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    石榴皮中多酚成分提取工藝的研究

    2021-06-16 07:44:30任增超溫朝昕劉振君
    現(xiàn)代食品 2021年7期
    關(guān)鍵詞:水浴加石榴皮福林

    ◎ 任增超,張 妍,李 景,劉 婧,溫朝昕,劉振君

    (天津天獅學(xué)院,天津 301700)

    石榴皮為石榴科植物石榴(Punica granatumL.)的干燥果皮,具有澀腸止瀉、止血驅(qū)蟲等功效[1-3]。然而在石榴的深加工過程中,占總質(zhì)量近30%的石榴皮大多被視為“無用”的下腳料而被丟棄,若是能夠?qū)⑹衿ぶ械亩喾游镔|(zhì)利用起來,既可減少資源浪費(fèi),也可提高石榴綜合開發(fā)利用的價(jià)值。研究發(fā)現(xiàn),石榴皮中含有大量的多酚類物質(zhì)[4-6],比石榴果實(shí)含量更高,石榴皮多酚具有顯著的抗氧化、抑菌消炎、治療痤瘡及促進(jìn)傷口愈合等作用,現(xiàn)已被應(yīng)用于食品、藥品及化妝品等方面。因此,對(duì)石榴皮多酚提取工藝及其應(yīng)用研究具有重要的意義。

    1 材料與儀器

    1.1 材料

    石榴皮為市售藥材;沒食子酸標(biāo)準(zhǔn)品:上海源葉生物科技有限公司(純度:HPLC≥98%);無水乙醇(分析純):天津市匯杭化工科技有限公司;福林酚試劑:國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司;碳酸鈉(分析純):天津市大茂化學(xué)試劑廠。

    1.2 儀器

    UV-2500型紫外可見分光光度計(jì):島津儀器有限公司;移液器:大龍興創(chuàng)實(shí)驗(yàn)儀器有限公司;BSA124S型精密分析天平:賽多利斯科學(xué)儀器有限公司;RE-52AA型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀:上海亞榮生化儀器廠;DH-101-3BS型電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱:天津市中環(huán)實(shí)驗(yàn)電爐有限公司。

    2 方法與結(jié)果

    2.1 石榴皮多酚含量測(cè)定方法

    2.1.1 標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備

    準(zhǔn)確稱取沒食子酸標(biāo)準(zhǔn)品50 mg,用水定容至50 mL容量瓶中混勻,得到1 mg mL-1標(biāo)準(zhǔn)溶液貯備液。

    2.1.2 樣品溶液的制備

    分別將樣品粉末加少量水溶解,水定容至100 mL容量瓶中混勻,即得樣品溶液。

    2.1.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作

    分別量取0.0 mL、0.1 mL、0.2 mL、0.3 mL、0.4 mL和0.5 mL標(biāo)準(zhǔn)溶液,置于25 mL比色管中,分別加入1 mL福林酚試劑,混勻后加入4 mL 7.5%的碳酸鈉溶液,于30 ℃水浴加熱2 h,冷卻后用水定容至25 mL刻度,充分混勻后,于765 nm處測(cè)量吸光度,并以溶液濃度(X)對(duì)吸光度(Y)進(jìn)行線性回歸分析,結(jié)果表明石榴皮多酚在4~20 μg mL-1范圍內(nèi)線性關(guān)系良好,標(biāo)準(zhǔn)曲線為Y=62.25X+0.075,r=0.997 4。

    2.1.4 精密度試驗(yàn)

    取0.1 mL樣品溶液,置于25 mL比色管中,分別加入1 mL福林酚試劑,混勻后加入4 mL 7.5%的碳酸鈉溶液,于30 ℃水浴加熱2 h,冷卻后用水定容至25 mL刻度,充分混勻后,于765 nm處重復(fù)測(cè)定吸光度5次,RSD為2.52%,結(jié)果表明精密度良好。

    2.1.5 穩(wěn)定性試驗(yàn)

    取0.1 mL樣品溶液,置于25 mL比色管中,分別加入1 mL福林酚試劑,混勻后加入4 mL 7.5%的碳酸鈉溶液,于30 ℃水浴加熱2 h,冷卻后用水定容至25 mL刻度,充分混勻后,分別放置0 h、1 h、2 h、4 h、6 h和8 h后于765 nm處測(cè)定吸光度,RSD為2.92%,結(jié)果表明在0~8 h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

    2.1.6 重現(xiàn)性試驗(yàn)

    取0.1 mL樣品溶液5份,置于25 mL比色管中,分別加入1 mL福林酚試劑,混勻后加入4 mL 7.5%的碳酸鈉溶液,于30 ℃水浴加熱2 h,冷卻后用水定容至25 mL刻度,充分混勻后,于765 nm處測(cè)定吸光度,RSD為2.82%,結(jié)果表明重現(xiàn)性良好。

    2.2 石榴皮多酚提取方法

    取新鮮石榴皮,干燥后粉碎,粉末過80目篩后,按照料液比加入乙醇溶液,水浴提取相應(yīng)時(shí)間,抽濾除去藥渣后減壓濃縮至濃稠,70 ℃干燥后粉碎,過100目篩得到石榴皮多酚粉末。

    2.3 正交試驗(yàn)優(yōu)化石榴皮多酚提取工藝

    2.3.1 正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)

    在前期單因素研究的基礎(chǔ)上,選用L9(34)正交表,分別考察乙醇濃度、料液比、提取溫度、提取時(shí)間4個(gè)因素對(duì)提取工藝的影響,見表1。

    表1 正交因素水平表

    2.3.2 正交試驗(yàn)結(jié)果

    準(zhǔn)確稱取9份石榴皮粉,每份20 g,按照正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)條件提取石榴皮多酚,用水復(fù)溶至100 mL容量瓶中,分別取9份樣品溶液各0.1 mL,置于25 mL比色管中,分別加入1 mL福林酚試劑,混勻后加入4 mL 7.5%的碳酸鈉溶液,于30 ℃水浴加熱2 h,冷卻后用水定容至25 mL刻度,充分混勻后于765 nm處測(cè)定吸光度,計(jì)算多酚含量,分析4個(gè)因素對(duì)石榴皮多酚提取工藝的影響,結(jié)果見表2。

    表2 正交試驗(yàn)結(jié)果表

    從表2中可以看出,以石榴皮多酚提取率為指標(biāo),各因素對(duì)提取率的影響為B>A>D>C,即料液比>乙醇濃度>提取時(shí)間>提取溫度,根據(jù)表3方差分析可知,料液比對(duì)石榴皮中多酚的提取率具有顯著影響。綜合分析得出石榴皮中多酚成分提取工藝條件為A2B3C3D2,即乙醇濃度60%、料液比1∶12、提取溫度80 ℃、提取時(shí)間1.5 h。

    表3 正交試驗(yàn)方差分析表

    2.3.3 驗(yàn)證試驗(yàn)

    為進(jìn)一步考察優(yōu)選出的提取工藝參數(shù)的穩(wěn)定性及可靠性,按照上述工藝進(jìn)行3次驗(yàn)證試驗(yàn),試驗(yàn)結(jié)果見表4,證明該工藝穩(wěn)定可行。

    表4 驗(yàn)證試驗(yàn)結(jié)果表

    3 結(jié)論

    石榴皮中含有的多酚類物質(zhì)具有顯著的抗氧化、抑菌消炎、治療痤瘡及促進(jìn)傷口愈合等功效。在前期研究的基礎(chǔ)上,綜合考慮提取率、成本及操作性,選取熱浸提法提取石榴皮中的多酚成分,將作為石榴生產(chǎn)廢料的石榴皮得到充分利用。

    通過正交試驗(yàn)確定石榴皮中多酚成分的提取工藝為12倍量的60%乙醇溶液于80 ℃下提取1.5 h,優(yōu)選出的工藝操作較為簡(jiǎn)單,且穩(wěn)定可靠,可以為石榴皮中多酚成分的提取提供一定的參考。

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