肝素抗凝劑對(duì)外周血淋巴細(xì)胞形態(tài)的影響

程凌利，朱大柱，謝榮偉，魏祥坤

(1.泉州市第一醫(yī)院輸血科，福建 泉州 362000；2.泉州市第910醫(yī)院檢驗(yàn)科，福建 泉州 362000)

肝素抗凝劑屬于黏多糖硫酸酯類(lèi)抗凝血藥，主要從豬或者牛腸黏膜中提取的硫酸氨基葡聚糖的鈉鹽，肝素抗凝劑可阻止血液凝固，因此國(guó)際血液學(xué)標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)常建議將肝素抗凝劑作為臨床行血液學(xué)檢查過(guò)程常用抗凝劑[1]。在日常進(jìn)行血常規(guī)檢測(cè)過(guò)程，常常會(huì)遇到自動(dòng)血液分析儀對(duì)淋巴細(xì)胞抱緊的情況，提示存在凝血反應(yīng)，這樣會(huì)影響檢驗(yàn)檢驗(yàn)結(jié)果[2]?；诖?，在本次研究中就進(jìn)一步探討了肝素抗凝劑對(duì)患者外周血淋巴細(xì)胞形態(tài)的影響，報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 研究對(duì)象

選取2020年1月-2020年9月門(mén)診收治行血常規(guī)檢查的123例患者為研究對(duì)象，其中男性71例，女性52例；年齡3～63歲，平均年齡(32.1±1.5)歲；成人73例，兒童50例。

1.2 儀器與試劑

檢測(cè)儀器：日本Olympus-CX21型雙目光學(xué)顯微鏡。

試劑與耗材：肝素抗凝管(山東奧賽特醫(yī)療器械有限公司)、瑞姬染液(珠海貝索生物技術(shù)公司)、高級(jí)鏡油(珠海貝索生物技術(shù)公司)、載玻片與推玻片(JIANG FAN)。

1.3 方法

所有患者現(xiàn)在未使用抗凝劑的情況下推片2張，之后置于裝有肝素的血常規(guī)抗凝管中，分別將5min、15min、30min、60min、120min作為檢測(cè)時(shí)間節(jié)點(diǎn)，將所有血液標(biāo)本均放置到室溫環(huán)境下，在檢測(cè)的時(shí)候推片2張，做干燥、固定及染色處理。血片均是由2名從事血液形態(tài)學(xué)檢驗(yàn)的技師遵循相關(guān)規(guī)范進(jìn)行操作。在進(jìn)行檢查的時(shí)候可先在低倍鏡下進(jìn)行觀察，之后借助油鏡做白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)，分類(lèi)200個(gè)白細(xì)胞，特別需注意觀察外周血淋巴細(xì)胞形態(tài)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

2 結(jié)果

在血液檢測(cè)情況上，成人患者檢測(cè)各項(xiàng)指標(biāo)均低于兒童(P<0.05)，成人經(jīng)肝素抗凝120min后外周血淋巴細(xì)胞同未抗凝時(shí)比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，兒童經(jīng)肝素抗凝劑60min、120min后外周血淋巴細(xì)胞比例同未抗凝時(shí)比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，詳見(jiàn)表1。外周血淋巴細(xì)胞形態(tài)上，兒童與成人細(xì)胞形態(tài)均以Ⅱ型(不規(guī)則型/單核細(xì)胞樣)為主，Ⅰ型(泡沫型/漿細(xì)胞樣)、Ⅲ型(未成熟型/幼稚型)比較少見(jiàn)。見(jiàn)表1。

表1 血標(biāo)本放置時(shí)間不同的外周血淋巴細(xì)胞檢測(cè)結(jié)果

3 討論

外周血淋巴細(xì)胞在受到病毒與藥物等應(yīng)激源的作用下，常常會(huì)出現(xiàn)應(yīng)激反應(yīng)及細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變，比如原始細(xì)胞及細(xì)胞幼稚化、細(xì)胞體積增大、細(xì)胞核體積增大、細(xì)胞胞質(zhì)增多、細(xì)胞顏色加深、細(xì)胞核不規(guī)則、細(xì)胞絲狀分裂等，此類(lèi)細(xì)胞多被稱作為異型淋巴細(xì)胞[3]。正常的群體中，外周血中有一定量的異型淋巴細(xì)胞，含量占比多在2%內(nèi)，若異型淋巴細(xì)胞大于10%常提示診斷意義突出[4]。相關(guān)研究表明，外周血異型淋巴細(xì)胞同多種病毒感染存在密切聯(lián)系，如EB病毒、巨細(xì)胞病毒、腺病毒及自身免疫系統(tǒng)疾病等，因此對(duì)外周血異型淋巴細(xì)胞進(jìn)行檢測(cè)對(duì)病毒或者相關(guān)感染疾病的診斷具有重要意義[5]。

既往的研究中，針對(duì)外周血白細(xì)胞均未應(yīng)用抗凝劑就直接分類(lèi)進(jìn)行染色，因此并不存在抗凝劑對(duì)淋巴細(xì)胞的影響。而近年來(lái)隨著檢驗(yàn)技術(shù)的發(fā)展，多種類(lèi)型的抗凝劑應(yīng)用使得傳統(tǒng)血液檢驗(yàn)方式發(fā)生了明顯改變[6]。而因?yàn)椴裳浇邮芘R床檢驗(yàn)的時(shí)間較長(zhǎng)，并且標(biāo)本送至檢驗(yàn)科室的時(shí)間往往較長(zhǎng)，這樣常存在檢驗(yàn)結(jié)果同實(shí)際情況不符的問(wèn)題，分析原因主要是隨著時(shí)間的增加常出現(xiàn)凝血情況，因此為保證檢測(cè)結(jié)果，常提倡應(yīng)用抗凝劑[7]。在血液檢驗(yàn)中，常用抗凝劑主要為肝素抗凝劑，該抗凝劑的作用機(jī)制比較復(fù)雜，具體通過(guò)同抗凝血酶進(jìn)行結(jié)合，增強(qiáng)抗凝血酶對(duì)凝血因子的抑制作用，阻止血小板凝集及防止凝血活酶形成，發(fā)揮抗凝的作用。在本次研究中，觀察對(duì)行血液檢驗(yàn)的患者，采取肝素抗凝劑對(duì)外周血淋巴細(xì)胞形態(tài)的影響，結(jié)果顯示兒童與成人患者在抗凝120min后的外周血淋巴細(xì)胞較無(wú)抗凝劑檢測(cè)提高，其中兒童在60min也提高，如此提示對(duì)行血液檢驗(yàn)的患者，使用肝素抗凝劑后，應(yīng)盡可能在60min內(nèi)完成檢測(cè)。在加用肝素抗凝劑后，外周血淋巴細(xì)胞的形態(tài)多是以Ⅱ型(不規(guī)則型/單核細(xì)胞樣)為主，這與相關(guān)研究結(jié)果一致[8]。綜合上述相關(guān)的探討及對(duì)研究結(jié)果的總結(jié)，對(duì)臨床行血液檢驗(yàn)的患者需注意以下幾點(diǎn)因素：第一，送往檢驗(yàn)科室的血常規(guī)標(biāo)本需盡快完成檢測(cè)，尤其是對(duì)兒科標(biāo)本需先行檢測(cè)；第二，若全自動(dòng)血液分析儀存在異型淋巴細(xì)胞報(bào)警，應(yīng)在推片后手工鏡檢；第三，鏡檢的時(shí)候若遇到淋巴細(xì)胞大于10%應(yīng)采取經(jīng)使用抗凝劑的外周血推片后進(jìn)行復(fù)檢，確保檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

綜上所述，針對(duì)臨床中行血液檢驗(yàn)的患者可應(yīng)用肝素抗凝劑，且加用抗凝劑后續(xù)盡快完成檢查，保證檢測(cè)質(zhì)量。