兒童自身免疫性甲狀腺疾病發(fā)病機(jī)制的研究進(jìn)展

夏秦，陳臨琪，陳婷

(蘇州大學(xué)附屬兒童醫(yī)院內(nèi)分泌遺傳代謝科，江蘇 蘇州 215000)

自身免疫性甲狀腺疾病(autoimmune thyroid disease，AITD)是最常見的器官特異性自身免疫性疾病。其中，毒性彌漫性甲狀腺腫又稱格雷夫斯病(Graves′ disease，GD)，是由促甲狀腺激素受體刺激性抗體(thyroid stimulating hormone receptor-stimulating antibody，TSAb)刺激甲狀腺分泌過多甲狀腺素所致。橋本甲狀腺炎(Hashimoto thyroiditis，HT)主要以甲狀腺組織淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)，甲狀腺濾泡細(xì)胞破壞、凋亡為特征[1],臨床上初期表現(xiàn)為甲狀腺功能亢進(jìn)，后期演變?yōu)榧谞钕俟δ軠p退。AITD的患病率逐年增高，全球患病率接近5%[2]，其中兒童的發(fā)病率也逐年升高，且不同程度影響患兒學(xué)習(xí)與生活質(zhì)量。因此，兒童AITD日益成為全球關(guān)注的公共衛(wèi)生問題。

AITD是由自身免疫介導(dǎo)，遺傳因素和環(huán)境誘發(fā)因素相互作用所致的疾病。研究表明，AITD存在家族遺傳性，屬于多基因遺傳病，目前已發(fā)現(xiàn)多個(gè)基因的單核苷酸多態(tài)性(single nucleotide polymorphism，SNP)可影響AITD的發(fā)生[3]。另一方面，AITD在某些遺傳疾病患兒中的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)升高[4]。AITD的發(fā)病20%～30%受環(huán)境因素影響，目前已發(fā)現(xiàn)的環(huán)境因素包括輻射、碘、感染、飲酒、藥物、吸煙、甲狀腺激素干擾物(thyroid disrupting chemicals,TDCs)等。遺傳及環(huán)境因素共同作用于免疫系統(tǒng)[5]，而自身抗體、T淋巴細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞參與了AITD發(fā)病的整個(gè)過程?，F(xiàn)就兒童AITD發(fā)病機(jī)制的研究進(jìn)展予以綜述，以為臨床尋找新的治療靶標(biāo)提供依據(jù)。

1 遺傳因素

遺傳因素是AITD發(fā)病的內(nèi)因。AITD普遍存在家族聚集性。既往流行病學(xué)研究表明，AITD患者的同胞患AITD的風(fēng)險(xiǎn)遠(yuǎn)高于普通人群，同卵雙胞胎患AITD的風(fēng)險(xiǎn)遠(yuǎn)高于異卵雙胞胎，且通過綜合人口分析、家庭研究和隔離分析等數(shù)據(jù)，證實(shí)AITD的家族聚集性是由遺傳因素導(dǎo)致[6]?；加蠥ITD的兒童接觸環(huán)境因素較成人少，因此遺傳因素在兒童AITD的發(fā)病過程中起更重要的作用[7]。目前對(duì)AITD遺傳因素的研究集中在遺傳易感基因的SNP[8]，主要包括甲狀腺抗原相關(guān)基因和免疫調(diào)節(jié)相關(guān)基因的SNP。另外，患有其他遺傳病的兒童AITD發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)也遠(yuǎn)高于普通兒童。

1.1遺傳易感基因的SNP

1.1.1甲狀腺抗原相關(guān)基因 促甲狀腺激素受體(thyroid stimulating hormone receptor，TSHR)是GD自身免疫反應(yīng)的直接靶標(biāo)，與GD密切相關(guān)。目前已知的與GD易感性最相關(guān)的SNP位點(diǎn)均位于TSHR的1號(hào)內(nèi)含子[9]。甲狀腺球蛋白(thyroglobulin，TG)占甲狀腺蛋白總量的80%，被認(rèn)為是AITD的另一個(gè)候選易感基因[10]。TG基因位于染色體8q24上，是AITD易感基因所在區(qū)域。TG基因33號(hào)外顯子上的一個(gè)SNP與DRβ1鏈74位點(diǎn)上含精氨酸的人類白細(xì)胞抗原(human leukocyte antigen，HLA)突變體顯著相關(guān)，其共同作用使AITD的轉(zhuǎn)錄發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)增高[11]。另有研究對(duì)TG基因轉(zhuǎn)錄位點(diǎn)上游2.5 kb范圍的啟動(dòng)子區(qū)域進(jìn)行了測(cè)序，發(fā)現(xiàn)下一個(gè)SNP位點(diǎn)，位于-1623(rs180195)[12]。該位點(diǎn)無論在病例對(duì)照研究還是家系關(guān)聯(lián)研究中均與AITD顯著相關(guān)。此外，rs180195被發(fā)現(xiàn)能通過表觀遺傳學(xué)的機(jī)制與干擾素調(diào)節(jié)因子相互作用觸發(fā)AITD[13]。

1.1.2免疫調(diào)節(jié)相關(guān)基因 HLA座是第一個(gè)被發(fā)現(xiàn)與GD和HT相關(guān)的基因座。其中，HLA-Ⅱ類基因同時(shí)也是1型糖尿病及乳糜瀉的易感基因[14]。目前已明確HLA-Ⅱ類基因中的HLA-DR3是所有GD易感基因中最主要的一個(gè)基因，而其與HT的關(guān)系尚不明確。但HLA-Ⅰ類基因高表達(dá)與HT存在明顯相關(guān)性[15]。研究發(fā)現(xiàn)，HLA-DRβ鏈第74位的谷氨酸對(duì)AITD具有保護(hù)作用，而該位置的精氨酸可促進(jìn)AITD的發(fā)生發(fā)展[16]。且DRβ1鏈74位點(diǎn)上含精氨酸的HLA突變體可增加同一個(gè)體的1型糖尿病和AITD共患病風(fēng)險(xiǎn)[17]。另外，HLA-B * 46和HLA-Cw * 01共存被認(rèn)為可能是早發(fā)型AITD的遺傳標(biāo)記[18]。細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞相關(guān)抗原4的基因多態(tài)性與AITD相關(guān)，其是T淋巴細(xì)胞表面表達(dá)的共刺激分子，可通過與抗原呈遞細(xì)胞表面的B7分子結(jié)合下調(diào)T淋巴細(xì)胞的活化。同時(shí)，細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞相關(guān)抗原4也表達(dá)于調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(regulatory T cell，Treg細(xì)胞)表面，在抑制Treg細(xì)胞功能方面起重要作用，參與免疫反應(yīng)負(fù)調(diào)節(jié)[19]。目前，已有一些細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞相關(guān)抗原4的多態(tài)性被報(bào)道與AITD相關(guān)[20]。蛋白酪氨酸磷酸酶非受體型22編碼淋巴酪氨酸磷酸酶蛋白，后者負(fù)向調(diào)控T淋巴細(xì)胞受體信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過程，蛋白酪氨酸磷酸酶非受體型22基因發(fā)生突變會(huì)導(dǎo)致T細(xì)胞活性增強(qiáng)，使免疫失衡，從而參與自身免疫反應(yīng)。該基因SNP也被發(fā)現(xiàn)與AITD存在相關(guān)性[21]。CD40在抗原呈遞細(xì)胞上的表達(dá)是其發(fā)揮正常作用的關(guān)鍵，同時(shí)CD40為B淋巴細(xì)胞的增殖、分化和產(chǎn)生抗體提供了重要信號(hào)，故CD40的變異可促進(jìn)AITD的發(fā)生[22]。CD25對(duì)Treg細(xì)胞的表達(dá)起重要作用，其多態(tài)性可減少Treg細(xì)胞的表達(dá)，促進(jìn)自身免疫[23]。Toll樣受體參與先天性免疫，可識(shí)別病原體保守結(jié)構(gòu)的分子，研究表明Toll樣受體可通過細(xì)胞因子產(chǎn)生激活免疫細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)過程，從而在AITD發(fā)病過程中起作用[24]。Fc受體樣蛋白3是編碼免疫球蛋白受體超家族的一個(gè)成員，其編碼結(jié)構(gòu)蛋白在胞質(zhì)中包含免疫受體-酪氨酸抑制基序和免疫受體-酪氨酸激活基序，可能參與免疫系統(tǒng)的調(diào)節(jié)。另外，F(xiàn)c受體樣蛋白3的多態(tài)性影響核因子κB的結(jié)合親和力，核因子κB是各種免疫基因的重要刺激物，在自身免疫性疾病中至關(guān)重要，因此Fc受體樣蛋白3與自身免疫性疾病相關(guān)[25]。25-羥維生素D3-1α-羥化酶是一種線粒體P450酶，也是決定1,25-二羥維生素D3生成速率的關(guān)鍵酶，其催化25-羥維生素D3轉(zhuǎn)化為1,25-二羥維生素D3，后者可通過抑制淋巴細(xì)胞的增殖和炎癥細(xì)胞的分泌調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答[26]。

1.2遺傳疾病 特納綜合征(Turner syndrome，TS)是X染色體數(shù)量或結(jié)構(gòu)異常引起的先天性卵巢發(fā)育不全綜合征。據(jù)研究數(shù)據(jù)顯示，小兒普通人群中HT的發(fā)病率為1.2%～1.3%，而TS患兒合并HT的發(fā)病率上升至10%～21%；GD發(fā)病率為1.07‰，TS患兒合并GD的發(fā)病率上升至1.7%～3%[4，27]。關(guān)于TS易合并AITD的原因尚未明確，目前認(rèn)為主要因?yàn)閄染色體上含有免疫相關(guān)基因(主要組織相容性復(fù)合體基因、叉頭框轉(zhuǎn)錄因子P3等)，它們可以調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答和改變免疫耐受[28]。

唐氏綜合征(Down′s syndrome，DS)作為一種染色體疾病，同樣易與AITD合并發(fā)生。小兒普通人群中HT的發(fā)病率為1.2%～1.3%，而DS患兒合并HT的發(fā)病率上升至14%～34%；GD發(fā)病率為1.07‰，而DS患兒合并GD的發(fā)病率上升至6.5‰[4]。目前，關(guān)于DS合并AITD發(fā)生的原因尚未完全闡明，可能因?yàn)榈?1號(hào)染色體上的相關(guān)基因表達(dá)不足引起DS免疫機(jī)制改變，從而導(dǎo)致自身免疫性疾病的發(fā)生[29]；也可能因?yàn)槿旧w非整倍性會(huì)誘發(fā)自身免疫反應(yīng)，如AITD易合并TS[4]。

2 環(huán)境因素

研究表明，碘、輻射、TDCs、感染、硒、吸煙及壓力等因素均可影響AITD的發(fā)病過程[30]。它們主要通過降低甲狀腺激素水平，影響促甲狀腺激素(thyroid stimulating hormone，TSH)分泌，甚至有些可作為甲狀腺受體激動(dòng)劑來影響甲狀腺功能。但不同環(huán)境因素在AITD發(fā)病過程中所起的作用尚不清楚。有學(xué)者認(rèn)為，與AITD易感性最密切相關(guān)的環(huán)境因素包括放射、碘攝入和環(huán)境毒物[31]。輻射主要引起甲狀腺功能低下；碘作為合成甲狀腺素的原材料，碘攝入過多或過少均可增加AITD的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)；化學(xué)毒物中與AITD發(fā)病相關(guān)的種類較多，包括多氯聯(lián)苯、大豆配方食品、全氟類化合物等。

2.1輻射 無論是環(huán)境輻射還是醫(yī)療輻射均與AITD的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)存在相關(guān)性。Agate等[32]的研究表明，放射性沉降物可以使兒童或青少年甲狀腺過氧化物酶抗體(thyroid peroxidase antibody，TPOAb)水平升高[30]。職業(yè)性暴露于電離輻射的女性發(fā)生AITD的比例明顯高于未暴露于電離輻射的女性[33]，故建議暴露于電離輻射工作者工作時(shí)使用防護(hù)罩。醫(yī)療放射性碘治療毒性甲狀腺腫后，甲狀腺功能降低的概率增加。研究表明，癌癥或甲狀腺毒癥的患者接受高劑量輻射后，甲狀腺功能減退和甲狀腺功能亢進(jìn)的發(fā)生率分別由2.4%升至31%、0%升至5%[34]。

2.2碘 碘是甲狀腺素的合成原料，其不適量供應(yīng)在AITD中起重要作用[35]。碘可通過誘導(dǎo)甲狀腺氧化損傷，增強(qiáng)甲狀腺抗原免疫原性和影響細(xì)胞因子表達(dá)來促進(jìn)AITD的發(fā)生[36]。研究表明，碘缺乏或過量時(shí)，TG水平在6～24月齡的嬰幼兒中明顯升高[37]。同時(shí)，碘水平還可通過影響孕婦甲狀腺功能而影響胎兒后期的神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育[38]。胺碘酮藥物在AITD中的作用與碘負(fù)荷相關(guān)，可以像其他形式的碘一樣影響甲狀腺功能。一項(xiàng)研究表明，即使是接受低劑量胺碘酮治療的先天性心臟病患者也容易合并AITD[39]。

2.3TDCs TDCs主要包括硝酸鹽、多氯聯(lián)苯、二噁英、六氯苯、2,5-二氯苯酚、汞、全氟辛酸、全氟羥基物質(zhì)和多鹵聯(lián)苯等，廣泛存在于大氣、水、土壤、灰塵和食物中，可通過以下4個(gè)水平干擾甲狀腺功能[40]：①在甲狀腺激素合成的水平上，影響碘攝入、甲狀腺過氧化物酶活性和TG水平；②在代謝水平上，影響甲狀腺激素轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白和相關(guān)代謝酶的活性；③在細(xì)胞水平，影響甲狀腺激素受體介導(dǎo)的下游基因轉(zhuǎn)錄；④通過干擾下丘腦-垂體-甲狀腺軸的反饋機(jī)制，影響其對(duì)甲狀腺系統(tǒng)功能的調(diào)節(jié)。另一方面，某些TDCs還可以直接作用于免疫系統(tǒng)，誘發(fā)自身免疫反應(yīng)，導(dǎo)致甲狀腺功能破壞。如多氯聯(lián)苯化學(xué)干擾物可以使接觸者體內(nèi)TPOAb的水平升高[41]。因此，TDCs既可直接影響甲狀腺功能，又可引起自身免疫反應(yīng)，間接破壞甲狀腺組織，通過不同機(jī)制誘發(fā)AITD。

2.4吸煙 吸煙在一定程度上可以通過影響免疫系統(tǒng)而增加GD和格雷夫斯眼病的患病率，并與TPOAb呈負(fù)相關(guān)[42]。一項(xiàng)對(duì)中國(guó)居民不同吸煙程度影響甲狀腺激素水平及甲狀腺相關(guān)抗體的研究表明，吸煙與TSH、TPOAb和抗甲狀腺球蛋白抗體(anti-thyroglobulin antibody，TGAb)水平顯著下降有關(guān)[43]。妊娠期間吸煙可降低甲狀腺炎的發(fā)生率，但可增加產(chǎn)后甲狀腺炎的發(fā)生率[44]。因此，吸煙可以降低TPOAb、TGAb水平及自身免疫性甲狀腺功能減弱發(fā)生率，但這種保護(hù)作用會(huì)在停止吸煙數(shù)年后消失[45]。這可能與免疫激活上調(diào)尼古丁受體的表達(dá)，尼古丁激活膽堿能抗炎系統(tǒng)抑制輔助性T細(xì)胞(helper T cell，Th細(xì)胞)和減少炎癥因子表達(dá)相關(guān)[46]。另外，父母吸煙對(duì)嬰兒的甲狀腺也產(chǎn)生影響，吸煙父母的嬰兒在出生和1歲時(shí)臍帶血血清TG和硫氰酸鹽水平更高[47]。不管是主動(dòng)吸煙還是被動(dòng)吸煙均可影響甲狀腺素水平[48]。

2.5壓力 既往研究表明，壓力與AITD存在相關(guān)性[49]。流行病學(xué)調(diào)查發(fā)現(xiàn)，GD患者發(fā)病前生活壓力大于對(duì)照者，且對(duì)疾病預(yù)后產(chǎn)生不利影響[50]。壓力可以直接或通過神經(jīng)和內(nèi)分泌系統(tǒng)間接影響免疫系統(tǒng)，抑制細(xì)胞免疫，增強(qiáng)體液免疫，參與AITD的發(fā)病過程[51]。另有研究發(fā)現(xiàn)，急性心理壓力會(huì)影響下丘腦-垂體-甲狀腺軸，引起TSH水平升高[52]。壓力與AITD的相關(guān)性表明，減少壓力對(duì)疾病發(fā)生及恢復(fù)有重要作用。

2.6病毒感染 病毒感染可以激活機(jī)體固有免疫和適應(yīng)性免疫，機(jī)體可通過釋放細(xì)胞抗原，介導(dǎo)細(xì)胞壞死或凋亡途徑來增加AITD的發(fā)生[53]。研究發(fā)現(xiàn)，感染人細(xì)小病毒B19、乙型和丙型肝炎病毒后，甲狀腺自身抗體TPOAb及TGAb水平升高[54]，TPOAb和TGAb可通過抗體依賴性細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒作用參與細(xì)胞凋亡。此外，腸道病毒也被認(rèn)為與甲狀腺疾病存在相關(guān)性。Desailloud等[55]研究發(fā)現(xiàn)，在切除的甲狀腺疾病患者的甲狀腺標(biāo)本中均可檢測(cè)到腸道病毒RNA，但有關(guān)腸道病毒RNA在甲狀腺疾病中的作用還需進(jìn)一步驗(yàn)證。

3 免疫機(jī)制

AITD是指由于對(duì)甲狀腺的自身抗原失去免疫耐受，T淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)甲狀腺，并分泌特異性自身抗體而引起的疾病。在GD中，血清促甲狀腺激素受體抗體(thyrotrophin receptor antibody，TRAb)可作為臨床診斷的特異性抗體，與GD的嚴(yán)重程度和預(yù)后存在一定關(guān)系。TSAb能刺激甲狀腺濾泡細(xì)胞的生長(zhǎng)，導(dǎo)致甲狀腺素的過度分泌及相關(guān)的高代謝癥狀，對(duì)病情變化有預(yù)測(cè)意義[56]。HT的主要標(biāo)志是出現(xiàn)能破壞甲狀腺濾泡的T淋巴細(xì)胞及相關(guān)抗體TPOAb和TGAb，T淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)甲狀腺實(shí)質(zhì)，導(dǎo)致甲狀腺濾泡細(xì)胞凋亡，從而破壞甲狀腺。

3.1甲狀腺自身抗體

3.1.1TRAb TRAb可分為TSAb、甲狀腺阻斷抗體(thyroid blocking antibody，TBAb)和中性促甲狀腺素受體抗體三種類型。TSAb與天然構(gòu)型的TSHR結(jié)合，誘導(dǎo)環(huán)腺苷酸生成，并競(jìng)爭(zhēng)抑制TSH與受體位點(diǎn)的結(jié)合[57]。TSAb是引起GD的特異性抗體，有研究表明TSAb在GD患者中持續(xù)存在，并反映GD的嚴(yán)重程度[58]。TBAb也可以作為弱TSH激動(dòng)劑發(fā)揮作用，其主要生物學(xué)作用為阻斷TSH與受體結(jié)合，從而導(dǎo)致甲狀腺功能減退。研究表明，HT患者中也可以檢測(cè)到TBAb的存在[59]。中性促甲狀腺素受體抗體既不阻斷TSH與其受體結(jié)合，也不誘導(dǎo)環(huán)腺苷酸的產(chǎn)生。因此，TSAb和TBAb的比例失衡被認(rèn)為是甲狀腺功能亢進(jìn)與甲狀腺功能減退交替出現(xiàn)的機(jī)制[60]。McLachlan和Rapoport[61]指出，口服甲狀腺藥物的治療可能會(huì)影響TSAb和TBAb之間的平衡。另外，新生兒自身免疫性甲狀腺功能亢進(jìn)并不多見，主要由于孕母體內(nèi)TRAb通過胎盤所致[62]。

3.1.2TGAb和TPOAb AITD患者血清中TGAb和TPOAb水平升高[63]，這兩種抗體是多克隆性抗體，與甲狀腺內(nèi)淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)的程度密切相關(guān)，主要在HT患者中以較高的滴度存在。TGAb在HT中的致病作用包括：①TGAb具有抗體依賴性細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒作用。即TGAb與TG結(jié)合，激活自然殺傷細(xì)胞，自然殺傷細(xì)胞表面Fc段受體與抗體Fc段結(jié)合，可以直接殺傷靶細(xì)胞，從而導(dǎo)致甲狀腺功能破壞。②TGAb具有水解酶的作用。其水解與TG無關(guān)的蛋白時(shí)，會(huì)引起甲狀腺組織損傷。③TGAb可以通過影響抗原的攝取和呈遞，增強(qiáng)T淋巴細(xì)胞抗原決定簇效應(yīng)，從而導(dǎo)致HT的發(fā)病或病情加重。TPOAb是氧化應(yīng)激的誘導(dǎo)因子[64]，它在甲狀腺細(xì)胞表面表達(dá)，使細(xì)胞易受TPOAb介導(dǎo)的補(bǔ)體依賴性細(xì)胞毒性和抗體依賴性細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒作用。近年來研究表明，IgG轉(zhuǎn)運(yùn)受體新生兒Fc受體可能參與HT的發(fā)病[65]。

3.2T淋巴細(xì)胞 T淋巴細(xì)胞胚胎期來源于卵黃囊和肝臟，出生后主要來源于骨髓中的造血干細(xì)胞，在胸腺中成熟后，離開胸腺到外周淋巴組織發(fā)揮作用。根據(jù)功能特征CD4+T淋巴細(xì)胞分為Th細(xì)胞和Treg細(xì)胞，CD8+T淋巴細(xì)胞可分為細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞和抑制性T淋巴細(xì)胞(supressor T cell，Ts細(xì)胞)。CD4+T淋巴細(xì)胞可進(jìn)一步分化為Th1、Th2、Th9、Th17、Th22、Treg細(xì)胞和濾泡輔助性T淋巴細(xì)胞(T follicular helper cell，Tfh細(xì)胞)在AITD中發(fā)揮重要作用。

3.2.1Th1與Th2細(xì)胞 Th1與Th2細(xì)胞相互制約，維持著自身免疫平衡。Th1細(xì)胞主要通過分泌白細(xì)胞介素(interleukin，IL)-1β、γ干擾素、IL-2和腫瘤壞死因子-α等細(xì)胞因子參與細(xì)胞免疫、炎癥反應(yīng)和組織損傷，在HT發(fā)病過程起主要作用，其中IL-1β和腫瘤壞死因子-α可以作為診斷HT的標(biāo)志物，IL-1β可以用來區(qū)分HT和GD[66]。IL-12和 γ干擾素可分別通過激活信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)及轉(zhuǎn)錄激活因子(signal transduction and activator of transcription，STAT)4和STAT1信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路誘導(dǎo)T-bet表達(dá)，從而促進(jìn)Th1細(xì)胞分化。Th2細(xì)胞主要通過分泌IL-4、IL-5、IL-6、IL-10、IL-13、IL-33等細(xì)胞因子參與體液免疫應(yīng)答產(chǎn)生刺激性抗體，從而在GD發(fā)病過程中起主要作用。IL-4通過激活STAT6信號(hào)通路誘導(dǎo)GATA結(jié)合蛋白3表達(dá)，從而促進(jìn)Th2細(xì)胞分化。Th1和Th2細(xì)胞之間能相互調(diào)節(jié)，這種調(diào)節(jié)可以發(fā)生在細(xì)胞因子和轉(zhuǎn)錄兩個(gè)層次。在細(xì)胞因子水平，Th1細(xì)胞分泌的γ干擾素可以抑制IL-4的分泌，從而阻止CD4+T細(xì)胞向Th2細(xì)胞的分化，而Th2細(xì)胞分泌的IL-4對(duì)Th1細(xì)胞的分化同樣具有抑制作用。在轉(zhuǎn)錄水平，T-bet可以通過阻止GATA結(jié)合蛋白3與Th2細(xì)胞因子基因座結(jié)合而抑制細(xì)胞因子表達(dá)，從而抑制Th2細(xì)胞分化。另一方面，GATA結(jié)合蛋白3可以下調(diào)STAT4，抑制Th1細(xì)胞的分化。當(dāng)Th1/Th2比例失衡時(shí)，機(jī)體發(fā)生免疫紊亂，促進(jìn)AITD的發(fā)生[67]。

3.2.2Th17與Treg細(xì)胞 Th17與Treg細(xì)胞之間也存在一定的平衡關(guān)系。IL-1β、IL-6和IL-23可以促進(jìn)Th17細(xì)胞的分化，后者主要分泌IL-17、IL-21、IL-22等細(xì)胞因子。其中IL-17為促炎因子，不僅能夠招募中性粒細(xì)胞和單核細(xì)胞，也可以協(xié)同其他促炎因子(如IL-1β、腫瘤壞死因子-α、γ干擾素)來誘導(dǎo)炎癥反應(yīng)。Treg細(xì)胞約占CD4+T淋巴細(xì)胞的10%，具有免疫抑制功能，可以阻止自身免疫性疾病的發(fā)生，以表達(dá)叉狀框轉(zhuǎn)錄因子P3的CD4+CD25+Treg細(xì)胞為主。Treg細(xì)胞主要通過分泌細(xì)胞因子IL-10、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子(transforming growth factor，TGF)-β發(fā)揮免疫抑制作用。IL-10和TGF-β可以直接減少細(xì)胞因子的生成和CD4+T淋巴細(xì)胞的增殖，也可以通過影響抗原呈遞細(xì)胞分子的功能、共刺激分子的表達(dá)，間接抑制CD4+T淋巴細(xì)胞因子的產(chǎn)生和增殖能力[68]。可見，Th17細(xì)胞通過分泌炎癥因子促進(jìn)AITD的發(fā)生，Treg細(xì)胞發(fā)揮免疫抑制作用抑制AITD的發(fā)生，兩者之間的失衡參與AITD的發(fā)病過程[69]。

3.2.3Tfh細(xì)胞 Tfh細(xì)胞亦屬于Th細(xì)胞的一種，細(xì)胞表面表達(dá)CXC趨化因子受體5、CD40和可誘導(dǎo)共刺激分子，由轉(zhuǎn)錄因子Bcl-6調(diào)控其分化，可分泌細(xì)胞因子IL-21。淋巴濾泡處分泌的CXC趨化因子13是CXC趨化因子受體5的配體，可刺激Tfh細(xì)胞向B細(xì)胞濾泡遷移。另外，Tfh細(xì)胞表面表達(dá)的CD40和可誘導(dǎo)共刺激分子可以與B細(xì)胞表面的CD40配體和可誘導(dǎo)共刺激分子配體相結(jié)合，從而刺激B細(xì)胞增殖、活化及生發(fā)中心的形成。IL-21在B淋巴細(xì)胞分化為漿細(xì)胞、產(chǎn)生抗體和Ig類別轉(zhuǎn)換中發(fā)揮重要作用，輔助B淋巴細(xì)胞免疫應(yīng)答產(chǎn)生抗體，從而參與AITD的發(fā)病過程[70]。Zhang等[71]研究發(fā)現(xiàn)，Tfh細(xì)胞相關(guān)細(xì)胞因子IL-21、IL-2受體、CXC趨化因子受體5、CXC趨化因子配體13在GD患者的甲狀腺組織中表達(dá)升高，提示Tfh細(xì)胞參與GD發(fā)病過程。

3.2.4Th9、Th22細(xì)胞 Th9、Th22細(xì)胞是近年來新發(fā)現(xiàn)的Th細(xì)胞亞群。Th9細(xì)胞分泌IL-9，后者與IL-9受體結(jié)合，經(jīng)Janus激酶/STAT通路調(diào)節(jié)細(xì)胞核內(nèi)基因轉(zhuǎn)錄來誘導(dǎo)T淋巴細(xì)胞增殖，引起炎癥反應(yīng)。有研究表明，HT患者外周血中IL-9水平升高[72]。但Th9細(xì)胞在GD中的作用目前尚不明確，需進(jìn)一步研究證實(shí)。Th22細(xì)胞主要分泌細(xì)胞因子IL-22，芳烴受體激動(dòng)劑可以促進(jìn)IL-22表達(dá)。在AITD中，IL-22主要作為一種促炎因子發(fā)揮炎癥破壞作用[73]。

3.2.5CD8+T細(xì)胞 根據(jù)細(xì)胞因子的不同，CD8+T淋巴細(xì)胞可分化為Tc1、Tc2、Tc9、Tc17及CD8+Treg細(xì)胞。CD8+T淋巴細(xì)胞可以通過細(xì)胞毒性直接殺傷細(xì)胞，也可以通過Fas細(xì)胞表面死亡受體-Fas細(xì)胞表面死亡受體配體途徑或釋放穿孔素和絲裂原來促進(jìn)細(xì)胞凋亡。目前認(rèn)為，Ts細(xì)胞數(shù)量和活性的缺陷導(dǎo)致其免疫監(jiān)視和調(diào)節(jié)功能紊亂，且無法有效地維持免疫監(jiān)視，是引起GD免疫調(diào)節(jié)紊亂并損害機(jī)體正常免疫活性的主要原因[74]。Tc對(duì)甲狀腺細(xì)胞的殺傷作用和Ts細(xì)胞免疫抑制功能減弱是HT患者甲狀腺功能減退的主要發(fā)病機(jī)制。Tc1細(xì)胞能夠通過釋放細(xì)胞毒性分子(如顆粒酶和穿孔素)進(jìn)入免疫突觸，進(jìn)而分泌細(xì)胞因子(如γ干擾素和腫瘤壞死因子-α)來殺死攜帶靶抗原的細(xì)胞[75]。與Th17細(xì)胞相似，Tc17由IL-6聯(lián)合TGF-β誘導(dǎo)分泌IL-17[76]，在HT中主要發(fā)揮炎癥作用[77]。與CD4+Treg細(xì)胞類似，CD8+Treg細(xì)胞具有免疫抑制作用，可以抑制外周自身反應(yīng)性T淋巴細(xì)胞，其Ts細(xì)胞的免疫抑制功能減弱參與HT的發(fā)病過程[78]。

3.3B淋巴細(xì)胞 人出生后，B淋巴細(xì)胞發(fā)育和成熟的場(chǎng)所均為骨髓，而其活化和發(fā)揮作用主要發(fā)生在外周淋巴組織，如脾臟和淋巴結(jié)。B淋巴細(xì)胞可以直接通過體液免疫產(chǎn)生針對(duì)TSHR的抗體參與AITD；也可以作為抗原呈遞細(xì)胞呈遞抗原給T淋巴細(xì)胞，后者反過來刺激B淋巴細(xì)胞的活化或誘導(dǎo)細(xì)胞毒性CD8+T淋巴細(xì)胞形成在AITD中發(fā)揮作用。調(diào)節(jié)性B淋巴細(xì)胞(regulatory B cell，Breg細(xì)胞)包括CD24hiCD38hi、CD25hi和CD24hiCD27+等不同類型，主要通過分泌IL-10、TGF-β和IL-35等細(xì)胞因子來維持外周耐受和抑制特定的自身抗原的免疫反應(yīng)。其參與AITD發(fā)病的過程可能涉及的機(jī)制：①Breg細(xì)胞可以抑制Th1和Th17細(xì)胞的分化并維持自身耐受[79]。②脂多糖激活的B淋巴細(xì)胞通過TGF-β的產(chǎn)生，可以誘導(dǎo)CD8+T淋巴細(xì)胞的無反應(yīng)性和CD4+T淋巴細(xì)胞的凋亡[80]。③誘導(dǎo)Treg細(xì)胞生成，與Treg細(xì)胞相互作用抑制免疫應(yīng)答過程[81]。④通過產(chǎn)生免疫調(diào)節(jié)因子(IL-35、IL-10)來調(diào)節(jié)免疫過程。如在沙門菌小鼠模型中，缺少IL-35表達(dá)的B淋巴細(xì)胞導(dǎo)致Th1細(xì)胞反應(yīng)增強(qiáng)，脾臟中巨噬細(xì)胞數(shù)量增加[82]。⑤Breg細(xì)胞可以維持恒定自然殺傷細(xì)胞的穩(wěn)態(tài)性，有助于維持自身免疫耐受[83]。由此可見，B淋巴細(xì)胞參與AITD的發(fā)病過程，且具有雙重調(diào)節(jié)作用。

4 小 結(jié)

AITD是由遺傳易感性和環(huán)境誘因相互作用、破壞自身免疫耐受，進(jìn)而導(dǎo)致的疾病。自身抗體、T淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞均參與AITD的發(fā)病過程,它們?cè)贕D和HT中的作用既有交叉又存在區(qū)別。遺傳因素作為內(nèi)因不易人為控制，但深入研究有助于高危易感人群的篩查及預(yù)防；環(huán)境因素作為外因應(yīng)避免或減少接觸，可通過科普方式向大眾特別是高危人群進(jìn)行宣教，以期降低發(fā)病率。另外，深入探索免疫失衡在AITD發(fā)病機(jī)制中的作用，有助于將來開發(fā)新的免疫調(diào)節(jié)或免疫靶向藥物，以改善AITD患兒的預(yù)后。