顱內(nèi)外動(dòng)脈搭橋術(shù)聯(lián)合BMMNCs治療缺血性腦卒中療效觀察*

王 華，張小廣

1.河南大學(xué)第一附屬醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，河南 開封 475000；

2.河南大學(xué)第一附屬醫(yī)院神經(jīng)外科，河南 開封 475000

如今，隨著我國逐漸步入人口老齡化社會(huì)，人們的生活水平提高，使得腦梗死發(fā)病率顯著上升。腦梗死具有較高的致殘率、致死率，臨床上尚未出現(xiàn)明顯的治療手段，主要是通過手術(shù)、藥物治療方式改善患者病情［1-2］。目前，臨床上尚未找到能夠提高梗死區(qū)域腦神經(jīng)細(xì)胞再生的方式，而干細(xì)胞作為神經(jīng)細(xì)胞再生的理想細(xì)胞，骨髓單個(gè)核細(xì)胞（BMMNCs）又是神經(jīng)干細(xì)胞的理想來源，因此國內(nèi)外專家不斷的探討骨髓單個(gè)核細(xì)胞在神經(jīng)細(xì)胞再生中的應(yīng)用價(jià)值。在本次研究中，為了解BMMNCs在缺血性腦血管病患者中應(yīng)用效果，對(duì)醫(yī)院收治的80例缺血性腦血管病患者展開分析，報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇于2016年1月—2018年1月間河南大學(xué)第一附屬醫(yī)院收治的缺血性腦血管病患者80例作為研究對(duì)象，將80例缺血性腦血管病患者隨機(jī)分為對(duì)照組和觀察組，每組各40例。

納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）腦梗死發(fā)病時(shí)間范圍＜3周；（2）年齡范圍：18～70歲；（3）發(fā)病時(shí)頭顱MRI證實(shí)存在明顯的腦梗死病灶，面積＞2 cm2；（4）有神經(jīng)功能障礙，NIHSS評(píng)分≥6分；（5）CTP顯示血管閉塞相關(guān)區(qū)域存在低灌注。

排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）年齡＜18歲，年齡＞70歲；（2）存在多種內(nèi)科疾病，不能耐受手術(shù)或有外科手術(shù)禁忌證患者；（3）妊娠期女性；（4）新發(fā)大面積腦梗死3周或腦梗死合并腦疝患者；（5）煙霧病腦出血3個(gè)月內(nèi)；（6）既往存在血液系統(tǒng)病史，存在嚴(yán)重出血傾向；（7）患者及其家屬不同意本次研究。

對(duì)照組：男性22例、女性18例，年齡34～67歲，平均年齡（54.7±4.6）歲，病程3～12 d，平均病程（6.7±1.4）d；觀察組：男性病例數(shù)23例、女性病例數(shù)17例，年齡36～68歲，平均年齡（54.9±4.8）歲，病程4～14 d，平均病程（6.8±1.3）d。對(duì)比兩組患者的性別、年齡、病程等一般資料，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

1.2 方法

對(duì)照組開展顱內(nèi)外血管搭橋手術(shù)+血清注射；觀察組開展顱內(nèi)外血管搭橋手術(shù)+BMMNCs經(jīng)搭橋血管注射。

顱內(nèi)外血管搭橋手術(shù)方式：了解顳淺動(dòng)脈走向，在外耳道上6 cm左右做骨窗，對(duì)大腦中動(dòng)脈的M2或M3進(jìn)行吻合，采取后期處理［3］。

制備BMMNCs：在無菌條件下，穿刺患者髂前上棘，抽取其骨髓60 ml，將其搖勻以后，骨穿針使用肝素沖管，使用無菌試管給予肝素抗凝。用Hanks平衡鹽溶液稀釋骨髓懸液1倍，1 500 r/min離心10 min，除去上層脂肪細(xì)胞，再用Hanks液稀釋骨髓懸液1倍［4］。取淋巴細(xì)胞分離液［密度（1.017±0.001）g/ml］放入空離心管中。將去脂肪的骨髓懸液沿試管壁緩緩加入，使骨髓懸液重疊于分離液上，骨髓懸液與分離液體積比例約為2∶1。以2 000 r/min低溫離心30 min，離心后管內(nèi)容物分為3層，上層為血漿和血小板，中層為分離液，底層為紅細(xì)胞和多核細(xì)胞。在上中層液體界面處可見到乳白色渾濁的單個(gè)核細(xì)胞層，呈白膜狀，用毛細(xì)吸管輕輕插到白膜層，沿試管壁吸取單個(gè)核細(xì)胞，移入另一試管。加Hanks液清洗細(xì)胞，1 500 r/min離心10 min后棄上清液，再加Hanks液使細(xì)胞重懸，離心清洗3次［5］。加血清培養(yǎng)液把細(xì)胞制成懸液，計(jì)數(shù)，備用。顱內(nèi)外血管搭橋及自體BMMNCs移植步驟：（1）取患側(cè)顳淺動(dòng)脈分支與大腦中動(dòng)脈皮層枝進(jìn)行端側(cè)吻合；（2）吻合成功后，將顳淺動(dòng)脈近心端臨時(shí)阻斷，在阻斷處以遠(yuǎn)穿刺顳淺動(dòng)脈，注射目標(biāo)液體（實(shí)驗(yàn)組注射含有BMMNCs的液體，對(duì)照組注射與其外觀相同的血清液），阻斷時(shí)間控制在10 min以內(nèi)［6］。

1.3 觀察指標(biāo)

在術(shù)前及術(shù)后3、6、12、24個(gè)月內(nèi)對(duì)患者進(jìn)行NIHSS評(píng)分，對(duì)比治療前后兩組患者腦梗死面積差值。另外兩組患者術(shù)后每個(gè)月均電話隨訪1次，確定是否出現(xiàn)明顯的不良事件。NIHSS評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)：0～1分正?；蚪跽?；1～4分輕度卒中/小卒中；5～15分中度卒中；15～20分中度、重度卒中；21～42分重度卒中。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

數(shù)據(jù)采用SPSS 23.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，組間比較采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以例數(shù)和百分比（%）表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

術(shù)前，兩組患者NIHSS評(píng)分對(duì)比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；術(shù)后3、6、12、24個(gè)月患者NIHSS評(píng)分與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表1。

表1 兩組患者NIHSS評(píng)分對(duì)比（±s） 分

表1 兩組患者NIHSS評(píng)分對(duì)比（±s） 分

組別對(duì)照組（n=40）觀察組（n=40）tP術(shù)前16.55±1.49 16.59±1.20 0.132 0.895術(shù)后3個(gè)月15.30±1.25 13.07±0.87 9.261 0.000術(shù)后6個(gè)月12.47±1.12 9.20±0.98 13.897 0.000術(shù)后12個(gè)月10.75±1.43 8.53±0.57 9.121 0.000術(shù)后24個(gè)月9.43±1.75 6.86±0.40 9.055 0.000

治療前兩組腦梗死面積分別為：觀察組（1.59±0.23）cm2、對(duì)照組（1.60±0.26）cm2，對(duì)比并無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異性（t=0.182，P＞0.05）；治療后，觀察組腦梗死面積為（0.78±0.05）cm2，明顯小于對(duì)照組的（1.05±0.12）cm2，組間數(shù)據(jù)對(duì)比（t=13.136，P＜0.05）。

隨訪12個(gè)月，觀察組出現(xiàn)2例不良事件，1例腦梗死再發(fā)生、1例癲癇，不良事件發(fā)生為5.00%。隨訪12個(gè)月，對(duì)照組患者中，出現(xiàn)8例不良事件，其中3例腦梗死、2例腫瘤形成、3例癲癇，不良反應(yīng)發(fā)生率為20.00%，組間數(shù)據(jù)對(duì)比（χ2=4.1143，P＜0.05）。

3 討論

作為人口大國，我國如今已經(jīng)步入老年化社會(huì)［7］。老年人群是腦血管疾病高發(fā)人群，其中腦卒中是僅次于心血管疾病、惡性腫瘤疾病導(dǎo)致患者死亡的疾病。缺血性腦卒中發(fā)生率往往要高于出血性腦卒中，很多患者會(huì)喪失生活自理能力或勞動(dòng)能力。缺血性腦卒中會(huì)導(dǎo)致患者出現(xiàn)語言功能障礙、肢體運(yùn)動(dòng)障礙等，這些臨床表現(xiàn)往往會(huì)嚴(yán)重危害到患者的工作、身心健康［8-9］。臨床上不斷的在探索合適的治療方式以改善患者病情，恢復(fù)腦組織、血管病變情況。常見的藥物治療雖然能夠達(dá)到一定效果，但是對(duì)于恢復(fù)損傷細(xì)胞并無明顯優(yōu)勢(shì)［10］。而BMMNCs作為一種有分化能力的細(xì)胞，大量存在于骨髓中，是干細(xì)胞較為理想的來源。干細(xì)胞是神經(jīng)細(xì)胞再生的理想細(xì)胞，但是干細(xì)胞往往制作過程復(fù)雜，而且要求較為嚴(yán)格，如果進(jìn)行體外培養(yǎng)會(huì)導(dǎo)致污染機(jī)率增加［11］。

相較于傳統(tǒng)的干細(xì)胞，BMMNCs能夠更容易提取、生物特性能夠最大程度保留。在國外的研究中，Helder Teixeira de Freitas將骨髓單個(gè)核細(xì)胞應(yīng)用于35只皮質(zhì)損傷后的大鼠，起到了促進(jìn)神經(jīng)細(xì)胞再生的效果，西班牙Francisco Moniche醫(yī)生等已經(jīng)在進(jìn)行BMMNCs治療腦梗死的臨床試驗(yàn)，他們采用靜脈注射或微導(dǎo)管注射的方法將含有BMMNCs的液體注入患者體內(nèi)，檢測(cè)其神經(jīng)生長因子及神經(jīng)功能恢復(fù)情況。相關(guān)研究均證實(shí)BMMNCs存在較高的安全性，而且不會(huì)對(duì)患者造成的較大的傷害［12］。

因此，在本文中，對(duì)觀察組患者在采取顱內(nèi)外血管搭橋術(shù)治療的同時(shí)，給予BMMNCs治療，觀察組患者的NIHSS評(píng)分顯著低于對(duì)照組，而且觀察組患者治療后的梗死面積低于對(duì)照組，不良事件發(fā)生率小于對(duì)照組。

綜上所述，在顱內(nèi)外動(dòng)脈搭橋術(shù)治療的同時(shí)，采取BMMNCs治療，有助于改善患者神經(jīng)功能缺損癥狀，減少不良事件發(fā)生率，提高治療效果，建議推廣。