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    乳黃消口服液治療奶牛乳房炎的臨床療效觀察

    2021-06-19 10:30:12白東東李新圃羅金印王旭榮李宏勝
    中國獸醫(yī)雜志 2021年1期
    關(guān)鍵詞:體細胞乳汁口服液

    白東東,李新圃,楊 峰,羅金印,王旭榮,張 行,李宏勝

    (中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州畜牧與獸藥研究所 農(nóng)業(yè)部獸用藥物創(chuàng)制重點實驗室甘肅省新獸藥工程重點實驗室,甘肅 蘭州 730050)

    奶牛乳房炎是奶牛場最常見的內(nèi)科病之一,往往由環(huán)境、自身機體和病原菌三方面因素綜合導(dǎo)致,它不僅可以使牛奶產(chǎn)量、質(zhì)量下降[1],治療成本提高[2],還可以導(dǎo)致患病奶牛的死亡[3]。目前奶牛場對于奶牛乳房炎的治療方法仍以抗生素為主,但其因耐藥性的問題受到了一定的限制。中獸藥與抗生素相比,因其毒性低、殘留量少、療效確切等已成為國內(nèi)外學(xué)者關(guān)注的焦點[4-5]。

    乳黃消口服液是蘭州畜牧與獸藥研究所奶牛疾病創(chuàng)新團隊研制的專用于治療熱毒壅盛型奶牛乳房炎的一種新型中獸藥,在前期的藥效學(xué)試驗中已經(jīng)證明其具有滋陰瀉火、消腫止痛和扶正祛邪的功效,故本試驗觀察該藥物對奶牛乳房炎的臨床療效,為后期正式臨床試驗提供數(shù)據(jù)參考。

    1 材料與方法

    1.1 材料

    1.1.1 中藥藥液 乳黃消口服液由知母、丹參、連翹等10味藥組成,其藥材均購自蘭州市黃河藥材市場。取藥材共5 kg,第1次加入4 L自來水,煎煮2 h, 過濾后藥渣再加入3 L自來水,煎煮1 h,過濾后藥渣再加3 L自來水,煎煮1 h,紗布過濾后3次濾液合并,將其濃縮至1 g/mL。

    1.1.2 試驗動物 正在泌乳期的健康奶牛和患有臨床型奶牛乳房炎的奶牛,由甘肅省荷斯坦奶牛繁育中心提供。

    1.1.3 儀器與設(shè)備 BC-2800vet獸用全自動血液細胞分析儀,購自深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司;XL-640全自動生化分析儀,購自Erba公司;J6-HC高速冷凍離心機,購自Backman公司;生化試劑盒,購自美康生物科技股份有限公司;Fossomatic 7,購自FOSS公司;HH-2數(shù)顯恒溫水浴鍋,購自常州智博瑞儀器制造有限公司;公英散,購自河北寶典藥業(yè)有限公司。

    1.2 方法

    1.2.1 動物的選擇 納入標(biāo)準(zhǔn):年齡3~9歲,2~8胎次,處于泌乳期的奶牛,無傳染病史,產(chǎn)前、產(chǎn)后無并發(fā)癥,無全身癥狀,乳汁中有絮狀物,顏色微黃或黃,乳房腫大或無,體溫不超過40 ℃;排除標(biāo)準(zhǔn):不在泌乳期的奶牛,或在泌乳期患有子宮內(nèi)膜炎、胎衣不下、急性產(chǎn)后腹瀉、蹄病、急性乳房炎、慢性乳房炎、隱性乳房炎等疾病和體溫超過40 ℃的奶牛排除;剔除標(biāo)準(zhǔn):試驗期間,對受試奶牛進行抗炎或抗生素治療措施、做過真胃移位手術(shù)或發(fā)生過蹄病以及意外死亡淘汰等情況,其試驗結(jié)果均排除在外。

    1.2.2 動物的分組 將納入試驗的40頭患病奶牛隨機分為4組,每組10頭,即乳黃消口服液高劑量組(1 500 mL/頭)、中劑量組(1 000 mL/頭)、低劑量組(500 mL/頭)和對照藥物組(公英散),健康組奶牛10頭。

    1.2.3 檢測指標(biāo) 一般觀察:試驗期間,每天下午觀察各組奶牛的精神狀態(tài),采食飲水情況,乳房腫脹情況以及乳汁顏色。血常規(guī)檢測:各組奶牛在治療前、后尾靜脈采血,全自動血細胞分析儀測定白細胞(White blood cell,WBC)、紅細胞(Red blood cell,RBC)、血紅蛋白(Hemoglobin,HGB)、紅細胞壓積(Red blood cell specific volume,HCT)和血小板(Blood platelet,PLT)等含量。血生化指標(biāo)檢測:尾靜脈采血后,靜置離心分離血清,測定其血清中總膽紅素(Total bilirubin,TBIL)、白蛋白(Albumin,ALB)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(Alkaline aminotransferase,ALT)、天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(Aspartate aminotransferase,AST)、堿性磷酸酶(Alkaline phosphatise,ALP)、乳酸脫氫酶(Lactate dehydrogenase,LDH)、肌酸激酶(Creatine kinase,CK)、尿素(UREA)和肌酐(Creatinine,CRE)。

    乳汁中體細胞檢測方法:首先在測定乳汁中體細胞前先將樣品放置于39~42 ℃的水浴鍋10~15 min(不可放置太久或重復(fù)加熱),顛倒幾次樣品使之混合均勻(切勿劇烈晃動),然后將樣品放置到Fossomatic 7傳送帶上攪拌器右側(cè),樣品的處理確保是以相同方式進行,點擊開始測定,收集數(shù)據(jù)。

    1.2.4 臨床療效判斷 有效:治療后,患牛乳房紅腫、硬結(jié)和熱脹感明顯減輕,乳汁水樣或絮狀沉淀減少或消失,奶產(chǎn)量有所增加;治愈:治療后,患牛乳房紅腫、硬結(jié)、熱感消失,奶樣外觀、采食量、奶產(chǎn)量和精神恢復(fù)正常;無效:治療后,患牛乳房臨床癥狀未改善或情況惡化,放棄本中藥治療而用其他方法治療。

    1.2.5 數(shù)據(jù)處理 應(yīng)用SPSS 20.0軟件對各組數(shù)據(jù)進行單因素方差分析,結(jié)果用平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示。

    2 結(jié)果

    2.1 乳黃消口服液臨床診療效果統(tǒng)計 對受試奶牛的臨床具體情況進行統(tǒng)計分析,經(jīng)統(tǒng)計觀察,納入的受試奶牛均未剔除,即受試奶牛的統(tǒng)計數(shù)據(jù)均可靠。從表1可以得出,乳黃消口服液高、中、低劑量組對奶牛乳房炎治愈率分別為70%、90%和60%,對照藥物組治愈率為50%。

    表1 乳黃消口服液和公英散治療臨床型奶牛乳房炎臨床效果統(tǒng)計Table 1 Statistics on the clinical effects of Ruhuangxiao oral liquid and Gongyingsan in the treatment of clinical bovine mastitis

    2.2 給藥后患病奶牛血液生理指標(biāo)的變化 對患病奶牛連續(xù)治療3~5 d后,經(jīng)統(tǒng)計分析發(fā)現(xiàn),乳黃消口服液高、中、低劑量組和對照藥物組的血液生理指標(biāo)與健康組相比差異均不顯著(P>0.05),見表2。說明乳黃消口服液對受試奶牛的血液生理指標(biāo)無影響。

    表2 給藥前后奶牛血液生理指標(biāo)參數(shù)Table 2 Blood physiological indexes of cows before and after administration

    2.3 給藥后患病奶牛血液生化指標(biāo)的變化 對患有乳房炎的奶牛連續(xù)治療3~5 d后,統(tǒng)計分析發(fā)現(xiàn),與健康組相比,乳黃消口服液高、中、低劑量組和對照藥物組的血液生化指標(biāo)差異均不顯著(P>0.05),見表3。說明乳黃消口服液對受試奶牛的血液生化指標(biāo)無影響。

    表3 給藥前后奶牛血液生化指標(biāo)Table 3 Blood biochemical indexes of cows before and after administration

    2.4 治療后患病奶牛乳汁體細胞的變化 對各組奶牛在治療前、治愈后和治療第30天采集奶樣,測得其乳汁中的體細胞數(shù)。經(jīng)統(tǒng)計發(fā)現(xiàn),治療前患病奶牛乳汁中的體細胞數(shù)和健康組奶牛乳汁中的體細胞相比差異極顯著(P<0.01),雖然治療后體細胞數(shù)明顯下降,但仍與健康組乳汁的體細胞差異極顯著(P<0.01),在治療的第30天,各組患病奶牛乳汁中體細胞數(shù)與健康組相比差異不顯著(P>0.05),且均降至20萬/mL以下。見表4。

    表4 治療前后各組奶牛乳汁體細胞的變化Table 4 Changes of milk somatic cells in each group before and after treatment

    3 討論

    3.1 乳黃消口服液對奶牛乳房炎的臨床治療效果 奶牛乳房炎常因畜體津液不足,陰虛火旺,而出現(xiàn)乳汁變黃、口干舌紅、尿赤糞干、脈洪大等臨床表現(xiàn),故應(yīng)滋陰瀉火、消腫止痛,乳黃消口服液中以知母為君藥,其性寒,滋陰瀉火;臣以銀花、連翹等清熱解毒、疏風(fēng)解表,以助知母清熱瀉火之功;佐以丹參等,活血止痛、消腫生肌;久熱繞于心,則神志不清,故加遠志以安神,諸藥合用,可其滋陰瀉火、消腫止痛的作用?,F(xiàn)代藥理學(xué)研究,知母具有抗抑郁[6]、抗炎[7-8]、增強免疫力[9]、改善高血糖[10]、糖尿病[11]等作用,金銀花具有保肝減肥[12]、驅(qū)蚊蟲[13]、抗高尿酸血癥[14]、抗炎、抗氧化[15-16]和調(diào)節(jié)免疫[17]等的功能,連翹具有抗炎[18]、抗菌[19]、增強免疫[20]等藥理作用。綜上所述,從現(xiàn)代藥理學(xué)研究角度看,乳黃消口服液中的主藥有一定的抗炎、抗菌和提高免疫力的作用,這與奶牛乳房炎的致病原因密切相關(guān),故可在臨床取得很好的療效。從治療效果來看,因各組未治愈的奶牛臨床癥狀均無好轉(zhuǎn),故只有用治愈率來表示臨床療效,其中乳黃消口服液高、中、低劑量組和對照藥物組的治愈率分別為70%、90%、60%和50%。說明乳黃消口服液中劑量組治療奶牛乳房炎效果最好,且各劑量組對奶牛乳房炎療效均好于對照藥物組,其中對照藥公英散治療效果與于瑞影[21]報道的治愈率97.5%有一定差距,推測可能與生產(chǎn)廠家、給藥時間、季節(jié)以及奶牛自身狀態(tài)有關(guān)。

    3.2 乳黃消口服液對奶牛乳房炎血液生理生化指標(biāo)的影響 乳房炎是奶牛乳房發(fā)生的炎癥,而炎癥必然會導(dǎo)致機體組織局部的紅、腫、熱、痛和機能障礙,表現(xiàn)為乳產(chǎn)量的下降、乳汁顏色變黃、產(chǎn)生絮狀物、乳房局部的腫脹。為了觀察納入奶牛是否已經(jīng)產(chǎn)生全身癥狀或已經(jīng)引起全身癥狀而乳黃消口服液對其產(chǎn)生影響,以及藥物是否對其肝腎功能產(chǎn)生影響,故測定治療前、后各組奶牛的血液生理生化指標(biāo)。從結(jié)果來看,患病奶牛均未出現(xiàn)全身癥狀,且給藥治療后WBC、RBC、PLT、ALB、ALT、AST、LDH、ALP、CK和CRE等與健康組無顯著性差異(P>0.05),同時表明乳黃消口服液不會影響奶牛的健康。

    3.3 乳黃消口服液對患病奶牛乳汁中體細胞的影響 近年來,許多國家均已將奶牛乳汁中的體細胞數(shù)作為奶牛乳房健康的評價標(biāo)準(zhǔn)[22-24]。從給藥前、后奶牛乳汁體細胞統(tǒng)計的結(jié)果來看,給藥前患病奶牛的體細胞數(shù)與健康組差異極顯著(P<0.01),給藥后患病奶牛乳汁中的體細胞數(shù)與健康組相比差異仍極顯著(P<0.01),但比治療前有所降低,給藥治療第30天,患病奶牛乳汁中的體細胞數(shù)與健康組相比差異不顯著(P>0.05),且均低于20萬/mL。說明乳黃消口服液對患病奶牛給藥治療3~5 d后,體細胞數(shù)會降低,但不會直接降至20萬/mL,需要一定的時間來修復(fù)乳腺損傷。

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