綿羊弓形蟲感染血清學(xué)檢測結(jié)果

3 討論

本試驗(yàn)利用間接ELISA方法檢測呼和浩特市、烏蘭察布市、鄂爾多斯市和巴彥淖爾市4個地級市15個旗縣共641份綿羊血樣，總體結(jié)果陽性率為21.84%。與已報(bào)道的國內(nèi)其他調(diào)查結(jié)果[6-8]相比處于較高水平。本次調(diào)查結(jié)果顯示，舍飼綿羊弓形蟲感染的血清學(xué)檢測結(jié)果陽性率(24.49%)高于放牧綿羊(12.93%)，且二者呈極顯著差異(P<0.01)，與已報(bào)道的研究結(jié)果[9-10]相吻合，造成這種情況的原因可能是由于舍飼綿羊集中，受感染的機(jī)率大于放牧綿羊，易發(fā)生群體性感染。此外年齡因素也是造成弓形蟲感染的風(fēng)險(xiǎn)因素之一。結(jié)果顯示，在所調(diào)查的12月齡以上綿羊中，弓形蟲感染率為33.21%，12月齡以下的綿羊弓形蟲感染率為13.83%，且差異極顯著(P<0.01)，可能原因是隨著飼養(yǎng)時間的增加綿羊接觸外界環(huán)境的概率隨之增大，因此接觸到弓形蟲卵囊的可能性也就越大。但該結(jié)果與已報(bào)道的結(jié)果[11-12]相左，這說明年齡因素可能與其他未知因素結(jié)合產(chǎn)生影響。需要指出的是，本試驗(yàn)結(jié)果顯示，性別不是弓形蟲感染的風(fēng)險(xiǎn)因素，說明不同性別綿羊均可感染弓形蟲，因此對于不同性別綿羊弓形蟲感染均需做好全面防控工作。本試驗(yàn)還發(fā)現(xiàn)，被調(diào)查地區(qū)不同月份綿羊弓形蟲血清陽性率雖無顯著差異，但可看出春冬季節(jié)感染率低、夏秋季節(jié)感染率高的趨勢，說明秋冬季節(jié)為弓形蟲感染的高發(fā)時期，提示在此期間相關(guān)人員應(yīng)加強(qiáng)該疫病的防控力度。

綜上所述，該結(jié)果為地區(qū)性動物疫病防控、畜牧業(yè)發(fā)展及居民肉類食品安全保障提供一定科學(xué)參考。但內(nèi)蒙古地區(qū)幅員遼闊，綿羊養(yǎng)殖量巨大，因此為獲得更加準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)，擴(kuò)大采樣范圍及采樣量是今后研究的方向。同時建議相關(guān)部門做好相關(guān)疫病防治及對相關(guān)人員的宣傳教育工作。