田小曼,李朝紅
(1.楊凌職業(yè)技術(shù)學(xué)院,陜西 楊凌 712100;2.漢中職業(yè)技術(shù)學(xué)院,陜西 漢中 723002)
小麥赤霉病是由禾谷鐮刀菌(Fusariumgraminearum)引起的、在小麥生產(chǎn)的各個(gè)生育期都可發(fā)生的一種真菌病害[1]。發(fā)生赤霉病后,不僅可以造成小麥減產(chǎn)、品質(zhì)降低,而且病粒中還含有脫氧雪腐鐮刀菌醇(deoxynivalenol,DON)、玉蜀黍赤霉烯酮(zearalenone,ZEN)等多種對人、畜有害的毒素,人、畜誤食后可致發(fā)熱、嘔吐、腹瀉等癥狀,懷孕母畜中毒后可引發(fā)流產(chǎn),是小麥生產(chǎn)上的重要病害[2~4]。近年來由于赤霉病菌對多菌靈等苯并咪唑類殺菌劑耐藥性明顯、抗性品種缺乏等原因[5~6],造成赤霉病頻繁發(fā)生,危害逐漸嚴(yán)重[7~8]。筆者試驗(yàn)旨在篩選出對赤霉病有較好療效的化學(xué)藥劑。
供試藥劑:供試藥劑為市場上供應(yīng)的用于防治真菌性病害的藥劑28種,主要來自陜西上格之路生物有限公司、四川國光農(nóng)化有限公司、上海杜邦農(nóng)化有限公司、拜耳作物科學(xué)公司等,見表1。
表1 供試藥劑
供試菌種:強(qiáng)致病力禾谷鐮刀菌(Fusarium graminearum Schm.)菌株作接種體。供試小麥品種:銘賢169。
1.2.1 皿內(nèi)抑菌試驗(yàn) 將一系列濃度的藥液分別與熱融的PDA培養(yǎng)基混勻,配制成含有有效成分為0、0.1、0.5、1、5、10、50、100和1 000μg·mL-1的帶毒培養(yǎng)基。分別倒入9 cm的培養(yǎng)皿中,冷卻后接入用直徑為5 mm打孔器打好的小麥赤霉病菌餅,菌餅反向置于含毒培養(yǎng)基中間。每個(gè)處理重復(fù)三次,置于25℃的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。72h后每隔24h測量菌落生長的大小[9~10],計(jì)算抑制率、EC50等,對藥劑進(jìn)行初步篩選。
1.2.2 孢子萌發(fā)試驗(yàn) 將在麥粒上培養(yǎng)的禾谷鐮刀菌分生孢子用蒸餾水洗脫,制成孢子懸浮液。將篩選出來的抑菌效果較好的幾種藥劑逐級稀釋成系列濃度的藥液,與孢子懸浮液混合制成有效成分為1.56、3.12、6.25、12.5、25、50、100、200、400、800和1 600μg·mL-1的培養(yǎng)液。取適量于凹玻片內(nèi),每濃度重復(fù)三次。將凹玻片置于保濕皿內(nèi),在25℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h后鏡檢。鏡檢時(shí),每張玻片取10個(gè)視野,詳細(xì)統(tǒng)計(jì)孢子總數(shù)、萌發(fā)數(shù)和畸變數(shù)[11]。
1.2.3 田間藥效試驗(yàn) 挑選孢子萌發(fā)試驗(yàn)中抑制率和畸變率高的幾種藥劑,在2017年4月份進(jìn)行田間藥效試驗(yàn),以清水和多菌靈為對照。小區(qū)面積為6.5 m2,每個(gè)處理重復(fù)3次。在小麥揚(yáng)花期噴灑配制好的禾谷鐮刀菌孢子懸浮液,2 d后噴灑各種藥劑,乳熟后期調(diào)查發(fā)病情況。調(diào)查時(shí)每個(gè)小區(qū)五點(diǎn)取樣,每點(diǎn)選取200個(gè)麥穗,詳細(xì)記錄發(fā)病情況,根據(jù)病情指數(shù)計(jì)算防治效果。
測定結(jié)果各種藥劑對赤霉病菌的生長抑制作用強(qiáng)度均隨藥劑濃度增加而增強(qiáng),但有的藥劑72h的抑制效果比120 h明顯,有的藥劑120 h的抑制效果比72 h的抑制效果明顯,實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表2、續(xù)表2。
表2 不同藥劑對小麥赤霉病菌菌落生長的抑制作用
續(xù)表2 不同藥劑對小麥赤霉病菌菌落生長的抑制作用
由表2、續(xù)表2不難看出三唑酮、恒順、灰克、銀法力等藥劑對禾谷鐮刀菌幾乎沒有抑制作用;甲基托布津、易保、佳托、小礬等藥劑的藥力作用時(shí)間短暫,72 h時(shí)有較好的抑制作用,120 h時(shí)的抑制作用明顯減弱,有的甚至幾乎喪失抑制作用;福星、歐博、鼎嘉、博醫(yī)等藥劑對禾谷鐮刀菌的抑制效果一般,EC50偏大;巨樂、滿艷、使百克等藥劑抑制作用持久且藥力作用時(shí)間長,72 h與120 h的抑制率相差不大,且EC50都比較理想。
好力克、鮮貯、滿艷、巨樂、使百克和立克莠這六種藥劑在有效成分含量≥10μg·mL-1時(shí)72h和120 h的抑制率都能達(dá)到95%以上,其中鮮貯、滿艷和使百克這三種藥劑在有效成分含量≥5μg·mL-1時(shí)72 h和120 h的抑制率依舊能達(dá)到95%以上。因此,通過初步篩選,挑選好力克、鮮貯、滿艷、巨樂、使百克和立克莠這六種藥劑繼續(xù)做孢子萌發(fā)試驗(yàn),其他藥劑淘汰。
用懸滴法來測定禾谷鐮刀菌(Fusarium graminearum Schw.)分生孢子在各種藥劑不同濃度下的萌發(fā)情況。實(shí)驗(yàn)用藥有好立克、鮮貯、滿艷、巨樂、使百克、立克秀。每種藥劑設(shè)置11種不同濃度,分別為0、1.56、3.12、6.25、12.5、25、50、100、200、400、800、1 600、(單位為μg·mL-1;0代表清水對照),滿艷、鮮貯和使百克的有效成分都是咪鮮胺,立克莠和好力克的有效成分均為戊唑醇,巨樂的有效成分為咪鮮胺錳絡(luò)合物,結(jié)合抑制率和畸變率,選擇巨樂、鮮貯和好力克作為田間藥效試驗(yàn)的供試藥劑。不同藥劑對禾谷鐮刀菌分生孢子具體作用如表3。
表3 各種藥劑對禾谷鐮刀菌分生孢子抑制和致畸作用
24 h以后,各藥劑對禾谷鐮刀菌分生孢子的萌發(fā)均有抑制作用,其中以鮮貯和滿艷的抑制作用最強(qiáng),當(dāng)有效成分含量≥100 μg·mL-1時(shí),幾乎沒有孢子能萌發(fā),但這兩種藥的致畸效果不太明顯。巨樂和好力克在高濃度時(shí),對孢子的致畸作用明顯,也有較好的抑制萌發(fā)的作用。使百克和立克莠因?yàn)楦邼舛葧r(shí)顆粒太多,顯微鏡下無法觀察孢子的萌發(fā)情況和畸變情況。
各種藥劑對小麥赤霉病的田間防治效果詳情見表4。可見巨樂防治效果優(yōu)異,2 000倍液防效依舊能達(dá)到85%以上,鮮貯次之,好力克最后。巨樂和鮮貯藥劑用量≥250 μg·mL-1時(shí)防效都比多菌靈500 μg·mL-1的防效好,而好力克用量≥331 μg·mL-1時(shí),防效也比多菌靈500 μg·mL-1的防效好。因此可見,所篩選出來的這三種供試藥劑都比多菌靈防治小麥赤霉病更有效。
表4 各種藥劑防治小麥赤霉病(穗腐)的效果
實(shí)驗(yàn)結(jié)果說明,咪鮮胺、戊唑醇和咪鮮胺錳絡(luò)合物對小麥赤霉病菌有強(qiáng)抑制作用。篩選出來的三種藥劑鮮貯、好力克和巨樂對小麥赤霉病有防治效果。
當(dāng)前麥田病害系統(tǒng)日趨復(fù)雜,小麥銹病、赤霉病、黑穗病、白粉病、紋枯病等是影響小麥產(chǎn)量的主要病害,這些病害并發(fā)或交替發(fā)生,給化學(xué)防治帶來了不少難題[12]。
筆者研究初步證明咪鮮胺、戊唑醇和咪鮮胺錳絡(luò)合物對小麥赤霉病菌有比較好的防效,還有其他研究證實(shí)了戊唑醇對小麥白粉病、小麥條銹病、小麥紋枯病和散黑穗病有著良好的防治效果。可見戊唑醇有潛力成為一種小麥病害綜合防治的藥劑。
筆者實(shí)驗(yàn)只是大體的對市場上現(xiàn)存的藥劑進(jìn)行了篩選,沒有進(jìn)行過多的深入的研究。咪鮮胺、戊唑醇和咪鮮胺錳絡(luò)合物對小麥赤霉病菌是如何抑制的,對其他病害是否還有沒發(fā)掘的抑制效果,還需要進(jìn)一步研究。