冷藏時間對兩廣二號越年種孵化率影響試驗初報

秦友華 張兆琴 龔畢寶 宿吉峰

(陜西省石泉縣蠶種場，陜西石泉 725200)

蠶桑產(chǎn)業(yè)一直是石泉縣的主導(dǎo)產(chǎn)業(yè)，是全縣富民強縣的功勛產(chǎn)業(yè)，尤其在脫貧攻堅工作中對貧困戶產(chǎn)業(yè)增收致富發(fā)揮著巨大作用。隨著近年來極端氣候頻發(fā)，石泉縣夏秋季蠶病發(fā)生率越來越高，甚至有的村上大面積爆發(fā)，蠶農(nóng)顆粒無收，嚴重影響蠶農(nóng)養(yǎng)蠶的積極性。2012年以來石泉縣蠶種場優(yōu)化全縣蠶品種結(jié)構(gòu)，夏秋季全縣飼養(yǎng)兩廣二號替代春秋兼用品種871×872，大幅降低了蠶病發(fā)生率，提高了蠶繭質(zhì)量。但是，生產(chǎn)實踐中兩廣二號越年種多次發(fā)生蠶種孵化不齊、孵化率低問題，導(dǎo)致生產(chǎn)用種直接報廢，給蠶種場造成嚴重經(jīng)濟損失。為了解和掌握兩廣二號蠶種的冷藏時間與孵化率、千卵粒重變化的關(guān)系，筆者于2018年、2019年進行了兩廣二號越年種冷藏天數(shù)對其實用孵化率的影響試驗，分析冷藏天數(shù)與孵化率及千粒卵重變化的相關(guān)性，探討兩廣二號春制越年種與秋制種的冷藏期限，以期對改進蠶種生產(chǎn)、保護工藝提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

兩廣二號(正反交)、皓月×菁松一代雜交種，均為石泉縣蠶種場繁育的越年種。

1.2 試驗方法

將本場2017年春制兩廣二號正交、兩廣二號反交、皓月×菁松一代雜交種按照常規(guī)復(fù)式冷藏方法入庫保護，2018年分階段分別抽取冷藏0 d、79 d、111 d、142 d、146 d、150 d、153 d、156 d、159 d、162 d、165 d、168 d、171 d的以上品種各3 g，按品種對應(yīng)冷藏天數(shù)分成3個重復(fù)區(qū)，每區(qū)1 g，清點各區(qū)卵粒數(shù)，采用兩段式簡化催青方法分次催青，蠶種轉(zhuǎn)青后黑暗保護至次日早6：00感光孵化：①催青開始前，調(diào)查各品種入庫前和入庫后各處理區(qū)千粒卵重，進行各品種冷藏天數(shù)與千粒卵重變化的相關(guān)性分析；②蠶卵孵化二日后，調(diào)查各品種冷藏79 d、111 d、142 d、146 d、150 d、153 d、156 d、159 d、162 d處理區(qū)的實用孵化率，對處理區(qū)孵化率反正弦轉(zhuǎn)換數(shù)據(jù)進行相關(guān)性分析。孵化率調(diào)查方法按照農(nóng)業(yè)部頒發(fā)的一代雜交種檢驗操作規(guī)程(NY/T327-1997)進行。

2)將本場2018年春季、2018年秋季繁育的兩廣二號正反交品種按照常規(guī)復(fù)式冷藏方法入庫保護，2019年分階段分別抽取冷藏79 d、111 d、142 d、162 d兩廣二號正反交品種各3 g，按品種對應(yīng)冷藏天數(shù)分成3個重復(fù)區(qū)，每區(qū)1 g，清點各區(qū)卵粒數(shù)，采用兩段式簡化催青方法分次催青，蠶種轉(zhuǎn)青后黑暗保護至次日早6：00感光孵化，2日后調(diào)查實用孵化率。將實用孵化率數(shù)據(jù)反正弦轉(zhuǎn)換后按繁育期、冷藏時間及二因素互作進行顯著性分析檢驗，并對差異顯著的因素進行平均數(shù)多重比較。

2 結(jié)果與分析

2.1 冷藏時間對蠶卵重量的影響

兩廣二號(正反交)、皓月×菁松千粒卵重的變化調(diào)查及相關(guān)系數(shù)顯著性檢驗見表1-2。

從表1、表2可知，兩廣二號(正交)、兩廣二號(反交)、皓月×菁松冷藏入庫時蠶卵千粒卵重分別為0.505 g、0.497 g、0.558 g，隨著冷藏時間延長，蠶卵重量均逐漸減輕，冷藏171日(6月30日)后其千粒卵重分別下降至0.473 g、0.470 g、0.548 g。經(jīng)相關(guān)分析，相關(guān)系數(shù)分別為-0.6346、-0.729、-0.4631，經(jīng)F值顯著性檢驗，兩廣二號(正交)差異性顯著，兩廣二號(反交)差異性極顯著，皓月×菁松差異性不顯著。

表1 不同品種不同冷藏時間的千粒卵重調(diào)查

表2 冷藏時間對不同蠶品種卵粒重相關(guān)系數(shù)顯著性檢驗

2.2 冷藏時間對蠶種孵化率的影響

兩廣二號(正反交)、皓月×菁松不同冷藏時間下的孵化率調(diào)查及相關(guān)系數(shù)顯著性檢驗見表3-4。

從表3、表4可知，在標準溫度冷藏保護中，不同品種對冷藏期限表現(xiàn)不同效果，皓月×菁松冷藏162 d(6月21日)孵化率達98.57%，仍達到農(nóng)業(yè)部桑蠶一代雜交種行業(yè)質(zhì)量標準(NY/326-1997)越年種實用孵化率≥90%的要求，與春季3月30日(冷藏79 d)孵化率調(diào)查相差不大，完全可以滿足蠶桑生產(chǎn)需要，而兩廣二號正反交品種的孵化率隨冷藏時間延長逐漸下降，142 d(6月1日)孵化率分別為81.07%、71.37%，冷藏162 d時孵化率分別下降至71.23%、58.37%，按照桑蠶一代雜交種行業(yè)及企業(yè)標準，這兩批蠶種不能用于夏蠶生產(chǎn)。經(jīng)孵化率數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換后的相關(guān)分析，3個批次兩廣二號(正交)、兩廣二號(反交)、皓月×菁松的相關(guān)系數(shù)分別為-0.9360、-0.9497、-0.3521，相關(guān)系數(shù)顯著性檢驗，3個批次兩廣二號(正交)、兩廣二號(反交)、皓月×菁松的F值分別為：49.495、64.3777、0.9906，兩廣二號(正交)、兩廣二號(反交)差異極顯著，皓月×菁松差異不顯著，說明含多化性血液品種耐冷藏性差，不利于長期冷藏。

表3 不同品種不同冷藏時間的實用孵化率調(diào)查

表4 冷藏時間對不同蠶品種孵化率的相關(guān)系數(shù)顯著性檢驗

2.3 蠶種繁育期與冷藏時間的關(guān)系

春制、秋制兩廣二號正反交品種常規(guī)復(fù)式冷藏后的孵化率調(diào)查結(jié)果見表5-7。

從表5、表6可知，春制、秋制兩廣二號冷藏79 d平均孵化率分別為98.2%、98.4%，隨著冷藏時間延長，春制兩廣二號孵化率逐漸下降，冷藏142 d時時平均孵化率下降至76.2%，冷藏162 d平均孵化率下降至64.8%，生產(chǎn)中必須淘汰；秋制兩廣二號冷藏至162 d平均孵化率仍有97.7%，下降幅度不大，達到行業(yè)及企業(yè)質(zhì)量標準，夏蠶種完全可以使用。經(jīng)孵化率數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換后差異顯著性分析，繁育時期、冷藏時間及二因素交互作用均為差異極顯著。

表5 繁育時期與冷藏時間二因素孵化率調(diào)查表

表6 冷藏時間、繁育期二因素方差分析表

由表7可知，B1、B2差異不顯著，與B3、B4差異極顯著，B3與B4差異極顯著，進一步對不同處理組合平均數(shù)采用SSR法多重比較，由表9可知，A2B1、 A2B2、A1B1、A2B3、A1B2、A2B4差異不顯著，與A1B3、A1B4差異極顯著，A1B3與A1B4差異極顯著,說明秋制兩廣二號安全冷藏期可達162 d，春制兩廣二號安全冷藏期只有111 d，即：春制兩廣二號越年種只可翌年春用，不可翌年夏用，秋制兩廣二號蠶種可以冷藏至翌年夏季使用[1]。

表7 不同處理組合平均數(shù)多重比較(SSR法)

3 小結(jié)與討論

3.1 冷藏時間對蠶種質(zhì)量的影響

千粒卵重是衡量蠶種質(zhì)量優(yōu)劣的指標之一。試驗結(jié)果表明，兩廣二號千粒卵重與與冷藏時間呈負相關(guān)，反交千粒卵重隨冷藏時間延長顯著性減小，而皓月×菁松千粒卵重與冷藏時間相關(guān)不顯著。兩廣二號蠶卵小，可能是貯存的營養(yǎng)物質(zhì)較皓月×菁松少，加之兩廣二號越冬解除滯育早，蠶卵內(nèi)營養(yǎng)物質(zhì)消耗比皓月×菁松快，所以兩廣二號蠶種冷藏時蠶卵重量減輕幅度較皓月×菁松大。千粒卵重的變化反映了蠶卵內(nèi)營養(yǎng)物質(zhì)的消耗情況，必然對蠶種的孵化造成一定的影響，千粒卵重與孵化率之間的變化關(guān)系有待進一步研究。

3.2 冷藏時間對蠶種孵化率的影響

實用孵化率即二日孵化率是衡量蠶種質(zhì)量優(yōu)劣的重要指標。試驗結(jié)果表明，兩廣二號孵化率與冷藏時間呈負相關(guān)，隨著冷藏時間的延長，孵化率逐漸下降，其反交種孵化率下降更為明顯，而皓月×菁松品種幾乎不受影響，在現(xiàn)行實用孵化率≥90%的生產(chǎn)標準下，本試驗兩廣二號春制越年種冷藏安全期為111 d,秋制種冷藏安全期為162 d。兩廣二號為上世紀九十年代廣東、廣西蠶區(qū)選育的夏秋用四元雜交種，我國南方地區(qū)桑樹發(fā)芽開葉早，一年可多批次養(yǎng)蠶，越年種無需長時間冷藏。兩廣二號含有多化性血緣[2]，抗高溫，越年種滯育期短，北方引種繁育后應(yīng)掌握好冷藏期限，防止超期冷藏造成蠶種孵化率下降，給蠶桑生產(chǎn)帶來迎頭損失。

3.3 兩廣二號春制越年種與秋制種用種問題

一般地，春制種可以通過即時浸酸、冷藏浸酸滿足當年夏蠶種、秋蠶種的生產(chǎn)需要，春制越年種和秋制種可以為翌年提供生產(chǎn)用種。本試驗結(jié)果表明，兩廣二號繁育期、冷藏時間的差異極顯著，二因素交互作用的差異極為顯著，也就是說春制越年種不如秋制種耐冷藏，兩廣二號春制越年種只可翌年春用，不可翌年夏用，兩廣二號秋制越年種可以冷藏至翌年夏季使用。2018年起，石泉縣蠶種場結(jié)合品種特性及氣候特點，采用多批次繁育蠶種模式，即：春季以生產(chǎn)菁松×皓月為主，晚春或夏季繁育兩廣二號作為即時浸酸早秋用種，秋季繁育兩廣二號翌年夏季用種的模式，縮短蠶種冷藏時間，大幅提高了兩廣二號蠶種的孵化率，降低蠶種生產(chǎn)成本的同時還減輕了冷藏浸酸蠶種計劃失調(diào)而報廢蠶種的風(fēng)險。