鎮(zhèn)栗青和東升南瓜多糖含量及抗氧化活性初步研究

高英春，吳曉東，韋武青，張文文，高云寶

（1.鎮(zhèn)江市蔬菜研究所，江蘇 鎮(zhèn)江 212004；2.鎮(zhèn)江市農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量檢驗測試中心，江蘇 鎮(zhèn)江 212000；3.內(nèi)蒙古蒙蘭農(nóng)業(yè)科技有限公司，內(nèi)蒙古 010020）

南瓜是葫蘆科(Cucurbitaceae)南瓜屬(Cucurbita)的一種一年生蔓生草本植物。目前，南瓜在我國的種植范圍較廣。南瓜軟糯甘甜，既可當菜、又可作為雜糧，種子還能食用或制油[1]。南瓜中富含多糖、蛋白質(zhì)、氨基酸、微量元素等，具有降脂、降糖等功能[2]，具有較高的營養(yǎng)價值和開發(fā)應(yīng)用價值。南瓜中含有豐富的南瓜多糖，能提高機體的免疫功能，直接參與降血糖、降血脂等有關(guān)活動，對預(yù)防糖尿病有明顯功效[3]。我國南瓜資源豐富，種類繁多，品種不同，營養(yǎng)成分含量不同[4]。鎮(zhèn)栗青南瓜是鎮(zhèn)江市蔬菜研究所培育的新南瓜品種，與常見紅皮東升南瓜相比，口感軟糯沙甜。本文以兩種南瓜為研究對象，測定多糖的含量，并初步研究了南瓜多糖的體外抗氧化性，為開發(fā)利用南瓜資源提供試驗依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

鎮(zhèn)栗青南瓜：蔬菜所選育的品種，果實扁球形，質(zhì)量約2 kg，果皮墨綠色，肉黃色；肉質(zhì)致密，口感細膩，味如板栗。

東升南瓜：蔬菜所引進的西洋南瓜新品種，早生，易結(jié)果，果實厚扁球形，質(zhì)量約1.5 kg，果皮金紅色，肉厚，橙色，肉粉質(zhì)香甜，風(fēng)味優(yōu)美。

兩種南瓜均于2019 年3 月12 日采用穴盤電熱線輔助育苗，3 月28 日按株行距35 cm×100 cm 定植于蔬菜所試驗田內(nèi)，正常田間管理。6 月30 日南瓜成熟采收，凍干成粉末，儲存在-18 ℃度冰箱待用。

1.2 試驗方法

1.2.1 鎮(zhèn)栗青、東升南瓜多糖含量測定

葡萄糖標準曲線的繪制：將葡萄糖置于105 ℃烘箱中烘干至恒重，配成1 mg/mL 葡萄糖標準液，再稀釋成不同濃度的葡萄糖標準溶液( 40、80、120、160、240 μg/mL)。取0.5 mL 不同濃度葡萄糖標準液于試管中，加入1 mL 5%苯酚溶液，混勻后快速加入5 mL 濃硫酸，混勻，30 ℃水浴顯色30 min。將顯色完全的溶液于490 nm 處測定吸光度，最后增加一個去離子水代替葡萄糖標準溶液做空白對照。繪制標準曲線，以不同葡萄糖濃度為X 軸，吸光度為Y 軸。測得 的 標 準 曲 線 為：Y=0.006 5X+0.072 3，R2＝0.99（n=6）（見圖1 所示）。

圖1 葡萄糖標準曲線

苯酚—硫酸法[5]測南瓜多糖含量：用分析天平準確稱取兩種干燥南瓜粉各0.25 g，再向250 mL 圓底燒瓶中加入150 mL 無水乙醇，在80 ℃恒溫的條件下回流2 h，用布氏漏斗抽濾，殘渣用無水乙醇洗滌后將乙醇回收。接著把瀝干的南瓜粉轉(zhuǎn)移至圓底燒瓶中，加入100 mL 蒸餾水溶解后再用沸水浴中提取2 h，抽濾取濾液。多次抽濾并將濾液合并，合并后的濾液轉(zhuǎn)入250 mL 容量瓶中，蒸餾水定容后得待測粗多糖溶液。分別吸取1 mL 鎮(zhèn)栗青、東升南瓜粗多糖溶液，與標準曲線處理相同，顯色完全后于490 nm處測定其吸光度，依據(jù)標準曲線方程計算樣品多糖含量。

1.2.2 鎮(zhèn)栗青、東升南瓜多糖的抗氧化能力分析

南瓜多糖清除DPPH 能力的測定：精確稱取DPPH 標準品19.75mg，無水乙醇溶解并定容于500 mL容量瓶中，配制成0.1 mmoL 的DPPH—乙醇溶液。取1 mL 不同濃度的南瓜多糖溶液（0～5 mg/mL），接著加入2 mLDPPH—乙醇溶液，搖勻，室溫反應(yīng)30min（避光），于波長517 nm 處測定其吸光度(AS)，用去離子水作為空白對照測定吸光度(AC)，VC作為陽性對照，DPPH 清除率公式如下：

南瓜多糖清除ABTS 能力的測定：取7 mmoL的ABTS 溶液5 mL，2.45 mmoL過硫酸鉀溶液88μL 加入小燒杯中，混勻，室溫下放置16 h（避光），用無水乙醇稀釋至734 nm 處的吸光度為0.70±0.02。取不同濃度的南瓜多糖溶液（0～5mg/mL），6min 后在734nm下測定吸光度（AS）。去離子水為空白對照測定吸光度（AC），VA為陽性對照。ABTS 清除率公式如下：

1.3 統(tǒng)計分析

采用Excel 軟件對數(shù)據(jù)進行處理。

2 結(jié)果與分析

2.1 鎮(zhèn)栗青、東升南瓜中多糖的含量

表1 結(jié)果表明，鎮(zhèn)栗青南瓜多糖含量為（55.52±2.29）mg/g，東升南瓜水多糖含量為（37.60±1.56）mg/g，鎮(zhèn)栗青南瓜中多糖含量較高，具有較高的應(yīng)用價值。南瓜多糖含量高低影響其降血糖、降血脂效果。

表1 鎮(zhèn)栗青、東升南瓜中多糖含量

2.2 鎮(zhèn)栗青、東升南瓜多糖的抗氧化能力分析

2.2.1 鎮(zhèn)栗青、東升南瓜多糖對DPPH 自由基的清除能力

圖2 表明，鎮(zhèn)栗青多糖濃度達到1 mg/L 時，對DPPH 的消除率達到54.03%，東升南瓜多糖在濃度為4 mg/L 時，對DPPH 的清除率達到57.71%，可見鎮(zhèn)栗青、東升南瓜多糖都具有清除自由基能力，鎮(zhèn)栗青南瓜多糖對DPPH 自由基的清除能力明顯高于東升南瓜。

圖2 鎮(zhèn)栗青、東升南瓜多糖對DPPH 自由基的清除能力

2.2.2 鎮(zhèn)栗青、東升南瓜多糖對ABTS 自由基的清除能力

圖3 表明，鎮(zhèn)栗青、東升南瓜多糖對ABTS 自由基的清除能力相當，濃度達到5 mg/L 時，兩種多糖對ABTS 的清除能力達到85%，接近于陽性對照VC的清除率?？梢?，兩種南瓜多糖具有較好的自由基清除能力。

圖3 鎮(zhèn)栗青、東升南瓜多糖對ABTS 自由基的清除能力

3 結(jié) 語

本次試驗測定了鎮(zhèn)栗青、東升南瓜中多糖的含量，比較了兩種南瓜多糖的體外抗氧化活性。試驗結(jié)果如下：

①不同品種南瓜多糖含量差異較大。鎮(zhèn)栗青南瓜多糖含量為55.5 mg/g，顯著高于東升南瓜（37.6 mg/g）。

②兩種南瓜多糖溶液具有較強的自由基清除能力，鎮(zhèn)栗青南瓜多糖溶液DPPH 自由基的清除能力顯著優(yōu)于東升南瓜多糖。

③與東升南瓜相比，鎮(zhèn)栗青南瓜多糖含量高，具有較強抗氧化活性，具有較高的開發(fā)應(yīng)用價值。該研究可為南瓜新品種的開發(fā)和培育提供參考，為鎮(zhèn)栗青南瓜的深度研究提供基礎(chǔ)和數(shù)據(jù)支撐。