血清miR-210和miR-375在子宮頸癌早期診斷與術(shù)后監(jiān)測的應(yīng)用研究

周清 張瑜 　莊執(zhí)文 王清

【摘要】 目的：分析血清微小RNA-210（miR-210）和miR-375在子宮頸癌早期診斷與術(shù)后監(jiān)測的應(yīng)用效果。方法：選擇2019年1月-2020年7月本院收治的30例子宮頸癌患者為子宮頸癌組;20例宮頸上皮內(nèi)瘤變患者為宮頸上皮瘤變組;20例健康者為健康對照組。所有入選者均檢測腫瘤標(biāo)志物水平，記錄三組血清miR-210、miR-375、SCC水平以及在子宮頸癌患者手術(shù)前后中的表達(dá)變化情況，分析其在子宮頸癌早期診斷和術(shù)后監(jiān)測的臨床意義。結(jié)果：子宮頸癌組的miR-210、SCC均高于宮頸上皮內(nèi)瘤變組和健康對照組，miR-375低于宮頸上皮內(nèi)瘤變組和健康對照組，且宮頸上皮內(nèi)瘤變組的miR-210、SCC均高于健康對照組，miR-375低于健康對照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。術(shù)后3個(gè)月，子宮頸癌患者miR-210、SCC均低于術(shù)前，miR-375高于術(shù)前，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。ROC曲線結(jié)果顯示，血清miR-210、miR-375、SCC單獨(dú)與聯(lián)合用于診斷子宮頸癌的曲線下面積分別為：0.710、0.816、0.811、0.843，具有一定的診斷性能。結(jié)論：子宮頸癌早期診斷與術(shù)后監(jiān)測中miR-210、miR-375、SCC具有重要意義，聯(lián)合診斷應(yīng)用價(jià)值較高，能夠反映患者病情。

【關(guān)鍵詞】 子宮頸癌 miR-210 miR-375 腫瘤標(biāo)志物

Application of Serum miR-210 and miR-375 in Early Diagnosis and Postoperative Monitoring of Cervical Cancer/ZHOU Qing， ZHANG Yu， ZHUANG Zhiwen， WANG Qing. //Medical Innovation of China， 2021， 18（34）： -145

[Abstract] Objective： To analyze the effect of serum microRNA-210 （miR-210） and miR-375 in the early diagnosis and postoperative monitoring of cervical cancer. Method： A total of 30 patients with cervical cancer admitted to our hospital from January 2019 to July 2020 were selected as cervical cancer group; 20 patients with cervical intraepithelial neoplasia were included in the cervical intraepithelial neoplasia group; 20 healthy subjects were selected as the healthy control group. The levels of tumor markers were detected in all the selected patients， and the levels of miR-210， miR-375 and SCC in serum of the three groups were recorded， as well as the expression changes in cervical cancer patients before and after surgery， and their clinical significance in the early diagnosis and postoperative monitoring of cervical cancer was analyzed. Result： The miR-210 and SCC of the cervical cancer group were higher than those of the cervical intraepithelial neoplasia group and healthy control group， and the miR-375 was lower than that of the cervical intraepithelial neoplasia group and healthy control group， and the miR-210 and SCC of the cervical intraepithelial neoplasia group were higher than those of the healthy control group， miR-375 was lower than the healthy control group， the differences were statistically significant （P<0.05）. 3 months after surgery， miR-210 and SCC of cervical cancer patients were lower than those before surgery， and miR-375 was higher than that before surgery， the differences were statistically significant （P<0.05）. The ROC curve results showed that the areas under the curve of serum miR-210， miR-375 and SCC for the diagnosis of cervical cancer alone and in combination were 0.710， 0.816， 0.811 and 0.843， respectively， showing certain diagnostic performance. Conclusion： miR-210，

miR-375， and SCC are of great significance in the early diagnosis and postoperative monitoring of cervical cancer， the sensitivity， specificity， and specificity of combined diagnosis are all high， which can reflect the patient’s condition.

[Key words] Cervical cancer miR-210 miR-375 Tumor markers

First-author’s address： Central Laboratory of Jiujiang Maternal and Child Health Hospital， Jiujiang 332000， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2021.34.034

子宮頸癌為臨床常見惡性腫瘤，發(fā)病率較高，隨著女性生活工作壓力增加，該疾病逐漸呈現(xiàn)年輕化，對女性健康造成較大威脅，盡早確診、及時(shí)治療是改善子宮頸癌患者預(yù)后的關(guān)鍵[1]。臨床通過檢測腫瘤標(biāo)志物以預(yù)測癌癥，正常人體中，腫瘤標(biāo)志物含量極低，且水平相對穩(wěn)定，當(dāng)患者出現(xiàn)腫瘤病變后，腫瘤標(biāo)志物水平也會出現(xiàn)異常改變，尋找用于子宮頸癌早期診斷、術(shù)后監(jiān)測的標(biāo)志物尤為重要[2]。微小RNA（miRNA）是一類長度約為22 nt的非編碼小分子單鏈RNA，在機(jī)體多種生理、病理中均有參與，能夠調(diào)控靶基因與信號通路，在腫瘤發(fā)生、發(fā)展中起到重要作用[3]。miRNA在各種體液中均有存在，尤其在血清中廣泛存在且較為穩(wěn)定，為腫瘤早期診斷與監(jiān)測提供新的方向。miR-210、miR-375在子宮頸癌患者血清中均出現(xiàn)異常表達(dá)，可作為新型腫瘤標(biāo)志物，但在子宮頸癌早期診斷、術(shù)后監(jiān)測中的應(yīng)用價(jià)值尚存在一定爭議[4-5]。鑒于此，本研究進(jìn)一步分析血清miR-210和miR-375在子宮頸癌早期診斷與術(shù)后監(jiān)測的應(yīng)用效果，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2019年1月-2020年7月本院收治的30例子宮頸癌患者為子宮頸癌組，選擇同期來本院治療的20例宮頸上皮內(nèi)瘤變患者為宮頸上皮內(nèi)瘤變組，另外選擇同期來本院進(jìn)行體檢的20例健康者作為健康對照組。（1）納入標(biāo)準(zhǔn)：①除健康對照組外，均經(jīng)組織病理學(xué)或細(xì)胞學(xué)確診;②預(yù)計(jì)生存期≥3個(gè)月;③健康者與宮頸上皮內(nèi)瘤變患者年齡25～60歲。（2）排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并重要臟器功能衰竭;②處于妊娠期、哺乳期;③合并其他惡性腫瘤;④合并其他可能影響血清腫瘤標(biāo)志物的疾病;⑤合并認(rèn)知障礙或精神疾病。（3）剔除或脫落標(biāo)準(zhǔn)：①自身原因無法進(jìn)行研究;②參加其他研究，影響本研究結(jié)果;③死亡、無法隨訪。本研究經(jīng)醫(yī)學(xué)倫理委員會同意，入組人員均簽署知情同意書。

1.2 方法 所有入選者均檢測腫瘤標(biāo)志物水平，子宮頸癌患者進(jìn)行子宮頸癌根治術(shù)，且分別于術(shù)前、術(shù)后3個(gè)月檢測，取入選者5 mL靜脈血，3 000 r/min離心，時(shí)間以5 min為宜，取上清液，-80 ℃保存待測。血清miR-210、miR-375檢測：使用實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測，總miRNA提取使用miRNA提取試劑盒，翻錄合成cDNA，計(jì)算目的基因的相對表達(dá)量采用2-ΔΔCt法。引物設(shè)計(jì)，miR-210逆轉(zhuǎn)錄引物：GTCGTATCCAGTGCAGGGTCCGAGGTATTCGCACTGGATACGACGACGAAACCCA，上游引物：ATGGTTCGTGGGAGCTACATTGTCTGCT;miR-375逆轉(zhuǎn)錄引物：GTCGTATCCAGTGCAGGGTCCGAGGTATTCGCACTGGATCCTGGAACGGCGATGA，上游引物：ATGGTTCGTGGGTTTGTTCGTTCGGCTCG。鱗狀細(xì)胞癌抗原（SCC）檢測：取血清使用BIOBASE 2000全自動酶聯(lián)免疫分析儀測定，檢測方法為酶聯(lián)免疫吸附法。

1.3 觀察指標(biāo) 記錄血清miR-210、miR-375、SCC在子宮頸癌患者手術(shù)前后中的表達(dá)變化情況。分析其在子宮頸癌早期診斷和術(shù)后監(jiān)測的臨床意義，并計(jì)算敏感度、特異度。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)分析軟件，計(jì)量資料用（x±s）表示，比較采用t檢驗(yàn);計(jì)數(shù)資料以率（%）表示，比較采用字2檢驗(yàn);繪制ROC曲線并計(jì)算曲線下面積（AUC）值，AUC值>0.9表示診斷性能較高，0.71～0.90表示有一定的診斷性，0.5～0.7表示診斷性能較差。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 三組一般資料比較

子宮頸癌組年齡34～72歲，平均（45.37±6.45）歲;體重42～76 kg，平均（59.38±3.61）kg;國際婦產(chǎn)科協(xié)會（FIGO）分期：Ⅰ期8例，Ⅱ期9例，Ⅲ期8例，Ⅳ期5例;組織分化程度：低分化13例，高分化17例;類型：腺癌14例，鱗癌16例。宮頸上皮內(nèi)瘤變組年齡25～60歲，平均（42.96±5.76）歲;體重42～74 kg，平均（60.04±3.14）kg。健康對照組年齡25～60歲，平均（43.58±5.64）歲;體重42～73 kg，平均（59.64±3.37）kg。三組一般資料比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。

2.2 三組腫瘤標(biāo)志物水平比較 子宮頸癌組的miR-210、SCC均高于宮頸上皮內(nèi)瘤變組和健康對照組，miR-375低于宮頸上皮內(nèi)瘤變組和健康對照組，且宮頸上皮內(nèi)瘤變組的miR-210、SCC均高于健康對照組，miR-375低于健康對照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表1。

2.3 子宮頸癌患者術(shù)前、術(shù)后腫瘤標(biāo)志物變化比較

術(shù)后3個(gè)月，子宮頸癌患者miR-210、SCC均低于術(shù)前，miR-375高于術(shù)前，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表2。

2.4 腫瘤標(biāo)志物對子宮頸癌早期診斷價(jià)值分析

繪制ROC曲線結(jié)果顯示，血清miR-210、miR-375、SCC單獨(dú)與聯(lián)合用于診斷子宮頸癌的曲線下面積分別為：0.710、0.816、0.811、0.843，具有一定的診斷性能。見圖1、表3。

3 討論

子宮頸癌發(fā)病早期缺乏特異性表現(xiàn)，隨著病情發(fā)展，患者會出現(xiàn)陰道異常流血，對患者健康造成較大威脅。子宮頸癌是一個(gè)不斷進(jìn)展過程，從癌前病變逐漸發(fā)展至子宮頸癌，若能在早期確診并進(jìn)行正規(guī)治療，部分患者能夠獲得良好預(yù)后[6-7]。臨床診斷子宮頸癌多以陰道鏡、宮頸刮片、活檢為主，陰道鏡、宮頸刮片漏診、誤診率高，使得患者無法及時(shí)檢出;活檢存在取樣難、操作復(fù)雜等弊端，影響患者依從性，故臨床急需新型、準(zhǔn)確的診斷方法[8-9]。

近些年，子宮頸癌診斷中臨床多采用血清學(xué)檢測，通過檢測腫瘤標(biāo)志物水平進(jìn)行篩查，既往以SCC為主，該指標(biāo)屬于抗原物質(zhì)，在正常與惡變的蛋白分解調(diào)控中有參與，是重要的子宮頸癌篩查指標(biāo)[10-12]。宮頸、頭頸等鱗狀上皮細(xì)胞中均存在SCC，具有一定的靈敏性與準(zhǔn)確性，但單獨(dú)使用時(shí)仍存在較高的漏診情況，尋找新型用于子宮頸癌篩查、術(shù)后監(jiān)測的生物標(biāo)志物尤為重要[13-14]。本研究結(jié)果顯示，子宮頸癌組的miR-210、SCC均高于宮頸上皮內(nèi)瘤變組和健康對照組，miR-375低于宮頸上皮內(nèi)瘤變組和健康對照組，且宮頸上皮內(nèi)瘤變組的miR-210、SCC均高于健康對照組，miR-375低于健康對照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。術(shù)后3個(gè)月miR-210、SCC均低于術(shù)前，miR-375高于術(shù)前，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。繪制ROC曲線結(jié)果顯示，血清miR-210、miR-375、SCC單獨(dú)與聯(lián)合用于診斷子宮頸癌的曲線下面積分別為：0.710、0.816、0.811、0.843，具有一定的診斷性能。表明miR-210、miR-375、SCC在子宮頸癌早期診斷與術(shù)后監(jiān)測中均有較高的應(yīng)用價(jià)值，能夠準(zhǔn)確反映病情變化，為臨床診斷、評估預(yù)后提供參考信息。分析其原因?yàn)?，miRNA在腫瘤的發(fā)生發(fā)展中均有參與，起到基因調(diào)控作用，能夠促進(jìn)腫瘤進(jìn)展與轉(zhuǎn)移，監(jiān)測其水平變化對臨床診斷、監(jiān)測病情均有重要意義[15-16]。miRNA在子宮頸癌中有獨(dú)特的表達(dá)譜，miR-210作為常見的miRNA分子，是一種促癌基因，在子宮頸癌中呈高表達(dá)，其表達(dá)與腫瘤分期、轉(zhuǎn)移均關(guān)系密切，可作為重要的新型腫瘤標(biāo)志物[17]。miR-375在多種腫瘤中均表達(dá)異常，對腫瘤進(jìn)展有促進(jìn)作用，其水平能夠反映病情程度，在子宮頸癌早期篩查、術(shù)后監(jiān)測中均有較高加之。單獨(dú)檢測時(shí)miR-210、miR-375診斷價(jià)值高于SCC，但三者聯(lián)合診斷價(jià)值更高，為確保診斷準(zhǔn)確性，臨床可進(jìn)行綜合診斷[18-20]。

綜上所述，miR-210、miR-375作為新型血清標(biāo)志物，在子宮頸癌早期診斷、術(shù)后監(jiān)測中均有一定價(jià)值，應(yīng)用價(jià)值高于SCC，但聯(lián)合診斷準(zhǔn)確性更高，值得應(yīng)用。

參考文獻(xiàn)

[1]敖梅紅，鄧旭情，熊艷，等.7051例宮頸癌患者發(fā)病趨勢分析[J].現(xiàn)代婦產(chǎn)科進(jìn)展，2018，27（1）：48-50.

[2]童揚(yáng)，姜靜，陳小華，等.miR-224在宮頸癌組織中的表達(dá)及對宮頸癌細(xì)胞增殖、侵襲和遷移的調(diào)控作用[J].山西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2019，50（3）：301-305.

[3]董紅玲.miR-543在宮頸癌中的表達(dá)及其對宮頸癌細(xì)胞侵襲與轉(zhuǎn)移的影響[J].現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué)，2018，26（2）：23-27.

[4]張強(qiáng)，張晶晶，曹麗艷，等.miRNA-375對宮頸癌細(xì)胞系SiHa增殖能力和遷移能力的影響及相關(guān)機(jī)制研究[J].臨床和實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2019，18（16）：1739-1743.

[5]鄧晶，王敏，謝環(huán).宮頸癌患者組織和血液miR-21和miR-34a表達(dá)及診斷意義[J].中華實(shí)用診斷與治療雜志，2019，33（6）：566-568.

[6]蔣莉莎，陸義紅，水麗君，等.微小RNA-375通過靶向PAX6對宮頸癌HeLa細(xì)胞順鉑敏感性的影響[J].臨床腫瘤學(xué)雜志，2018，23（6）：501-507.

[7]金玲玲，喻志英，朱進(jìn)璐.宮頸癌患者血清miR-329-3p和miR-34a-5p水平檢測及臨床意義[J].中國婦幼保健，2019，34（22）：225-228.

[8]李彩云，毛靜月，張崢程，等.宮頸癌患者血清miR-24和miR-155表達(dá)水平及臨床意義[J].中國婦幼保健，2019，34（8）：1864-1866.

[9]席源，劉永潔，李祥坤.外周血TSGF、SCC-Ag、CA125水平表達(dá)對宮頸癌預(yù)后評估的價(jià)值[J].臨床輸血與檢驗(yàn)，2019，21（5）：78-81.

[10]劉月芬.Ⅰ期宮頸癌患者化療前外周血中TSGF、SCC-Ag、CA125水平表達(dá)對其預(yù)后的評估價(jià)值[J].實(shí)用癌癥雜志，2019，34（2）：151-153.

[11]王元元，李娜.HPV-DNA聯(lián)合SCC-Ag、CEA、HE4檢測對宮頸癌患者的診斷價(jià)值研究[J].實(shí)用癌癥雜志，2019，34（11）：1752-1755.

[12]劉鵬，程桂麗，鄭艷杰，等.CEA、SCC-Ag在宮頸癌診斷及病情變化中的意義[J].解放軍預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志，2019，37（3）：122-123.

[13]章家青.宮頸癌患者血清中SCC-Ag含量與腫瘤惡性生物學(xué)行為的關(guān)系[J].實(shí)用預(yù)防醫(yī)學(xué)，2019，26（2）：238-241.

[14]汪萍萍，馮六連.SCCAg、TAP、CEA對宮頸癌新輔助化療療效的評估價(jià)值[J].國際腫瘤學(xué)雜志，2018，45（10）：604-609.

[15]吳新華，張慶，張珂，等.宮頸癌組織miR-127的表達(dá)變化及其意義[J].山東醫(yī)藥，2018，58（4）：66-68.

[16]曾慶，謝鶯，張慶華.miR-155-5p在宮頸癌中的表達(dá)及其對宮頸癌細(xì)胞侵襲與轉(zhuǎn)移的影響[J].中國婦產(chǎn)科臨床雜志，2019，20（1）：13-15.

[17]王夢潔，閔旭紅，王尚虎，等.miR-124在宮頸癌中的表達(dá)及對宮頸癌細(xì)胞增殖、遷移的影響[J].現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué)，2018，26（21）：26-31.

[18]胥琳琳，陳宗寧，崔蕾蕾，等.血清miR-501和miR-195檢測對宮頸癌臨床診斷及預(yù)后價(jià)值[J].中國計(jì)劃生育學(xué)雜志，2019，27（12）：124-126，130.

[19]張廣平，廖亞男.MicroRNA-210在宮頸鱗癌中的表達(dá)及意義[J].黑龍江中醫(yī)藥，2019，48（1）：189-191.

[20]劉育飛，莫曉瑜，詹銀珠.液基波層細(xì)胞學(xué)檢測聯(lián)合血清miR-375檢測對于診斷宮頸癌的價(jià)值[J].四川醫(yī)學(xué)，2019，40（4）：92-95.

（收稿日期：2021-02-05）

基金項(xiàng)目：江西省衛(wèi)生健康委科技計(jì)劃（20204246）

①江西省九江市婦幼保健院 江西 九江 332000

通信作者：周清