eIF4E蛋白在乳腺癌組織中的表達(dá)及其意義

張梅燕 劉英霞 陳麗紅

廣東省惠州市第一人民醫(yī)院病理科，廣東惠州 516000

臨床中，腫瘤組織的發(fā)生、發(fā)展浸潤(rùn)以及轉(zhuǎn)移，通常與相關(guān)蛋白異常表達(dá)相關(guān)[1]。eIF4E是帽依賴性mRNA翻譯過程中的限速因子，其在大部分蛋白合成中均有調(diào)控作用[2]。據(jù)相關(guān)研究指出，在多種惡性腫瘤疾病中eIF4E蛋白檢測(cè)中，均發(fā)現(xiàn)eIF4E存在過表達(dá)問題，而且過表達(dá)程度關(guān)系著腫瘤組織侵襲能力[3-4]。本研究從2019年1月至2020年1月選取120例乳腺疾病患者，分析eIF4E蛋白的表達(dá)及其意義?，F(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2019年1月至2020年1月惠州市第一人民醫(yī)院收治的120例乳腺疾病患者，按照病理類型分組，60例乳腺纖維腺瘤患者納入對(duì)照組，60例乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌患者納入研究組。對(duì)照組均為女性，年齡33～70歲，平均（58.46±6.78）歲，平均身高（160.85±13.12）cm，平均體重（58.41±10.78）kg；研究組均為女性，年齡35～71歲，平均（58.66±6.59）歲，平均身高（160.77±13.44） cm，平均體重（58.33±10.59） kg。兩組一般資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)意義（P＞0.05），具有可比性。納入標(biāo)準(zhǔn)：均經(jīng)病理檢查證實(shí)；對(duì)本次研究知曉且同意參與；病歷資料完整；經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。排除標(biāo)準(zhǔn)：接受放化療；合并其他惡性腫瘤疾??；合并嚴(yán)重器質(zhì)性疾病、精神疾病等患者。

1.2 方法

所選研究對(duì)象均通過免疫組化S-P法對(duì)eIF4E蛋白表達(dá)予以檢測(cè)，選用武漢博士德生物工程有限公司生產(chǎn)的鼠抗人elF4E單克隆抗體P-2；選用北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)的DAB顯色試劑盒；選用福州邁新公司生產(chǎn)的免疫組化S-P檢測(cè)試劑盒。具體操作如下：以免疫組化S-P檢測(cè)試劑盒說明書為依據(jù)開展檢測(cè)工作，先對(duì)腫瘤組織予以石蠟切片處理，厚度為5 μm，之后通過二甲苯進(jìn)行脫蠟處理，再對(duì)標(biāo)本予以梯度酒精水化處理，通過蛋清（10%）進(jìn)行封閉，并滴入一抗，通過過氧化氫（體積分?jǐn)?shù)1%）對(duì)內(nèi)源性過氧化物酶進(jìn)行封閉，再滴入二抗，同時(shí)加入鏈霉親和素—過氧化物酶復(fù)合物，待DAB顯色，再通過蘇木素進(jìn)行復(fù)染，每次檢測(cè)陰性對(duì)照選用磷酸緩沖鹽溶液代替一抗，陽(yáng)性對(duì)照選用已經(jīng)確認(rèn)為eIF4E蛋白陽(yáng)性表達(dá)的腫瘤組織。

1.3 觀察指標(biāo)及評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)

分析兩組陽(yáng)性表達(dá)率，并對(duì)eIF4E蛋白陽(yáng)性表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及臨床分期之間的關(guān)系進(jìn)行分析。eIF4E蛋白陽(yáng)性表達(dá)判定標(biāo)準(zhǔn)如下：隨機(jī)選擇5個(gè)視野，通過高倍鏡進(jìn)行觀察，每個(gè)視野觀察細(xì)胞數(shù)量在200個(gè)以上，根據(jù)著色深淺程度、陽(yáng)性細(xì)胞占比判定陽(yáng)性率，具體內(nèi)容如下：①著色深淺程度判定。0分：陰性，1分：淡黃色，2分：中度黃色，3分：棕黃色。②陽(yáng)性細(xì)胞占比。1分：占比在10%及以下，2分：占比介于11%～50%，3分占比在50%以上。著色深淺評(píng)分與陽(yáng)性細(xì)胞占比評(píng)分乘積為總分，總分在3分以下為陰性，3分及以上為陽(yáng)性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 21.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，計(jì)量資料用（）表示，組間比較采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料用[n（%）]表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組eIF4E蛋白陽(yáng)性表達(dá)率比較

對(duì)照組eIF4E蛋白陽(yáng)性表達(dá)28例，陽(yáng)性表達(dá)率為46.67%，研究組eIF4E蛋白陽(yáng)性表達(dá)52例，陽(yáng)性表達(dá)率為86.67%，研究組eIF4E蛋白陽(yáng)性表達(dá)率高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表1。

表1 兩組eIF4E蛋白陽(yáng)性表達(dá)率比較

2.2 乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與eIF4E蛋白陽(yáng)性表達(dá)關(guān)系

在研究組患者中，36例存在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，其中eIF4E蛋白陽(yáng)性表達(dá)36例，陽(yáng)性表達(dá)率為100.00%，24例無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，其中eIF4E蛋白陽(yáng)性表達(dá)16例，陽(yáng)性表達(dá)率為66.67%，存在淋巴轉(zhuǎn)移患者的eIF4E蛋白陽(yáng)性表達(dá)率高于無淋巴轉(zhuǎn)移患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表2。

表2 乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與eIF4E蛋白陽(yáng)性表達(dá)關(guān)系

2.3 乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌臨床分期與eIF4E蛋白陽(yáng)性表達(dá)關(guān)系

在研究組患者中，24例臨床分期為中晚期（Ⅲ期、Ⅳ期），其中eIF4E蛋白陽(yáng)性表達(dá)23例，陽(yáng)性表達(dá)率為95.83%，36例臨床分期為早期（Ⅰ期、Ⅱ期），其中eIF4E蛋白陽(yáng)性表達(dá)29例，陽(yáng)性表達(dá)率為80.56%，中晚期患者eIF4E蛋白陽(yáng)性表達(dá)率高于早期患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表3。

表3 乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌臨床分期與eIF4E蛋白陽(yáng)性表達(dá)關(guān)系

3 討論

通常情況下，機(jī)體中eIF4E蛋白表達(dá)較低，如果eIF4E蛋白出現(xiàn)過表達(dá)現(xiàn)象，則會(huì)引發(fā)基因不穩(wěn)定，進(jìn)而導(dǎo)致細(xì)胞癌變。對(duì)于腫瘤相關(guān)mRNA翻譯，eIF4E均有調(diào)控作用，而這不僅與多種蛋白合成、癌變、細(xì)胞侵襲相關(guān)，同時(shí)也與癌基因激活、自分泌生長(zhǎng)刺激、細(xì)胞外環(huán)境通訊等相關(guān)[5]。據(jù)相關(guān)研究[6]指出，在頭頸部鱗狀細(xì)胞癌中，eIF4E蛋白出現(xiàn)過表達(dá)現(xiàn)象，而在正常組織及良性病變組織中eIF4E蛋白則無過表達(dá)現(xiàn)象。同時(shí)也有學(xué)者指出，頭頸部腫瘤標(biāo)本切取區(qū)域不同，如腫瘤核心區(qū)域、過渡區(qū)域、邊緣區(qū)域，其eIF4E蛋白表達(dá)也存在差異，所以可以將eIF4E蛋白過表達(dá)作為惡性病變的分子標(biāo)記之一[7]。在相關(guān)研究[8]指出，胃癌浸潤(rùn)深度與eIF4E陽(yáng)性表達(dá)有關(guān)，而且淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移也與eIF4E陽(yáng)性表達(dá)相關(guān)，說明eIF4E陽(yáng)性表達(dá)關(guān)系著胃癌形成，而且隨著病情發(fā)展eIF4E陽(yáng)性表達(dá)也持續(xù)提高，由此可見eIF4E陽(yáng)性表達(dá)水平可以對(duì)胃癌惡性程度進(jìn)行有效評(píng)估。相比于傳統(tǒng)腫瘤轉(zhuǎn)移評(píng)估指標(biāo)，eIF4E蛋白過表達(dá)具備較強(qiáng)的敏感性以及特異性[9]。有研究[10]顯示，對(duì)乳腺癌標(biāo)本中eIF4E蛋白表達(dá)進(jìn)行檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者的eIF4E蛋白表達(dá)更高，與無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者的eIF4E蛋白表達(dá)有明顯區(qū)別，所以可以將eIF4E陽(yáng)性表達(dá)作為淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移判定的一個(gè)指標(biāo)。本研究中，分別對(duì)乳腺纖維腺瘤、乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌患者進(jìn)行eIF4E蛋白表達(dá)檢測(cè)，結(jié)果顯示，乳腺纖維腺瘤患者eIF4E蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為46.67%，乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌eIF4E蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為86.67%，乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌eIF4E蛋白陽(yáng)性表達(dá)率高于乳腺纖維腺瘤，同時(shí)在乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌患者中，存在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者的eIF4E蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為100.00%，無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者eIF4E蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為66.67%，存在淋巴轉(zhuǎn)移患者的eIF4E蛋白陽(yáng)性表達(dá)率高于無淋巴轉(zhuǎn)移患者。

eIF4E的α和（或）β結(jié)構(gòu)域單一，涉及到三條長(zhǎng)的α螺旋以及八條由非平行β鏈組成且彎曲的β片層，其可以與mRNA5’帽子結(jié)構(gòu)特異性地結(jié)合，進(jìn)而解除5’非翻澤區(qū)螺旋，對(duì)mRNA翻譯予以參與[11-12]。在帽依賴翻譯初始時(shí)，eIF4E具備限制以及調(diào)節(jié)效果[13-14]。通常條件下，eIF4E在細(xì)胞中呈現(xiàn)出低表達(dá)狀態(tài)，但在腫瘤疾病中出現(xiàn)表達(dá)失控現(xiàn)象，如乳腺癌、肺癌、前列腺癌、淋巴瘤等[15-16]。據(jù)相關(guān)研究指出，相比于乳腺良性疾病，eIF4E在乳腺癌中的表達(dá)更高，且兩項(xiàng)檢查結(jié)果相差可達(dá)3 ～ 30倍，而且相比于低表達(dá)患者，中表達(dá)以及高表達(dá)患者的疾病復(fù)發(fā)率更高，分別可達(dá)4.1倍和7.2倍，由此可見隨著eIF4E蛋白在癌癥組織中的表達(dá)水平升高，患者疾病復(fù)發(fā)率也隨之提高，這也說明乳腺癌患者預(yù)后與eIF4E蛋白表達(dá)增高之間存在一定聯(lián)系[17-18]。

對(duì)于乳腺癌患者來說，可以通過對(duì)組織中eIF4E蛋白表達(dá)進(jìn)行檢測(cè)，進(jìn)而對(duì)乳腺纖維腺瘤以及乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌進(jìn)行鑒別診斷，而且還可以通過檢測(cè)組織中eIF4E蛋白表達(dá)判斷淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期情況，具備顯著臨床價(jià)值。