不同種質(zhì)北沙參香豆素成分含量和總含量的測(cè)定研究

孟令江，上官同強(qiáng)，于秀玲，滕海達(dá)

摘要：目的：根據(jù)北沙參制定標(biāo)準(zhǔn)測(cè)定不同種質(zhì)北沙參8-甲氧基異歐前胡內(nèi)酯和香豆素總含量的研究。方法：檢測(cè)不同種質(zhì)類型北沙參產(chǎn)量相關(guān)性狀，利用高效液相色譜法測(cè)定北沙參中香豆素成分含量和總含量。結(jié)果：不同種質(zhì)的北沙參8種香豆素類成分含量存在顯著差異，以8種香豆素類成分的總含量作為指標(biāo)，優(yōu)選出的主根中側(cè)根少的種質(zhì)和白條參種質(zhì)所含8種香豆素類成分的總含量最高。結(jié)論：不同種質(zhì)的北沙參香豆素類成分含量存在差異。

關(guān)鍵詞：北沙參;香豆素;總含量

北沙參是傘形科植物珊瑚菜（Glehnia? littoralis? FrSchmidt? ex Miq）的干燥根，具有養(yǎng)陰清肺，祛痰止咳、益胃生津等功效，為臨床上常用的中藥材，常用于治療勞嗽痰血，熱病津傷，咽干口渴、胃陰不足等病癥[1-2]。北沙參在我國(guó)已有500多年種植歷史，其中以萊陽(yáng)種植量大、產(chǎn)量多、質(zhì)量好而聞名。根據(jù)栽培品種，不同品種之間的北沙參在性狀、質(zhì)量、功效方面是否存在差異目前尚未有定論，有待進(jìn)一步研究。因此本實(shí)驗(yàn)收集不同種質(zhì)北沙參，以常見(jiàn)和重要的8-甲氧基異歐前胡內(nèi)酯含量以及香豆素含量作為評(píng)價(jià)指標(biāo)，利用高效液相色譜法等標(biāo)準(zhǔn)方法對(duì)其含量進(jìn)行檢測(cè)，為客觀評(píng)價(jià)不同種質(zhì)北沙參內(nèi)在質(zhì)量等提供依據(jù)。

1材料與方法

1.1 儀器與原料

KQ-500E型超聲波清洗器、AE240十萬(wàn)分之一電子天平、戴安U-3000高效液相色譜儀、恒溫烘箱等。甲醇、乙腈、補(bǔ)骨脂素、歐前胡素、異歐前胡素對(duì)照品HPLC≥98%等。從山東萊陽(yáng)胡城、河北安國(guó)東桄、赤峰牛營(yíng)子三個(gè)北沙參人工種植基地進(jìn)行種質(zhì)資源收集，共收集北沙參鮮藥材12批。洗去泥沙后，置于恒溫烘箱55℃烘干備用。

1.2 測(cè)定指標(biāo)及方法

1.2.1 色譜條件：色譜柱：Inertsil ODS-3（250×4.6 mm，5μm）;流動(dòng)相為乙腈-水，檢測(cè)波長(zhǎng)：310 nm;進(jìn)樣量10?l。

1.2.2 相關(guān)溶液配制：對(duì)照品溶液配制：精密稱取異茴芹內(nèi)酯、花椒毒素、佛手柑內(nèi)酯、氧化前胡素、異歐前胡素、珊瑚菜素、8-甲氧基異歐前胡內(nèi)酯、異歐前胡素對(duì)照品，分別配制成濃度為對(duì)照品溶液備用。

1.2.3 供試品溶液配制：分別取不同種質(zhì)的北沙參進(jìn)行碾碎（過(guò)40目）后精密稱定各取1g，置具塞錐形瓶中，加甲醇20ml，超聲處理30 min，用0.45μm微孔濾膜濾過(guò)，作為供試品溶液備用。

1.3 方法學(xué)驗(yàn)證

精密吸取混合對(duì)照品溶液0.5、1、2、4、5、8 ml至10 ml容量瓶中，加甲醇稀釋并定容至刻度，搖勻。分別精密吸取10μL，依次注入高效液相色譜儀，測(cè)定峰面積，以對(duì)照品濃度（mg/mL）為橫坐標(biāo)、峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。并分別進(jìn)行精密度試驗(yàn)、穩(wěn)定性試驗(yàn)、重復(fù)性試驗(yàn)。最終得回歸方程：異茴芹內(nèi)酯Y=10.343+14.343x，r=0.9992，花椒毒素Y=2.707x-1.5077，r=0.9991，佛手柑內(nèi)酯Y=4.9731x-2.6935，r=0.9998，氧化前胡素=5.9731x-3.6935，r=0.9993、異歐前胡素=1.9731x-0.6935，r=0.9998。珊瑚菜素=0.9822x-0.8232，r=0.9991，8-甲氧基異歐前胡內(nèi)酯=1.3928x-0.7271，r=0.9992，異歐前胡素=2.9833x-1.9823，r=0.9991。

2結(jié)果

2.1 不同種質(zhì)類型產(chǎn)量相關(guān)性狀測(cè)定

12批北沙參鮮藥材分別是大紅袍（DH）、白條參（BT）、紅條參（HT）、山東地方種（SHD）、高含量組（HC）、高產(chǎn)量組（HY）、安國(guó)地方種（ANG）、根型優(yōu)組即主根粗側(cè)根少（RG）、赤峰地方種（CHF）、主根粗側(cè)根多（CD）、主根中側(cè)根少（ZS）、主根細(xì)側(cè)根少（XS）。具體產(chǎn)量相關(guān)性狀見(jiàn)表1。

2.2 不同種質(zhì)北沙參含量評(píng)價(jià)

北沙參含量測(cè)定結(jié)果顯示不同種質(zhì)北沙參所含香豆素類成分含量存在顯著差異，其中，異茴芹內(nèi)酯、花椒毒素、佛手柑內(nèi)酯、氧化前胡素、異歐前胡素、珊瑚菜素、8-甲氧基異歐前胡內(nèi)酯、異歐前胡素等成分含量存在顯著差異（P<0.01），不同種質(zhì)北沙參所含8種香豆素類成分含量也有較大差異，其中優(yōu)選出的主根細(xì)側(cè)根少的種質(zhì)和白條參種質(zhì)，所含8種香豆素類成分的總含量最高;主根中等側(cè)根少的種質(zhì)和赤峰本地種質(zhì)，所含8種香豆素類成分的總含量最低，結(jié)果見(jiàn)表2。

3討論

結(jié)果顯示，不同種質(zhì)的北沙參8種香豆素類成分含量存在顯著差異，這與國(guó)內(nèi)研究北沙參的其他文獻(xiàn)結(jié)果相似，可以作為北沙參種質(zhì)評(píng)價(jià)和良種選育的一個(gè)重要指標(biāo)。以8種香豆素類成分的總含量作為指標(biāo)，優(yōu)選出的主根中側(cè)根少的種質(zhì)和白條參種質(zhì)所含8種香豆素類成分的總含量最高，可以作為優(yōu)良種質(zhì)。此外，不同成分也可能具有不同的藥理活性和臨床療效，在藥理活性明確的情況下，也可以根據(jù)對(duì)成分的要求來(lái)定向選育不同的北沙參品種。

參考文獻(xiàn)

[1]邱曉月，景永帥，鄭玉光，等.北沙參多糖對(duì)免疫系統(tǒng)調(diào)節(jié)作用研究進(jìn)展[J].中國(guó)藥理學(xué)與毒理學(xué)雜志，2021，35（10）：794.

[2]李雪瑩，武永剛.中藥材北沙參及其偽品鑒定方法的研究進(jìn)展[J].農(nóng)技服務(wù)，2021，38（3）：88-89+92.