Notch信號通路對變應(yīng)性鼻炎的免疫調(diào)控機制及中藥干預(yù)作用的研究進展

肖鍶瑤，張紓難，熊軼敏，賈明月

(1. 北京中醫(yī)藥大學(xué)，北京 100029；2. 中日友好醫(yī)院，北京 100029)

變應(yīng)性鼻炎(allergic rhinitis,AR)是特應(yīng)性個體接觸變應(yīng)原后，主要由IgE介導(dǎo)的組胺等介質(zhì)釋放，并且有多種免疫活性細胞和細胞因子等參與的鼻黏膜非感染性炎癥。AR是免疫系統(tǒng)疾病中最常見的類型，屬于Ⅰ型變態(tài)反應(yīng)性疾病，易合并哮喘的發(fā)生，與哮喘同屬氣道不同部位的變態(tài)反應(yīng)性疾病，有“同一氣道，同一疾病”之說。流行病學(xué)研究表明，AR已影響到全球40%的人口，且發(fā)病率日漸升高，在世界范圍內(nèi)造成重大健康問題[1-2]，如何早期防控AR及防止其向哮喘進一步發(fā)展是目前研究的重點問題。Notch信號通路是一類高度保守的、存在于多種生物體內(nèi)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，參與組織細胞的信號識別、生長、分化、凋亡等過程，對細胞命運的決定起到重要性作用[3]。新近研究發(fā)現(xiàn)，Notch信號通路與變態(tài)反應(yīng)性疾病密切相關(guān)，Notch信號通路內(nèi)成分在AR中呈異常表達，同時Notch信號通路能夠影響T淋巴細胞亞群的分化和AR炎性因子、T淋巴細胞相關(guān)細胞因子的分泌。中醫(yī)藥通過多位點、多途徑的網(wǎng)絡(luò)藥理機制對疾病進行調(diào)控，是治療AR的有效手段之一，近年來研究證實單味中藥及復(fù)方制劑能夠明顯抑制AR炎性因子水平，恢復(fù)T淋巴細胞亞群平衡，且影響Notch信號通路功能。本文就已有證據(jù)對Notch信號通路與AR的免疫調(diào)控機制及中藥干預(yù)作用作一綜述。

1 Notch信號通路

1.1Notch信號通路的組成 Notch信號首次提出是在1917年，基因?qū)W家Morgan[4]把翅膀邊緣出現(xiàn)缺口(notch)為表型的果蠅體內(nèi)缺少的基因命名為Notch。Notch信號廣泛存在于無脊椎動物到哺乳動物體內(nèi)，其組成成分包括跨膜受體、配體、核內(nèi)結(jié)合蛋白三部分。在哺乳動物體內(nèi)，Notch信號通路具體由4個Notch受體(Notch1-4)、5個Notch配體(Dll-1、Dll-3、Dll-4、Jagged-1、Jagged-2)、細胞內(nèi)效應(yīng)器分子(CSL-DNA結(jié)合蛋白)組成，其靶基因主要為HES、HEY和HERP家族。

Notch受體是具有細胞表面受體和核內(nèi)轉(zhuǎn)錄調(diào)控雙重功能的Ⅰ型跨膜蛋白，由同一前體蛋白在細胞內(nèi)經(jīng)由內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體向細胞膜轉(zhuǎn)運過程中經(jīng)過剪切、修飾而成。Notch受體包括細胞外結(jié)構(gòu)域(notch extracellular domain,NECD)、細胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域(notch intracellular domain,NICD)和跨膜結(jié)構(gòu)域(transmembrane domain,TMD)，NECD介導(dǎo)與配體的相互作用，NICD則負責(zé)將Notch信號轉(zhuǎn)到細胞核內(nèi)并與其他蛋白相互作用。Notch配體又稱DSL蛋白，取其在果蠅中名稱Delta、Serrate和線蟲中名稱Serrate的首字母而成，是一種含保守分子結(jié)構(gòu)的Ⅰ型跨膜蛋白，包括Delta樣配體Dll-1、Dll-3、Dll-4和Serrate樣配體Jagged-1、Jagged-2，包含的DSL基序可與Notch受體結(jié)合和活化。CSL為CBF-1、Su(H)、Lag的合稱，它們是同一蛋白在哺乳動物、果蠅、線蟲體內(nèi)的不同名稱，CSL是一組DNA結(jié)合蛋白，是Notch信號在核內(nèi)活化的轉(zhuǎn)錄因子。Notch信號通路的靶基因主要包括HES、HEY和HERP家族，多為含有堿性螺旋-環(huán)-螺旋(basic Helix-loop-helix, bHLH)結(jié)構(gòu)域的轉(zhuǎn)錄因子。

1.2Notch信號通路的活化 Notch信號通路活化有經(jīng)典型(CSL依賴途徑)與非經(jīng)典型(非CSL依賴途徑)兩條途徑。經(jīng)典的Notch信號通路通過相鄰細胞間Notch受體和配體的結(jié)合來實現(xiàn)，此途徑的活化需要經(jīng)過三步酶切過程：①在細胞內(nèi)，Notch信號蛋白前體分子在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)被合成，在Notch跨膜區(qū)胞外端的S1位點處，經(jīng)高爾基體內(nèi)的furin蛋白酶酶切作用下形成Notch受體，并轉(zhuǎn)運至細胞表面。②當(dāng)Notch配體與受體結(jié)合后，ADAM類非金屬蛋白酶在S2位點對Notch受體進行第二次酶切作用，釋放部分胞外段。③第三次酶切作用由γ-分泌酶介導(dǎo)，在S3位點進行，此過程形成可溶性的NICD并轉(zhuǎn)移至核內(nèi)。NICD在細胞核內(nèi)與CSL蛋白結(jié)合，使CSL蛋白發(fā)生變構(gòu)，進而與DNA形成多蛋白-DNA復(fù)合體，由轉(zhuǎn)錄抑制物轉(zhuǎn)變?yōu)檗D(zhuǎn)錄激活物，從而激活下游轉(zhuǎn)錄抑制因子家族靶基因的轉(zhuǎn)錄，發(fā)揮生物學(xué)效應(yīng)。非CSL依賴途徑的具體機制尚未完全闡明，在此不做贅述。

2 Notch信號通路對AR免疫調(diào)控機制的研究進展

2.1Notch信號通路和免疫球蛋白E(immunoglobulin E,IgE) IgE是介導(dǎo)AR發(fā)病的主要物質(zhì)。當(dāng)鼻黏膜暴露于變應(yīng)原時，變應(yīng)原被抗原提呈細胞捕獲和處理，并提呈給幼稚的T細胞，幼稚的T細胞分化成輔助性T細胞(help T cell, Th)2，Th2細胞產(chǎn)生相應(yīng)的細胞分子以及Th2細胞和B細胞中共刺激分子的連接促進B細胞表型轉(zhuǎn)換，產(chǎn)生變應(yīng)原特異性IgE，IgE與肥大細胞和嗜堿性粒細胞表面的高親和力受體(FcεRI)結(jié)合，導(dǎo)致這兩種細胞敏化，釋放組胺、白三烯、細胞因子、趨化因子等炎癥介質(zhì)[1-2]。Damle等[5]從基因?qū)用孀C實Notch信號通路中的Notch1受體或ADAM10任一的缺失，影響血清總IgE和特異性IgE的產(chǎn)生，以及抑制Th2免疫反應(yīng)，在AR患者體內(nèi)Notch1和Jagged1的表達明顯升高，且與變應(yīng)原特異性IgE水平呈正相關(guān)[6]。Dell Aringa等[7]發(fā)現(xiàn)Notch信號決定濾泡輔助性T細胞(follicular helper T cell,TFH)和Th2細胞分化，TFH介導(dǎo)2型體液免疫反應(yīng)并產(chǎn)生IgE，Notch信號通路中的受體Notch1、Notch2是TFH生成所必需的，配體DLL4在TFH分化中起促進作用；NICD過表達促進TFH產(chǎn)生白細胞介素(interleukin,IL)-4，產(chǎn)生的IL-4促進變應(yīng)原特異性抗體IgE的產(chǎn)生。奧馬珠單抗(omalizumab)是一種抗IgE單克隆抗體，目前作為靶向IgE藥物應(yīng)用于各種高IgE的過敏性疾病的治療，通過抑制游離IgE和FcεRI結(jié)合、下調(diào)FcεRI、加速IgE-FcεRI復(fù)合物的降解等多種機制減少IgE的合成和釋放。奧馬珠單抗已被批準用于治療中-重度哮喘，后適應(yīng)證擴大用于治療慢性蕁麻疹，通過大量的臨床實驗分析已證明其在治療AR過程中的安全性和有效性，奧馬珠單抗可明顯減輕患者臨床癥狀和改善患者生存質(zhì)量，尤其對血清高IgE患者效果更為顯著[8-9]。

2.2Notch信號通路和Th1/Th2失衡 輔助性T細胞參與AR的發(fā)生發(fā)展過程，其中尤以Th2介導(dǎo)的細胞免疫反應(yīng)為主[10]。機體受到變應(yīng)原刺激后，促進原始T淋巴細胞向Th2分化，使Th2細胞免疫反應(yīng)增強，Th2細胞因子IL-4、IL-5分泌增加，Th1細胞及其細胞因子干擾素-γ(interferon-γ, IFN-γ)產(chǎn)生減少，Th1/Th2免疫失衡已被證實是AR的發(fā)病機制之一。多項研究均顯示AR動物模型體內(nèi)Th2細胞數(shù)量和IL-4、IL-5水平升高，IFN-γ表達降低[11]。

不同的Notch受體的表達影響T淋巴細胞亞群的分化和炎癥反應(yīng)。Xia等[12]發(fā)現(xiàn)肺泡巨噬細胞引起氣道炎癥是通過誘導(dǎo)配體Jagged1的表達來實現(xiàn)的，而后通過對4種Notch受體的檢測發(fā)現(xiàn)Notch4介導(dǎo)配體的作用大于其他受體，說明過敏原以Jagged1和Notch4依賴的方式促進Th2和Th17細胞分化，強調(diào)了Notch4受體在過敏性疾病中的重要性，通過Notch4基因位點途徑可以調(diào)節(jié)疾病的嚴重程度。另一項研究發(fā)現(xiàn)OVA小鼠鼻黏膜和外周血單核細胞中受體Notch1、Notch3、Notch4的表達升高，Notch2的表達下降[13]。Jurynczyk等[14]研究證實受體Notch3通過抑制Th1反應(yīng)改善了實驗性自身免疫性腦脊髓炎的癥狀。由不同的Notch配體介導(dǎo)受體作用也是影響T淋巴細胞向特定亞群分化的方式。DLL4在誘導(dǎo)階段可能為Th2的發(fā)育提供負面信號。Schaller等[15]發(fā)現(xiàn)抗DLL4處理的動物氣道高反應(yīng)性顯著增加，而抑制DLL4可促進過敏性氣道炎癥環(huán)境中Th2細胞功能。動物實驗研究可觀察到AR小鼠模型中Notch信號通路中各成分異常表達的顯著變化，但當(dāng)應(yīng)用γ-分泌酶抑制劑(γ-secretase inhibitor, GSI)阻斷Notch信號通路后，引發(fā)鼻黏膜炎癥的介質(zhì)如Th2細胞因子以及Notch信號通路中受體Notch1和Notch信號靶基因Hes1、Hes5的表達均受到明顯抑制[11]。GSI對Th1細胞的作用尚存在爭議，Zhou等[16]通過對哮喘模型小鼠的實驗發(fā)現(xiàn)GSI有助于哮喘模型中的Th1反應(yīng)，導(dǎo)致IFN-γ水平上升。由此可見，Notch信號通路在Th1/Th2的分化和成熟中發(fā)揮重要作用，不同Notch受體與配體接觸的信號可以引導(dǎo)分化向特定的細胞命運[17]，且對分化后的細胞功能存在影響。

2.3Notch信號通路和Th17/Treg失衡 近年研究發(fā)現(xiàn)，T淋巴細胞亞群中的Th17對變應(yīng)性鼻炎的發(fā)病有重要影響，Th17釋放的細胞因子IL-17和氣道巨噬細胞募集有關(guān)，參與嗜酸性粒細胞和中性粒細胞的聚集和中性粒細胞的激活，并且誘導(dǎo)Th2細胞活化以及血清IgE的產(chǎn)生。調(diào)節(jié)性T細胞(regulatory T cell, Treg)在免疫系統(tǒng)中的重要作用近來更多地被重視，Treg在參與過敏原的致敏作用、對Th1/Th2/Th17細胞的調(diào)控以及通過操控Treg治療過敏性疾病的作用已被多項研究證實，尤其Treg可通過調(diào)節(jié)Th2細胞的極化狀態(tài)，使Th2對變應(yīng)原的反應(yīng)被抑制，是Treg進行免疫調(diào)控的重要機制[18]。變應(yīng)原促進原始T淋巴細胞向Th17分化，而具有免疫抑制作用的Treg產(chǎn)生減少，Th17/Treg失衡作為Th1/Th2免疫失衡的補充使AR的發(fā)病機制理論更加完善。

從基因水平上，Th17的產(chǎn)生與特異性轉(zhuǎn)錄因子RORγt和IL-17密切相關(guān)，RORγt和IL-17基因是Th17細胞分化中Notch信號的直接轉(zhuǎn)錄靶點，Notch配體可以通過上調(diào)這兩個基因的啟動子區(qū)域直接調(diào)控Th17。Foxp3作為調(diào)控CD4+CD25+Foxp3+Treg表達的上游基因，F(xiàn)oxp3啟動子含有Notch反應(yīng)元件，Treg相關(guān)標記CD25也被認為是Notch靶基因，F(xiàn)oxp3的缺失或突變會引起機體的免疫失調(diào)和變態(tài)反應(yīng)性疾病的發(fā)生[19]。Notch信號可以通過RBP-J和Hes1依賴的機制雙向調(diào)控Foxp3啟動子，從而參與Treg的分化和功能發(fā)育[6]。下調(diào)Notch信號中Foxp3的表達，會增加Notch1、Jagged1、NICD的表達，抑制Treg細胞的分化，促進AR的發(fā)生發(fā)展。轉(zhuǎn)化生長因子-β(transforming growth factor-β, TGF-β)是Treg分泌的物質(zhì)之一，被發(fā)現(xiàn)在過敏性疾病中發(fā)揮作用，表達Foxp3和產(chǎn)生具有抑制能力的Treg需要TGF-β誘導(dǎo)的RUNX1和RUNX3的參與。Ostroukhova[20]發(fā)現(xiàn)Treg表達的膜結(jié)合型TGF-β通過激活靶細胞中Notch1-HES1軸從而觸發(fā)Notch信號來實現(xiàn)，且高水平的TGF-β可能促進CD4+CD25+T細胞上Notch配體的表達，進而減輕過敏性氣道炎癥。

Notch信號通路參與Th17/Treg免疫調(diào)控的機制之一是其受體的表達影響，Notch1在此過程中發(fā)揮了重要作用。受體Notch1參與Th17的活化，Keerthivasan等[21]在多發(fā)性硬化癥的小鼠體內(nèi)觀察到Notch1在體外極化的Th17細胞中被激活。Huang等[22]通過對AR患者外周血的研究發(fā)現(xiàn)，Th17/Treg異常與Notch1的表達有關(guān)，在另一項卵清蛋白(ovalbumin,OVA)/AR動物實驗[23]中也證實了Treg細胞分化受Notch1負調(diào)控。Notch配體介導(dǎo)的Notch信號的表達是參與Th17/Treg免疫調(diào)控的另一機制。Mota等[24]發(fā)現(xiàn)DLL1介導(dǎo)的Notch信號促進誘導(dǎo)CD4+T細胞轉(zhuǎn)化為體外誘導(dǎo)的Treg(iTreg)，還能增強Foxp3+細胞的增殖和Treg功能相關(guān)標志物的表達。配體DLL4則與Th17分化有關(guān)，動物實驗中發(fā)現(xiàn)抗DLL4抗體抑制哮喘小鼠Th17細胞的分化[25]。人類Treg被證明表達受體Notch1和Notch4以及配體DLL1、Jagged1和Jagged2，而在肥胖哮喘小鼠模型中，GSI阻斷Notch信號會顯著下調(diào)Notch1、Hes1的mMRA表達以及NICD水平，IL-17、IL-6和RORγt均降低[26]，經(jīng)GSI治療的ITP患者的研究得出了同樣的結(jié)果，同時降低了Th17細胞百分比和Th17/Treg比值[27]，以上實驗結(jié)果均支持Notch信號通路參與調(diào)控了變態(tài)反應(yīng)性疾病中Th17和Treg的分化過程和功能形成，并通過此途徑影響氣道炎癥的嚴重程度。以上結(jié)果說明，Notch信號通路在基因?qū)用嫔贤ㄟ^調(diào)控上游基因可影響Th17/Treg的分化和功能發(fā)育，同時Th17/Treg分化和功能標志物的表達也受Notch受體及配體的調(diào)控作用影響。

2.4Notch信號通路和樹突狀細胞(dendritic cell,DC) 在AR發(fā)病過程中，DC是最強大的抗原提呈細胞，未成熟的DC在受到外來抗原刺激時被激活，獲得成熟表型后，遷移到淋巴結(jié)里，引導(dǎo)Th分化。DC的成熟狀態(tài)被認為在刺激免疫反應(yīng)中起決定性作用，而表達IL-10的未成熟DC有利于免疫耐受。受體Notch1與配體Jagged1在AR發(fā)病過程中呈高表達，焦沃爾等[23]證實Notch1-Jagged1信號軸可通過促進DC分化引起IL-6及IL-10高表達而導(dǎo)致AR的發(fā)生發(fā)展。Notch信號通路通過DC進行免疫調(diào)控的方式，一是直接調(diào)控DC的產(chǎn)生和功能，二是調(diào)節(jié)DC對T淋巴細胞發(fā)育和活性的影響。DC的產(chǎn)生與Notch信號相關(guān)，近期研究指出在DC生長因子Flt3L培養(yǎng)中加入Notch配體可以增加小鼠和人類干細胞cDC1的產(chǎn)量[28]。DC的功能也受到Notch配體的影響，Shen等[29]發(fā)現(xiàn)IgA通過Notch配體DLL4介導(dǎo)抑制DC細胞的功能，IgA/DLL/Notch調(diào)節(jié)軸與IgA-DC對效應(yīng)T細胞的抑制活性有關(guān)。DC通過Notch信號促進Th1/Th2/Th17的分化和發(fā)育，并對分化后的細胞活性產(chǎn)生影響。Th2發(fā)育需要DC的協(xié)同信號，由Notch配體Jagged2通過刺激幼稚T淋巴細胞合成的IL-4決定Th2極化因素，抑制Notch信號在體外和體內(nèi)消除了IL-4的增加，修飾DC的分子如DC配體也會影響Th2的活性[30]。其他研究也證實了DLL4的表達決定人DC在調(diào)節(jié)T細胞免疫反應(yīng)中的活性，從而影響Th1和Th17的分化[31]。

2.5Notch信號通路和其他炎性細胞 AR發(fā)病過程中會出現(xiàn)肥大細胞、嗜堿性粒細胞脫顆粒釋放炎性介質(zhì)，嗜酸性粒細胞(eosinophilia, EOS)、中性粒細胞浸潤滲入鼻黏膜等病理改變，AR動物實驗中也證實了這種病理現(xiàn)象，OVA小鼠的BALF和肺組織中可以觀察到嗜酸性粒細胞和中性粒細胞浸潤，肺組織中杯狀細胞增生和黏液高分泌[10]。ADAM10作為Notch信號通路活化的關(guān)鍵物質(zhì)，ADAM10靶向敲除的OVA小鼠，支氣管灌洗液BALF中的嗜酸性粒細胞數(shù)量明顯減少，肺組織中IL-4和IL-13 mRNA的表達也較少[5]。使用GSI來阻斷Notch信號通路的一系列實驗[11,16,25,32]發(fā)現(xiàn)，GSI通過ERK途徑可以降低嗜酸性粒細胞陽離子蛋白(eosinophil cationic protein,ECP)脫顆粒，削弱嗜酸性粒細胞對嗜酸性粒細胞趨化因子的反應(yīng)能力，同時抑制Th2細胞因子水平，減輕嗜酸性粒細胞浸潤和杯狀細胞化生，改善AR小鼠嗜酸性粒細胞浸潤和黏蛋白的產(chǎn)生。黏液素基因MUC5AC是Notch信號的靶基因，其表達是由NICD通過激活EGFR途徑誘導(dǎo)的，這可能是GSI處理后的AR模型黏液素產(chǎn)量下降的原因。GSI還通過影響Notch信號導(dǎo)致DC和肥大細胞功能改變，誘導(dǎo)耐受性DC活性，抑制肥大細胞增生。由此可見，Notch信號通路參與了嗜酸性粒細胞的產(chǎn)生和趨化、杯狀細胞和肥大細胞增生、黏液產(chǎn)生等過程，且上述過程可以同在鼻黏膜和肺組織中觀察到，也反映了AR與哮喘有著“同一氣道，同一疾病”的密切聯(lián)系。

3 中醫(yī)藥通過Notch信號通路治療AR的研究進展

3.1中醫(yī)藥治療AR的研究概況 AR屬于中醫(yī)“鼻鼽”“鼻窒”的范疇，肺開竅于鼻是其理論基礎(chǔ)?！端貑枴の迮K別論》中提到“五氣入鼻，藏于心肺，心肺有病，而鼻為之不利也”，《素問·至真要大論》則從運氣學(xué)角度闡述了鼻鼽的發(fā)生與五運六氣失常相關(guān)，可見鼻鼽病因在于外失常于氣候變化、內(nèi)失調(diào)于臟腑經(jīng)絡(luò)。祖國醫(yī)學(xué)認為AR的病機可歸納為肺氣虛寒、脾氣虛弱、腎陽不足、肺經(jīng)伏熱四個方面，此病病位在肺，涉及脾腎，病性以虛寒為主，也可蘊而化熱。由于現(xiàn)代生活方式的改變，寒涼飲食及冷氣空調(diào)對人體的影響日益深重，致使AR患者證屬陽氣不足者的比例日益升高，患者常伴畏寒、四肢不溫等陽氣不足的癥狀，針對不同的病機，臨床上采用溫肺散寒、益氣固表、益氣健脾、溫補腎陽、通利鼻竅等相應(yīng)的治法，在AR的臨床治療和預(yù)防上能取得較好療效。

現(xiàn)代研究表明，中醫(yī)藥可以通過多位點、多途徑的復(fù)雜網(wǎng)絡(luò)藥理機制對疾病進行調(diào)控而發(fā)揮作用。如溫馨等[33]通過構(gòu)建AR大鼠模型，采用具有清熱涼血、脫敏祛風(fēng)的涼血祛風(fēng)顆粒進行治療后，大鼠血清IL-4減少、IFN-γ表達升高，病理觀察下鼻黏膜炎癥反應(yīng)明顯減輕。李媛等[34]采用具有祛風(fēng)抗敏止涕作用的過敏煎對AR患者進行治療，可顯著降低患者鼻腔分泌物中EOS數(shù)量和血清IgE水平。李倩[35]認為AR多與肺脾腎三臟失調(diào)有關(guān)相關(guān)，使用補氣助陽湯以達到溫腎助陽補虛、健脾益氣通竅的作用，治療后患者的Th17/Treg比例、TNF-α、IL-17和TGF-β明顯優(yōu)于對照組，證實補氣助陽湯可調(diào)節(jié)Th17/Treg細胞間的平衡狀態(tài)。

3.2單藥及其有效成分通過Notch信號通路治療AR的研究概況 AR的臨床治療常選用具有宣通鼻竅、溫肺散寒作用的單味藥物，如辛夷、蒼耳子、白芷、細辛、鵝不食草等，此類藥物性味偏于辛溫，尤其對頭面五官疾病具有針對性治療作用，現(xiàn)代藥理研究也證明了上述藥物對AR治療的有效性，如辛夷在抗炎實驗研究中證明有抗組胺、抗慢反應(yīng)物質(zhì)、抗過敏、抗菌作用，鵝不食草具有抗過敏、抗炎、抗腫瘤作用，多用于AR、鼻竇炎、鼻咽癌的治療。

厚樸善于健脾燥濕、溫肺平喘，在AR及哮喘等變態(tài)反應(yīng)性疾病中應(yīng)用廣泛，在現(xiàn)代藥理研究中發(fā)現(xiàn)厚樸提取物厚樸酚具有抑菌、抗炎作用，Huang等[36]發(fā)現(xiàn)受體Notch1和配體Jagged1、Jagged2在致敏小鼠體內(nèi)顯著上調(diào)，厚樸酚可通過調(diào)節(jié)JAK-STAT和Notch1信號影響Th1/Th2/Th17細胞因子水平，證實了Notch1在T細胞發(fā)育和Th1/Th2失衡中有獨特的作用，而厚樸酚可以通過調(diào)節(jié)Notch受體表達而發(fā)揮其恢復(fù)T淋巴細胞亞群及細胞因子水平免疫平衡的作用。Liu等[10]采用陳皮有效提取成分橘皮素進行實驗得出了類似的結(jié)果，認為Notch和P13K信號通路與T細胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、增殖和分化有關(guān)，橘皮素可通過下調(diào)Notch1/Jagged1的表達而抑制Notch信號通路，增加CD4+CD25+Foxp3+Treg細胞和轉(zhuǎn)錄因子Foxp3的表達，從而促進Foxp3/Treg分化，影響Th17/Treg比例從而抑制AR炎癥，采用OVA腹腔注射和鼻腔激發(fā)構(gòu)建的模型小鼠經(jīng)橘皮素治療后IL-6、IL-17A水平亦明顯降低。黃芪、白術(shù)具有益氣固表之功，常用于臨床兼有衛(wèi)表不固者，黃芪有效提取成分黃芪甲苷能夠調(diào)節(jié)Notch1、Jagged1的表達，在過敏性皮炎及肺纖維化模型小鼠中被證實[37]，白術(shù)提取成分白術(shù)內(nèi)酯除上述作用外，還能下調(diào)Notch信號通路下游蛋白Hes1、Hey1水平[38]，說明黃芪、白術(shù)可以通過調(diào)節(jié)Notch受體和配體表達在過敏性疾病中發(fā)揮作用。

3.3中藥復(fù)方通過Notch信號通路治療AR的研究概況 復(fù)方制劑較之單味藥物在臨床的應(yīng)用更為廣泛，中藥復(fù)方的功效也不僅僅是單味中藥功效的簡單相加，如玉屏風(fēng)散、過敏煎等方劑在AR的臨床治療中可明顯緩解鼻部炎癥癥狀，有助于防止疾病復(fù)發(fā)。玉屏風(fēng)散由黃芪、白術(shù)、防風(fēng)組成，功用解表祛風(fēng)，被認為能夠調(diào)節(jié)T淋巴細胞亞群、改善患者免疫功能、降低氣道高反應(yīng)性。過敏煎為名老中醫(yī)祝湛予所創(chuàng)的方劑，由銀柴胡、防風(fēng)、烏梅、五味子組成，具有祛風(fēng)解表抗敏的作用，通過拮抗組胺、降低血清IgE、抑制肥大細胞脫顆粒及改變CD4+T細胞亞群分化而發(fā)揮其抗炎、止癢、降低毛細血管通透性等作用，在各類過敏性疾病中從多靶點、多路徑、多層次發(fā)揮其抗過敏功效，玉屏風(fēng)散聯(lián)合過敏煎可以改善Th17/Treg免疫失衡引起的肺損傷，增加肺組織中Foxp3和降低其IL-17蛋白的表達[39]。具有益氣溫陽、宣肺平喘之功的復(fù)方平喘顆粒(淫羊藿、太子參、黃芪、五味子、知母、炙麻黃、款冬花、地龍、罌粟殼)，可用于哮喘癥狀的緩解，任宇哲[40]通過采用OVA致敏構(gòu)建的哮喘模型大鼠進行研究，發(fā)現(xiàn)復(fù)方平喘顆粒能調(diào)節(jié)大鼠Notch1、Jagged1表達及激活STAT信號通路，降低嗜酸性粒細胞水平，抑制DC成熟，且調(diào)節(jié)DC功能可能是通過Notch信號通路影響早期生長反應(yīng)因子1(early growth response protein1,EGR1)蛋白及蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)的表達來實現(xiàn)的，說明復(fù)方平喘顆粒改善氣道炎癥反應(yīng)和調(diào)節(jié)細胞免疫功能可以通過Notch和STAT信號通路來實現(xiàn)。Wu等[41]在乳腺癌骨轉(zhuǎn)移的體外實驗中，采用具有溫陽補腎功效的溫腎壯骨方(蛇床子、補骨脂、附子)進行治療，發(fā)現(xiàn)溫腎壯骨方可以顯著調(diào)節(jié)Jagged1的表達，通過Jagged1/Notch途徑與TGF-β和IL-6信號通路的串?dāng)_調(diào)節(jié)骨基質(zhì)細胞之間的相互作用，從而抑制惡性腫瘤的骨轉(zhuǎn)移。

此外，中醫(yī)藥通過干預(yù)Notch信號在改善肺纖維化、抗血管再生、抑制腫瘤等方面的作用已被廣泛研究，可見Notch信號通路與各個系統(tǒng)疾病的發(fā)生發(fā)展有重要關(guān)系，且多項實驗均證明中醫(yī)藥可通過抑制Notch信號通路發(fā)揮治療作用，故阻斷Notch信號通路可能是中醫(yī)藥治療AR的機制之一。目前中醫(yī)藥在AR治療方面，與Notch信號通路關(guān)系的證據(jù)尚有限，中醫(yī)藥干預(yù)Notch信號通路治療AR的機制有待進一步探索。

4 小結(jié)與展望

AR的發(fā)生有著復(fù)雜的免疫調(diào)控機制，根據(jù)目前研究，Notch信號通路在其中發(fā)揮了重要作用。Notch信號通路通過調(diào)節(jié)AR發(fā)病過程中DC的活化、IgE的產(chǎn)生、T淋巴細胞亞群異常分化、炎性細胞的聚集、嗜堿性粒細胞和肥大細胞脫顆粒釋放炎性介質(zhì)等過程，發(fā)揮免疫調(diào)控作用，尤其在Th1/Th2、Th17/Treg免疫失衡中扮演著重要的角色。Notch信號通路中不同受體和配體的表達，以及不同受體和不同配體之間的接觸信號可能是影響T淋巴細胞分化和功能的方式，不同受體配體的特異性作用值得進一步探討研究。阻斷Notch信號可能是治療AR的一種潛在方法，本文提及的GSI已體現(xiàn)出這一作用。中醫(yī)藥在AR的臨床治療和預(yù)防上表現(xiàn)出顯著的療效，在現(xiàn)代研究中也體現(xiàn)了調(diào)節(jié)機體免疫功能、抗炎、抗過敏等作用，中醫(yī)藥治療AR的作用機制之一可能是通過阻斷Notch信號來實現(xiàn)的。對此展開深入的基礎(chǔ)和臨床研究，能夠進一步揭示AR發(fā)生發(fā)展的可能機制，并為今后中醫(yī)藥防治AR的現(xiàn)代化研究提供新的思路和方向。

利益沖突：所有作者均聲明不存在利益沖突。