血清HIF-1α、25（OH）D3、IGF-1及SAA水平在不同臨床特征乳腺癌患者中的表達(dá)及臨床意義

雷建梅 匡文斌 鄧秋嬋 張肄鵬

【摘要】 目的：探討不同臨床特征乳腺癌（BC）患者血清缺氧誘導(dǎo)因子-1α（HIF-1α）、25-羥維生素D3[25（OH）D3]、胰島素樣生長(zhǎng)因子-1（IGF-1）及血清淀粉樣蛋白A（SAA）水平表達(dá)情況及其臨床意義。方法：收集2017年3月-2020年7月深圳市龍華區(qū)中心醫(yī)院收治的92例乳腺癌患者作為BC組，113例乳腺良性腫瘤（BBT）患者作為BBT組，120名健康育齡婦女作為對(duì)照組。分別檢測(cè)血清中HIF-1α、25（OH）D3、IGF-1及SAA水平。結(jié)果：BC組HIF-1α、IGF-1及SAA水平明顯高于BBT組和對(duì)照組，而25（OH）D3水平明顯低于BBT組和對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;BBT組IGF-1和SAA水平均高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），而HIF-1α、25（OH）D3與對(duì)照組比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。Ⅲ、Ⅳ期、腫塊>5.0 cm、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及組織中、低度分化的BC患者血清HIF-1α、IGF-1及SAA水平分別明顯高于Ⅰ、Ⅱ期、腫塊<2.0 cm、無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及組織高度分化的BC患者，而25（OH）D3水平明顯低于Ⅰ、Ⅱ期、腫塊<2.0 cm、無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及組織高度分化的BC患者，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。經(jīng)Pearson相關(guān)性分析，BC患者血清HIF-1α與IGF-1、HIF-1α與SAA、IGF-1與SAA均呈正相關(guān)（r=0.587、0.752、0.604，P<0.05），而25（OH）D3與HIF-1α、IGF-1、SAA均呈負(fù)相關(guān)（r=-0.494、-0.715、-0.570，P<0.05）。結(jié)論：BC患者HIF-1α、IGF-1及SAA水平明顯升高，而25（OH）D3水平明顯降低，且與不同臨床特征有關(guān)。因此，加強(qiáng)上述指標(biāo)監(jiān)測(cè)對(duì)BC患者早期鑒別診斷及疾病嚴(yán)重程度的判斷具有一定的指導(dǎo)意義。

【關(guān)鍵詞】 缺氧誘導(dǎo)因子-1α 25-羥維生素D3 胰島素樣生長(zhǎng)因子-1 血清淀粉樣蛋白A 乳腺癌

Expression and Clinical Significance of Levels of HIF-1α， 25 （OH） D3， IGF-1 and SAA in Breast Cancer Patients with Different Clinical Characteristics/LEI Jianmei， KUANG Wenbin， DENG Qiuchan， ZHANG Yipeng. //Medical Innovation of China， 2021， 18（34）： 0-052

[Abstract] Objective： To investigate the levels of hypoxia inducible factor-1α （HIF-1α）， 25-hydroxyvitamin D3 [25 （OH） D3]， insulin-like growth factor-1 （IGF-1） and serum amyloid A （SAA） in breast cancer （BC） patients with different clinical features and their clinical significance. Method： From March 2017 to July 2020， 92 breast cancer patients in Shenzhen Longhua District Central Hospital were enrolled as BC group， 113 benign breast tumor （BBT） patients were enrolled as BBT group， and 120 healthy women of childbearing age were enrolled as control group. The levels of HIF-1α， 25 （OH） D3， IGF-1 and SAA were detected. Result： The levels of HIF-1α， IGF-1 and SAA in BC group were significantly higher than those in BBT group and control group， while the level of 25 （OH） D3 was significantly lower than those in BBT group and control group， the differences were statistically significant （P<0.05）. The levels of IGF-1 and SAA in BBT group were higher than those in control group， and the differences were statistically significant （P<0.05）， while there were no significant differences in HIF-1α and 25（OH）D3 （P>0.05）. The levels of HIF-1α， IGF-1 and SAA in BC patients with stage Ⅲ and Ⅳ， mass >5.0 cm，?lymph node metastasis and medium and low differentiation were significantly higher than those in BC patients with stage Ⅰ and Ⅱ， mass <2.0 cm， no lymph node metastasis and high differentiation， while the level of 25 （OH） D3?was significantly lower than those in BC patients with stage Ⅰ and Ⅱ， mass <2.0 cm， no lymph node metastasis and high differentiation， the differences were statistically significant（P<0.05）. Pearson correlation analysis showed that HIF-1α and IGF-1， HIF-1α and SAA， IGF-1 and SAA were positively correlated （r=0.587， 0.752， 0.604， P<0.05）， while there was a negative correlation between 25（OH）D3 and HIF-1α， IGF-1， SAA （r=-0.494， -0.715， -0.570， P<0.05） in BC patients. Conclusion： The levels of HIF-1α， IGF-1 and SAA are significantly increased in BC patients， while the level of 25 （OH） D3 is significantly decreased， which are related to different clinical characteristics. Therefore， strengthening the monitoring of the above indicators has certain guiding significance for the early and differential diagnosis of BC patients and the judgment of the severity of the disease.

[Key words] Hypoxia-inducible factor-1α 25-hydroxyvitamin D3 Insulin-like growth factor-1 Serum amyloid A Breast cancer

First-author’s address： Shenzhen Longhua District Central Hospital， Shenzhen 518110， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2021.34.011

乳腺癌（breast cancer，BC）是威脅全球女性身心健康的主要惡性腫瘤之一，位居女性惡性腫瘤發(fā)病率和死亡率的首位，且其發(fā)病率呈逐年上升趨勢(shì)，同時(shí)不斷年輕化，女性身心健康和生活質(zhì)量受到嚴(yán)重威脅[1-2]，但其病因和發(fā)病機(jī)制至今仍尚未完全闡明。有研究表明，年齡、種族、遺傳、飲食、環(huán)境及激素水平等多種因素在BC的發(fā)病中發(fā)揮了重要的作用[3-4]，而導(dǎo)致BC死亡的主要因素是癌細(xì)胞的浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移，而癌細(xì)胞的浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移與腫瘤細(xì)胞的增殖、分化、遷移、黏附及慢性炎癥等多種因素的調(diào)控有關(guān)[5-8]。為此，本研究對(duì)與上述調(diào)控有關(guān)的缺氧誘導(dǎo)因子-1α（hypoxia inducible factor-1α，HIF-1α）、25-羥維生素D3[25（OH）D3]、胰島素樣生長(zhǎng)因子-1（insulin-like growth factor-1，IGF-1）及血清淀粉樣蛋白A（serum amyloid A，SAA）等多種指標(biāo)在不同臨床特征BC患者中的表達(dá)及臨床意義進(jìn)行了探討，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2017年3月-2020年7月深圳市龍華區(qū)中心醫(yī)院婦產(chǎn)科確診的乳腺癌患者92例為BC組。BC診斷參照《中國(guó)抗癌協(xié)會(huì)乳腺癌診治指南與規(guī)范（2017年版）》診斷標(biāo)準(zhǔn)[9]，并依據(jù)TNM分期標(biāo)準(zhǔn)、腫塊大小、是否有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及組織分化程度的不同對(duì)BC患者進(jìn)行分類，其中Ⅰ、Ⅱ期60例，Ⅲ、Ⅳ期32例;腫塊>5.0 cm 21例，2.0～5.0 cm 46例，<2.0 cm 25例;有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移35例，無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移57例;組織中、低分化63例，高度分化29例。納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）資料完整的女性患者;（2）術(shù)后組織學(xué)活檢確診者;（3）初次確診者;（4）未經(jīng)放、化療及相關(guān)性治療者;（5）未服用VitD補(bǔ)充劑及鈣調(diào)節(jié)劑者。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）伴有心、腦、肝及腎等嚴(yán)重疾病者;（2）出血性疾病者;（3）伴有其他腫瘤者;（4）伴有高血壓、糖尿病及白血病等疾病者;（5）精神病者;（6）不配合者。同期病理確診為乳腺良性腫瘤（benign breast tumor，BBT）患者113例為BBT組。納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）乳腺良性腫瘤確診女性;（2）初診者;（3）未經(jīng)任何治療者;（4）未服用任何藥物者。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）伴有心腦、肝及腎等實(shí)質(zhì)器官嚴(yán)重疾病者;（2）出血性疾病者;（3）伴有其他腫瘤者;（4）伴有高血壓、糖尿病及血液病等疾病者;（5）精神病者;（6）不配合者。選擇健康育齡婦女120名為對(duì)照組。納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）體格檢查未見(jiàn)任何異常者;（2）未服用任何藥物者。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）伴有心腦、肝及腎等實(shí)質(zhì)器官嚴(yán)重疾病者;（2）出血性疾病者;（3）腫瘤者;（4）伴有高血壓、糖尿病及血液病等疾病者;（5）精神病者;（6）不配合者。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，且患者及家屬均知情同意。

1.2 方法

1.2.1 標(biāo)本采集 采集三組清晨空腹靜脈血2份于無(wú)抗凝劑的干燥管內(nèi)，每管3.0～5.0 mL，室溫靜置30 min后離心分離血清，及時(shí)檢測(cè)，不能及時(shí)分析者于-20 ℃保存。冰凍標(biāo)本取出后需室溫放置30 min，待完全復(fù)溶后才再行檢測(cè)。

1.2.2 HIF-1α、25（OH）D3、IGF-1及SAA水平檢測(cè) 采用酶聯(lián)免疫吸附法（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）對(duì)HIF-1α和IGF-1水平進(jìn)行分析，采用化學(xué)發(fā)光免疫法和免疫比濁法對(duì)25（OH）D3和SAA進(jìn)行分析。所有操作按儀器和試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 22.0軟件對(duì)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料用（x±s）表示，比較采用t檢驗(yàn)，多組間比較采用F檢驗(yàn);相關(guān)性采用Pearson分析。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 三組一般資料比較 BC組年齡28～59歲，平均（37.98±10.26）歲。BBT組年齡27～63歲，平均（38.91±12.53）歲。對(duì)照組年齡25～66歲，平均（36.89±13.05）歲。三組一般資料比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。

2.2 三組HIF-1α、25（OH）D3、IGF-1及SAA水平比較 BC組血清HIF-1α、IGF-1及SAA水平均高于BBT組和對(duì)照組，而25（OH）D3水平明顯低于BBT組和對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;BBT組IGF-1和SAA水平均高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），而HIF-1α、25（OH）D3與對(duì)照組比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。見(jiàn)表1。

2.3 不同臨床特征BC患者血清HIF-1α、25（OH）D3、IGF-1及SAA水平比較 Ⅲ、Ⅳ期、腫塊>5.0 cm、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及組織中、低度分化的BC患者血清HIF-1α、IGF-1及SAA水平明顯高于Ⅰ、Ⅱ期、腫塊<2.0 cm、無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及組織高度分化的BC患者，而25（OH）D3水平明顯低于Ⅰ、Ⅱ期、腫塊<2.0 cm、無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及組織高度分化的BC患者，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見(jiàn)表2。

2.4 相關(guān)性分析 經(jīng)Pearson相關(guān)性分析，BC患者血清HIF-1α與IGF-1、HIF-1α與SAA、IGF-1與SAA均呈正相關(guān)（r=0.587、0.752、0.604，P<0.05），而25（OH）D3與HIF-1α、IGF-1及SAA均呈負(fù)相關(guān)（r=-0.494、-0.715、-0.570，P<0.05）。

3 討論

BC是女性高度異質(zhì)的一種全身性惡性腫瘤，發(fā)病率高，居女性惡性腫瘤的首位，嚴(yán)重威脅婦女健康及生命，是導(dǎo)致女性死亡的主要原因之一[10-11]。早發(fā)現(xiàn)、早診斷與及時(shí)有效的治療措施是提高BC患者療效和術(shù)后生活質(zhì)量的關(guān)鍵，但BC早期臨床癥狀不明顯，且無(wú)特異性的診斷標(biāo)記物，易被漏診。因此，探索BC、BBT及健康育齡婦女中某些生化和/或免疫標(biāo)記物水平表達(dá)差異，對(duì)BC患者早發(fā)現(xiàn)、早確診及疾病嚴(yán)重程度的判斷具有重要的指導(dǎo)意義。

HIF-1α是一種關(guān)鍵的核轉(zhuǎn)錄因子，人體細(xì)胞內(nèi)廣泛存在，具有相當(dāng)廣泛的靶基因譜，是體內(nèi)維持細(xì)胞內(nèi)氧平衡的重要調(diào)控因子，具有促進(jìn)細(xì)胞黏附、抑制鈣黏蛋白表達(dá)及增強(qiáng)細(xì)胞活性和侵襲性等多種生物學(xué)效應(yīng)。同時(shí)HIF-1α調(diào)控一系列下游基因，如血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（vascular endothelial growth factor，VEGF），在腫瘤細(xì)胞代謝、新血管生成及腫瘤轉(zhuǎn)移中發(fā)揮了重要的調(diào)控作用，研究顯示，多種癌癥患者血清HIF-1α水平明顯升高[5，12]。本研究結(jié)果顯示，BC患者血清HIF-1α水平較BBT組和對(duì)照組明顯升高，且與疾病嚴(yán)重程度有關(guān)（P<0.05），但BBT組和對(duì)照組之間差異不明顯（P>0.05），表明HIF-1α水平可能與BC發(fā)生和發(fā)展有密切關(guān)系，這可能與BC患者乳腺組織細(xì)胞內(nèi)存在缺氧，引起HIF-1α水平應(yīng)激性分泌增加，導(dǎo)致其一系列下游基因激活，從而引發(fā)BC發(fā)生和進(jìn)程等有關(guān)。

25（OH）D3是維生素D（vitamin D，VitD）的活性代謝產(chǎn)物，是一種脂溶性的類固醇衍生物，主要調(diào)節(jié)鈣、磷水平穩(wěn)定和骨代謝。此外，25（OH）D3在細(xì)胞凋亡、細(xì)胞分化、腫瘤細(xì)胞增殖、侵襲、轉(zhuǎn)移及抗血管生成等方面發(fā)揮著重要的作用[13-14]。有研究發(fā)現(xiàn)，25（OH）D3與VitD受體（VitD receptor，VDR）結(jié)合后具有抗癌作用，其水平在多種癌癥患者中明顯降低[15-16]。本研究結(jié)果顯示，BC患者25（OH）D3水平明顯降低，且疾病嚴(yán)重程度越重，25（OH）VitD3水平越低（P<0.05），表明BC的發(fā)生和進(jìn)程可能與25（OH）D3水平降低有關(guān)，這可能與25（OH）D3水平降低對(duì)癌細(xì)胞增殖的抑制、誘導(dǎo)癌細(xì)胞分化和凋亡的作用減弱有關(guān)[16-17]。

IGF-1可激活體內(nèi)多種信號(hào)通路，對(duì)提高腫瘤細(xì)胞的活性和DNA的持續(xù)復(fù)制均有較強(qiáng)的作用。同時(shí)IGF-1和IGF-1R結(jié)合后可激活絲裂原活化蛋白激酶通路，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖及低分化，是惡性腫瘤相關(guān)診斷指標(biāo)中較為常用的指標(biāo)之一[6，18]。近年來(lái)，IGF-1水平常用于BC患者診療，但不同機(jī)構(gòu)研究結(jié)果之間存在很大差異。SAA是一種正向急性時(shí)相反應(yīng)蛋白，具有纖連蛋白和膠原蛋白等相似的結(jié)構(gòu)和功能，能促進(jìn)細(xì)胞黏附、轉(zhuǎn)移和增殖，促進(jìn)腫瘤的發(fā)展。此外，SAA還可誘導(dǎo)基質(zhì)金屬蛋白酶表達(dá)，促進(jìn)腫瘤生長(zhǎng)和侵襲組織，是許多腫瘤發(fā)生的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。有研究表明，多種腫瘤SAA水平明顯升高，且不受抗炎藥物、免疫抑制劑及腎上腺皮質(zhì)激素等藥物的影響，常作為一種非特異的腫瘤標(biāo)志物用于腫瘤的診斷、療效及預(yù)后判斷[19-20]。本研究結(jié)果顯示，BC患者IGF-1和SAA水平明顯升高，且隨病情的加重而升高（P<0.05），表明IGF-1和SAA水平可能與BC發(fā)病有一定關(guān)系，對(duì)BC早期診斷及病情判斷具有重要的意義。

綜上所述，BC患者血清HIF-1α、IGF-1及SAA水平明顯升高，而25（OH）D3水平明顯降低，且與BC臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況及分化程度有關(guān)。因此，加強(qiáng)上述指標(biāo)監(jiān)測(cè)，對(duì)BC患者的早發(fā)現(xiàn)、早診斷及疾病嚴(yán)重程度的判斷具有參考價(jià)值，值得臨床推廣應(yīng)用。

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（收稿日期：2021-10-11）

基金項(xiàng)目：深圳市科技計(jì)劃項(xiàng)目（JCYJ20160428135756806）

①?gòu)V東省深圳市龍華區(qū)中心醫(yī)院 廣東 深圳 518110

通信作者：雷建梅