雙氫青蒿素抗炎作用機(jī)制的研究進(jìn)展

張然 楊冰 李紅珠 華潔 周鈺通 周福軍 張鐵軍

中圖分類號 R285 文獻(xiàn)標(biāo)志碼 A 文章編號 1001-0408（2021）09-1147-06

DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2021.09.20

摘 要 目的：探討雙氫青蒿素（DHA）的抗炎作用機(jī)制，為其進(jìn)一步研究和應(yīng)用提供參考。方法：分析DHA對炎癥介質(zhì)、信號通路、免疫細(xì)胞的作用，對其抗炎機(jī)制的研究進(jìn)展進(jìn)行總結(jié)。結(jié)果與結(jié)論：DHA的抗炎作用機(jī)制主要是通過調(diào)節(jié)炎癥介質(zhì)、免疫細(xì)胞以及多種信號通路來實現(xiàn)的。DHA可通過調(diào)節(jié)促炎細(xì)胞因子（如腫瘤壞死因子α、白細(xì)胞介素類）發(fā)揮抗炎作用;通過調(diào)節(jié)蛋白激酶（ERK）信號通路、核因子κB（NF-κB）信號通路、腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）/沉默信息調(diào)節(jié)因子1（STRT1）信號通路、活性氧（ROS）-c-Jun N末端激酶1/2（JNK1/2）信號通路、哺乳動物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）/核糖體S6激酶1（S6K1）信號通路、磷脂酰肌醇-3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）信號通路等，起到抗炎作用;通過調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞（如巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞），防止炎癥反應(yīng)的發(fā)生。但DHA仍存在一些尚不明確的抗炎機(jī)制且缺乏相應(yīng)的臨床試驗，應(yīng)進(jìn)行深入研究，推進(jìn)其在臨床上的應(yīng)用。

關(guān)鍵詞 雙氫青蒿素;抗炎作用;作用機(jī)制;炎癥介質(zhì);信號通路;免疫細(xì)胞

青蒿是菊科植物，為黃花蒿Artemisia annua L.的干燥地上部分。青蒿素提取分離自中藥黃花蒿，是一種抗瘧藥物，其療效高、毒性較小[1]。雙氫青蒿素（Dihydroartemisinin，DHA）是青蒿素的主要活性代謝產(chǎn)物，可由青蒿素經(jīng)四氫硼鈉還原而成，具有獨(dú)特的過氧橋結(jié)構(gòu);其分子式為C12H24O5，分子量為284.35，標(biāo)準(zhǔn)命名為（3R，5a S，6R，8a S，9R，12S，12a，R）-八氫-3，6，9-三甲基-3，12-橋氧-12H-吡喃并[4，3-j]-1，2-苯并二氧七環(huán)-10（3H）-醇[2]。DHA具有吸收快、排泄和代謝迅速、分布廣、高效、低毒等優(yōu)點(diǎn)，其口服生物利用度較青蒿素大大提高，為青蒿素的10倍以上，抗瘧作用為青蒿素的4～8倍[3]。此外，經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)，DHA還具有抗腫瘤、抗炎、抗寄生蟲等多種藥理作用[4]。

炎癥反應(yīng)是由活組織受損引起的，是高等生物進(jìn)化的一種防御機(jī)制，其目的是定位并消除有害物質(zhì)，去除受損的組織成分，使機(jī)體開始愈合;然而，當(dāng)這種反應(yīng)不斷被觸發(fā)，隨著時間的推移，又會損害機(jī)體，引發(fā)嚴(yán)重的疾病，如肺損傷、癌癥等[5]。大量研究表明，DHA對多種炎癥具有良好的治療作用，但其作用機(jī)制尚未明確。因此，為了更好地了解DHA的抗炎作用，本文對DHA抗炎機(jī)制的研究進(jìn)展進(jìn)行總結(jié)，旨在為DHA的進(jìn)一步研究和應(yīng)用提供參考。

1 DHA對炎癥介質(zhì)的作用

炎癥反應(yīng)過程是通過釋放細(xì)胞和介質(zhì)來保護(hù)人體免受損害和疾病的侵襲，這些細(xì)胞和介質(zhì)可以抵抗外來物質(zhì)并有助于防止感染[5]。抑制炎癥介質(zhì)是治療急性或慢性炎癥性疾病的一種有效策略。

細(xì)胞因子作為細(xì)胞間相互作用的介質(zhì)，在炎癥性疾病的發(fā)生和維持中發(fā)揮著重要作用。迄今為止，DHA抗炎作用的研究大多集中于促炎細(xì)胞因子，包括腫瘤壞死因子α（TNF-α）、白細(xì)胞介素類（IL-1、IL-5、IL-6、IL-8、IL-17、IL-18、IL-22、IL-23）[6]。戴夕超等[7]采用γ射線對SD大鼠單次全肺照射15 Gy以構(gòu)建放射性肺損傷模型，對照射對照組大鼠給予等體積溶媒，對照射用藥組大鼠灌服DHA[劑量為60 mg/（kg·d）]進(jìn)行干預(yù)。結(jié)果顯示，照射用藥組大鼠血清、肺組織中TNF-α表達(dá)水平低于照射對照組，表明DHA能降低放射性肺損傷模型大鼠的血清以及肺組織中TNF-α表達(dá)，具有抑制炎癥細(xì)胞滲出、抗肺纖維化、抗炎的作用。王亞明等[8]研究發(fā)現(xiàn)，DHA對四氯化碳（CCl4）誘導(dǎo)的肝纖維化模型小鼠的抗肝纖維化作用是通過降低肝組織中轉(zhuǎn)化生長因子β1（TGF-β1）和TNF-α的水平來實現(xiàn)的。吳蘋等[9]構(gòu)建了小鼠腎炎模型，經(jīng)酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）檢測發(fā)現(xiàn)，與正常對照組、脂多糖（LPS）組、LPS+腎勻漿組小鼠比較，治療組小鼠予以腹腔注射10 μL DHA（20 mg/kg）干預(yù)后其血清中炎癥因子TNF-α和IL-6水平明顯下降，腎臟的病理損傷得以改善，表明DHA可起到抗炎作用。易劍峰[10]采用DHA聯(lián)合布洛芬（2.24 mg/g DHA+0.05 mg/g布洛芬）對佐劑性關(guān)節(jié)炎（AIA）模型大鼠進(jìn)行治療，與布洛芬組（0.05 mg/g）比較，DHA聯(lián)合布洛芬組大鼠關(guān)節(jié)滑膜的IL-1β、TNF-α的表達(dá)水平顯著降低。劉江敏等[11]用0、50、100、200、400 mg/L的氧化苦參堿以及0、10、20、30、40 mg/L的DHA處理人角質(zhì)形成細(xì)胞HaCaT，通過檢測該細(xì)胞增殖及細(xì)胞因子的表達(dá)發(fā)現(xiàn)，隨DHA作用時間和濃度的增加可越明顯地抑制HaCaT細(xì)胞增殖，升高細(xì)胞中IL-4和IL-10的表達(dá)水平，并降低細(xì)胞中人干擾素γ、IL-17、IL-23的表達(dá)水平，表明DHA影響HaCaT細(xì)胞炎癥因子表達(dá)的作用機(jī)制可能是通過IL-23/IL-17軸來實現(xiàn)的。Lei等[12]研究發(fā)現(xiàn)，對葡聚糖硫酸鈉（DSS）致炎性腸?。↖BD）模型小鼠采用DHA（150 mg/kg）進(jìn)行干預(yù)治療，可改善小鼠的腹瀉和血便癥狀;與DSS組比較，DHA干預(yù)能使小鼠血清中TNF-α、IL-1β和IL-23表達(dá)水平以及腸道中TNF-α、IL-1β和IL-6表達(dá)水平均顯著降低，并能恢復(fù)其腸道上皮細(xì)胞黏附分子（EpCAM）和閉合蛋白（Claudins）的表達(dá)以及因DSS發(fā)生改變的腸道細(xì)菌數(shù)量，達(dá)到治療IBD的目的。劉少敏[13]以DSS誘導(dǎo)構(gòu)建IBD小鼠模型，并采取灌胃給藥DHA（150 mg/kg）進(jìn)行干預(yù)。結(jié)果顯示，與DSS模型組小鼠比較，DHA治療組小鼠的TNF-α、IL-1β表達(dá)水平顯著降低，IL-6表達(dá)水平有下降趨勢，表明DHA具有抗炎作用。李鵬飛等[14]采用超高分子量聚乙烯（UHMWPE）誘導(dǎo)小鼠巨噬細(xì)胞系RAW264.7細(xì)胞源性炎癥因子釋放，給予2.5、25、250 μmol/L的DHA干預(yù)后發(fā)現(xiàn)，細(xì)胞培養(yǎng)上清液中TNF-α、IL-1β及IL-6的表達(dá)水平均降低，而IL-10釋放均增加，并呈劑量依賴性。

巨噬細(xì)胞可通過過度產(chǎn)生炎癥介質(zhì)[包括一氧化氮（NO）和前列腺素E2（PGE2）]在炎癥中發(fā)揮重要作用[15]。炎癥介質(zhì)NO由誘導(dǎo)型一氧化氮合酶（iNOS）合成，是調(diào)節(jié)血管、神經(jīng)和免疫系統(tǒng)生物活性的重要分子;然而，在感染過程中，其過度釋放可導(dǎo)致靶組織的破壞[16]。Yin等[17]探討了DHA對內(nèi)皮細(xì)胞環(huán)氧化酶/PGE合成酶（PGES）/PGE2級聯(lián)和合成的調(diào)節(jié)作用，并通過以10、20、50 μmol/L的DHA處理小鼠主動脈內(nèi)皮細(xì)胞后發(fā)現(xiàn)，DHA能減少內(nèi)皮細(xì)胞中TNF-α、PGE2的表達(dá)，并抑制TNF-α或PGE2誘導(dǎo)的IL-6和IL-1β的上調(diào)，提示DHA在治療嬰兒血管疾病方面具有潛力。喻婉瑩等[18]研究發(fā)現(xiàn)，DHA對LPS誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞中TNF-α、IL-6、NO的釋放以及iNOS蛋白的表達(dá)具有抑制作用，從而發(fā)揮抗炎作用。

2 DHA對信號通路的作用

2.1 NF-κB信號通路

NF-κB/Rel家族成員作為二聚體轉(zhuǎn)錄因子，在調(diào)節(jié)細(xì)胞因子、生長因子和凋亡抑制劑的表達(dá)方面發(fā)揮著重要作用。NF-κB家族由5個相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子組成，包括Rel-C、NF-κB1（p50/p105）、NF-κB2（p52/p100）、Rel-A（p65）、Rel-B[19]。NF-κB的激活有兩條信號途徑，即經(jīng)典（典型）途徑和替代（非典型）途徑。在經(jīng)典途徑中，NF- κB/Rel蛋白可被NF-κB抑制蛋白（IκB）結(jié)合和抑制。經(jīng)典途徑的激活影響多種生物學(xué)過程，包括免疫反應(yīng)、炎癥反應(yīng)、應(yīng)激反應(yīng)、B細(xì)胞發(fā)育和淋巴器官生成[20-21]，而替代途徑依賴于IκB激酶（IKKα）的激活[22]。隋曉梅等[23]建立Wistar大鼠放射性肺炎模型，對治療組大鼠的雙肺采用6MV-X線直線加速器單次照射15 Gy，并給予60 mg/（kg·d）的DHA灌胃治療。結(jié)果顯示，DHA可通過調(diào)控NF-κB信號通路，對大鼠肺組織中細(xì)胞因子TNF-α、IL-6以及NF-κB的表達(dá)起到抑制作用，從而減輕炎癥，達(dá)到治療放射性肺炎的目的。Huang等[24]飼喂宮內(nèi)發(fā)育遲緩（IUGR）斷奶仔豬基礎(chǔ)日糧加80 mg/kg DHA，結(jié)果顯示，DHA可激活核因子E2相關(guān)因子2（Nrf2）對NF-κB途徑產(chǎn)生抑制，從而抑制LPS誘導(dǎo)的仔豬體內(nèi)炎性細(xì)胞浸潤、髓過氧化物酶活性上升、氧化應(yīng)激以及IL-1β、TNF-α和IL-6的產(chǎn)生，降低LPS誘導(dǎo)的炎癥反應(yīng)。Yang等[25]將大鼠分為生理鹽水對照組（NS組）、博萊霉素組、地塞米松組和DHA-1、DHA-2、DHA-3組，博萊霉素組大鼠給予氣管內(nèi)滴注博萊霉素，NS組大鼠采用等量生理鹽水代替博萊霉素，DHA-1、DHA-2、DHA-3組大鼠分別腹腔滴注DHA（25、50、100 mg/kg）并聯(lián)合氣管內(nèi)滴注博萊霉素。結(jié)果顯示，與博萊霉素組比較，DHA-1、DHA-2、DHA-3組大鼠肺內(nèi)中性粒細(xì)胞和巨噬細(xì)胞的數(shù)量顯著減少，肺組織中TGF-β1、TNF-α、IL-1、α-平滑肌肌動蛋白（α-SMA）和NF-κB的表達(dá)水平及膠原合成水平均顯著降低。Liu等[26]采用20 mg/（kg·d）的DHA預(yù)處理雄性C57BL/6小鼠2天，然后經(jīng)腹腔注射LPS（10 mg/kg）構(gòu)建膿毒性急性腎損傷（AKI）小鼠模型，結(jié)果顯示，DHA可使小鼠的NF-κB信號通路失活，并抑制LPS激發(fā)的氧化應(yīng)激反應(yīng)。尤燕舞等[27]以MRL/lpr小鼠構(gòu)建狼瘡模型，對DHA治療狼瘡腎炎的作用機(jī)制進(jìn)行了研究。該研究將模型小鼠分為正常對照組、DHA組、潑尼松組、DHA+潑尼松組，分別給予1 mL生理鹽水、DHA 60? ?mg/（kg·d）、潑尼松9 mg/（kg·d）、DHA 60 mg/（kg·d）+潑尼松9 mg/（kg·d）灌胃。經(jīng)反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)及免疫組織化學(xué)染色法檢測發(fā)現(xiàn)，經(jīng)DHA治療后的小鼠腎皮質(zhì)中不規(guī)則趨化因子（FKN）、NF-κB p65 mRNA和蛋白的表達(dá)水平均降低，與潑尼松治療的效果相似，且兩者聯(lián)用效果更顯著;其作用機(jī)制是通過NF-κB信號通路來調(diào)節(jié)FKN的表達(dá)。董妍君等[28]選擇BXSB小鼠構(gòu)建狼瘡腎炎模型，通過免疫熒光檢測發(fā)現(xiàn)，經(jīng)低、中、高劑量（5、25、125 mg/kg）的DHA治療后，小鼠腎組織中NF-κB活化及p65蛋白表達(dá)水平均有所下降，表明DHA能調(diào)控NF-κB信號通路，并可有效抑制腎組織中多種免疫球蛋白（如IgG、IgA、IgM）及補(bǔ)體（如C3、C1q）的沉積。杜成成等[29]建立了AIA和膠原誘導(dǎo)性關(guān)節(jié)炎（CIA）大鼠模型，給予DHA 30 mg/（kg·d）干預(yù);另外，體外培養(yǎng)RAW264.7巨噬細(xì)胞系，分別給予不同濃度（0.5、1、2、4、8 μmol/L）DHA處理。結(jié)果顯示，DHA能夠使AIA/CIA模型大鼠的足腫脹度減輕，降低AIA模型大鼠脾臟指數(shù)和胸腺指數(shù)以及血清中IL-6 水平，并降低關(guān)節(jié)炎評分指數(shù);此外，DHA能抑制RAW264.7細(xì)胞活力以及NF-κB p65向細(xì)胞核內(nèi)轉(zhuǎn)位，其抗炎機(jī)制可能與NF-κB信號通路有關(guān)。

蛋白激酶B（Akt）能調(diào)控下游信號分子NF-κB的活性，研究發(fā)現(xiàn)，NF-κB表達(dá)的增強(qiáng)是通過活化后的Akt調(diào)控多種轉(zhuǎn)錄因子來實現(xiàn)的[30]。許赤多等[31]對DHA誘導(dǎo)人類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（RA）滑膜細(xì)胞凋亡的信號機(jī)制進(jìn)行研究，通過培養(yǎng)RA患者膝關(guān)節(jié)滑膜組織中關(guān)節(jié)滑膜細(xì)胞，并加入不同濃度（2.5、5、10 μmol/L）的DHA進(jìn)行處理。經(jīng)流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡、Western blot法半定量分析Akt活化以及電泳遷移率變動法檢測NF-κB活性后，發(fā)現(xiàn)DHA能抑制NF-κB活化以及Akt 473位絲氨酸磷酸化，表明DHA可通過Akt/NF-κB信號通路誘導(dǎo)RA滑膜細(xì)胞凋亡，從而起到抗炎作用。

NF-κB是Toll樣受體4（TLR4）信號通路中的下游信號分子之一，TLR4/NF-κB信號通路的激活可通過控制多種細(xì)胞因子的表達(dá)在多種炎癥疾病中發(fā)揮重要作用。覃萬翔[32]等以LPS誘導(dǎo)BV-2小膠質(zhì)細(xì)胞使其活化來構(gòu)建神經(jīng)炎癥模型，并考察不同濃度（0.5、1、2、4? ? ? ? ?μmol/L）DHA對BV-2細(xì)胞的作用。結(jié)果顯示，DHA能抑制活化的BV-2細(xì)胞中iNOS、IL-1β、IL-6、TNF-α mRNA的表達(dá)，使促炎因子IL-1β、IL-6、TNF-α的釋放以及TLR4蛋白和胞質(zhì)內(nèi)IκBα的表達(dá)減少，抑制NF-κB的入核;其作用機(jī)制可能是通過調(diào)控TLR4/NF-κB信號通路從而抑制促炎因子的釋放，進(jìn)而發(fā)揮抗炎作用。

絲裂原活化蛋白激酶（MAPK）與多種細(xì)胞外刺激誘導(dǎo)炎癥的信號級聯(lián)有關(guān)，其中包括產(chǎn)生刺激性介質(zhì);MAPK家族由3個主要部分組成，包括細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶（ERK1/2或p42/p44）、c-Jun N端激酶（JNK/SAPK）和p38 MAPK[33]?；罨腗APK可結(jié)合和刺激其他激酶靶點(diǎn)，轉(zhuǎn)移到細(xì)胞核內(nèi)并激活促炎基因的轉(zhuǎn)錄，MAPK信號通路的下游部分之一即為NF-κB[33]。魏強(qiáng)等[34]研究了低、高劑量組[25、50 mg/（kg·d）]DHA對銀屑病樣模型小鼠皮膚炎癥反應(yīng)的作用及其機(jī)制。結(jié)果顯示，DHA對小鼠紅斑、銀屑和皮膚增厚產(chǎn)生了明顯的抑制作用，并隨劑量增大而加強(qiáng);同時，DHA還能明顯縮短釘狀突起，減少炎癥細(xì)胞的浸潤。該研究還發(fā)現(xiàn)，DHA能降低小鼠皮損組織中IL-1β、IL-18、IL-6以及CXC型趨化因子配體1（CXCL-1）的表達(dá)水平，并抑制NF-κB（p65）和磷酸化p38 MAPK的表達(dá)，且呈劑量依賴性;其作用機(jī)制可能是通過MAPK/NF-κB信號通路，來抑制角質(zhì)形成細(xì)胞的過度增殖及其所分泌的細(xì)胞因子。

2.2 ERK信號通路

ERK級聯(lián)可被多種細(xì)胞外因子激活（如生長因子、激素和細(xì)胞應(yīng)激），以誘導(dǎo)增殖和分化等細(xì)胞過程[35]。歐利等[36]使用甲型流感病毒吸附BEAS-2B細(xì)胞，分別加入低、中、高濃度（12.5、25、50 μmol/L）的DHA，觀察TNF-α、IL-6的mRNA和蛋白以及磷酸化細(xì)胞外調(diào)節(jié)磷酸化蛋白激酶（p-ERK）蛋白表達(dá)水平的變化。結(jié)果顯示，DHA可通過ERK信號通路抑制TNF-α、IL-6 mRNA和TNF-α、IL-6、p-ERK蛋白的表達(dá)，并呈劑量依賴性。Wei等[37]研究了DHA對卵清蛋白（OVA）誘導(dǎo)的哮喘模型小鼠體內(nèi)炎癥介質(zhì)的調(diào)節(jié)作用，并以30 mg/kg 劑量的DHA對小鼠灌胃給藥，通過Western blot分析表明DHA能抑制p38 MAPK和ERK的激活。該研究還表明，DHA可通過抑制p38 MAPK和ERK途徑來減輕OVA誘導(dǎo)的哮喘，提示DHA對過敏性炎癥可能有治療作用。

2.3 AMPK/SIRT1信號通路

腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）是一種重要的能量傳感器，可參與多種細(xì)胞代謝過程：可激活A(yù)MPK，表現(xiàn)為AMPK磷酸化;可抑制脂肪生成，促進(jìn)脂肪酸β-氧化，進(jìn)而改善肝臟脂肪變性[38]。沉默信息調(diào)節(jié)因子1（SIRT1）是一種參與調(diào)節(jié)糖和脂代謝穩(wěn)態(tài)的關(guān)鍵酶，具有調(diào)節(jié)細(xì)胞分化和凋亡等功能[38]。AMPK和SIRT1在生理和病理環(huán)境中可相互調(diào)節(jié)，并在生理和病理環(huán)境中預(yù)防炎癥的發(fā)生[39]。Zhao等[40]在IUGR仔豬的日糧中添加80 mg/kg DHA，與未添加DHA的體質(zhì)量正常的仔豬比較，IUGR仔豬AMPK/SIRT1信號通路的相關(guān)基因表達(dá)活性增加，且炎癥因子TNF-α、IL-1β、IL-6相關(guān)基因表達(dá)受到抑制。趙永偉等[41]探究了在基礎(chǔ)日糧中添加80 mg/kg DHA對斷奶仔豬肝臟炎癥以及脂代謝的影響，結(jié)果顯示，LPS誘導(dǎo)的肝臟炎癥模型斷奶仔豬經(jīng)DHA治療后其肝臟中TG、IL-1β、IL-6、TNF-α、游離脂肪酸（NEFA）水平降低，脂肪酸合成酶（FAS）活力受到抑制，固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白1c（SREBP-1c）和乙酰輔酶A羧化酶β（ACCβ）mRNA表達(dá)增加，而肉堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶1（CPT-1）、SIRT1、AMP依賴的AMPKα和硬脂酰輔酶A脫氫酶（SCD）mRNA表達(dá)減少，表明DHA能通過AMPK/SIRT1信號通路來減輕LPS誘導(dǎo)的肝臟炎癥以及脂代謝異常。

2.4 ROS-JNK1/2信號通路

活性氧（ROS）是極端條件下的早期自噬誘導(dǎo)物，JNK1/2是ROS的下游信號分子，ROS能通過抑制JNK1/2的特異性磷酸酶來促進(jìn)JNK1/2的活化[42]。Zhang等[42]構(gòu)建了大鼠肝纖維化模型，分別給予劑量為3.5、7、14 mg/kg的DHA進(jìn)行干預(yù)治療，結(jié)果顯示，DHA能抑制大鼠的炎癥反應(yīng)，改善體內(nèi)肝纖維化的炎性微環(huán)境，抑制炎癥因子的產(chǎn)生和釋放，保護(hù)肝臟免受CCl4損傷，其強(qiáng)抗炎作用可能有助于其發(fā)揮抗纖維化作用。該研究還發(fā)現(xiàn)，DHA在大鼠肝纖維化中的抗炎作用是通過ROS-JNK1/2信號通路依賴性自噬實現(xiàn)。張自力[43]分離原代肝星狀細(xì)胞（HSC）進(jìn)行體外培養(yǎng)，采用血小板源性生長因子-BB（PDGF-BB）刺激使其活化，然后給予不同濃度（5、10、20 μmol/L）的DHA進(jìn)行處理。結(jié)果顯示，DHA能抑制活化型HSC的合成以及炎癥因子NF-κB、TNF-α、炎性小體NLRP3、IL-1β、IL-4、IL-6、IL-8等的釋放，該過程可能是通過調(diào)控ROS-JNK1/2信號通路，促進(jìn)HSC的自噬，從而實現(xiàn)抗炎作用。

2.5 mTOR/S6K1信號通路

哺乳動物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）能調(diào)節(jié)核糖體S6激酶（如S6K1、S6K2）和真核起始因子4E（eIF4E）的活性，其中，mTOR/S6K1是一種重要的細(xì)胞生長協(xié)調(diào)通路，在哺乳動物體內(nèi)起著自噬負(fù)調(diào)控的作用[44]。Xi等[45]研究發(fā)現(xiàn)，采用DHA（0～15 μmol/L）處理IgA腎?。↖gAN）人系膜細(xì)胞，可顯著抑制細(xì)胞增殖，下調(diào)mTOR/S6K1信號通路的磷酸化水平，并增加自噬相關(guān)蛋白LC3B的表達(dá)，提示DHA在IgAN中具有抗炎和自噬促進(jìn)作用。

2.6 PI3K/Akt信號通路

磷脂酰肌醇-3-激酶（PI3K）/Akt信號通路可被多種細(xì)胞刺激或毒性損傷激活，調(diào)節(jié)細(xì)胞的轉(zhuǎn)錄、翻譯、增殖、生長和存活等基本功能;PI3K催化細(xì)胞膜上磷脂酰肌醇-3，4，5-三磷酸（PIP3）的生成，繼而由PIP3充當(dāng)?shù)诙攀?，幫助激活A(yù)kt;Akt一旦激活，就可以通過磷酸化參與凋亡、蛋白質(zhì)合成、代謝等來控制關(guān)鍵細(xì)胞過程[46]。Gao等[47]以LPS誘導(dǎo)構(gòu)建了神經(jīng)炎癥小鼠模型，發(fā)現(xiàn)經(jīng)DHA（40 mg/kg）干預(yù)后的模型小鼠比LPS組小鼠在行為學(xué)上有所改善，其膠質(zhì)纖維酸性蛋白（GFAP）、IL-1β、IL-6、磷酸化PI3K（p-PI3K）/PI3K、TNF和磷酸化蛋白激酶B（p-Akt）/Akt的表達(dá)水平均降低。該研究表明，DHA能夠使成年小鼠的PI3K/Akt信號通路失活，防止LPS致海馬組織損傷（例如神經(jīng)炎癥介導(dǎo)的神經(jīng)退行性疾?。?。

3 DHA對免疫細(xì)胞的調(diào)節(jié)作用

免疫細(xì)胞包括淋巴細(xì)胞、單核/巨噬細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞、肥大細(xì)胞、粒細(xì)胞等，其通過釋放細(xì)胞因子并對其作出反應(yīng)來相互交流;細(xì)胞因子作用于其他細(xì)胞，產(chǎn)生對外來入侵的免疫反應(yīng)[48-49]。張楊等[50]使用大腸埃希菌（E-coli）誘導(dǎo)構(gòu)建了ALI大鼠模型，治療組大鼠采用低、中、高劑量（5、15、25 mg/kg）的DHA灌胃給藥。結(jié)果顯示，E-coli組大鼠巨噬細(xì)胞的極化以M1型為主，而治療組大鼠巨噬細(xì)胞的極化發(fā)生逆轉(zhuǎn)——以M2型為主;血清及支氣管肺泡灌洗液中IL-10水平上升，TNF-α水平下降;肺泡巨噬細(xì)胞表型以重組人精氨酸酶1（Arg1）、IL-1受體拮抗劑（IL-1ra）mRNA的表達(dá)為主。該研究表明，DHA可以減輕ALI炎癥，調(diào)控巨噬細(xì)胞的極化可能是其作用機(jī)制。閆思超[51]構(gòu)建唑酮（OXA）和2，4，6-三硝基苯磺酸（TNBX）誘導(dǎo)的小鼠IBD模型，以地塞米松磷酸鈉給藥劑量為1 mg/（kg·d）注射作為陽性對照，考察不同劑量DHA[4、8、16 mg/（kg·d）]對其的影響。結(jié)果表明，DHA能減少模型小鼠結(jié)腸組織淋巴細(xì)胞的浸潤，縮小結(jié)腸組織纖維化的面積，并調(diào)節(jié)CD4+T細(xì)胞亞群平衡，從而緩解OXA和TNBX誘導(dǎo)的腸炎。Zhang等[52]研究發(fā)現(xiàn)，弓形蟲感染后小鼠血清中IL-17A、TNF-α、IL-22和IL-5水平顯著升高，經(jīng)DHA干預(yù)后可抑制上述細(xì)胞因子的表達(dá)，表明DHA可有效調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)，防止炎癥反應(yīng)的發(fā)生。該研究還發(fā)現(xiàn)，DHA可促進(jìn)瘧原蟲感染時小鼠脾臟CD8+T細(xì)胞的生成，增加小鼠脾臟和循環(huán)中的自然殺傷細(xì)胞和自然殺傷T細(xì)胞以及炎性細(xì)胞因子分泌，通過促進(jìn)健康和感染小鼠的細(xì)胞免疫即CD8+T細(xì)胞和Th細(xì)胞的增殖并且抑制B細(xì)胞反應(yīng)來調(diào)節(jié)宿主的免疫應(yīng)答，多途徑發(fā)揮抗炎作用。

4 其他

Xu等[53]基于法尼醇X受體（FXR）作為治療酒精性肝病（ALD）的潛在靶點(diǎn)，探究了DHA對ALD的影響及其作用機(jī)制。該研究通過構(gòu)建酒精性肝損傷大鼠模型，采用7 mg/kg的DHA腹腔注射，并分別聯(lián)合谷甾酮（10 mg/kg）和奧苯甲酸（30 mg/kg）進(jìn)行治療。結(jié)果表明，DHA能抑制酒精性肝損傷大鼠肝臟FXR的表達(dá)和活性，降低其谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）、堿性磷酸酶（ALP）和乳酸脫氫酶（LD）的表達(dá)，起到了改善肝損傷以及抑制炎癥基因表達(dá)和炎癥細(xì)胞浸潤的作用。

5 結(jié)語

青蒿素及其衍生物是防治瘧疾最重要和最有影響力的一類藥物，是中醫(yī)藥獻(xiàn)給世界的一份“禮物”[54]。DHA作為青蒿素重要的衍生物之一，其良好的抗瘧作用已在臨床上得到充分體現(xiàn);此外，對于DHA其他的藥理作用的研究，如抗腫瘤、抗炎、抗纖維化、抗紅斑狼瘡等已成為當(dāng)今熱點(diǎn)。研究表明，DHA能對多種炎癥有治療作用，如肺[7]、肝[41]和腎[9]相關(guān)炎癥以及關(guān)節(jié)炎[10]、神經(jīng)炎癥[47]等。本文通過歸納大量研究認(rèn)為，DHA能夠通過不同的信號通路調(diào)節(jié)炎癥因子的水平來起到抗炎作用，如ERK信號通路、NF-κB信號通路、AMPK/STRT1信號通路、ROS-JNK1/2信號通路、mTOR/S6K1信號通路、PI3K/Akt信號通路等。雖然目前對DHA抗炎作用機(jī)制的研究達(dá)到了細(xì)胞水平，但有一些抗炎的作用機(jī)制尚不明確，仍停留在基礎(chǔ)性研究階段，尚未進(jìn)行大量的臨床試驗，DHA的臨床治療效果仍然是一個未知數(shù)。此外，對于DHA在抗炎方面能否具有高選擇性以及較低的副作用也值得進(jìn)一步研究。在今后的研究中，可對DHA在抗炎方面的作用機(jī)制進(jìn)行深入研究，開發(fā)療效高、選擇性高、不良反應(yīng)小、多途徑的新型抗炎藥，推進(jìn)其在臨床上的應(yīng)用。

參考文獻(xiàn)

[ 1 ] 劉桂梅，蔡楠，謝靜，等.青蒿素及其衍生物用于治療新型冠狀病毒肺炎的探討[J].藥物評價研究，2020，43（4）：606-612.

[ 2 ] SANDEEP C，NIRAJ K N，MOHIT K T，et al. New orally active diphenylmethyl-based ester analogues of dihydro- artemisinin：dynthesis and antimalarial assessment against multidrug-resistant plasmodium yoelii nigeriensis in mice[J]. Bioorg Med Chem Lett，2016，26（6）：1536-1541.

[ 3 ] 謝相紅，閔瑤，劉璐，等.雙氫青蒿素抗腫瘤作用機(jī)制的研究進(jìn)展[J].吉林醫(yī)藥學(xué)院學(xué)報，2020，41（2）：136-138.

[ 4 ] 付巖松，李春宇，鐘越，等.雙氫青蒿素的研究進(jìn)展[J].吉林醫(yī)藥學(xué)院學(xué)報，2018，39（4）：292-294.

[ 5 ] FERRERO-MILIANI L，NIELSEN O，ANDERSEN P， et al. Chronic inflammation：importance of NOD2 and NALP3 in interleukin-1β generation[J]. Clin Exp Immunol，2007，147（2）：227-235.

[ 6 ] KIDD B L，URBAN L A. Mechanisms of inflammatory pain[J]. Br J Anaesth，2001，87（1）：3-11.

[ 7 ] 戴夕超，杜秀平，張西志，等.雙氫青蒿素對早期放射性肺損傷大鼠TNF-α表達(dá)的影響[J].中華腫瘤防治雜志，2010，17（10）：728-731.

[ 8 ] 王亞明，王靜，楊安，等.雙氫青蒿素對肝纖維化小鼠TGF- β1和TNF-α的影響[J].職業(yè)與健康，2020，36（9）：1193- 1196.

[ 9 ] 吳蘋，李啟杰，夏增亮，等.小鼠腎炎模型的制備及雙氫青蒿素對其炎癥因子釋放的影響[J].華西醫(yī)學(xué)，2011，26（7）：1028-1031.

[10] 易劍峰.布洛芬與雙氫青蒿素配伍對佐劑性關(guān)節(jié)炎大鼠關(guān)節(jié)滑膜IL-1β、TNF-α表達(dá)的影響[J].宜春學(xué)院學(xué)報，2009，31（2）：63-64.

[11] 劉江敏，金琳博，于然，等.雙氫青蒿素和氧化苦參堿對HaCaT細(xì)胞增殖及細(xì)胞因子表達(dá)的影響[J].延邊大學(xué)醫(yī)學(xué)學(xué)報，2019，42（2）：95-98.

[12] LEI Z L，YANG Y H，LIU S M，et al. Dihydroartemisinin ameliorates dextran sulfate sodium induced inflammatory bowel diseases in mice[J]. Bioorg Chem，2020，100：103915.

[13] 劉少敏. EpCAM基因缺失誘發(fā)肝腸疾病及雙氫青蒿素改善炎癥性腸病的機(jī)制研究[D].廣州：廣東藥科大學(xué)，2019.

[14] 李鵬飛，曹曉瑞，楊重飛，等.二氫青蒿素對超高分子量聚乙烯顆粒誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞源性炎性因子釋放的影響[J].現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展，2014，14（19）：3601-3605.

[15] 陳金龍，張月巧，袁婭，等.植物多糖通過NF-κB信號通路對巨噬細(xì)胞的免疫調(diào)節(jié)作用研究進(jìn)展[J].食品科學(xué)，2015，36（23）：288-294.

[16] SIBI G，RABINA S. Inhibition of pro-inflammatory me- diators and cytokines by chlorella vulgaris extracts[J]. Pharmacognosy Res，2016，8（2）：118-122.

[17] YIN J，XIA W W，ZHANG Y，et al. Role of dihydroartemisinin in regulating prostaglandin E2 synthesis cascade and inflammation in endothelial cells[J]. Heart Vessels，2018，33（11）：1411-1422.

[18] 喻婉瑩，闞偉娟，于鵬霞，等.青蒿素和二氫青蒿素的抗炎作用及機(jī)制[J].中國中藥雜志，2012，37（17）：2618-2621.

[19] ZHAO N，WANG R，ZHOU L，et al. MicroRNA-26b suppresses the NF-κB signaling and enhances the chemosensitivity of hepatocellular carcinoma cells by targeting TAK1 and TAB3[J]. Mol Cancer，2014，13（2）：35-46.

[20] LV Y N，XU Q，Mao Y，at el. TRAF3 of blunt snout bream participates in host innate immune response to pathogenic bacteria via NF-κB signaling pathway[J]. Fish Shellfish Immunol，2020，104：592-604.

[21] BETH T C，F(xiàn)RANCES L B. The NF-κB signalling pathway regulates GLUT6 expression in endometrial cancer[J].Cell Signall，2020，73：109688.

[22] 綦鈺瑩，齊雯麗，鄭衛(wèi)紅.心肌缺血-再灌注損傷的促損傷性與保護(hù)性信號通路研究進(jìn)展[J].生命的化學(xué)，2020，40（6）：911-918.

[23] 隋曉梅，朱勤偉，潘紀(jì)紅，等.雙氫青蒿素對大鼠放射性肺炎的治療作用[J].濰坊醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2016，38（5）：338- 341.

[24] HUANG X T，LIU W，ZHOU Y，et al. Dihydroartemisinin attenuates lipopolysaccharide-induced acute lung injury in mice by suppressing NF-κB signaling in an Nrf2-dependent manner[J]. Int J Mol Med，2019，44（6）：2213-2222.

[25] YANG D X，YUAN W D，LV C J，et al. Dihydroartemi- sinin supresses inflammation and fibrosis in bleomycine- induced pulmonary fibrosis in rats[J]. Int J Clin Exp Pathol，2015，8（2）：1270-1281.

[26] LIU X H，LU J D，LIAO Y J，et al. Dihydroartemisinin attenuates lipopolysaccharide-induced acute kidney injury by inhibiting inflammation and oxidative stress[J]. Biomed Pharmacother，2019，117：109070.

[27] 尤燕舞，廖品琥，楊發(fā)奮，等.雙氫青蒿素對狼瘡模型MRL/lpr小鼠腎皮質(zhì)Fractalkine表達(dá)的調(diào)節(jié)作用研究[J].免疫學(xué)雜志，2014，30（7）：617-622.

[28] 董妍君，李衛(wèi)東，屠呦呦，等.雙氫青蒿素對BXSB小鼠狼瘡腎炎的作用及機(jī)制研究[J].中國藥理學(xué)通報，2003，19（10）：1125-1128.

[29] 杜成成，譚余慶，沈建英，等.雙氫青蒿素對兩種類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎模型的影響及機(jī)制[J].中國實驗方劑學(xué)雜志，2019，25（10）：48-56.

[30] 王海燕，覃慧林，張永峰，等.木瓜三萜對佐劑性關(guān)節(jié)炎大鼠關(guān)節(jié)滑膜組織中Akt，NF-κB和促炎因子的表達(dá)影響[J].中國實驗方劑學(xué)雜志，2017，23（5）：141-146.

[31] 許赤多，劉純，趙玲.二氫青蒿素通過Akt信號途徑誘導(dǎo)類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎滑膜細(xì)胞凋亡[J].中國醫(yī)師雜志，2009，30（7）：889-891.

[32] 覃萬翔.雙氫青蒿素對LPS誘導(dǎo)的小膠質(zhì)細(xì)胞炎癥反應(yīng)的抑制作用及機(jī)制研究[D].重慶：重慶醫(yī)科大學(xué)，2018.

[33] SUN P，ZHOU K W，WANG S，et al. Involvement of MAPK/NF-κB signaling in the activation of the cholinergic anti-inflammatory pathway in experimental colitis by chronic vagus nerve stimulation[J]. PLoS One，2013，8（8）：e69424.

[34] 魏強(qiáng)，金權(quán)鑫，金琳博，等.雙氫青蒿素通過抑制角質(zhì)形成細(xì)胞的增殖和促炎因子的產(chǎn)生改善小鼠銀屑病樣皮膚炎癥[J].中國免疫學(xué)雜志，2020，36（5）：543-548.

[35] ARKUN Y，YASEMI M. Dynamics and control of the ERK signaling pathway：sensitivity，bistability，and oscillations[J]. PLoS One，2018，13（4）：e0195513.

[36] 歐利，秦克，楊子宵，等.雙氫青蒿素對甲型流感病毒H1N1誘導(dǎo)人支氣管上皮細(xì)胞TNF-α和IL-6表達(dá)的影響及機(jī)制研究[J].四川大學(xué)學(xué)報（醫(yī)學(xué)版），2020，51（2）：171-177.

[37] WEI M M，XIE X X，CHU X，et al. Dihydroartemisinin suppresses ovalbumin-induced airway inflammation in a mouse allergic asthma model[J]. Immunopharmacol Immunotoxicol，2013，35（3）：382-389.

[38] RUDERMAN N B，XU X J，NELSON L，et al. AMPK and SIRT1：a long-standing partnership[J]. Am J Physiol Endocrinol Metab，2010，298（4）：E751-E760.

[39] ZHU Y，LIU R，SHEN Z，et al. Combination of luteolin and lycopene effectively protect against the “two-hit” in NAFLD through Sirt1/AMPK signal pathway[J]. Life Sci，2020，256：117990.

[40] ZHAO Y W，NIU Y，HE J T，et al. Effects of dietary dihydroartemisinin supplementation on growth performance，hepatic inflammation，and lipid metabolism in weaned piglets with intrauterine growth retardation[J]. Anim Sci J，2020，91（1）：e13363.

[41] 趙永偉，牛玉，何進(jìn)田，等.雙氫青蒿素對脂多糖誘導(dǎo)的斷奶仔豬肝臟炎癥以及脂代謝的影響[J].中國中藥雜志，2020，45（1）：202-208.

[42] ZHANG Z L，GUO M，ZHAO S F，et al. ROS-JNK1/2-dependent activation of autophagy is required for the induction of anti-inflammatory effect of dihydroartemisinin in liver fibrosis[J]. Free Radic Biol Med，2016，101：272-283.

[43] 張自力.雙氫青蒿素調(diào)控肝星狀細(xì)胞自噬與衰老發(fā)揮抗肝纖維化作用的分子機(jī)制研究[D].南京：南京中醫(yī)藥大學(xué)，2019.

[44] HOLZ M K，BALLIF B A，GYGI S P，et al. mTOR and S6K1 mediate assembly of the translation preinitiation complex through dynamic protein interchange and ordered phosphorylation events[J]. Cell，2005，123（4）：569-580.

[45] XI M，LIU D，TANG X F，et al. Dihydroartemisinin inhi- bits the proliferation of IgAN mesangial cells through the mTOR signaling pathway[J]. Int Immunopharmacol，2020，80：106125.

[46] LIU Y，ZHU J Q，JIN X H，et al. Up-regulation of miR- 146b-3p protects septic mice with acute respiratory distress syndrome by inhibiting PI3K/AKT signaling pathway[J]. Springer US，2020，52（4）：229-236.

[47] GAO Y T，CUI M M，ZHONG S J，et al. Dihydroartemi- sinin ameliorates LPS-induced neuroinflammation by? ? inhibiting the PI3K/AKT pathway[J]. Metab Brain Dis，2020，35（4）：661-672.

[48] 林穎韜，陳伶莉，胡雪峰.免疫細(xì)胞的種類、功能及相關(guān)疾病概述[J].生物學(xué)教學(xué)，2020，45（4）：77-80.

[49] 王玉亮，王峰，耿潔.細(xì)胞因子與細(xì)胞因子風(fēng)暴[J].天津醫(yī)藥，2020，48（6）：494-499.

[50] 張楊，王榮麗.雙氫青蒿素對急性肺損傷大鼠炎癥機(jī)制的研究[J].臨床肺科雜志，2020，25（6）：828-833.

[51] 閆思超.雙氫青蒿素對小鼠炎癥性腸病模型藥效作用及調(diào)節(jié)Th/Treg平衡的機(jī)制研究[D].北京：中國中醫(yī)科學(xué)院，2019.

[52] ZHANG T，ZHANG Y W，JIANG N，et al. Dihydroartemisinin regulates the immune system by promotion of CD8+T lymphocytes and suppression of B cell respon- ses[J]. Sci China Life Sci，2020，63（5）：737-749.

[53] XU W X，LU C F，YAO L，et al. Dihydroartemisinin protects against alcoholic liver injury through alleviating hepatocyte steatosis in a farnesoid Ⅹ receptor-dependent manner[J]. Toxicol Appl Pharmacol，2017，315：23-34.

[54] WANG J G，XU C C，WONG Y K，et al. Artemisinin，the magic drug discovered from traditional Chinese medicine[J]. Engineering，2019，5（1）：32-39.

（收稿日期：2020-11-11 修回日期：2021-03-29）

（編輯：羅 瑞）