循環(huán)血miR類(lèi)指標(biāo)在膿毒癥中的變化及與嚴(yán)重程度的關(guān)系分析

王濱　張憲華　徐志偉

【摘要】 目的：探究循環(huán)血miR類(lèi)指標(biāo)在膿毒癥中的變化及其與嚴(yán)重程度的關(guān)系，以為膿毒癥的臨床診治提供參考依據(jù)。方法：選取2019年6月-2021年2月本院收治的90例膿毒癥患者為觀察組，同時(shí)期的90名健康者為對(duì)照組。比較對(duì)照組和觀察組的循環(huán)血miR類(lèi)指標(biāo)（miR-155-5p、miR-326、miR-223、miR-146a及miR-107）表達(dá)量，同時(shí)比較觀察組中不同病因（肺部感染、腹腔感染及其他病因）及嚴(yán)重程度（膿毒癥、嚴(yán)重膿毒癥及膿毒性休克）者的上述循環(huán)血miR類(lèi)指標(biāo)表達(dá)量，采用Spearman秩相關(guān)分析上述循環(huán)血miR類(lèi)指標(biāo)與膿毒癥嚴(yán)重程度的關(guān)系。結(jié)果：觀察組的循環(huán)血miR-155-5p、miR-326、miR-223、miR-146a及miR-107表達(dá)量均顯著高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。觀察組中不同病因者的循環(huán)血miR-155-5p、miR-326、miR-223、miR-146a及miR-107表達(dá)量比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。觀察組中不同嚴(yán)重程度者的循環(huán)血miR-155-5p、miR-326、miR-223、miR-146a及miR-107表達(dá)量比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;膿毒性休克者的上述循環(huán)血miR類(lèi)指標(biāo)表達(dá)量均顯著高于膿毒癥者及嚴(yán)重膿毒癥者，嚴(yán)重膿毒癥者的上述循環(huán)血miR類(lèi)指標(biāo)表達(dá)量均顯著高于膿毒癥者，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。Spearman秩相關(guān)分析顯示，循環(huán)血miR-155-5p、miR-326、miR-223、miR-146a及miR-107均與膿毒癥嚴(yán)重程度呈正相關(guān)（P<0.05）。結(jié)論：循環(huán)血miR類(lèi)指標(biāo)在膿毒癥中呈現(xiàn)異常表達(dá)的狀態(tài)，且與膿毒癥嚴(yán)重程度密切相關(guān)，在膿毒癥患者中的檢測(cè)價(jià)值較高。

【關(guān)鍵詞】 循環(huán)血miR類(lèi)指標(biāo) 膿毒癥 嚴(yán)重程度 病因

[Abstract] Objective： To explore the changes of circulating blood miR indexes in sepsis and its relationship with severity， so as to provide reference for clinical diagnosis and treatment of sepsis. Method： A total of 90 patients with sepsis admitted to our hospital from June 2019 to February 2021 were selected as the observation group， and 90 healthy subjects during the same period were selected as the control group. The expression levels of circulating blood miR indexes （miR-155-5p， miR-326， miR-223， miR-146a and miR-107） were compared between the control group and the observation group. At the same time， the expression levels of above circulating blood miR indexes in the observation group were compared with different etiologies （pulmonary infection， abdominal infection and other etiologies） and severity （sepsis， severe sepsis and septic shock）. Spearman rank correlation was used to analyze the relationship between the above circulating blood miR indexes and the severity of sepsis. Result： The expressions of miR-155-5p， miR-326， miR-223， miR-146a and miR-107 in the observation group were significantly higher than those in the control group， the differences were statistically significant （P<0.05）. There were no significant differences in the expression of miR-155-5p， miR-326， miR-223， miR-146a and miR-107 in patients with different etiologies of the observation group （P>0.05）. The expressions of miR-155-5p， miR-326， miR-223， miR-146a and miR-107 in patients with different severity in the observation group were compared， the differences were statistically significant （P<0.05）. The expression of above circulating blood miR indexes in septic shock group were significantly higher than those in sepsis group and severe sepsis group， the expression levels of above circulating blood miR indexes in severe sepsis were significantly higher than those in sepsis， the differences were statistically significant （P<0.05）. Spearman rank correlation analysis showed that miR-155-5p， miR-326， miR-223， miR-146a and miR-107 in circulating blood were positively correlated with the severity of sepsis （P<0.05）. Conclusion： Circulating blood miR indexes in sepsis showed abnormal expression， and is closely related to the severity of sepsis， which has high detection value in sepsis patients.

[Key words] Circulating blood miR indexes Sepsis Severity Etiology

First-authors address： Shenzhen Second Peoples Hospital， Shenzhen 518035， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2021.19.004

膿毒癥主要為由于感染所致的全身炎癥反應(yīng)，患者的病情兇險(xiǎn)，病死率較高，因此膿毒癥是臨床重點(diǎn)研究方面。臨床中與膿毒癥相關(guān)的研究中，miR相關(guān)指標(biāo)是近年來(lái)在膿毒癥中研究較多的指標(biāo)，其中miR-155-5p、miR-326、miR-223、miR-146a及miR-107等均是在膿毒癥中研究較多的miR類(lèi)指標(biāo)，但也是在膿毒癥中研究差異較多的指標(biāo)，因此進(jìn)一步細(xì)致探究的需求較高[1-2]。另外，上述miR指標(biāo)作為與機(jī)體免疫、炎癥狀態(tài)等密切相關(guān)的指標(biāo)，進(jìn)一步研究其與感染及炎性反應(yīng)疾病包括膿毒癥的意義較高[3-4]。本研究就循環(huán)血miR類(lèi)指標(biāo)在膿毒癥中的變化及其與嚴(yán)重程度的關(guān)系進(jìn)行探究與分析，以為膿毒癥的臨床診治提供參考依據(jù)，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2019年6月-2021年2月本院收治的90例膿毒癥患者為觀察組，同時(shí)期的90名健康者為對(duì)照組。（1）納入標(biāo)準(zhǔn)：20～65歲者;男女不限;對(duì)照組為體檢健康者，觀察組為膿毒癥者。（2）排除標(biāo)準(zhǔn)：合并創(chuàng)傷者;妊娠期者;合并代謝性疾病者;合并自身免疫性疾病者;合并高血壓、糖尿病等慢性疾病者;發(fā)病前存在凝血異常者;臨床資料不完整者?；颊吆?或家屬對(duì)研究知情同意，本研究經(jīng)醫(yī)院倫理學(xué)委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 方法 采集對(duì)照組和觀察組的外周靜脈血標(biāo)本，血標(biāo)本采集量為5 mL，采用醫(yī)用離心機(jī)將其進(jìn)行離心（半徑15 cm，速度3 000 r/min，時(shí)間

5 min），采集離心后的上清液進(jìn)行miR類(lèi)指標(biāo)的檢測(cè)，檢測(cè)指標(biāo)為miR-155-5p、miR-326、miR-223、miR-146a及miR-107，提取血清總RNA，逆轉(zhuǎn)錄合成cDNA反應(yīng)液，采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR法進(jìn)行操作檢測(cè)，采用2-ΔCt進(jìn)行計(jì)算，得出上述指標(biāo)的表達(dá)量。上述檢測(cè)由兩名經(jīng)驗(yàn)豐富者嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行操作檢測(cè)。

1.3 觀察指標(biāo) 統(tǒng)計(jì)及比較對(duì)照組和觀察組的循環(huán)血miR類(lèi)指標(biāo)（miR-155-5p、miR-326、miR-223、miR-146a及miR-107），同時(shí)比較觀察組中不同病因（肺部感染、腹腔感染及其他病因）及嚴(yán)重程度（膿毒癥、嚴(yán)重膿毒癥及膿毒性休克）者的上述循環(huán)血miR類(lèi)指標(biāo)表達(dá)量，采用Spearman秩相關(guān)分析上述循環(huán)血miR類(lèi)指標(biāo)與膿毒癥嚴(yán)重程度的關(guān)系。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 23.0軟件對(duì)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料用（x±s）表示，比較采用t檢驗(yàn)，多組數(shù)據(jù)比較采用方差分析;計(jì)數(shù)資料以率（%）表示，比較采用字2檢驗(yàn)。相關(guān)性分析采用Spearman秩相關(guān)分析，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組一般資料比較 對(duì)照組中男50名，女40名;年齡25～65歲，平均（43.3±6.7）歲。觀察組中男51例，女39例;年齡25～63歲，平均（43.6±6.6）歲;病因：肺部感染者35例，腹腔感染者35例，其他20例;嚴(yán)重程度：膿毒癥者39例，嚴(yán)重膿毒癥者36例，膿毒性休克者15例。兩組的性別、年齡比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。

2.2 兩組的循環(huán)血miR類(lèi)指標(biāo)表達(dá)量比較 觀察組的循環(huán)血miR-155-5p、miR-326、miR-223、miR-146a及miR-107表達(dá)量均顯著高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見(jiàn)表1。

2.3 觀察組中不同病因者的循環(huán)血miR類(lèi)指標(biāo)表達(dá)量比較 觀察組中不同病因者的循環(huán)血miR-155-5p、miR-326、miR-223、miR-146a及miR-107表達(dá)量比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），見(jiàn)表2。

2.4 觀察組中不同嚴(yán)重程度者的循環(huán)血miR類(lèi)指標(biāo)表達(dá)量比較 觀察組中不同嚴(yán)重程度者的循環(huán)血miR-155-5p、miR-326、miR-223、miR-146a及miR-107表達(dá)量比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;膿毒性休克者的上述循環(huán)血miR類(lèi)指標(biāo)表達(dá)量均顯著高于膿毒癥者及嚴(yán)重膿毒癥者，嚴(yán)重膿毒癥者的上述循環(huán)血miR類(lèi)指標(biāo)表達(dá)量均顯著高于膿毒癥者，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見(jiàn)表3。

2.5 循環(huán)血miR類(lèi)指標(biāo)與膿毒癥嚴(yán)重程度的關(guān)系分析 Spearman秩相關(guān)分析顯示，循環(huán)血miR-155-5p、miR-326、miR-223、miR-146a及miR-107均與膿毒癥嚴(yán)重程度呈正相關(guān)（P<0.05），見(jiàn)表4。

3 討論

膿毒癥在臨床并不乏見(jiàn)，對(duì)患者的危害極大?；颊呖杀憩F(xiàn)出全身的炎性反應(yīng)，嚴(yán)重者可導(dǎo)致多器官功能障礙及循環(huán)方面的異常，病死率較高，且存活者的并發(fā)癥發(fā)生率較高，因此膿毒癥是臨床診治與防控的重點(diǎn)[5-6]。臨床中與膿毒癥相關(guān)的研究眾多，其中關(guān)于疾病發(fā)生發(fā)展及嚴(yán)重程度相關(guān)指標(biāo)的研究是熱點(diǎn)。miR類(lèi)指標(biāo)研究較多，但研究結(jié)果差異相對(duì)顯著，同時(shí)為研究涉及面較廣的一類(lèi)指標(biāo)，其多見(jiàn)于膿毒癥發(fā)病機(jī)制的研究中[7-9]，與膿毒癥嚴(yán)重程度的關(guān)系研究極為匱乏，導(dǎo)致其在膿毒癥診治方面的參考價(jià)值仍有待進(jìn)一步探究。miR-155-5p、miR-326、miR-223、miR-146a及miR-107等作為在膿毒癥中研究較多的miR類(lèi)指標(biāo)，其在膿毒癥患者中更為細(xì)致全面的探究意義相對(duì)更高。miR-155-5p作為在體液免疫調(diào)節(jié)中作用較強(qiáng)的指標(biāo)，其受病毒、細(xì)菌感染的誘導(dǎo)作用，呈現(xiàn)高表達(dá)狀態(tài)，且對(duì)TNF等指標(biāo)具有反饋性調(diào)節(jié)作用[10];miR-326則主要為通過(guò)調(diào)控靶基因來(lái)達(dá)到影響多種細(xì)胞因子表達(dá)的作用，在炎性反應(yīng)與免疫調(diào)節(jié)方面均有較強(qiáng)的作用[11];miR-223則主要為通過(guò)調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞的分化、成熟及增殖等方面來(lái)達(dá)到影響機(jī)體免疫的作用，并對(duì)機(jī)體炎性反應(yīng)狀態(tài)起到一定影響作用[12];miR-146a則在機(jī)體感染過(guò)程中發(fā)揮促進(jìn)促炎因子表達(dá)的作用，同時(shí)其還對(duì)免疫耐受及逃逸等多方面起到干預(yù)的作用，因此在膿毒癥等感染性疾病中的檢測(cè)意義較高[13];miR-107是與炎性反應(yīng)相關(guān)的指標(biāo)，除此之外，其對(duì)于腎臟損傷等多方面也有一定的反應(yīng)作用[14]，但是其對(duì)于膿毒癥嚴(yán)重程度的影響研究未見(jiàn)。

本研究就循環(huán)血miR類(lèi)指標(biāo)在膿毒癥中的變化及其與嚴(yán)重程度的關(guān)系進(jìn)行探究，結(jié)果顯示，膿毒癥患者的循環(huán)血miR-155-5p、miR-326、miR-223、miR-146a及miR-107表達(dá)量均顯著高于健康同齡者，不同病因者的上述循環(huán)血miR類(lèi)指標(biāo)表達(dá)量差異并不顯著，而不同嚴(yán)重程度者的上述循環(huán)血miR類(lèi)指標(biāo)表達(dá)量差異顯著，Spearman秩相關(guān)分析顯示，循環(huán)血miR-155-5p、miR-326、miR-223、miR-146a及miR-107均與膿毒癥嚴(yán)重程度呈正相關(guān)（P<0.05），因此肯定了上述循環(huán)血miR類(lèi)指標(biāo)在膿毒癥患者中的檢測(cè)價(jià)值及與膿毒癥嚴(yán)重程度的關(guān)系。分析原因，膿毒癥是由于感染所致的炎性反應(yīng)，機(jī)體應(yīng)激性的免疫變化也相對(duì)突出，而上述miR類(lèi)指標(biāo)在機(jī)體的上述感染、炎性反應(yīng)及免疫狀態(tài)變化中起到較強(qiáng)的影響作用[15-17]，因此其表達(dá)相對(duì)異常，且越為嚴(yán)重的患者，其上述應(yīng)激反應(yīng)程度越為嚴(yán)重，機(jī)體的上述方面也越為異常[18-23]，故認(rèn)為上述循環(huán)血miR類(lèi)指標(biāo)在本類(lèi)患者中的檢測(cè)價(jià)值較高，對(duì)于膿毒癥嚴(yán)重程度的檢測(cè)意義也較高。

綜上所述，筆者認(rèn)為循環(huán)血miR類(lèi)指標(biāo)在膿毒癥中呈現(xiàn)異常表達(dá)的狀態(tài)，且與膿毒癥嚴(yán)重程度密切相關(guān)，在膿毒癥患者中的檢測(cè)價(jià)值較高。

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（收稿日期：2021-05-31） （本文編輯：姬思雨）