楊梅黃酮藥理作用機(jī)制的研究進(jìn)展

李樂(lè)樂(lè)綜述，范紅艷審校

(吉林醫(yī)藥學(xué)院：a.2016級(jí)藥學(xué)本科班，b.基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院，吉林 吉林 132013)

楊梅是我國(guó)的特色資源產(chǎn)品且品種豐富，主要生長(zhǎng)在我國(guó)浙江、云南等地區(qū)。楊梅黃酮?jiǎng)e名楊梅苷,楊梅素，是一類六羥基黃酮化合物，具有很強(qiáng)的生物活性。本文探討其藥理作用機(jī)制，為進(jìn)一步研究提供理念基礎(chǔ)。

1 抗氧化

石治敏[1]研究發(fā)現(xiàn)，楊梅黃酮對(duì)DPPH自由基有很好的清除效果，且能夠有效抑制山茶油、亞麻籽油、紫蘇籽油和油酸等油樣的氧化。林建原等[2]研究表明,楊梅黃酮具有還原能力,且具有劑量依賴性。李培培研究發(fā)現(xiàn),楊梅黃酮可有效清除自由基,且楊梅黃酮對(duì)肝線粒體膜和肝組織氧化損傷以及紅細(xì)胞膜具有保護(hù)作用。劉合生[3]等研究表明,楊梅黃酮可增強(qiáng)小鼠機(jī)體的抗氧化性，抑制酒精性肝損傷所致的氧化應(yīng)激和脂質(zhì)過(guò)氧化。Guo等[4]也在相關(guān)肝氧化應(yīng)激實(shí)驗(yàn)中，發(fā)現(xiàn)楊梅黃酮可提高肝臟中超氧化物歧化酶的含量并增強(qiáng)谷胱甘肽過(guò)氧化物酶活性，從而使高膽堿飲食誘導(dǎo)型肝損傷情況得以改善。

2 抑制炎癥因子

炎癥是當(dāng)損傷因子作用于機(jī)體時(shí)，做出的防御性反應(yīng)，致炎因子可對(duì)機(jī)體各大組織造成不同程度的損傷。Azevedo等[5]用角叉菜膠誘導(dǎo)足部水腫實(shí)驗(yàn)作為炎癥模型,結(jié)果發(fā)現(xiàn)楊梅黃酮的抗炎作用表現(xiàn)為對(duì)一氧化氮的合成抑制。范紅艷等[6]采用灌胃楊梅黃酮對(duì)環(huán)磷酰胺所致生殖損傷的小鼠進(jìn)行干預(yù)治療，發(fā)現(xiàn)楊梅黃酮能夠有效改善模型小鼠睪丸組織中的一氧化氮含量顯著升高的現(xiàn)象，血清中睪酮的含量、精子密度及睪丸指數(shù)等均得到改善，進(jìn)而使小鼠生精功能水平得以維持。Choi等[7]發(fā)現(xiàn)25 μmol/L的楊梅黃酮能夠抑制TNF-α、IL-6以及前列腺素E2等炎癥細(xì)胞因子的表達(dá),且濃度為50 μmol/L的楊梅黃酮對(duì)誘導(dǎo)型一氧化氮合酶的抑制作用達(dá)到40%。

Kan等[8]在脂多糖誘導(dǎo)的乳腺炎模型的體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)楊梅黃酮能減輕中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)程度和炎癥損害，且楊梅黃酮預(yù)處理誘導(dǎo)能顯著減少TNF-α、IL-1β和髓過(guò)氧化物酶的生成，還能增加血乳屏障的完整性，上調(diào)緊密連接蛋白；在體外，楊梅黃酮的抗炎機(jī)制表現(xiàn)為抑制乳腺炎誘導(dǎo)的AKT/IKK/NF-κB信號(hào)通路的磷酸化，從而減輕乳腺上皮細(xì)胞炎癥反應(yīng)。Chen等[9]發(fā)現(xiàn)楊梅黃酮對(duì)皮膚表面細(xì)菌刺激引起的Toll樣受體2(TLR2)基因表達(dá)和p70S6激酶蛋白磷酸化也有抑制作用,其機(jī)制是通過(guò)調(diào)節(jié)雷帕霉素通路的TLR和哺乳動(dòng)物靶點(diǎn)，從而對(duì)痤瘡丙酸桿菌誘導(dǎo)的細(xì)胞因子產(chǎn)生抑制。

楊梅黃酮的抗炎作用在一定程度上對(duì)癌癥也有不錯(cuò)的治療效果。Tuponchai等[10]采用transwell侵襲實(shí)驗(yàn)、創(chuàng)傷愈合實(shí)驗(yàn)、Western blot檢測(cè)楊梅黃酮對(duì)膽管癌細(xì)胞中細(xì)胞因子誘導(dǎo)的STAT3活化的影響，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明楊梅黃酮能夠降低處理后磷酸化STAT3蛋白的活性表達(dá)，明顯抑制STAT3的下游基因，包括誘導(dǎo)型一氧化氮合酶、細(xì)胞間黏附分子-1、環(huán)氧合酶2的細(xì)胞因子介導(dǎo)的炎癥相關(guān)基因上調(diào)。

3 誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡、抑制腫瘤生長(zhǎng)

腫瘤是由各種環(huán)境或遺傳致癌因素以序慣或協(xié)同方式引起損害的基因病。邢樹(shù)剛等[11]通過(guò)體外培養(yǎng)小鼠腦膠質(zhì)瘤GL261細(xì)胞，應(yīng)用CCK-8實(shí)驗(yàn)及流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)楊梅黃酮能抑制GL261細(xì)胞的活性；細(xì)胞周期分析證明楊梅黃酮能抑制膠質(zhì)瘤細(xì)胞的分裂增殖；Hoechst33342染色形態(tài)學(xué)觀察發(fā)現(xiàn)楊梅黃酮增加了細(xì)胞凋亡小體，即楊梅黃酮通過(guò)抑制增殖、促進(jìn)凋亡兩個(gè)機(jī)制同時(shí)發(fā)揮作用，從而抑制了膠質(zhì)瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)。蘇健裕等研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)楊梅黃酮能顯著抑制癌細(xì)胞的增殖分化并誘導(dǎo)其凋亡，作用機(jī)制與調(diào)節(jié)凋亡基因Bcl-2有關(guān)。

不僅如此，Zang等[12]發(fā)現(xiàn)楊梅黃酮能夠影響MAD1和RSK2通路，從而促進(jìn)裸鼠食管鱗癌細(xì)胞EC9706、KYSE30凋亡,使癌細(xì)胞擴(kuò)散轉(zhuǎn)移進(jìn)一步受到抑制。Ha等[13]在研究楊梅黃酮對(duì)人乳頭狀甲狀腺癌的抗癌機(jī)制時(shí)，利用SUN-790 HPTC細(xì)胞檢測(cè)表明楊梅黃酮對(duì)該細(xì)胞具有毒性作用，并以劑量依賴的方式誘導(dǎo)DNA凝聚；此外，楊梅黃酮還上調(diào)了Bax、Bcl-2的表達(dá)，以及引發(fā)凋亡誘導(dǎo)因子的釋放，改變線粒體膜電位，誘導(dǎo)細(xì)胞死亡。張蓓等對(duì)小鼠腋皮下注射腫瘤細(xì)胞懸液進(jìn)行接種處理后，在第8天各組給予灌胃水楊梅總黃酮，結(jié)果發(fā)現(xiàn)水楊梅總黃酮可顯著增加S180肉瘤的抑瘤率。

4 拮抗血小板活化因子

血小板是機(jī)體遭遇損傷時(shí)參與止血的重要單位，也是血栓形成的主要結(jié)構(gòu)單位。研究顯示[14],血小板可為癌細(xì)胞生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移提供促凝血表面,癌細(xì)胞可因此躲過(guò)免疫系統(tǒng)攻擊；除此之外，癌細(xì)胞還會(huì)誘導(dǎo)血小板聚集，加速癌細(xì)胞的侵襲、轉(zhuǎn)移。然而研究表明楊梅黃酮具有拮抗血小板活化因子的生理功能，這對(duì)防治腫瘤的生長(zhǎng)和侵襲非常重要。

方晴霞等[15]利用血小板活化因子(PAF)、花生四烯酸聚合劑誘導(dǎo)體外血小板聚集，并建立了大鼠動(dòng)靜脈旁路血栓模型和小鼠尾部出血模型。檢測(cè)發(fā)現(xiàn)水楊梅根黃酮治療后，大鼠動(dòng)靜脈旁路血栓形成條件受到明顯抑制、小鼠尾部凝血時(shí)間延長(zhǎng)；Western blot檢測(cè)顯示水楊梅根黃酮對(duì)血小板標(biāo)記蛋白CD41的上調(diào)及PI3K/Akt信號(hào)通路的活化具有積極作用。更有體外實(shí)驗(yàn)證明楊梅黃酮在細(xì)胞及分子水平上可抑制PAF引發(fā)的血小板內(nèi)Ca2+升高、血小板聚集，且與楊梅黃酮濃度呈正性關(guān)系。

5 增敏胰島素、調(diào)節(jié)糖代謝

細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶5 (cyclin-dependent kinase 5，CDK5)對(duì)糖尿病環(huán)境下胰腺β細(xì)胞具有重要作用。Ku等[16]通過(guò)把胰腺β細(xì)胞暴露于毒胡蘿卜素中來(lái)激活CDK5，CDK5被激活后，對(duì)抗凋亡蛋白髓樣細(xì)胞白血病序列1 (Mcl-1)具有誘導(dǎo)降解作用，并使p66Shc在絲氨酸36位點(diǎn)發(fā)生磷酸化，進(jìn)而導(dǎo)致線粒體功能障礙和細(xì)胞凋亡。使用楊梅黃酮處理后，不僅能抑制CDK5的活化、增強(qiáng)Mcl-1的穩(wěn)定性、減少線粒體ROS和caspase-3的激活來(lái)減輕線粒體功能障礙，還能增強(qiáng)PDX-1和胰島素mRNA的表達(dá)，增加胰島素分泌。戴承恩等[17]研究發(fā)現(xiàn)楊梅黃酮能夠減慢糖原的降解、增加葡萄糖的利用率和促進(jìn)胰島素的分泌；楊梅黃酮還能減輕組織對(duì)胰島素的抵抗，作用機(jī)制為上調(diào)胰島素受體基因和GLUT4基因的表達(dá)水平，提高胰島素敏感性從而減弱組織抵抗性。逯鳳肖等[18]發(fā)現(xiàn)二氫楊梅素能有效改善四氧嘧啶模型小鼠癥狀，主要結(jié)果有模型小鼠“三多一少”癥狀明顯改善，病理切片發(fā)現(xiàn)胰島的損傷程度有效減輕等。作者認(rèn)為可能的降糖機(jī)制是：首先二氫楊梅素能夠促進(jìn)肝糖原合成，減少葡萄糖的氧化分解；另一方面二氫楊梅素還能改善脂代謝紊亂，提高機(jī)體抗氧化能力，從而減輕肝臟和胰島β細(xì)胞的損傷。

6 降低神經(jīng)毒性、保護(hù)神經(jīng)

興奮性神經(jīng)遞質(zhì)谷氨酸可在大腦中積累，被認(rèn)為可能是許多神經(jīng)退行性疾病的病因。谷氨酸介導(dǎo)的興奮性毒性起因于細(xì)胞內(nèi)Ca2+超載，Shimmyo等[19]研究發(fā)現(xiàn)楊梅黃酮能夠參與影響多種生化途徑保護(hù)神經(jīng)元，從而抑制谷氨酸介導(dǎo)的興奮性毒性，且抑制作用較為顯著。首先，楊梅黃酮磷酸化能夠干預(yù)N-甲基-D-天冬氨酸受體調(diào)節(jié)，減輕谷氨酸誘導(dǎo)的細(xì)胞內(nèi)Ca2+超載情況；其次，楊梅黃酮還能抑制活性氧產(chǎn)生；最后，楊梅黃酮可通過(guò)3個(gè)氫鍵與caspase-3活性位點(diǎn)直接相互作用從而抑制谷氨酸誘導(dǎo)的caspase-3的活化。

Chen等研究發(fā)現(xiàn)過(guò)氧亞硝酸鹽可使大鼠原代星形膠質(zhì)細(xì)胞DNA損傷，進(jìn)而介導(dǎo)多種神經(jīng)退行性疾病。給予楊梅黃酮治療后發(fā)現(xiàn)，楊梅黃酮能夠明顯抑制過(guò)氧亞硝酸鹽誘導(dǎo)的 DNA 斷裂，減少羥基自由基形成，進(jìn)而降低神經(jīng)病變。除此之外，楊梅黃酮對(duì)阿爾茨海默病[20]、亨廷頓病及帕金森病等也具有良好的治療效果，還可治療多發(fā)性硬化癥，以及作為鎮(zhèn)痛劑使用。

楊梅黃酮通過(guò)抗氧化、抑制炎癥因子、誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡與抑制腫瘤生長(zhǎng)、拮抗血小板活化因子與抗血小板聚集、增敏胰島素與調(diào)節(jié)糖代謝、降低神經(jīng)毒性等方面作用機(jī)制而發(fā)揮抗肝損傷、抗炎、抗腫瘤、拮抗血小板活化因子、降血糖以及保護(hù)神經(jīng)等藥理作用。此外，還發(fā)現(xiàn)楊梅黃酮在降脂、抗病毒以及抑菌等方面也發(fā)揮積極的藥理作用[21]。目前楊梅產(chǎn)品的國(guó)際研究牌處于起步階段，我國(guó)應(yīng)盡快利用資源優(yōu)勢(shì)開(kāi)展綜合研究，利用已經(jīng)成熟的提取技術(shù)對(duì)楊梅黃酮進(jìn)行化學(xué)修飾或人工合成，進(jìn)而更多得應(yīng)用在醫(yī)藥、保健品與化妝品等產(chǎn)業(yè)中。