不同前處理方法在雞體液或組織FAA檢測(cè)中的研究

陳 琛， 杜光英， 曾選智， 楊永興， 甘文斌，陶 冶， 張燕鳴， 黃艷芳， 陶琳麗*， 張 曦*

（1.云南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，云南省動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)與飼料重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，云南昆明650201；2.云南省獸藥飼料檢測(cè)所，云南昆明650201；3.云南省飼料工業(yè)協(xié)會(huì)，云南昆明650201）

氨基酸作為一類非常重要的營(yíng)養(yǎng)及功能性物質(zhì)，在雞體內(nèi)的代謝過(guò)程及代謝效果可通過(guò)雞體液或組織中FAA的定性與定量分析來(lái)表征，但當(dāng)前關(guān)于雞體液或組織中FAA檢測(cè)的相關(guān)報(bào)道較少，因此針對(duì)其開(kāi)展研究是十分必要的。在通用型檢測(cè)中，檢測(cè)FAA可用的儀器分析方法有高效液相色譜法（李維等，2016）、超高效液相色譜法（董尚文等，2018）、氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法（黃志等，2017）、毛細(xì)管電泳法等（陳惜貞，2007），其中最主要的是高效液相色譜法，該法因衍生的先后可分為柱前衍生和柱后衍生兩類，而柱后衍生隨即發(fā)展出氨基酸檢測(cè)專屬儀器—氨基酸自動(dòng)分析儀。總體來(lái)說(shuō)，氨基酸自動(dòng)分析儀的靈敏度不如高效液相色譜儀，但其在分離度、重現(xiàn)性、操作簡(jiǎn)便性和方法可移植性等方面均具有較佳的表現(xiàn)（孫蕊等，2018）。本研究使用氨基酸自動(dòng)分析儀完成樣品檢測(cè)。

由于雞不同體液或組織成分復(fù)雜各異，存在各種干擾因素，F(xiàn)AA的含量也存在很大差異，因此研究去除這些干擾的前處理方法就顯得十分關(guān)鍵。本試驗(yàn)針對(duì)FAA吸收代謝途徑，以血清、肝臟和肌肉組織這些可較好表征代謝的樣品作為研究對(duì)象，研究適用于這些體液或組織樣本的前處理方法，致力于提升雞體液或組織樣品凈化程度的同時(shí)，優(yōu)化步驟，提高分析準(zhǔn)確性，保障檢測(cè)分析結(jié)果。針對(duì)影響雞體液或組織FAA檢測(cè)的干擾物質(zhì)，本試驗(yàn)選取3種具有代表性的雞體液或組織（胸肌、血清、肝臟組織），分別采用鹽析、醇沉和有機(jī)酸化學(xué)沉淀法來(lái)去除體液樣品中的蛋白雜質(zhì)，利用高速離心沉淀大分子雜質(zhì)，比較經(jīng)不同前處理后的檢測(cè)效果，實(shí)現(xiàn)樣品的凈化，方法的優(yōu)搭。

1 材料與方法

1.1 試劑與材料 出欄土雜雞；硫酸銨、乙醇、SSA、三氯乙酸（TCA），均為國(guó)產(chǎn)分析純?cè)噭?/p>

41種氨基酸混合標(biāo)樣：賴氨酸（Lys）、蛋氨酸（Met）、蘇氨酸（Thr）、精氨酸（Arg）、酪氨酸（Tyr）、脯氨酸（Pro）、谷氨酸（Glu）、半胱氨酸（Cys）、天冬氨酸（Asp）、天冬酰胺（Asn）、丙氨酸（Ala）、絲氨酸（Ser）、甘氨酸（Gly）、纈氨酸（Val）、色氨酸（Trp）、苯丙氨酸（Phe）、亮氨酸（Leu）、異亮氨酸（Ile）、組氨 酸 （His）、 羥 基 脯 氨 酸 （Hypro）、 乙 醇 胺（EOHNH2）、鳥(niǎo)氨酸（Orn）、氯化銨（NH4）、羥基賴氨酸（Hylys）、鵝肌肽（Ans）、肌肽（Car）、1-甲基組氨酸（1Mehis）、3-甲基組氨酸（3Mehis）、磷-絲氨酸（P-Ser）、尿素（Urea）、?；撬幔═au）、磷-乙醇胺（PEA）、肌氨酸（Sar）、α-氨基肥酸（α-AAA）、α-氨基正丁酸（α-ABA）、β-羥基異丁酸（β-AiBA）、γ-氨基正異丁酸（γ-ABA）、β-羥基丙酸（β-Ala）、瓜氨酸（Cit）、胱硫醚（Cystha）、高胱氨酸（H-Cysteine），購(gòu)自德國(guó)曼默博爾公司，氨基酸的濃度均為100 nmol/mL。

10%的SSA溶液：精確稱取100 g的SSA，加超純水1 L，混勻充分溶解。

10%的TCA溶液：精確稱取100 g的TCA，加超純水1 L，混勻充分溶解。

飽和硫酸銨溶液：稱取硫酸銨80 g溶解到100 mL水中，加熱到80℃左右，溶解部分過(guò)濾，其余的再溶，仍有一部分結(jié)晶，過(guò)濾的溶液當(dāng)降到室溫時(shí)就會(huì)有結(jié)晶，平衡1～2 d，取上清液用氨水調(diào)節(jié)pH至7.2使用。

流動(dòng)相A、B、C、D、E、F，反應(yīng)液R，清洗液W均購(gòu)自德國(guó)曼默博爾公司。（其中，R為衍生劑茚三酮，用前需要活化，每500 mL衍生劑加1 mL活化劑混勻，現(xiàn)配現(xiàn)用）

1.2 儀器與設(shè)備 A 300氨基酸自動(dòng)分析儀（membraPure）；GT16-3A型高速臺(tái)式離心機(jī)（北京時(shí)代北利離心機(jī)有限公司）；TD5A-WS低速大容量離心機(jī)（湖南湘立科學(xué)儀器有限公司）；EUK2-20TY實(shí)驗(yàn)室超純水器（南京歐鎧環(huán)境科技有限公司）；SHA-B恒溫振蕩器（常州智博瑞儀器制造有限公司）；GENIUS 3渦旋混勻器（IKA@VORTEX）；SCIENT2-IID超聲波細(xì)胞粉碎機(jī)（寧波新芝生物科技股份有限公司）；FSH-2A可調(diào)高速勻漿機(jī)（常州智博瑞儀器制造有限公司）；AL104電子天平（METTLER TOLEDO）。

1.3 試驗(yàn)方法 胸肌、腿?。簩⑼涝變龃娴男丶⊥燃∪〕鼋鈨?，精確稱取5 g（精確至0.0001 g）肌肉，按重量（g）：體積（mL）=1：3的比例加入3倍體積10%的SSA溶液，勻漿，置于4℃冰箱中冷藏靜置60 min，之后14500 r/min離心15 min，經(jīng)0.22μm濾膜過(guò)濾后上機(jī)分析。

血清：屠宰雞只時(shí)直接進(jìn)行頸部采血，新鮮血液放入離心管內(nèi)靜置，以3500 r/min離心10 min，取上清液，密封，記號(hào)，-80℃凍存，備用。上機(jī)前，取備用血清1 mL于離心管內(nèi)，加入10%的SSA溶液1 mL，混勻，置于4℃冰箱中冷藏靜置60 min，之后14500 r/min離心15 min，經(jīng)0.22μm濾膜過(guò)濾后上機(jī)分析。

肝臟組織、腸道組織：將屠宰凍存的組織樣品取出解凍，精確稱取組織塊或食糜2 g（精確至0.0001 g）于50 mL離心管內(nèi)，按重量（g）：體積（mL）=1：9的比例加入9倍體積的生理鹽水（0.9%的氯化鈉溶液），勻漿，6000 r/min離心15 min，取上清液1 mL加入10%的SSA溶液2 mL，混勻，置于4℃冰箱中冷藏靜置60 min后，以14500 r/min離心15 min，經(jīng)0.22μm濾膜過(guò)濾后上機(jī)分析。

為對(duì)比不同除雜試劑對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響，選擇3種體液按照上述步驟依次更換10%的SSA溶液為飽和硫酸銨溶液，無(wú)水乙醇，10%的TCA溶液，其余步驟不變。另選擇其中某一體液或組織樣品，分別使用高速勻漿機(jī)與超聲波粉碎機(jī)勻漿，比較不同色譜效果。

1.4 色譜柱條件 檢測(cè)參數(shù)設(shè)置：陽(yáng)離子交換柱，柱溫50℃，泵壓20 bar；流動(dòng)相（洗脫液）：A、B、C、D、E、F，流速200μL/min；反應(yīng)液：R，流速100μL/min；衍生反應(yīng)器溫度：120℃；進(jìn)樣量：30μL。

1.5 統(tǒng)計(jì)與分析 不同體液樣品的稀釋因子根據(jù)樣品前處理過(guò)程推算所得，輸入儀器自帶軟件，內(nèi)標(biāo)法計(jì)算各FAA含量，所有數(shù)據(jù)采用Mcrosoft Excel軟件進(jìn)行整理。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同前處理方法的選擇 使用飽和硫酸銨溶液處理的樣品上機(jī)后儀器基線漂移十分嚴(yán)重，因此排除鹽析作為蛋白沉淀劑使用的前處理方法。超聲波粉碎勻漿相比高速勻漿機(jī)勻漿色譜圖峰高更高一點(diǎn)，響應(yīng)值較高，因此勻漿均采用超聲波細(xì)胞粉碎機(jī)。41種FAA標(biāo)品上機(jī)后的色譜圖如圖1所示，雞體液FAA含量均由標(biāo)品內(nèi)標(biāo)儀器自帶軟件計(jì)算所得。

圖1 41種FAA標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖

2.2 雞體液FAA含量的檢測(cè)結(jié)果

2.2.1 雞胸肌FAA的含量 使用3種不同除雜劑按相同步驟進(jìn)行前處理后，雞胸肌中41種FAA總含量、12種蛋白質(zhì)編碼必需FAA含量、必需FAA占總FAA比例以及19種蛋白質(zhì)編碼FAA各自的含量見(jiàn)表1。

由表1可知，用3種化學(xué)試劑處理雞胸肌樣品，F(xiàn)AA檢測(cè)結(jié)果有所差異。使用SSA處理的雞胸肌總FAA的含量為2～3 g/kg。用TCA處理的各氨基酸峰值響應(yīng)普遍偏高，這可能與TCA自身化學(xué)特性有關(guān)。而乙醇處理過(guò)的樣品色譜峰雜峰較多，峰圖效果不如SSA處理過(guò)的分離度好，總FAA含量偏高，必需FAA占總FAA比例反而偏低。故用10%SSA處理的樣品上機(jī)較適，其中必需FAA占總FAA比例為15.08%，在19種蛋白質(zhì)編碼FAA中，雞必需FAA占12種，其中賴氨酸含量最高，精氨酸和脯氨酸次之，異亮氨酸含量最低，非必需氨基酸中丙氨酸含量最高，天冬酰胺和天冬氨酸含量最低。

表1 雞胸肌FAA的含量

2.2.2 雞血清FAA的含量 使用3種不同除雜劑按相同步驟進(jìn)行前處理后，雞血清中41種FAA總含量、12種蛋白質(zhì)編碼必需FAA含量、必需FAA占總FAA比例以及19種蛋白質(zhì)編碼FAA各自的含量見(jiàn)表2。

由表2可知，用3種化學(xué)試劑處理雞血清樣品，F(xiàn)AA檢測(cè)結(jié)果有所差異。使用SSA處理的雞血清總FAA含量為11.36 g/L，峰圖效果最優(yōu)。乙醇處理的樣品明顯和其他兩種試劑處理的結(jié)果相差較大，F(xiàn)AA總量均高于其他兩種試劑處理結(jié)果的2倍左右，導(dǎo)致必需FAA占總FAA的比例大幅降低約10～17個(gè)百分點(diǎn)，再結(jié)合色譜圖情況，用乙醇作為沉淀劑除雜檢測(cè)結(jié)果并不理想。故以10%SSA處理的樣品檢測(cè)結(jié)果為準(zhǔn)，必需FAA占總FAA的比例為43.93%，在20種蛋白質(zhì)編碼FAA中，雞必需FAA占12種，其中脯氨酸含量最高，賴氨酸次之，精氨酸再次，異亮氨酸含量最低，非必需FAA中丙氨酸含量最高，絲氨酸次之，天冬酰胺含量最低。

表2 雞血清FAA的含量

2.2.3 雞肝臟FAA的含量 使用3種不同除雜劑按相同步驟進(jìn)行前處理后，雞肝臟中41種FAA總含量、12種蛋白質(zhì)編碼必需FAA含量、必需FAA占總FAA比例以及19種蛋白質(zhì)編碼FAA各自的含量見(jiàn)表3。

由表3可知，用3種化學(xué)試劑處理雞肝臟樣品，F(xiàn)AA檢測(cè)結(jié)果有所差異。使用SSA處理的雞肝臟總FAA含量為11.62 g/kg，TCA處理后的FAA總量相對(duì)SSA處理的結(jié)果偏高，乙醇處理的樣品FAA總量高于SSA，但必需FAA含量均低于其余兩種試劑處理的樣品，所以必需FAA占總FAA比例亦偏低很多，且每種必需FAA含量與其余兩組樣品差異也很大。故以10%SSA處理的樣品檢測(cè)結(jié)果為準(zhǔn)，必需FAA占總FAA的比例為35.28%，在20種蛋白質(zhì)編碼FAA中，雞必需FAA占12種，其中精氨酸含量最高，脯氨酸次之，賴氨酸再次，異亮氨酸和蛋氨酸含量最低，非必需FAA中谷氨酸含量最高，半胱氨酸含量最低。

表3 雞肝臟FAA的含量

3 討論

樣品前處理是檢測(cè)分析的重中之重 研究采用柱后衍生法完成檢測(cè)，即使用氨基酸自動(dòng)分析儀，完成樣品色譜分析。色譜分析包含樣品采集、樣品前處理、色譜分析、數(shù)據(jù)處理與結(jié)果這一系列過(guò)程。樣品前處理所耗時(shí)間占樣品分析時(shí)間的60%，遠(yuǎn)大于色譜分析的時(shí)間，前處理過(guò)程會(huì)消耗大量的溶劑及其他化學(xué)品，占分析的消耗成本最大，并且其是整個(gè)試驗(yàn)中重復(fù)性和準(zhǔn)確性最差的環(huán)節(jié)，是影響結(jié)果好壞的決定性步驟。適當(dāng)?shù)臉悠非疤幚?，不僅可保護(hù)價(jià)格昂貴的離子交換樹(shù)脂，對(duì)于分析結(jié)果的準(zhǔn)確可靠和靈敏性亦具有決定性作用。由于分析對(duì)象雞體液或組織的組成、濃度、物理形態(tài)等均能影響色譜分析，因而對(duì)雞體液或組織樣品的前處理就成為提高分析測(cè)定效率，改善和優(yōu)化色譜分析的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。

3.1 FAA檢測(cè)前處理方法 前人多數(shù)研究均以血清作為檢測(cè)對(duì)象，前處理過(guò)程存在異曲同工之處。周文舉（1987）在測(cè)牛血清FAA時(shí)，取血清加2%的SSA溶液（1:2.5）混合，振蕩30 min后，1500 r/min離心15 min，取無(wú)蛋白的上清液為上機(jī)試樣，使用日立835-50型氨基酸自動(dòng)分析儀檢測(cè)。馮鑫等（2017）分析家兔血清FAA時(shí)，采用心臟取血，低速離心制備待測(cè)血清；上機(jī)前，取血清加入8%的SSA溶液（1:1）混合，充分振蕩混勻，以15000 r/min離心15 min除雜，取上清液過(guò)膜，濾后樣品按照日立L-8900氨基酸分析儀使用說(shuō)明書(shū)上機(jī)操作。王軍萍（1988）測(cè)定中華鱉血清時(shí)，取血清與8%的SSA溶液也是1:1混合。朱振聲（1997）在測(cè)定人血清FAA時(shí)，取人空腹前前臂靜脈血1～1.5 mL，置于含肝素抗凝、無(wú)離子離心管中，立即離心（3000 r/min，10 min，40℃）后，取一定量血清，按1:4加5%的SSA溶液混合搖勻，4℃環(huán)境放置10 min，再高速離心沉淀雜蛋白（18000 r/min，20 min，4℃），取上清液上機(jī)或置15℃以上環(huán)境塞蓋保存，保存時(shí)間不超過(guò)3 d。王小艷等（2013）在測(cè)定乳牛乳靜脈血液FAA時(shí)，處理待測(cè)血清樣本和上述類似，上機(jī)前取血清加10%的SSA溶液以1:4混合，高速離心過(guò)膜后保存于-20℃冰箱備用。本研究針對(duì)雞血清采用的前處理方法亦是遵循以上基本步驟，用制備好的血清與沉淀劑（1:1）混合，4℃靜置1 h，高速離心過(guò)膜后即可上機(jī)，分析效果可滿足色譜要求。

對(duì)于肝臟FAA的檢測(cè)，相關(guān)報(bào)道較少。周銘文等（2015）在測(cè)定石斑魚(yú)肝臟中的FAA時(shí)，取組織與4%的SSA溶液（1:4或1:2）混合，超聲波儀超聲勻質(zhì)5 min后，15000 r/min離心15 min，將上清液全部轉(zhuǎn)移至25 mL容量瓶中，沉淀物再用上述方法提取1次，合并上清液，混勻，用0.02 mol/L鹽酸溶液定容，溶液經(jīng)0.45μm濾膜過(guò)濾后，上機(jī)測(cè)定FAA含量。韋京豫等（2000）將雄性大鼠處死后取肝臟，用5%的SSA溶液研磨，離心后取上清液，使用日立835-50型氨基酸自動(dòng)分析儀檢測(cè)。本研究針對(duì)雞肝臟組織、腸道組織采用的前處理方法步驟一致，由于這兩類組織FAA含量較高，因此均先精確稱取組織加生理鹽水（1:9）勻漿，再取上清液加入沉淀劑（1:2）混合，4℃靜置1 h，高速離心過(guò)膜后即可上機(jī)，分析效果亦能滿足色譜要求。

對(duì)于肌肉組織FAA的檢測(cè)，相關(guān)研究則較為豐富。樊艷鳳等（2018）稱取雞胸樣品加入0.02 mol/L鹽酸溶液（1:3），充分均質(zhì)后用0.02 mol/L的鹽酸溶液定容至25 mL，1000g離心10 min；取上清液加入8%的SSA溶液（1:1）混合，于4℃冰箱中靜置30 min后，12000 r/min離心10 min，再取上清液加入正己烷（1:1），混勻后10000 r/min離心10 min，取下層液體，過(guò)孔徑0.22μm濾膜后用氨基酸自動(dòng)分析儀檢測(cè)。王帥等（2017）用TCA除樣品蛋白，使用氨基酸分析儀測(cè)定中華絨鰲蟹肝胰腺和體肉中的FAA。張?zhí)K平等（2017）測(cè)定4種貝類肌肉FAA時(shí)，精確稱取組織加入0.02 mol/L的稀鹽酸（1:15），充分均質(zhì)后用超聲波清洗，再用冷凍離心機(jī)（5000 r/min，4℃）離心10 min，收集上清液；將剩余殘?jiān)尤?.02 mol/L稀鹽酸后攪拌，再次離心（5000 r/min，4℃）5 min，合并上清液，定容至50 mL；定容后取溶液加入5%的SSA溶液（1:1）混合，離心（10000 r/min，4℃）10 min，經(jīng)0.22μm水相濾膜過(guò)濾后，上機(jī)檢測(cè)。Findley等（1978）在測(cè)定藍(lán)蟹肌肉或血漿的FAA時(shí)，將肌肉或血漿樣品與4%的SSA溶液（3:1）混合，超聲波粉碎勻質(zhì)，13000 r/min離心沉淀雜質(zhì)，取上清液經(jīng)0.45μm濾膜過(guò)濾后上機(jī)。林建偉等（2015）檢測(cè)對(duì)蝦肌肉FAA的前處理方法同前。王燕等（2003）研究撒壩火腿中FAA時(shí)，精確取樣后加入10%的SSA溶液（1:20）混勻，于4℃下放置20 h，4℃高速離心10 min后取上清液，用4 mol/L的NaOH溶液調(diào)整濾液pH至6.0，并定容至50 mL，經(jīng)10 kDa超濾膜超濾除去大分子后，用氨基酸自動(dòng)分析儀檢測(cè)。馬建爽等（2015）檢測(cè)肉雞肌肉FAA時(shí)，稱取肌肉組織樣加入去離子水（1:4），在冰浴中用分散器高速勻漿3次（22000 r/min，每次10 s，間隔10 s），然后加入與去離子水同體積的10%的SSA溶液，振蕩混合，靜置10 min，于4℃下高速離心10 min，用定量濾紙過(guò)濾，濾液用4 mol/L的LiOH溶液調(diào)pH至2.2，再用去離子水定容，經(jīng)濾膜過(guò)濾后用全自動(dòng)氨基酸分析儀檢測(cè)。Liao等（2009）測(cè)定豬肉中FAA時(shí)，亦是先取肉樣加入8%的SSA溶液，冰水中勻漿，用8000 r/min離心13 min，取上清液用0.45μm濾膜過(guò)濾后即可上機(jī)?？梢?jiàn)以上對(duì)于肌肉中FAA前處理方法大多較為復(fù)雜，旨在使上機(jī)液濃度與pH合宜，本研究針對(duì)雞胸肌、腿肌的前處理方法參考了以上方法，通過(guò)預(yù)試探究后確定了適合雞肌肉FAA檢測(cè)較為快速簡(jiǎn)便的前處理方法，精確取樣后加入沉淀劑勻漿（1:3），4℃靜置1 h后，高速離心過(guò)膜后即可上機(jī)，分析效果亦能達(dá)到色譜要求。

3.2 不同蛋白沉淀劑對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響 氨基酸自動(dòng)分析儀的流動(dòng)相成分均為不同濃度的鹽溶液，洗脫過(guò)程為梯度洗脫，因此使用同為鹽類物質(zhì)的硫酸銨去除蛋白會(huì)導(dǎo)致鹽類物質(zhì)殘留在柱子內(nèi)，造成樣品檢測(cè)失敗，沖洗柱子耗費(fèi)試劑與時(shí)間，從而影響儀器使用壽命，因此鹽析沉淀除雜并不適用于該研究的前處理。而超聲粉碎不僅可破碎體組織，還可將組織細(xì)胞內(nèi)的成分充分破出，所以較機(jī)械勻漿檢測(cè)響應(yīng)值高，結(jié)果更為準(zhǔn)確。

在前處理過(guò)程中使用不同化學(xué)試劑沉淀蛋白時(shí)，會(huì)不可避免地造成程度不同的基質(zhì)效應(yīng)，導(dǎo)致檢測(cè)響應(yīng)值受到影響，表現(xiàn)出結(jié)果上的差異。胸肌FAA總量用SSA處理的檢測(cè)結(jié)果與樊艷鳳等（2018）相近，雞3種體液或組織FAA總量表現(xiàn)為肝臟＞血清＞胸肌，用TCA處理的與其表現(xiàn)一致，乙醇則不完全一致；用SSA處理的雞3種體液或組織中必需FAA含量表現(xiàn)為血清＞肝臟＞胸肌，與用TCA處理的一致，乙醇處理的有異；用SSA、TCA和乙醇處理的雞3種體液或組織中必需FAA占總FAA的比例表現(xiàn)同前?？偟膩?lái)說(shuō)，檢測(cè)雞體液或組織FAA推薦使用SSA或TCA這兩種有機(jī)酸進(jìn)行蛋白除雜，兩者處理的樣品結(jié)果較為接近，但大多體液或組織樣品的總FAA、必需FAA以及必需FAA占總FAA比例均表現(xiàn)為T(mén)CA處理的樣品值高于SSA，這可能與TCA自身性質(zhì)有關(guān)，隨蛋白分子量增大，它可能滲入分子內(nèi)部，勻漿產(chǎn)熱時(shí)會(huì)造成樣品中部分蛋白酸水解，導(dǎo)致FAA檢測(cè)響應(yīng)值普遍增大，且TCA毒性較大，屬于致癌物質(zhì)，因此應(yīng)慎用。乙醇與有機(jī)酸處理的結(jié)果差異較大，從色譜圖表現(xiàn)來(lái)看，雜峰亦最多，因此會(huì)導(dǎo)致檢測(cè)響應(yīng)值不太準(zhǔn)確。

4 結(jié)論

使用氨基酸分析儀檢測(cè)雞體液或組織FAA時(shí)，針對(duì)不同體液或組織樣品需采用不同的前處理方法。其中，蛋白雜質(zhì)沉淀采用有機(jī)酸中的磺基水揚(yáng)酸，組織勻漿采用超聲波粉碎較為理想。