血清MALAT1、ENA-78、HE4表達情況與子宮內(nèi)膜異位癥進展的關系研究

李鳳梅

（鄭州大學附屬鄭州中心醫(yī)院婦產(chǎn)科 河南鄭州 450007）

子宮內(nèi)膜異位癥（Endometriosis,EMs）簡稱內(nèi)異癥，在臨床上是一種發(fā)病率奇高的婦科疾病，其發(fā)病的病機并不明確。目前，EMs已成為婦女常見病和多發(fā)病，發(fā)病率逐年上升，所占比例超過普通婦科手術的30%[1]。發(fā)病原因有多種假說，如化生內(nèi)膜、良性轉(zhuǎn)移及遺傳因素等。EMs常表現(xiàn)為痛經(jīng)、下腹部疼痛等，對婦女健康及生活質(zhì)量都產(chǎn)生了嚴重影響，是發(fā)生不育癥的一個主要因素[2～3]。目前，EMs的具體發(fā)病原因仍不明確，其發(fā)病多樣且廣泛，已成為當下的難治之癥[4～5]。在臨床上治療該病的方法較多，常見通過手術輔助藥物進行治療，但是效果并不理想，預后復發(fā)率較高，所以早期診斷及干預治療是提高患者生存率的有效手段。如何簡單有效地對該病進行診斷有著十分重要的臨床意義，但是一般通過單一標記物進行診斷時，其敏感性及特異性存在一定問題，本研究對血清中的ENA-78、HE4及MALAT1因子水平進行研究。現(xiàn)報道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料 隨機選取2017年4月～2019年10月來我院就診的EMs患者46例為觀察組，年齡25～35歲，平均（29.12±3.29）歲；平均體質(zhì)量指數(shù)（23.92±1.33）kg/m2。根據(jù)美國生育學會的EMs的分期準則對觀察組患者進行劃分，輕度患者（Ⅰ～Ⅱ度）21例，重度患者（Ⅲ～Ⅳ度）25例，輕度患者與重度患者的年齡、體質(zhì)量指數(shù)之間差異不存在統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。另外選取同期來我院體檢的46例正常健康婦女為對照組，年齡25～36歲，平均（29.45±3.78）歲；平均體質(zhì)量指數(shù)（23.55±1.69）kg/m2。觀察組與對照組的年齡、體質(zhì)量指數(shù)之間差異不存在統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。所有研究對象均簽署知情同意書，并經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學倫理委員會審核通過。

1.2 入組標準 （1）納入標準：經(jīng)過超聲及臨床綜合檢查確診為EMs患者；依從性較好，能夠有效配合完成各項檢查的患者；患者或家屬已經(jīng)簽署知情同意書者。（2）排除標準：合并有心、肝、腎等重要臟器嚴重衰竭者；各種其他對本次研究可能會產(chǎn)生負面作用的疾病者；自身存在免疫性或血液方面疾病者；3個月內(nèi)存在激素類藥物使用史者。

1.3 觀察指標 取兩組患者清晨空腹靜脈血，離心后，取上清液，采用酶聯(lián)免疫法（ELLSA）對患者血清中ENA-78、HE4水平進行檢測。按照血清總核糖核酸（RNA）提取試劑盒的操作規(guī)范對血清中RNA進行提取，對其中轉(zhuǎn)錄因子MALAT1的含量進行測定。實驗過程包括包被、加樣、加酶標抗體、顯色劑終止反應過程，按廠家操作規(guī)范進行操作。結果判定標準[4～5]：（1）ENA-78＞1.0 ng/ml判定為陽性；（2）HE4＞42 pmol/L判定為陽性；（3）MALAT1＜0.65 U/ml判定為陽性；（4）平行聯(lián)合檢測判定，不同檢測方法中，任何一項出現(xiàn)陽性，即判定為陽性；（5）系列聯(lián)合檢測，幾項檢測方法均出現(xiàn)陽性結果時，判定為陽性。

1.4 統(tǒng)計學方法 數(shù)據(jù)處理采用SPSS19.0統(tǒng)計學軟件，計數(shù)資料以%表示，采用χ2檢驗，計量資料以（±s）表示，采用t檢驗。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 兩組ENA-78、HE4與MALAT1水平差異 觀察組ENA-78（t=14.105，P=0.000）、HE4（t=13.355，P=0.000）顯 著 高 于 對 照 組，MALAT1因 子（t=59.321，P=0.000）水平顯著低于對照組。見表1。

表1 兩組ENA-78、HE4與MALAT1水平差異（±s）

表1 兩組ENA-78、HE4與MALAT1水平差異（±s）

組別 n MALAT1（U/ml）ENA-78（ng/ml） HE4（pmol/L）觀察組對照組tP 46 46 0.61±0.05 1.12±0.03 59.321 0.000 2.22±0.63 0.89±0.11 14.105 0.000 53.79±4.99 41.38±3.85 13.355 0.000

2.2 不同嚴重程度患者的NA-78、HE4與MALAT1水平差異 Ⅰ～Ⅱ度組患者ENA-78（t=9.930，P=0.000）、HE4（t=13.424，P=0.000）顯著低于Ⅲ～Ⅳ度組，MALAT1因子（t=40.540，P=0.000）水平顯著高于Ⅲ～Ⅳ度組。見表2。

表2 不同嚴重程度患者的NA-78、HE4與MALAT1水平差異（±s）

表2 不同嚴重程度患者的NA-78、HE4與MALAT1水平差異（±s）

組別 n MALAT1（U/ml）ENA-78（ng/ml） HE4（pmol/L）Ⅰ～Ⅱ度組Ⅲ～Ⅳ度組tP 21 25 0.74±0.02 0.50±0.02 40.540 0.000 1.10±0.36 3.16±0.96 9.930 0.000 50.67±1.33 56.41±1.57 13.424 0.000

2.3 相關性分析 采用Spearman相關性分析，對疾病的嚴重程度與NA-78、HE4與MALAT1水平進行相關性分析，患者的疾病嚴重程度與NA-78（r=0.445，P=0.000）、HE4（r=0.551，P=0.000）呈正相關，與MALAT1呈負相關（r=-0.578，P=0.000）。

2.4 聯(lián)合檢測診斷的ROC曲線分析 平行聯(lián)合檢測ROC曲線下面積分別為0.761、0.763和0.915，系列聯(lián)合檢測ROC曲線下面積為0.750、0.721和0.904，ENA-78+MALAT1診斷的ROC曲線下面積顯著高于MALAT1+HE4及ENA-78+HE4，差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。見圖1。

圖1 ROC曲線分析（A為平行聯(lián)合檢測，B為系列聯(lián)合檢測）

2.4 EMs患病危險因素的多因素Logistic回歸分析多因素Logistic回歸分析顯示，ENA-78、HE4與MALAT1均是EMs發(fā)病的影響因素（P＜0.05）。見表3。

表3 子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)病危險因素的多因素Logistic回歸分析

3 討論

EMs是臨床上發(fā)病率較高的一種雌激素依賴系統(tǒng)疾病，發(fā)病人群多為育齡女性，患者通常會出現(xiàn)不規(guī)則出血、疼痛、不孕等臨床表現(xiàn)，比較嚴重時會對患者的生活質(zhì)量造成負面影響[6]。最近幾年來，該病發(fā)病率持續(xù)走高，患者不孕概率高達50%，所以如何在患者發(fā)病時進行準確有效的診斷并開展治療，對改善患者的預后十分有必要[7～8]。目前臨床上一般通過腹腔鏡手術切除異位病灶，并在患者術后同時輔以藥物鞏固治療來減少復發(fā)。隨著醫(yī)療條件的改善和各種創(chuàng)新藥物的研發(fā)，該病的治療已經(jīng)取得十分顯著的效果[9]。雖然臨床上認為腹腔鏡檢查診斷EMs是“金標準”，但這種檢查需要全身麻醉，在檢查期間要對患者的腹腔進行侵入性操作，對患者機體造成一定傷害，會引起副交感神經(jīng)的應激反應，導致檢查后的并發(fā)癥也較多，而且檢查花費也較大，限制了推廣使用的范圍，所以應該尋找一種操作方便、特異性強、靈敏度較好的診斷方案。已有文獻報道了許多生物標志物可以用于該病的診斷，具有十分廣泛的參考價值[10～11]。

HE4是近年來發(fā)現(xiàn)的一種腫瘤標志物，在臨床上多用于卵巢癌的早期診斷，一般在健康人體的呼吸道、生殖系統(tǒng)及卵巢組織中的表達水平極低，但是在卵巢癌患者的組織和血清中均發(fā)現(xiàn)高度表達。隨著科學家的進一步研究發(fā)現(xiàn)，EMs患者血清中HE4也存在一定程度的升高[12]。ENA-78是一種炎癥介質(zhì)，來源于人體的上皮細胞，作用是趨化及激活患者體內(nèi)的中性粒細胞，能夠顯著促進患者體內(nèi)新血管的形成，同時也能夠?qū)Ξ愇徊≡钪械男律芪呛响o脈微血管系統(tǒng)起到促進作用，導致患者局部出現(xiàn)缺血、缺氧，引發(fā)纖維化，進而加重盆腔粘連，最終出現(xiàn)異位作用[13～15]。研究表明，MALAT在多個腫瘤中均出現(xiàn)了過表達現(xiàn)象，如子宮內(nèi)膜癌，乳腺癌及卵巢癌等多種雌激素依賴性腫瘤，MALAT7因子表達下調(diào)，能夠調(diào)節(jié)患者的上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化，涉及惡性腫瘤的生長、遷移及侵襲過程[16～18]。由此可見，已經(jīng)有文獻和臨床支持以上三個指標與卵巢癌存在密切關聯(lián)，但是與子宮異位癥的關系沒有得到進一步確定[19～20]。本研究結果發(fā)現(xiàn)，觀察組ENA-78、HE4水平顯著高于對照組，MALAT1水平低于對照組，P＜0.05?？梢哉J為檢測患者血清中的ENA-78、HE4和MALAT1水平對于EMs診斷有一定參考價值。隨著分子生物學迅速發(fā)展及血管形成理論的進一步規(guī)律揭示，已經(jīng)有越來越多研究顯示EMs病機與患者的血管生成過程存在密切關聯(lián)。而在本研究中，隨著疾病的嚴重程度加重，ENA-78、HE4顯著升高，MALAT1顯著降低，與以上研究相互印證。ENA-78、HE4和MALAT1與子宮內(nèi)膜癥的相關關系已經(jīng)十分明確，但三者聯(lián)合用于該病的診斷報道較少。平行聯(lián)合檢測ROC曲線下面積分別為0.761、0.763和0.915，系列聯(lián)合檢測ROC曲線下面積為0.750、0.721和0.904，ENA-78+MALAT1診斷的ROC曲線下面積顯著高于MALAT1+HE4及ENA-78+HE4，差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。說明ENA-78、MALAT1的聯(lián)合檢測對于該病的陽性診斷有重要意義，對于該病的早期篩查有積極的作用。

綜上所述，ENA-78、HE4和MALAT1表達情況與EMs疾病進展存在相關性，而且ENA-78的診斷靈敏度最高，HE4診斷靈敏度最低，ENA-78、MALAT1的聯(lián)合檢測可以為該病臨床陽性診斷提供參考，診斷過程簡單且為非侵入式的，價值較高，值得在臨床中推廣運用。

（收稿日期：2020-12-18）