• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    基于骨細(xì)胞的骨穩(wěn)態(tài)維持與骨缺損修復(fù)*

    2021-03-29 04:13:15樂,
    中國病理生理雜志 2021年11期
    關(guān)鍵詞:骨組織成骨骨細(xì)胞

    洪 樂, 李 鑫

    (口腔疾病研究國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,國家口腔疾病臨床醫(yī)學(xué)研究中心,四川大學(xué)華西口腔醫(yī)院,四川成都610041)

    1 骨細(xì)胞概述

    骨細(xì)胞是骨骼系統(tǒng)中含量最豐富、分布最廣泛的細(xì)胞,由成骨細(xì)胞分化而來,包埋于礦化的骨基質(zhì)中,占成年人骨骼細(xì)胞的90%~95%,壽命可長達(dá)25年[1]。多年來研究者對骨細(xì)胞的生物學(xué)性質(zhì)與功能知之甚少。隨著骨細(xì)胞分離和體外培養(yǎng)技術(shù)的開發(fā),人們對骨細(xì)胞的認(rèn)知有了極大的拓展。從最早認(rèn)為骨細(xì)胞是埋藏在礦化骨基質(zhì)中靜止的、不活躍的細(xì)胞[2],到發(fā)現(xiàn)其機(jī)械應(yīng)力轉(zhuǎn)導(dǎo)和礦物質(zhì)穩(wěn)態(tài)維持功能[3],再到近幾年研究發(fā)現(xiàn)骨細(xì)胞的骨代謝調(diào)控作用[4],骨細(xì)胞目前已成為骨生理和骨病理研究的熱點(diǎn)。

    骨組織的生理代謝過程大致可分為骨形成和骨改建兩個(gè)階段,個(gè)體生長發(fā)育期中以骨形成為主導(dǎo),骨改建則貫穿整個(gè)生命周期。這兩個(gè)階段中均伴隨生理性成骨過程[5]。成骨細(xì)胞經(jīng)歷膠原基質(zhì)分泌、細(xì)胞嵌入、細(xì)胞突生成3 個(gè)階段分化為骨細(xì)胞,所在位置被基質(zhì)包埋而成為骨陷窩[6];成熟骨細(xì)胞通過細(xì)胞突與其他骨細(xì)胞互相連接,形成最基本的骨細(xì)胞網(wǎng)格;隨著基質(zhì)分泌、礦化與包埋,細(xì)胞突周圍形成骨小管,從而最終形成骨陷窩-骨小管網(wǎng)格系統(tǒng)(lacuno-canaliculi system,LCN)。據(jù)估計(jì)成人體內(nèi)LCN 總面積可達(dá)到 201 m2[7],每個(gè)組成 LCN 的骨細(xì)胞可伸出多達(dá)40~100 個(gè)細(xì)胞突。在皮質(zhì)骨解剖中,骨細(xì)胞層疊環(huán)繞哈弗氏管而形成骨單位。LCN 及骨單位的存在令各類信號分子得以進(jìn)行跨細(xì)胞移動,是骨細(xì)胞發(fā)揮功能的形態(tài)學(xué)與組織學(xué)基礎(chǔ)[8]。雖然組織學(xué)上骨細(xì)胞與成骨細(xì)胞同源,二者基因選擇性表達(dá)幾近相同,但在表達(dá)水平上卻呈現(xiàn)明顯差異。例如,骨細(xì)胞中堿性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)和I 型膠原蛋白(collagen type I,Col I)表達(dá)水平較低,而磷酸代謝和骨組織礦化相關(guān)基因如X 染色體內(nèi)肽酶同源磷酸調(diào)節(jié)基因(phosphate regulating gene with homologies to endopeptidases on the X-chromosome,PHEX)、細(xì)胞外基質(zhì)磷酸糖蛋白(matrix extracellular phosphoglycoprotein,MEPE)、特定成纖維細(xì)胞生長因子(fibroblast growth factor,F(xiàn)GF)等的表達(dá)較高[6]。這也導(dǎo)致了骨細(xì)胞特有的功能機(jī)制。

    2 骨細(xì)胞參與骨穩(wěn)態(tài)維持

    骨組織的動態(tài)代謝過程是由成骨細(xì)胞和破骨細(xì)胞共同協(xié)調(diào)的[4],而骨細(xì)胞可與骨微環(huán)境中多種細(xì)胞發(fā)生交互作用,進(jìn)而影響骨形成與骨吸收的動態(tài)平衡。骨細(xì)胞的數(shù)量和活性對骨組織正常生理功能的維持十分重要,其凋亡則與骨組織病理情況密切相關(guān)[6]。靶向消除骨細(xì)胞的轉(zhuǎn)基因小鼠表現(xiàn)出成骨細(xì)胞功能障礙、骨小梁缺失、皮質(zhì)空隙增加等脆性骨特征[9]。在新生小鼠體內(nèi)利用原位末端轉(zhuǎn)移酶標(biāo)記DNA 片段分析發(fā)現(xiàn),骨細(xì)胞凋亡小體的核因子κB 配體受體激活劑(receptor activator of nuclear factor-κB ligand,RANKL)表達(dá)與釋放增加,進(jìn)而作為破骨細(xì)胞招募與分化的信號[10],影響局部骨改建從而參與骨發(fā)育進(jìn)程。衰老小鼠中骨細(xì)胞的數(shù)目明顯降低,且骨細(xì)胞凋亡通過誘導(dǎo)破骨細(xì)胞形成與招募從而調(diào)控衰老相關(guān)骨病理進(jìn)程[11]。

    在骨形成方面,骨細(xì)胞可以通過參與類骨基質(zhì)的合成和礦化、合成骨形成與礦化相關(guān)蛋白質(zhì),如Col I、骨鈣蛋白(osteocalcin,OCN)及ALP 等[4],參與骨生成。骨細(xì)胞也可通過分泌骨橋蛋白(osteopontin,OPN)及OPN/CD4 介導(dǎo)通路,招募骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs),啟動成骨分化與骨形成[4];還可分泌骨硬化蛋白(sclerostin,SOST)。作為骨細(xì)胞特異性表達(dá)的分泌蛋白,SOST 在骨小管中廣泛分布,主要通過拮抗骨形態(tài)發(fā)生蛋白(bone morphogenetic protein,BMP)及競爭性結(jié)合低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白5/6(lowdensity lipoprotein receptor-related protein 5/6,LRP5/6)兩種調(diào)控方式[12],阻斷 Wnt 通路對成骨分化和骨形成的促進(jìn)作用[13]。同時(shí),骨細(xì)胞特異性高表達(dá)FGF2及FGF18[4]。當(dāng)FGF2缺失時(shí),成骨細(xì)胞數(shù)目顯著減少、骨量下降;敲除FGF18則表現(xiàn)出骨骼延遲形成。FGF 通路與Wnt 通路的協(xié)同作用可解除Wnt 抑制從而促進(jìn)成骨分化與骨形成[14]。

    在骨吸收方面,骨細(xì)胞可分泌RANKL。RANKL和巨噬細(xì)胞集落刺激因子(macrophage colony-stimulating factor,M-CSF)是破骨細(xì)胞分化過程的關(guān)鍵因子[15]。M-CSF基因敲除小鼠表現(xiàn)出骨細(xì)胞缺陷與骨質(zhì)疏松表型,這可能是由于M-CSF 對骨細(xì)胞存活和(或)分化的直接影響,或是破骨細(xì)胞和(或)巨噬細(xì)胞依賴性信號缺失的間接作用[15]。而RANKL可阻止破骨細(xì)胞凋亡,促進(jìn)破骨細(xì)胞前體分化并增強(qiáng)成熟破骨細(xì)胞活性,從而調(diào)控破骨細(xì)胞的活化與功能[16]。骨細(xì)胞源性RANKL對骨穩(wěn)態(tài)至關(guān)重要,有證據(jù)顯示,純化的骨細(xì)胞比成骨細(xì)胞或BMSCs更能通過釋放RANKL刺激破骨細(xì)胞分化成熟[17]。在特定條件下,骨細(xì)胞也可模仿破骨細(xì)胞的功能,通過清除周圍骨基質(zhì)從而作為骨組織的一種保護(hù)機(jī)制[18]。值得注意的是,骨細(xì)胞可通過RANKL/OPG 軸調(diào)控骨吸收過程[19]。骨保護(hù)素(osteoprotegerin,OPG)可與 RANKL 相互拮抗[19],阻止RANKL-RANK 間結(jié)合,因而RANKL/OPG 比值是決定破骨細(xì)胞介導(dǎo)的骨吸收在特定部位發(fā)生程度的關(guān)鍵因素。同時(shí),骨細(xì)胞可通過分泌BMP 等與甲狀旁腺激素(parathyroid hormone,PTH)、雌激素等其他外源性因子共同作用調(diào)節(jié) RANKL/OPG 比例[20],從而控制成骨-破骨的動態(tài)平衡。此外,在應(yīng)力作用下,成熟骨細(xì)胞的胞內(nèi)鈣離子濃度隨之發(fā)生改變進(jìn)而通過信號通路調(diào)控引起相關(guān)生物學(xué)作用,提示骨細(xì)胞可通過機(jī)械感受機(jī)制直接參與調(diào)控骨穩(wěn)態(tài)[21]。

    3 骨細(xì)胞參與骨缺損進(jìn)程

    骨缺損泛指一整類由感染、創(chuàng)傷、腫瘤、骨髓炎清創(chuàng)及先天性疾病造成骨質(zhì)缺失、間隙形成的疾病[22]。因診斷標(biāo)準(zhǔn)復(fù)雜、臨床表現(xiàn)多樣,學(xué)術(shù)上一般使用“臨界骨缺損”(critical-sized bone defects,CSBD)或“大段骨缺損”(large/massive bone defects)描述長度超過2 cm或深度超過骨周徑50%的骨體缺損[23-24]。有報(bào)道指出,外傷骨折患者中有0.4%(主要是粉碎性、開放性骨折)伴發(fā)臨界骨缺損[25],全球每年因顱面部臨界骨缺損進(jìn)行的骨移植術(shù)可超過100 萬例[26]。此外,臨界骨缺損還可繼發(fā)休克、感染、各型骨不連及損傷性骨化等并發(fā)癥[23-24,27-34],嚴(yán)重影響患者健康及生存,為社會帶來巨大的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。骨缺損后骨細(xì)胞的病理變化主要包括3 個(gè)方面:首先,骨細(xì)胞網(wǎng)格狀結(jié)構(gòu)將逐漸發(fā)生細(xì)胞突的萎縮斷裂、陷窩中細(xì)胞皺縮、細(xì)胞核染色性狀改變等退行性變化,單個(gè)骨細(xì)胞的平均骨細(xì)胞小管數(shù)也明顯減少[35-36];其次,骨缺損后病灶區(qū)骨細(xì)胞內(nèi)分泌功能減弱,而鄰近健康骨細(xì)胞分泌功能增強(qiáng)[35],提示骨缺損阻斷了骨細(xì)胞間通訊[37];此后,骨陷窩及骨小管中液體流速及成分發(fā)生變化,溶解氧減少,從而引起骨細(xì)胞凋亡并釋放炎性細(xì)胞因子招募破骨細(xì)胞[36];后期,病灶區(qū)骨細(xì)胞加速血管新生并進(jìn)一步促進(jìn)破骨細(xì)胞募集及骨重建[35]。在炎性骨缺損中,促炎性細(xì)胞因子的釋放將加速骨細(xì)胞凋亡,從而加速上述進(jìn)程[38]。成熟骨組織出現(xiàn)微小骨缺損后,骨細(xì)胞可通過旁分泌信號通路抑制破骨細(xì)胞活性[39],并分泌腫瘤壞死因子(tumor necrosis factor,TNF)等炎癥因子以加速骨修復(fù)[35]。

    在不同的病理狀態(tài)下,骨細(xì)胞可能參與骨折、炎性骨損傷和腫瘤骨轉(zhuǎn)移的疾病進(jìn)程。在骨質(zhì)疏松導(dǎo)致的骨折率增加與骨折愈合延遲中,骨細(xì)胞中縫隙連接蛋白43(connexin 43,Cx43)基因突變的轉(zhuǎn)基因小鼠骨折韌性降低且骨折風(fēng)險(xiǎn)增加,提示骨細(xì)胞對維持骨組織正常結(jié)構(gòu)和機(jī)械完整性的重要作用[40]。在重度牙周炎引發(fā)的牙槽骨缺損中,牙周致病菌毒性產(chǎn)物脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)可穿透牙槽骨直接刺激包埋其中的骨細(xì)胞,引起RANKL 陽性的骨細(xì)胞比例及RANKL 整體水平顯著上調(diào),從而引起牙槽骨炎性骨丟失。抑制骨細(xì)胞SOST的表達(dá)可誘導(dǎo)牙槽骨中牙周膜干細(xì)胞的成骨向分化產(chǎn)生類骨細(xì)胞并最終轉(zhuǎn)化為骨,進(jìn)而導(dǎo)致牙槽骨體積增加甚至逆轉(zhuǎn)牙槽骨退化。腫瘤骨轉(zhuǎn)移過程中轉(zhuǎn)移癌細(xì)胞與靶骨組織骨微環(huán)境之間相互作用可引起骨組織的溶骨性或成骨性病變[13]。研究已表明,腫瘤骨轉(zhuǎn)移過程中,在包括原發(fā)性腫瘤擴(kuò)散、轉(zhuǎn)移性腫瘤休眠、轉(zhuǎn)移性腫瘤生長、腫瘤誘導(dǎo)成骨/溶骨的多個(gè)進(jìn)程中,Wnt信號通路都起到重要作用[13]。例如,在間充質(zhì)上皮轉(zhuǎn)化過程中βcatenin 等的高參與度決定了其在原發(fā)性腫瘤擴(kuò)散的重要地位[41];同時(shí),Wnt 通路可通過β-catenin 介導(dǎo)的經(jīng)典途徑或非經(jīng)典途徑直接調(diào)控腫瘤細(xì)胞的休眠行為[42];轉(zhuǎn)移性腫瘤生長時(shí),Wnt3a 等分子可通過下游通路介導(dǎo)腫瘤細(xì)胞與骨微環(huán)境的交流從而支持腫瘤細(xì)胞生長[43];而在腫瘤細(xì)胞誘導(dǎo)成骨/溶骨過程中,腫瘤細(xì)胞分泌的Wnt7b 等分子可破壞骨穩(wěn)態(tài)從而引起骨組織損傷[44-45]。在腫瘤轉(zhuǎn)移骨組織中,骨細(xì)胞的SOST 表達(dá)與分泌水平也可發(fā)現(xiàn)明顯升高,表明骨細(xì)胞可能通過分泌SOST調(diào)控腫瘤細(xì)胞對骨組織的浸潤與損傷[46]。研究還發(fā)現(xiàn),腫瘤骨轉(zhuǎn)移過程中骨細(xì)胞中表達(dá)的Cx43還可與乳腺癌細(xì)胞表達(dá)的Cx43形成異質(zhì)細(xì)胞間隙來促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的遷移和入侵[47]。此外,在腫瘤骨轉(zhuǎn)移晚期,骨細(xì)胞凋亡將加劇骨吸收與骨沉積失衡從而加速骨破壞[17],嚴(yán)重影響患者生存質(zhì)量。

    4 靶向骨細(xì)胞調(diào)控骨代謝

    骨細(xì)胞參與的 Wnt 通路[48]可與 BMP 通路[49]和Hedgehog 通路[50]交互作用,進(jìn)而調(diào)控骨與軟骨生成。在成骨調(diào)控中,Wnt 經(jīng)典通路通過激活β 連環(huán)蛋白(β-catenin)進(jìn)入細(xì)胞核內(nèi)啟動RUNX2基因活化,以此調(diào)節(jié)ALP、OCN、Col I 等的表達(dá)促進(jìn)成骨分化。值得注意的是,在發(fā)育不同階段,Wnt 通路對骨形成的調(diào)控有賴于不同的細(xì)胞類型。在發(fā)育早期[5,13],Wnt/β-catenin 通路在BMSCs、成骨祖細(xì)胞及早期成骨細(xì)胞等高表達(dá),敲除CTNNB1基因(編碼β-catenin 的基因)將導(dǎo)致成骨細(xì)胞數(shù)量缺失,骨形成進(jìn)程終止;而在成骨發(fā)育晚期,Wnt 對上述細(xì)胞的作用相對減弱,轉(zhuǎn)而通過骨細(xì)胞對骨形成施加影響。將小鼠原代BMSCs 與原代骨細(xì)胞進(jìn)行體外共培養(yǎng)發(fā)現(xiàn),在成骨發(fā)育晚期激活骨細(xì)胞β-catenin可顯著增強(qiáng)BMSCs的成骨向分化;體內(nèi)激活骨細(xì)胞的Wnt 信號也可顯著增加成骨細(xì)胞數(shù)量及骨量[5],提示骨細(xì)胞的Wnt/βcatenin 通路對骨形成代謝有重要調(diào)控作用。近期研究也發(fā)現(xiàn)Wnt/β-catenin 通路在血管生成和免疫監(jiān)視方面的調(diào)節(jié)作用[51],針對性調(diào)控骨細(xì)胞Wnt 通路可能對骨穩(wěn)態(tài)維持及骨缺損修復(fù)有重要意義。

    骨細(xì)胞也可通過Wnt通路調(diào)節(jié)自身Notch配體的表達(dá)進(jìn)而激活靶細(xì)胞如BMSCs的Notch通路[5]。典型的Notch 通路由受體、配體及DNA 結(jié)合因子組成,是進(jìn)化上高度保守的信號通路。在卵巢去勢的成年小鼠中,過表達(dá)Notch通路可促進(jìn)包埋在基質(zhì)中的骨細(xì)胞繼續(xù)增殖分化,從而顯著促進(jìn)成骨[52]。Notch 通路也可通過下調(diào)SOST與Dickkopf-1(DKK1)的表達(dá),正向調(diào)控 Wnt 通路[52],也可通過 Smad 依賴的 BMP 信號通路協(xié)同上調(diào)OPG 表達(dá)水平,從而促進(jìn)成骨細(xì)胞分化與骨形成,間接抑制破骨細(xì)胞分化與骨吸收?;赗osa 轉(zhuǎn)基因小鼠條件性誘導(dǎo)骨形成不同階段Notch表達(dá)的研究發(fā)現(xiàn),不同發(fā)育階段對Notch通路在骨組織中的作用有重要影響。在未成熟的成骨細(xì)胞中抑制Notch 表達(dá)時(shí),成骨分化進(jìn)程將被阻止,導(dǎo)致骨質(zhì)減少;而在骨細(xì)胞中抑制Notch 表達(dá)則可抑制骨吸收,增加骨體積[53]。因此,對骨細(xì)胞相關(guān)Notch通路的調(diào)控應(yīng)注意骨組織所處環(huán)境對調(diào)控手段的影響。

    靶向Wnt 通路抑制劑SOST 的骨損傷修復(fù)療法近年來已頗有成效。2010 年SOST 單抗羅莫佐單抗(romosozumab/AMG785)率先在美國完成人體內(nèi)臨床試驗(yàn)[54],并于 2019 年獲 FDA 批準(zhǔn)作為一種骨折高危絕經(jīng)后女性的骨質(zhì)疏松癥治療藥物上市。骨細(xì)胞SOST的表達(dá)受機(jī)械應(yīng)力刺激、失重、PTH、雌激素、胰島素樣生長因子(insulin-like growth factor,IGF)等的影響[12,55],這可能為未來針對性調(diào)控骨細(xì)胞中 SOST表達(dá)與分泌的骨修復(fù)與再生策略提供一定參考。

    5 結(jié)語

    骨細(xì)胞雖然在骨骼系統(tǒng)中數(shù)量最多、分布最廣,但研究進(jìn)展卻長期落后于同在骨組織中的成骨細(xì)胞和破骨細(xì)胞。近年來,骨細(xì)胞偶聯(lián)成骨與破骨活動調(diào)控骨代謝的作用成為骨生理和骨病理研究的熱點(diǎn)。骨細(xì)胞的獨(dú)特形態(tài)學(xué)與生物學(xué)特性使其在生命進(jìn)程早期的發(fā)育階段乃至成年期生理與病理狀態(tài)下的骨代謝中都發(fā)揮著重要作用。本文淺談了骨細(xì)胞在骨穩(wěn)態(tài)維持與骨缺損修復(fù)中的科研進(jìn)展。值得注意的是,雖然當(dāng)前靶向骨細(xì)胞的骨代謝調(diào)控策略的研究已取得一定進(jìn)展,但基于此的實(shí)際臨床轉(zhuǎn)化應(yīng)用仍十分匱乏。一些關(guān)鍵問題,如骨細(xì)胞的脫分化潛能、直接或間接的骨細(xì)胞功能調(diào)控方式、新型骨代謝調(diào)節(jié)因子或分子靶點(diǎn)的鑒別等,均需進(jìn)一步的研究,以便為基于骨細(xì)胞的骨組織修復(fù)與再生策略提供科學(xué)依據(jù)。因此,對骨細(xì)胞在骨穩(wěn)態(tài)和骨損傷中的調(diào)控作用及其機(jī)制的深入研究將有助于我們認(rèn)識骨發(fā)育、損傷、修復(fù)和再生過程,為代謝性骨病的防治方法提供參考。

    猜你喜歡
    骨組織成骨骨細(xì)胞
    機(jī)械應(yīng)力下骨細(xì)胞行為變化的研究進(jìn)展
    經(jīng)典Wnt信號通路與牙周膜干細(xì)胞成骨分化
    調(diào)節(jié)破骨細(xì)胞功能的相關(guān)信號分子的研究進(jìn)展
    硅+鋅+蠶絲 印度研制出促進(jìn)骨組織生成的新型材料
    山東陶瓷(2019年2期)2019-02-17 13:08:24
    骨細(xì)胞在正畸牙移動骨重塑中作用的研究進(jìn)展
    鈦夾板應(yīng)用于美學(xué)區(qū)引導(dǎo)骨組織再生1例
    糖尿病大鼠Nfic與成骨相關(guān)基因表達(dá)的研究
    液晶/聚氨酯復(fù)合基底影響rBMSCs成骨分化的研究
    長期應(yīng)用糖皮質(zhì)激素對大鼠骨組織中HMGB1、RAGE、OPG和RANKL表達(dá)的影響
    30例Ⅰ型成骨不全患者股骨干骨折術(shù)后康復(fù)護(hù)理
    久久草成人影院| 日本免费a在线| 国产一区二区亚洲精品在线观看| 天美传媒精品一区二区| 国产亚洲av嫩草精品影院| 欧美xxxx性猛交bbbb| 午夜精品国产一区二区电影 | 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 午夜福利视频1000在线观看| 久久久久九九精品影院| 大香蕉97超碰在线| 亚洲国产色片| 麻豆av噜噜一区二区三区| 午夜精品国产一区二区电影 | 欧美丝袜亚洲另类| 国产精品国产三级国产专区5o| 麻豆乱淫一区二区| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 午夜精品一区二区三区免费看| 午夜免费男女啪啪视频观看| 男的添女的下面高潮视频| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 搡老妇女老女人老熟妇| 韩国av在线不卡| 一级毛片aaaaaa免费看小| 日本-黄色视频高清免费观看| 久久国产乱子免费精品| 亚洲伊人久久精品综合| 国产精品无大码| 国产麻豆成人av免费视频| 久久精品久久精品一区二区三区| 日日摸夜夜添夜夜爱| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 久99久视频精品免费| 欧美丝袜亚洲另类| 免费黄网站久久成人精品| 精品人妻一区二区三区麻豆| 国产视频首页在线观看| 天美传媒精品一区二区| 男人和女人高潮做爰伦理| 免费在线观看成人毛片| 国产在线一区二区三区精| 最近最新中文字幕大全电影3| 成年版毛片免费区| 在线观看一区二区三区| 毛片一级片免费看久久久久| 内地一区二区视频在线| 亚洲成色77777| 成人国产麻豆网| 久久韩国三级中文字幕| 久久久久久久久久久丰满| 免费无遮挡裸体视频| 婷婷色综合大香蕉| 午夜福利视频精品| 伊人久久国产一区二区| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线 | 成人一区二区视频在线观看| 日韩av不卡免费在线播放| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 一本一本综合久久| 99久久精品一区二区三区| 亚洲精品aⅴ在线观看| 亚洲av成人av| 国产精品一区www在线观看| 成人欧美大片| 2022亚洲国产成人精品| 欧美一区二区亚洲| 99久国产av精品| 日本熟妇午夜| 亚洲成人中文字幕在线播放| 日日摸夜夜添夜夜爱| 免费黄网站久久成人精品| 网址你懂的国产日韩在线| 日韩不卡一区二区三区视频在线| 欧美成人一区二区免费高清观看| 一级爰片在线观看| 一区二区三区高清视频在线| 色综合站精品国产| 人妻系列 视频| 免费人成在线观看视频色| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站| 久久久久久国产a免费观看| 亚洲成人久久爱视频| 亚洲av中文字字幕乱码综合| 国产极品天堂在线| 日本爱情动作片www.在线观看| 男人狂女人下面高潮的视频| 久久久久国产网址| 日本wwww免费看| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 天堂网av新在线| 身体一侧抽搐| 亚洲最大成人av| 色视频www国产| 天天一区二区日本电影三级| 99久久精品热视频| 男人和女人高潮做爰伦理| 一级毛片aaaaaa免费看小| 亚洲精品视频女| 乱人视频在线观看| 中文字幕制服av| 亚洲av二区三区四区| 美女国产视频在线观看| 五月天丁香电影| 欧美变态另类bdsm刘玥| 国产精品无大码| 丝袜美腿在线中文| 观看免费一级毛片| 两个人的视频大全免费| 乱人视频在线观看| 免费黄网站久久成人精品| 最近中文字幕2019免费版| 日韩三级伦理在线观看| 最近的中文字幕免费完整| 亚洲无线观看免费| eeuss影院久久| 女人十人毛片免费观看3o分钟| 日本三级黄在线观看| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线 | 国产精品无大码| 久久97久久精品| 日本三级黄在线观看| 亚洲电影在线观看av| 床上黄色一级片| 国产精品一二三区在线看| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 色综合亚洲欧美另类图片| 禁无遮挡网站| kizo精华| 在线观看一区二区三区| 精品欧美国产一区二区三| 午夜免费观看性视频| 国产极品天堂在线| 性插视频无遮挡在线免费观看| 尤物成人国产欧美一区二区三区| ponron亚洲| 亚洲av电影在线观看一区二区三区 | 日日啪夜夜爽| 国产精品综合久久久久久久免费| 搡老妇女老女人老熟妇| 91精品国产九色| 欧美潮喷喷水| 亚洲成人精品中文字幕电影| 国产成人福利小说| 97精品久久久久久久久久精品| 人妻一区二区av| 国内揄拍国产精品人妻在线| 成年人午夜在线观看视频 | 亚洲精品色激情综合| 亚洲成人久久爱视频| 高清视频免费观看一区二区 | 成人美女网站在线观看视频| 亚洲av国产av综合av卡| 国产 亚洲一区二区三区 | 精品一区在线观看国产| 国模一区二区三区四区视频| 精品久久国产蜜桃| 午夜福利在线观看吧| 欧美3d第一页| 成人欧美大片| 免费观看av网站的网址| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆| or卡值多少钱| 五月天丁香电影| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 国产探花极品一区二区| 中文天堂在线官网| 国产精品女同一区二区软件| 老女人水多毛片| 男人舔奶头视频| 国产高清有码在线观看视频| 中文字幕久久专区| 深夜a级毛片| 18禁在线无遮挡免费观看视频| 亚洲在线观看片| 2022亚洲国产成人精品| 日韩欧美精品免费久久| 久久久欧美国产精品| 日韩中字成人| 好男人在线观看高清免费视频| 国产又色又爽无遮挡免| 久久99热这里只有精品18| 亚洲国产精品成人久久小说| 白带黄色成豆腐渣| 精品一区在线观看国产| 精品人妻一区二区三区麻豆| 免费看a级黄色片| 美女内射精品一级片tv| 午夜视频国产福利| 亚洲伊人久久精品综合| 国产麻豆成人av免费视频| 大香蕉久久网| 色哟哟·www| 亚洲精品456在线播放app| 日本免费在线观看一区| 免费大片18禁| 一级爰片在线观看| 日本色播在线视频| 男人和女人高潮做爰伦理| 国产午夜精品论理片| 亚洲国产精品专区欧美| 99热全是精品| 免费观看在线日韩| 最近中文字幕高清免费大全6| 国产精品伦人一区二区| 两个人的视频大全免费| 欧美成人a在线观看| 国产成人精品一,二区| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 午夜福利在线观看吧| 久久这里有精品视频免费| 又大又黄又爽视频免费| 久久精品国产亚洲网站| 熟女电影av网| 两个人视频免费观看高清| 中文字幕久久专区| 国产精品av视频在线免费观看| 麻豆成人午夜福利视频| 亚洲经典国产精华液单| 99九九线精品视频在线观看视频| 亚洲av成人精品一区久久| 国产黄频视频在线观看| 精品欧美国产一区二区三| 国产一区二区三区综合在线观看 | 97人妻精品一区二区三区麻豆| 亚洲欧美清纯卡通| 国产伦在线观看视频一区| 国产 亚洲一区二区三区 | 免费在线观看成人毛片| 国产一级毛片七仙女欲春2| 校园人妻丝袜中文字幕| 日韩欧美一区视频在线观看 | 午夜精品一区二区三区免费看| 日本色播在线视频| 免费黄色在线免费观看| 高清午夜精品一区二区三区| 日本av手机在线免费观看| 成人综合一区亚洲| 日本wwww免费看| 99热全是精品| 永久免费av网站大全| av在线播放精品| 免费少妇av软件| 国产午夜精品久久久久久一区二区三区| 亚洲av成人av| 久久99精品国语久久久| 禁无遮挡网站| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 一级a做视频免费观看| 国产久久久一区二区三区| 午夜日本视频在线| 国产亚洲精品久久久com| 欧美激情国产日韩精品一区| 一边亲一边摸免费视频| 国产乱人偷精品视频| 亚洲乱码一区二区免费版| 午夜精品在线福利| 夫妻性生交免费视频一级片| 久久精品久久精品一区二区三区| 在线播放无遮挡| 国产一区亚洲一区在线观看| av线在线观看网站| 精品久久久久久久久亚洲| 国产精品美女特级片免费视频播放器| 精品熟女少妇av免费看| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 欧美激情国产日韩精品一区| 综合色av麻豆| 免费人成在线观看视频色| 亚洲怡红院男人天堂| 久久人人爽人人片av| 日本免费在线观看一区| 久久午夜福利片| av在线亚洲专区| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 日本三级黄在线观看| 日本与韩国留学比较| 老司机影院成人| 白带黄色成豆腐渣| 五月玫瑰六月丁香| 97精品久久久久久久久久精品| 成人午夜精彩视频在线观看| 日本黄大片高清| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 99热这里只有是精品50| 欧美xxⅹ黑人| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 男人爽女人下面视频在线观看| 久久久精品免费免费高清| 国产精品国产三级专区第一集| 舔av片在线| 亚洲一区高清亚洲精品| 伊人久久精品亚洲午夜| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| videossex国产| 夜夜爽夜夜爽视频| 久久热精品热| 免费大片18禁| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久 | 嘟嘟电影网在线观看| 中文字幕av成人在线电影| 性色avwww在线观看| 国产精品一区二区三区四区免费观看| 久久99热这里只频精品6学生| 久久久久久久久中文| 国产一区亚洲一区在线观看| 在线观看人妻少妇| 高清日韩中文字幕在线| 色尼玛亚洲综合影院| 国产精品福利在线免费观看| 日韩一区二区三区影片| 男女边摸边吃奶| 亚洲最大成人手机在线| 国产熟女欧美一区二区| 成人无遮挡网站| 久久久久国产网址| 国精品久久久久久国模美| 欧美日本视频| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 久久久精品免费免费高清| 在线免费观看的www视频| 少妇熟女欧美另类| 日韩av不卡免费在线播放| 日韩亚洲欧美综合| 午夜福利在线观看免费完整高清在| 亚洲国产精品成人综合色| 欧美人与善性xxx| 日韩强制内射视频| 亚洲精华国产精华液的使用体验| 成人特级av手机在线观看| 夜夜爽夜夜爽视频| 一边亲一边摸免费视频| 亚洲人成网站高清观看| 久久久久久伊人网av| 99久国产av精品| 日韩av在线免费看完整版不卡| 春色校园在线视频观看| 九九在线视频观看精品| 性色avwww在线观看| 成年版毛片免费区| 六月丁香七月| 国产精品一区二区在线观看99 | 中文字幕av在线有码专区| 精品午夜福利在线看| 久久久a久久爽久久v久久| 美女国产视频在线观看| 免费黄频网站在线观看国产| 亚洲自偷自拍三级| 啦啦啦韩国在线观看视频| 五月玫瑰六月丁香| 精品国内亚洲2022精品成人| 少妇的逼好多水| 亚洲av成人精品一区久久| 丰满人妻一区二区三区视频av| 亚洲图色成人| 免费av毛片视频| 亚洲不卡免费看| 日韩不卡一区二区三区视频在线| 亚洲国产精品国产精品| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片 精品乱码久久久久久99久播 | 国产精品麻豆人妻色哟哟久久 | 91精品一卡2卡3卡4卡| av一本久久久久| 欧美变态另类bdsm刘玥| 亚洲av电影在线观看一区二区三区 | 久久精品国产亚洲av涩爱| 乱人视频在线观看| 十八禁网站网址无遮挡 | 久久久久久久久久人人人人人人| 久久久久九九精品影院| 国内精品美女久久久久久| 99久国产av精品国产电影| 免费观看av网站的网址| 国产精品久久久久久精品电影小说 | 成人美女网站在线观看视频| 九色成人免费人妻av| 亚洲丝袜综合中文字幕| 91久久精品国产一区二区三区| 欧美变态另类bdsm刘玥| 欧美一区二区亚洲| 九草在线视频观看| 久久午夜福利片| 亚洲成人av在线免费| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 国产熟女欧美一区二区| 国产片特级美女逼逼视频| 边亲边吃奶的免费视频| 久久精品国产亚洲网站| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 国产亚洲一区二区精品| 3wmmmm亚洲av在线观看| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 亚洲精品色激情综合| 夜夜爽夜夜爽视频| 淫秽高清视频在线观看| 欧美人与善性xxx| 国产黄片视频在线免费观看| 久久鲁丝午夜福利片| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 看免费成人av毛片| 亚洲精品影视一区二区三区av| 亚洲成色77777| 能在线免费看毛片的网站| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 美女内射精品一级片tv| 寂寞人妻少妇视频99o| 亚洲国产色片| 久久99精品国语久久久| 成人亚洲精品av一区二区| 男女下面进入的视频免费午夜| 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 亚洲国产av新网站| 久久久久久久亚洲中文字幕| 国国产精品蜜臀av免费| 高清视频免费观看一区二区 | 亚洲欧美精品自产自拍| 最近的中文字幕免费完整| 国产精品国产三级专区第一集| 欧美3d第一页| 日本wwww免费看| 在线观看人妻少妇| 男女边吃奶边做爰视频| 久久久久久久久久成人| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 国内精品美女久久久久久| 水蜜桃什么品种好| 黄片无遮挡物在线观看| 久久久久久久国产电影| 亚洲国产精品专区欧美| 国产淫语在线视频| 深爱激情五月婷婷| 99久久九九国产精品国产免费| av国产久精品久网站免费入址| 亚洲第一区二区三区不卡| 男人爽女人下面视频在线观看| 亚洲精品视频女| 免费看av在线观看网站| 草草在线视频免费看| videos熟女内射| 亚洲av福利一区| 赤兔流量卡办理| 一级二级三级毛片免费看| 日本熟妇午夜| 最近手机中文字幕大全| 亚洲精品乱码久久久久久按摩| 国产精品一二三区在线看| 日韩中字成人| 日本一本二区三区精品| 亚洲最大成人av| 久久鲁丝午夜福利片| 97热精品久久久久久| 国产成人精品久久久久久| 国产成人aa在线观看| 亚洲成人精品中文字幕电影| 亚洲av在线观看美女高潮| 2021天堂中文幕一二区在线观| 午夜免费激情av| 少妇熟女aⅴ在线视频| 日本午夜av视频| 国产麻豆成人av免费视频| 精品国产一区二区三区久久久樱花 | 成人av在线播放网站| 九草在线视频观看| 亚洲av电影在线观看一区二区三区 | 成年免费大片在线观看| 亚洲欧美精品自产自拍| 午夜福利视频精品| 搞女人的毛片| 国产精品爽爽va在线观看网站| 成人美女网站在线观看视频| 亚洲国产精品专区欧美| 成年免费大片在线观看| av网站免费在线观看视频 | 免费看不卡的av| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 91av网一区二区| 成人鲁丝片一二三区免费| 最新中文字幕久久久久| 免费黄频网站在线观看国产| 国产亚洲最大av| 人妻制服诱惑在线中文字幕| 毛片女人毛片| 久久久午夜欧美精品| 特大巨黑吊av在线直播| 国产 亚洲一区二区三区 | 亚洲三级黄色毛片| 午夜亚洲福利在线播放| av.在线天堂| 国产精品美女特级片免费视频播放器| 欧美日韩精品成人综合77777| 午夜久久久久精精品| 久久久久久久午夜电影| 伦理电影大哥的女人| 国产精品嫩草影院av在线观看| 国产黄色免费在线视频| 别揉我奶头 嗯啊视频| 少妇的逼好多水| 内射极品少妇av片p| 久久久久九九精品影院| 亚洲真实伦在线观看| 99久久人妻综合| 一级a做视频免费观看| 国产一区二区三区综合在线观看 | 成人午夜高清在线视频| 日本黄大片高清| 成人鲁丝片一二三区免费| 久久久久久久久大av| 日韩一区二区视频免费看| 搡老妇女老女人老熟妇| 天堂中文最新版在线下载 | 亚洲美女搞黄在线观看| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 伦精品一区二区三区| 亚洲综合精品二区| 亚洲真实伦在线观看| 色尼玛亚洲综合影院| 97在线视频观看| 99久久九九国产精品国产免费| 好男人在线观看高清免费视频| 日韩欧美精品v在线| av在线老鸭窝| 一个人免费在线观看电影| 日本免费在线观看一区| 国产69精品久久久久777片| 国产成人91sexporn| 人人妻人人看人人澡| 亚洲高清免费不卡视频| 国产乱人视频| 99久久人妻综合| 男女国产视频网站| 国产男女超爽视频在线观看| 国产成人aa在线观看| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆| 成年女人在线观看亚洲视频 | 成人亚洲精品av一区二区| 国产亚洲91精品色在线| 十八禁网站网址无遮挡 | 91aial.com中文字幕在线观看| 国产综合懂色| 一级二级三级毛片免费看| 插逼视频在线观看| 三级国产精品片| 七月丁香在线播放| 麻豆成人av视频| 春色校园在线视频观看| 国产精品无大码| 免费少妇av软件| 69人妻影院| 亚洲精品aⅴ在线观看| 午夜福利成人在线免费观看| 色哟哟·www| 成人亚洲精品一区在线观看 | 成人漫画全彩无遮挡| 在线天堂最新版资源| 欧美丝袜亚洲另类| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看 | 最近最新中文字幕免费大全7| 久久久久免费精品人妻一区二区| 久久午夜福利片| 久久99精品国语久久久| 国产成人a区在线观看| 在线观看美女被高潮喷水网站| 全区人妻精品视频| 免费看日本二区| 天堂√8在线中文| 国产精品.久久久| 在线免费观看不下载黄p国产| 亚洲美女视频黄频| 欧美日本视频| 一本一本综合久久| 久久精品久久久久久噜噜老黄| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 国模一区二区三区四区视频| 国产精品福利在线免费观看| 国产色婷婷99| 男女视频在线观看网站免费| 汤姆久久久久久久影院中文字幕 | 热99在线观看视频| 男女那种视频在线观看| 夫妻午夜视频| 一级a做视频免费观看| 男女那种视频在线观看| 久久人人爽人人爽人人片va| 成人欧美大片| 午夜亚洲福利在线播放| 人体艺术视频欧美日本| 乱系列少妇在线播放| av播播在线观看一区| av线在线观看网站| 亚洲av成人av| 国产精品99久久久久久久久| 欧美激情在线99| 亚洲成人av在线免费| 亚洲欧美一区二区三区黑人 | 亚洲四区av| 亚洲精品乱码久久久久久按摩| 成人鲁丝片一二三区免费| 亚洲综合色惰| 日韩一区二区视频免费看| 一级二级三级毛片免费看| 久久久久久久久久久免费av| 毛片一级片免费看久久久久| 日本-黄色视频高清免费观看| 久99久视频精品免费| 亚洲欧美日韩无卡精品| 午夜精品国产一区二区电影 | 两个人的视频大全免费| 国产亚洲一区二区精品| 免费av毛片视频| 亚洲人成网站在线观看播放| 一二三四中文在线观看免费高清| 午夜福利在线观看免费完整高清在| 国产美女午夜福利| 日韩中字成人|