親子鑒定中常染色體STR基因座檢出三帶型等位基因1例

韓 立 芹

(安徽天正司法鑒定中心，安徽 合肥 230000)

1 案例介紹

1.1 簡要案情

因救助需要，某救助管理站委托本中心對其父親和孩子(女孩)是否存在血緣關(guān)系進行鑒定，采集孩子、某男(疑父)指尖血各一份，同時采集疑父口腔拭子一份。

1.2 DNA分型檢驗

采用GoldeneyeTM DNA身份鑒定系統(tǒng)20A人類熒光標(biāo)記STR復(fù)合擴增檢測試劑(基點認(rèn)知技術(shù)有限公司)對D19S433、D5S818、D21S11、D18S51、D6S1043、D3S1358、D13S317、D7S820、D16S539、CSF1PO、Penta D、Amelogenin、vWA、D8S1179、TPOX、Penta E、TH01、D12S391、D2S1338、FGA基因座進行復(fù)合PCR擴增。

采用AGCU Expressmarker 22人類熒光標(biāo)記STR復(fù)合擴增檢測試劑(無錫中德美聯(lián)生物技術(shù)有限公司)對疑父口腔拭子D3S1358、D13S317、D7S820、D16S539、Penta E、D2S441、TPOX、TH01、D2S1338、CSF1PO、Penta D、D10S1248、D19S433、vWA、D21S11、D18S51、D6S1043、Amelogenin、D8S1179、D5S818、D12S391、FGA基因座進行復(fù)合PCR擴增。

使用ABI3130遺傳分析儀對擴增產(chǎn)物進行毛細(xì)管電泳和基因型分析。

1.3 檢驗結(jié)果

采用基點20A試劑盒檢測孩子血樣、疑父血樣及口腔拭子STR基因分型(表1、圖1)。采用中德美聯(lián)EX22試劑盒檢測疑父口腔拭子STR基因分型(表2、圖2)。

表1 孩子血樣、疑父血樣及口腔拭子常染色體基因座基因分型結(jié)果

A:疑父血樣 B:疑父口腔拭子 C:孩子血樣

表2 疑父口腔拭子常染色體基因座基因分型結(jié)果

圖2 疑父口腔拭子常染色體STR分型結(jié)果

2 討 論

經(jīng)問詢本案排除骨髓移植、同卵雙胞胎、經(jīng)常接觸化學(xué)試劑、近親婚配、輸血史和檢材污染情況，采用GoldeneyeTM DNA身份鑒定系統(tǒng)20A人類熒光標(biāo)記STR復(fù)合擴增檢測試劑(基點認(rèn)知技術(shù)有限公司)復(fù)合PCR擴增，經(jīng)檢測疑父血樣和口腔拭子基因分型出現(xiàn)三等位基因，疑父血樣、口腔拭子在D19S433、D21S11、D3S1358、TPOX、TH01、FGA 6個基因座上出現(xiàn)三等位基因，與AGCU Expressmarker 22人類熒光標(biāo)記STR復(fù)合擴增檢測試劑(無錫中德美聯(lián)生物技術(shù)有限公司)檢驗結(jié)果一致，表明疑父在D19S433基因座的基因分型為“12，13,13.2”，在D21S11基因座的基因分型為“30,31,32.2”，在D3S1358基因座的基因分型為“15,16,18”，在TPOX基因座的基因分型為“8,11,12”，在TH01基因座的基因分型為“6,7,9”，在FGA基因座的基因分型為“22,23,24”。在D19S433、D21S11、D3S1358、Amelogenin、TPOX、TH01、D2S1338、FGA 8個基因座上的等位基因峰高不均衡(圖1)。經(jīng)分析，孩子的等位基因可從疑父基因型中找到來源，累積親權(quán)指數(shù)大于10 000，支持疑父為孩子的生物學(xué)父親。

正常人常染色體單個STR基因座的分型圖譜中純合子有1個峰，雜合子有2個峰，一般很少出現(xiàn)3個峰或多個峰，單個STR基因座出現(xiàn)3個峰，稱為三帶型。STR三等位基因第一次被報道是在1999年[1]，目前關(guān)于三帶型的報道較多[2-4]。三帶型形成機制尚不明確，主要有以下觀點[2]：同源染色體不分離；同源染色體不等價交換；嵌合體；骨髓移植受體內(nèi)有供體細(xì)胞；雙胞胎在胚胎發(fā)育過程中出現(xiàn)血液交換；發(fā)生腫瘤等病變；非特異性擴增[5]。

親子鑒定過程中三帶型等位基因現(xiàn)象時有發(fā)生，首先應(yīng)重復(fù)試驗排除檢材、試劑等污染問題，再采用多種類型檢材以及其他擴增體系進行驗證。如果條件允許，增加基因測序等檢測手段，以確保鑒定結(jié)果的準(zhǔn)確性。