Sysmex XN-2000血細(xì)胞分析儀的性能驗(yàn)證

山東大學(xué)生殖醫(yī)學(xué)研究中心，國(guó)家輔助生殖與優(yōu)生工程技術(shù)研究中心，生殖內(nèi)分泌教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 （山東 濟(jì)南 250001）

內(nèi)容提要：目的：對(duì)本實(shí)驗(yàn)室Sysmex XN-2000全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀進(jìn)行性能評(píng)價(jià)，保證儀器檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確可靠。方法：按照中華人民共和國(guó)衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)WS/T 406-2012《臨床血液學(xué)檢驗(yàn)常規(guī)項(xiàng)目的分析質(zhì)量要求》及相關(guān)文件的要求，對(duì)該儀器的本底計(jì)數(shù)、攜帶污染率、批內(nèi)精密度、日間精密度、線性范圍、正確度、不同吸樣模式可比性、實(shí)驗(yàn)室內(nèi)結(jié)果的可比性、準(zhǔn)確度、儀器間五分類比對(duì)和人機(jī)五分類比對(duì)進(jìn)行驗(yàn)證，判斷是否符合衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)的要求。結(jié)果：該儀器的本底計(jì)數(shù)良好，攜帶污染率、批內(nèi)精密度、日間精密度、正確度、準(zhǔn)確度等均在要求范圍內(nèi)，不同吸樣模式比對(duì)和實(shí)驗(yàn)室內(nèi)結(jié)果比對(duì)的偏差均符合要求，儀器間白細(xì)胞五分類比對(duì)和人機(jī)五分類的結(jié)果也均合格。結(jié)論：本實(shí)驗(yàn)室Sysmex XN-2000血細(xì)胞分析儀各項(xiàng)指標(biāo)性能良好，符合質(zhì)量目標(biāo)要求。

臨床實(shí)驗(yàn)室的全面質(zhì)量管理越來(lái)越受到各方面的關(guān)注與重視，對(duì)于醫(yī)療儀器設(shè)備的性能要求也越來(lái)越嚴(yán)格，醫(yī)療儀器設(shè)備的質(zhì)量和性能直接關(guān)系著患者檢驗(yàn)報(bào)告的可靠和準(zhǔn)確性，檢驗(yàn)報(bào)告的可靠和準(zhǔn)確性也將直接影響到醫(yī)生正確的臨床診斷及治療方案，所以定期進(jìn)行校準(zhǔn)和驗(yàn)證檢驗(yàn)儀器設(shè)備的性能指標(biāo)是非常必須和必要的[1]。本實(shí)驗(yàn)研究主要參照中華人民共和國(guó)衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)WS/T 406-2012《臨床血液學(xué)檢驗(yàn)常規(guī)項(xiàng)目的分析質(zhì)量要求》[2]，參考NCCLS EP6-P2[3]、EP9-A2[4]、EP15-A2[5]文件要求，通過(guò)Sysmex XN-2000全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀對(duì)白細(xì)胞（WBC）、紅細(xì)胞（RBC）、血紅蛋白（HGB）、血小板（PLT）、紅細(xì)胞壓積（HCT）、平均紅細(xì)胞體積（MCV）、平均紅細(xì)胞血紅蛋白含量（MCH）、平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度（MCHC）、中性粒細(xì)胞百分比（NEUT%）、淋巴細(xì)胞百分比（LYMPH%）、單核細(xì)胞百分比（MONO%）、嗜酸性粒細(xì)胞百分比（EO%）、嗜堿性粒細(xì)胞百分比（BASO%）等檢測(cè)項(xiàng)目的檢測(cè)數(shù)據(jù)，對(duì)Sysmex XN-2000全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀的性能參數(shù)進(jìn)行驗(yàn)證，從而保證檢測(cè)報(bào)告準(zhǔn)確可靠。

1.材料與方法

1.1 一般資料

標(biāo)本來(lái)源：血液標(biāo)本均為本院門診患者及住院患者的新鮮樣本。

儀器與試劑：儀器為Sysmex XN-2000全自動(dòng)血液分析儀，標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品和試劑均為希森美康公司配套產(chǎn)品，且均在有效期內(nèi)。

1.2 方法

1.2.1 本底計(jì)數(shù)

把稀釋液當(dāng)成樣本測(cè)定，連續(xù)測(cè)3次，3次結(jié)果的最大值應(yīng)符合要求。要求：WBC≤0.5×109/L，RBC≤0.05×1012/L，HGB≤2g/L，PLT≤10×109/L。

1.2.2 攜帶污染率

高濃度樣本連測(cè)3次，測(cè)定值為H1、H2、H3；低濃度樣本連測(cè)3次，測(cè)定值為L(zhǎng)1、L2、L3。根據(jù)公式|（L1-L3）|/（H3-L3）×100%計(jì)算攜帶污染率。高濃度樣本應(yīng)滿足要求（WBC＞90×109/L，RBC＞6.2×1012/L，HGB＞220g/L，PLT＞900×109/L），低濃度樣本應(yīng)滿足要求（WBC＜3×109/L，RBC＜1.5×1012/L，HGB＜50g/L，PLT＜30×109/L）。攜帶污染率要求：WBC≤3%，RBC≤2%，HGB≤2%，PLT≤4%。

1.2.3 批內(nèi)精密度

使用1份滿足要求的樣本，重復(fù)測(cè)定11次，計(jì)算后10次結(jié)果的變異系數(shù)。樣本要求和變異系數(shù)要求如表1所示。

表1. 批內(nèi)精密度檢驗(yàn)結(jié)果

1.2.4 日間精密度

使用2個(gè)濃度水平的質(zhì)控品，在檢測(cè)當(dāng)日至少進(jìn)行1次室內(nèi)質(zhì)控，剔除離群值，計(jì)算1個(gè)月內(nèi)各項(xiàng)目的變異系數(shù)。變異系數(shù)要求：WBC≤6%，RBC≤2.5%，HGB≤2%，HCT≤4%，PLT≤8%，MCV≤2.5%，MCH≤2.5%，MCHC≤3%。

1.2.5 線性范圍

使用1份接近本實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)上限的高值樣本，按照100%、80%、60%、40%、20%、10%、0比例稀釋，每份稀釋樣本測(cè)3次，計(jì)算其均值。將儀器實(shí)際測(cè)定值與理論稀釋值進(jìn)行比較，得出y=ax+b，進(jìn)行線性范圍驗(yàn)證。要求斜率a在1±0.05范圍內(nèi)，相關(guān)系數(shù)r≥0.975。

1.2.6 正確度

使用10份結(jié)果在參考區(qū)間內(nèi)的樣本，每份樣本測(cè)2次，計(jì)算20次結(jié)果的均值，以本實(shí)驗(yàn)室內(nèi)參加衛(wèi)生部臨檢中心和山東省臨檢中心室間質(zhì)評(píng)成績(jī)優(yōu)良、定期校準(zhǔn)合格的血細(xì)胞分析儀（序列號(hào)為13903）的測(cè)定均值為標(biāo)準(zhǔn)，計(jì)算偏倚。偏倚要求：WBC≤5%、RBC≤2%、HGB≤2.5%、HCT≤2.5%、PLT≤6%、MCV≤3%、MCH≤3%、MCHC≤3%。

1.2.7 不同吸樣模式的結(jié)果可比性

使用5份樣本分別采用自動(dòng)模式和手動(dòng)模式進(jìn)行測(cè)定，每份樣本各測(cè)2次，根據(jù)公式（自動(dòng)模式均值-手動(dòng)模式均值）/自動(dòng)模式均值×100%，計(jì)算兩種不同模式的相對(duì)差異。相對(duì)差異要求：WBC≤5%、RBC≤2%、HGB≤2%、HCT≤3%、MCV≤3%、PLT≤7%。

1.2.8 實(shí)驗(yàn)室內(nèi)結(jié)果的可比性

使用20份樣本，每份樣本分別在本實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)儀器和比對(duì)儀器上進(jìn)行檢測(cè)，計(jì)算相對(duì)偏差，每個(gè)項(xiàng)目相對(duì)偏差滿足要求的比例應(yīng)≥80%。（選取樣本濃度的要求和相對(duì)偏差要求如表2所示）。

表2. 比對(duì)樣本的濃度要求及可比性驗(yàn)證的允許偏差

1.2.9 準(zhǔn)確度

使用5份衛(wèi)生部室間質(zhì)評(píng)物進(jìn)行檢測(cè)，計(jì)算每份樣本結(jié)果與參考值的相對(duì)偏差，每個(gè)項(xiàng)目的相對(duì)偏差滿足要求的比例應(yīng)≥80%。相對(duì)偏差要求：WBC≤15.00%、RBC≤6.00%、HGB≤6.00%、HCT≤9.00%、PLT≤20.00%、MCV≤7.00%、MCH≤7.00%、MCHC≤8.00%。

1.2.10 儀器間五分類比對(duì)

參照本儀器說(shuō)明書，使用10份樣本，樣本濃度覆蓋整個(gè)生物參考區(qū)間，每份樣本分別在標(biāo)準(zhǔn)儀器上和比對(duì)儀器各檢測(cè)2次，計(jì)算兩次結(jié)果均值的偏差。判斷標(biāo)準(zhǔn)：NEUT%偏差≤3.0%、LYMPH%偏差≤3.0%、MONO%偏差≤2.0%、EO%偏差≤1.0%、BASO%偏差≤1.0%，10份樣本中8份滿足要求為比對(duì)合格。

1.2.11 人機(jī)五分類實(shí)驗(yàn)

使用20份樣本分別采用人工鏡檢和儀器法進(jìn)行白細(xì)胞五分類。人工鏡檢由2位具備資格的檢驗(yàn)工作人員，通過(guò)雙盲法對(duì)每一份樣本的血涂片計(jì)數(shù)200個(gè)細(xì)胞，計(jì)算99%的可信區(qū)間[6,7]。儀器法對(duì)20份樣本分別測(cè)定2次，判斷儀器法結(jié)果的均值是否在99%可信范圍內(nèi)。

2.結(jié)果

2.1 本底計(jì)數(shù)檢驗(yàn)結(jié)果

檢驗(yàn)結(jié)果的最大值均在要求范圍內(nèi)，驗(yàn)證合格。

2.2 攜帶污染率檢驗(yàn)結(jié)果

計(jì)算得出的各項(xiàng)目攜帶污染率均在要求范圍內(nèi)，驗(yàn)證合格。

2.3 批內(nèi)精密度檢驗(yàn)結(jié)果

批內(nèi)精密度檢驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表1。

2.4 日間精密度檢驗(yàn)結(jié)果

本實(shí)驗(yàn)室一個(gè)月的質(zhì)控在控?cái)?shù)據(jù)的變異系數(shù)結(jié)果均在要求范圍內(nèi)，驗(yàn)證合格。

2.5 線性范圍檢驗(yàn)結(jié)果

以下各項(xiàng)目WBC高值、WBC低值、RBC、HGB、HCT、PLT高值、PLT低值的線性回歸方程的斜率均在1±0.05范圍內(nèi)，相關(guān)系數(shù)r≥0.975，均在要求范圍內(nèi)，驗(yàn)證合格。

2.6 正確度驗(yàn)證檢驗(yàn)結(jié)果

各項(xiàng)目的偏倚均在要求范圍內(nèi)，驗(yàn)證合格。

2.7 不同吸樣模式可比性的檢驗(yàn)結(jié)果

自動(dòng)模式和手動(dòng)模式下檢測(cè)結(jié)果均值間的相對(duì)差異均在要求范圍內(nèi)，驗(yàn)證合格。

2.8 實(shí)驗(yàn)室內(nèi)結(jié)果可比性的檢驗(yàn)結(jié)果

各項(xiàng)目相對(duì)偏差滿足要求的比例≥80%，驗(yàn)證合格。見(jiàn)表2。

2.9 準(zhǔn)確度的檢驗(yàn)結(jié)果

本次實(shí)驗(yàn)5份衛(wèi)生部室間質(zhì)評(píng)樣本，每個(gè)項(xiàng)目的相對(duì)偏差滿足要求的比例為100%，驗(yàn)證合格。

2.10 儀器間五分類比對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果

本次實(shí)驗(yàn)10份樣本偏差均在要求范圍內(nèi)，驗(yàn)證合格。

2.11 人機(jī)五分類實(shí)驗(yàn)結(jié)果

本次實(shí)驗(yàn)20份樣本儀器法結(jié)果的均值均在參考方法的99%可信范圍內(nèi)，驗(yàn)證合格。

3.討論

實(shí)驗(yàn)室醫(yī)療儀器設(shè)備的性能驗(yàn)證直接關(guān)系到檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，也是保證儀器自身性能穩(wěn)定的重要因素，同時(shí)在臨床實(shí)驗(yàn)室的全面質(zhì)量管理中有著舉足輕重的作用。性能驗(yàn)證也是醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可和等級(jí)醫(yī)院評(píng)審?fù)ㄟ^(guò)必備的條件。CNAS-CL02醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量和能力認(rèn)可準(zhǔn)則（ISO15189:2012）[8]要求定期驗(yàn)證要求的測(cè)量準(zhǔn)確度和測(cè)量系統(tǒng)功能。CNAS-CL02-A001《醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量和能力認(rèn)可準(zhǔn)則在臨床血液學(xué)檢驗(yàn)領(lǐng)域的應(yīng)用說(shuō)明》[9]要求設(shè)備出現(xiàn)故障，應(yīng)先分析原因，如果影響方法學(xué)性能，修復(fù)后必須進(jìn)行相關(guān)的驗(yàn)證。例如穿刺針磨損嚴(yán)重進(jìn)行更換后，要進(jìn)行質(zhì)控驗(yàn)證和樣本比對(duì)，驗(yàn)證其加樣精度偏差是否滿足檢測(cè)要求，驗(yàn)證通過(guò)后才能正常進(jìn)行患者樣本的檢測(cè)。

本實(shí)驗(yàn)室在依照相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)的同時(shí)，參考已通過(guò)ISO 15189認(rèn)可實(shí)驗(yàn)室和三甲醫(yī)院評(píng)審的經(jīng)驗(yàn)，制定了該套針對(duì)本實(shí)驗(yàn)室血液分析儀性能驗(yàn)證的方案。本套方案在對(duì)基本常規(guī)指標(biāo)進(jìn)行驗(yàn)證的同時(shí)，增加了不同吸樣模式可比性、實(shí)驗(yàn)室內(nèi)結(jié)果的可比性、儀器間五分類比對(duì)和人機(jī)五分類比對(duì)的驗(yàn)證。目前大部分實(shí)驗(yàn)室為了提供快速高效的檢驗(yàn)報(bào)告都有多臺(tái)血細(xì)胞分析儀，參加衛(wèi)生部或省級(jí)室間質(zhì)評(píng)的也只有一臺(tái)儀器，而且同一臺(tái)機(jī)器還有不同的吸樣模式，儀器之間及不同吸樣模式之間的偏差是固然存在的，所以為了同實(shí)驗(yàn)室內(nèi)檢測(cè)結(jié)果的一致性，需要評(píng)估自己實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部檢測(cè)數(shù)據(jù)的差異性，故增加了這幾個(gè)項(xiàng)目的比對(duì)。本次性能驗(yàn)證的兩臺(tái)儀器數(shù)據(jù)偏差均在標(biāo)準(zhǔn)范圍內(nèi)，表明本實(shí)驗(yàn)室兩臺(tái)血細(xì)胞分析儀的差異小，有良好的可比性。

另外，白細(xì)胞分類作為血常規(guī)檢測(cè)的重要數(shù)據(jù)，其分類直接影響醫(yī)生對(duì)疾病的判斷，儀器自動(dòng)化的白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)又能減輕臨床實(shí)驗(yàn)室的勞動(dòng)強(qiáng)度和工作壓力，故血細(xì)胞分析儀的白細(xì)胞分類驗(yàn)證十分重要，本實(shí)驗(yàn)室增加了白細(xì)胞人機(jī)五分類比對(duì)[10]。白細(xì)胞分類以具備資格的專業(yè)技術(shù)人員閱片結(jié)果為金標(biāo)準(zhǔn)，驗(yàn)證儀器的白細(xì)胞五分類結(jié)果是否在99%可信范圍內(nèi)。本次研究?jī)x器的五分類結(jié)果均在99%可信范圍內(nèi)，說(shuō)明儀器的白細(xì)胞五分類結(jié)果可靠。但在日常工作中，還需要檢驗(yàn)工作人員結(jié)合報(bào)警信息以及散點(diǎn)圖進(jìn)行全面分析，必要的時(shí)候進(jìn)行人工鏡檢[11]。

綜上所述，此次性能驗(yàn)證結(jié)果顯示本實(shí)驗(yàn)室Sysmex XN-2000全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀本底計(jì)數(shù)低，符合要求。攜帶污染率在要求范圍內(nèi)，儀器沖洗效果良好。精密度結(jié)果在允許范圍內(nèi)，儀器重復(fù)性良好。線性良好，儀器準(zhǔn)確度好，結(jié)果可靠。兩臺(tái)儀器之間的數(shù)據(jù)差異小，白細(xì)胞五分類結(jié)果可靠。所以，本實(shí)驗(yàn)室Sysmex XN-2000血細(xì)胞分析儀驗(yàn)證的所有項(xiàng)目均符合要求，性能驗(yàn)證通過(guò)，可以滿足本院臨床樣本分析的需求。