新型金屬蛋白酶ADAMTS家族在缺血性腦血管疾病中的診斷價值

張霞軍 袁紅萍 譚俊華

缺血性腦血管疾?。↖schemic cerebral vascular disease，ICVD）為世界范圍內(nèi)位于第二位的致死性疾病，主要包括急性腦梗死（Acute cerebral infarction，ACI）、短暫性腦缺血發(fā)作（Transient ischemic attack，TIA）。前者多需行血管內(nèi)介入治療，后者保守治療即可痊愈，但二者早期癥狀相似且常規(guī)影像學無明顯特征［1-2］。近年來，隨著研究不斷深入，發(fā)現(xiàn)含Ⅰ型血小板結合蛋白基序的解聚蛋白樣金屬蛋白酶（A disintegrin and metallo-proteinase with thrombospondin motifs，ADAMTS）參與ICVD發(fā)病發(fā)展過程，對斑塊穩(wěn)定性產(chǎn)生一定影響［3］。研究新型金屬蛋白酶ADAMTS 家族水平或可為臨床鑒別診斷TIA、ACI 提供參考。本研究初次嘗試分析ADAMTS 家族在缺血性腦血管疾?。↖CVD）中的診斷價值，旨在為完善臨床診療機制提供參考。

1 資料與方法

1.1 研究對象及選取標準

選取本院2017年2月至2020年5月缺血性腦血管疾病患者104 例作為觀察組，包括急性腦梗死（ACI）患者70 例、短暫性腦缺血發(fā)作（TIA）患者34 例；另選同期健康體檢者52 例作為對照組。納入標準：①觀察組經(jīng)頭顱CT、血管造影檢查確診；②近2 周內(nèi)未服用影響凝血、纖溶系統(tǒng)藥物。排除標準：①無癥狀性腦梗死；②腦血管病家族史；③伴有腦外傷、腦動脈瘤及出血性疾病者；④伴有急性冠脈綜合征、外周血管病者。其中觀察組男55 例，女49 例，年齡平均（56.56±6.69）歲。對照組男29 例，女23 例，年齡平均（57.82±6.15）歲。兩組性別、年齡比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。研究經(jīng)本院倫理委員會審核評議同意，所有研究對象均知情，并簽訂同意書。

1.2 方法

于清晨采集觀察組患者治療前和對照組空腹靜脈血4 mL，離心取血清，采用殘余膠原結合實驗（R-CBA）測定受檢者血清ADAMTS-1、ADAMTS-4、ADAMTS-12、ADAMTS-13 水平。

1.3 觀察指標

①比較兩組血清ADAMTS 家族指標水平。②血清ADAMTS 家族指標水平對ICVD 的診斷價值。③觀察組ACI、TIA 患者血清ADAMTS 家族指標水平。④分析觀察組血清ADAMTS 家族指標與NIHSS 評分相關性［4］。⑤分析血清ADAMTS家族指標與ACI 發(fā)生的關系，以是否發(fā)生ACI、TIA作為因變量（未發(fā)生=0，發(fā)生=1），將合并高脂血癥、高Hcy 血癥、血清ADAMTS-1、ADAMTS-4、ADAMTS-12、ADAMTS-13 作為自變量（合并高脂血癥：否=0，是=1；合并高Hcy 血癥：否=0，是=1；血清ADAMTS-1、ADAMTS-4、ADAMTS-12、ADAMTS-13 以觀察組所有ICVD 患者平均值為界：（≤平均值=1，＞平均值=2）。⑥血清ADAMTS家族指標對ACI 與TIA 的鑒別診斷價值。

1.4 統(tǒng)計學分析

采用統(tǒng)計學軟件SPSS 19.0 處理數(shù)據(jù)；計數(shù)資料以n（%）描述，采用χ2檢驗；計量資料以（±s）描述，兩組間比較采用獨立樣本t檢驗；相關性分析采用Pearson 相關系數(shù)模型；預測效能分析采用ROC 曲線，獲取曲線下面積不同預測方案間曲線下面積比較采用DeLong 檢驗，聯(lián)合診斷實施Logistic 二元回歸擬合，返回預測概率logit（p），將其作為獨立檢驗變量。P＜0.05 為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 兩組血清ADAMTS 家族指標水平比較

觀察組血清 ADAMTS-1、ADAMTS-4、ADAMTS-12 水平高于對照組，ADAMTS-13 水平低于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。見表1。

表1 兩組血清ADAMTS 家族指標水平比較（±s）Table 1 Comparison of serum ADAMTS family index levels between 2 groups（±s）

組別觀察組對照組t 值P 值n 104 52 ADAMTS-1（ng/mL）32.31±10.14 11.06±3.62 14.633＜0.001 ADAMTS-4（ng/mL）96.47±25.17 50.29±13.59 12.348＜0.001 ADAMTS-12（ng/mL）48.23±16.01 14.27±4.74 14.950＜0.001 ADAMTS-13（ng/mL）37.69±10.03 58.72±15.46 10.232＜0.001

2.2 血清ADAMTS 家族指標水平對ICVD 的診斷價值

ADAMTS-1、ADAMTS-4、ADAMTS-12、ADAMTS-13敏感度為86.54%，特異度為80.77%，優(yōu)于各指標單獨診斷，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。見表2。

2.3 觀察組ACI 與TIA 患者臨床資料、血清ADAMTS 家族指標水平比較

觀察組ACI 與TIA 患者合并高脂血癥、高Hcy血癥、NIHSS 評分、血清ADAMTS-1、ADAMTS-4、ADAMTS-12、ADAMTS-13 水平比較，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。見表3。

2.4 觀察組血清ADAMTS 家族指標與NIHSS 評分相關性

觀察組血清ADAMTS-1、ADAMTS-4、ADAMTS-12 與NIHSS 評分呈正相關（r=0.872、0.870、0.754，P＜0.05），ADAMTS-13 與NIHSS 評分呈負相關（r=-0.807，P＜0.05）。見圖1。

2.5 血清ADAMTS 家族指標與ACI、TIA 相關性

Logistic 回歸分析，血清ADAMTS-1、ADAMTS-4、ADAMTS-12、ADAMTS-13 與ACI、TIA發(fā)生顯著相關，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。見表4。

表3 觀察組ACI 與TIA 患者臨床資料比較［n（%），（±s）］Table 3 Comparison of clinical data between ACI and TIA patients in the observation group［n（%），（±s）］

資料年齡（歲）性別BMI（kg/m2）合并高血壓合并高脂血癥t/χ2值1.367 0.182 0.758 0.301 P 值0.175 0.670 0.450 0.584合并高Hcy 血癥男女 是否是否是否NIHSS 評分（分）血清ADAMTS 家族指標（ng/mL）ADAMTS-1 ADAMTS-4 ADAMTS-12 ADAMTS-13 ACI 患者（n=70）57.49±6.12 36（51.43）34（48.57）25.13±1.71 39（55.71）31（44.29）51（72.86）19（27.14）45（64.29）25（35.71）9.84±2.45 48.76±15.46 110.88±30.12 62.47±20.20 26.24±8.34 TIA 患者（n=34）55.63±7.26 19（55.88）15（44.12）24.85±1.88 17（50.00）17（50.00）12（35.29）22（64.71）13（38.24）21（61.76）5.05±1.12 24.32±8.02 66.81±17.27 41.31±10.49 43.25±12.58 13.521 6.296 10.843 8.565 7.911 5.734 8.209＜0.001 0.012＜0.001＜0.001＜0.001＜0.001＜0.001

圖1 觀察組血清ADAMTS 家族指標與NIHSS 評分相關性Figure 1 The correlation between serum ADAMTS family indicators and NIHSS score in the observation group

表4 血清ADAMTS 家族指標與ACI、TIA 發(fā)生的關系Table 4 The relationship between serum ADAMTS family indicators and the occurrence of ACI、TIA

2.6 血清ADAMTS 家族指標對ACI 與TIA 的鑒別診斷價值

ADAMTS-1、ADAMTS-4、ADAMTS-12、ADAMTS-13 聯(lián)合診斷的敏感度為84.29%，特異度為82.35%，優(yōu)于各指標單獨診斷，差異有統(tǒng)計學意（P＜0.05），見表5、圖2。

表5 血清ADAMTS 家族指標對ACI 與TIA 的鑒別診斷價值Table 5 The value of serum ADAMTS family indicators in the differential diagnosis of ACI and TIA

圖2 血清ADAMTS 家族指標對ACI 與TIA 的診斷價值Figure 2 The value of serum ADAMTS family indicators in the differential diagnosis of ACI and TIA

3 討論

國內(nèi)外研究發(fā)現(xiàn)［5-6］，ADAMTS 家族與心腦血管系統(tǒng)多種疾病發(fā)生、發(fā)展密切相關，其有望成為心腦血管疾病的標志蛋白及藥物治療靶點。本研究結果發(fā)現(xiàn)，ICVD 患者血清ADAMTS-1、ADAMTS-4、ADAMTS-12 水平呈高表達，血清ADAMTS-13 水平呈低表達。分析其原因，ADAMTS-1通過酶解血管基質(zhì)蛋白，促進血管平滑肌增殖與移位，進而參與動脈血管壁損傷；ICVD 患者應激狀態(tài)下，ADAMTS-4 可從平滑肌細胞中移位至細胞核，參與平滑肌細胞凋亡，破壞血管功能及血管結構完整性。Ren P 等［7］研究也指出，敲除ADAMTS-4 基因小鼠的主動脈彈性纖維受到破壞。ADAMTS-12可解除軟骨基質(zhì)蛋白（Cartilage oligomeric matrix protein，COMP）對血管平滑肌細胞的遷移、黏附抑制作用，致使血管內(nèi)膜增厚，造成ICVD 發(fā)生。而ADAMTS-13 具有抗血栓性質(zhì)，可將VWF 多聚體切割成小的非活性片段，用于調(diào)節(jié)機體循環(huán)中凝血生理過程，ADAMTS-13 表達水平降低可引起ICVD 發(fā)生。另外，Schuppner R 等［8］實施的前瞻性隊列研究指出ADAMTS-13 與缺血性腦卒中相關。由此推測，ADAMTS 家族指標可能在ICVD 發(fā)生、發(fā)展中起著重要作用，檢測ADAMTS 家族指標可幫助臨床識別ICVD 高危個體，指導臨床早期診治。

既往研究顯示［9］，約12%的TIA 患者7 d 內(nèi)可進展為ACI，故及時鑒別ICVD 類型，對臨床預防腦缺血不良事件發(fā)生至關重要。近年來有報道指出［10］，ADAMTS 在動脈粥樣硬化疾病發(fā)生、發(fā)展中起到重要作用。本研究結果與劉美霞等［11］研究結果相似。上述結果產(chǎn)生機制可能為，當TIA 患者血管內(nèi)皮受損時，大分子、具有強大止血功能的超大分子量血管性血友病因子（ULVWF）被釋放，進而引起ADAMTS13 消耗性降低，此推測同先前報道的急性缺血性腦卒中小鼠中ADAMTS13 活性降低相一致［12］。現(xiàn)有研究表明，ADAMTS-12 基因同細胞內(nèi)膜增厚、血管炎癥反應有關［13］。作者推測高ADAMTS-12 水平，致使其基因蛋白功能活性改變，在炎性反應、血管平滑肌遷移等方面發(fā)生作用，促進動脈粥樣硬化發(fā)生發(fā)展過程，進而加速腦梗死發(fā)生；Li H 等［14］經(jīng)小鼠模型證明，大鼠大腦中動脈短暫閉塞后，星形膠質(zhì)細胞中ADAMTS-1 mRNA呈高表達，且腫瘤壞死因子-a 等炎性反應介質(zhì)能上調(diào)星形膠質(zhì)細胞中ADAMTS-1 表達水平，致使神經(jīng)細胞由基膜上脫落、凋亡；ADAMTS-4 作為炎癥反應調(diào)節(jié)酶，其表達水平升高可能加速動脈粥樣硬化易損斑塊形成和繼發(fā)性血栓形成，具體機制有待今后深入分析。因ADAMTS 家族單一指標診斷鑒別ACI、TIA 存在一定局限性，故本研究采取聯(lián)合診斷模式，結果顯示，ADAMTS 家族指標聯(lián)合診斷AUC 最大為0.901，高于任一指標單獨診斷。

綜上，隨著臨床對ADAMTS 家族在ACI、TIA中的作用機制研究深入，將為ICVD 診治及新型抗血栓藥物研發(fā)提供更多有利證據(jù)。