國(guó)家評(píng)價(jià)性抽驗(yàn)鹽酸奧洛他定口服制劑質(zhì)量分析

李寶霞，董雙濤，張春泓，馬 鄭*

（1.山西藥科職業(yè)學(xué)院，太原 030031；2.大連市藥品檢驗(yàn)所，遼寧大連 116021）

國(guó)家評(píng)價(jià)性抽驗(yàn)是藥品主管部門(mén)為掌握全國(guó)藥品的質(zhì)量水平而進(jìn)行的抽查檢驗(yàn)工作〔1〕，國(guó)產(chǎn)藥品依法定標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行檢驗(yàn)；然后以問(wèn)題為導(dǎo)向，開(kāi)展針對(duì)性的探索性研究。

鹽酸奧洛他定（C21H23NO3·HCl）為治療過(guò)敏性鼻炎、結(jié)膜炎的抗過(guò)敏藥，也可用于治療銀屑病的瘙癢〔2-4〕，其不良反應(yīng)輕微〔5〕。我國(guó)鹽酸奧洛他定口服制劑分為片劑和膠囊劑，且均是仿制藥。為全面系統(tǒng)地評(píng)價(jià)仿制藥的質(zhì)量?jī)?yōu)劣，我們對(duì)國(guó)產(chǎn)鹽酸奧洛他定口服制劑進(jìn)行了系統(tǒng)的研究，首先依照法定標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)，然后基于風(fēng)險(xiǎn)控制的理念開(kāi)展了詳實(shí)的探索性研究〔6〕，全面系統(tǒng)地對(duì)鹽酸奧洛他定口服制劑進(jìn)行質(zhì)量評(píng)價(jià)。

1 制劑的概況

鹽酸奧洛他定為新型選擇性組胺受體阻斷劑。本品口服后，消除半衰期為8～12 h。該藥60%～70%經(jīng)腎臟以原形形式消除，17%以糞便排出。不良反應(yīng)以頭痛、困倦較為常見(jiàn)。

本次抽驗(yàn)涉及鹽酸奧洛他定片、鹽酸奧洛他定膠囊、鹽酸奧洛他定滴眼液3 個(gè)劑型，收集到114 批次樣品（本文只介紹口服制劑），分別來(lái)自26 個(gè)省區(qū)、直轄市。片劑和膠囊劑的內(nèi)包裝均為鋁塑板，外包裝均為紙盒，規(guī)格均為5 mg。涉及生產(chǎn)企業(yè)為某國(guó)外制藥企業(yè)（片劑，原研制劑生產(chǎn)商）、某制藥有限公司（片劑）、某制藥有限公司（膠囊劑）。

2 法定檢驗(yàn)結(jié)果及質(zhì)量分析

2.1 法定檢驗(yàn)結(jié)果依法定標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行檢驗(yàn)。本部分內(nèi)容主要考察質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的合理性、科學(xué)性、可操作性，對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行對(duì)比，對(duì)法定檢驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)的問(wèn)題進(jìn)行剖析，并開(kāi)展針對(duì)性的探索性研究。

質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)涉及的檢查項(xiàng)目有性狀、鑒別（分別為化學(xué)鑒別、紫外鑒別、液相色譜鑒別）、含量均勻度、溶出度、有關(guān)物質(zhì)及含量。所有樣品的檢驗(yàn)結(jié)果均合格，提示樣品均能達(dá)到質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的各項(xiàng)要求。質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)各檢查項(xiàng)目齊全，檢查方法具備可操作性，符合我國(guó)藥典規(guī)定的技術(shù)要求〔7〕。存在的問(wèn)題：膠囊劑的溶出度檢查法采用小杯法（其他兩個(gè)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)均采用槳法），該法是我國(guó)特有的檢查法，隨著我國(guó)加入人用藥品注冊(cè)技術(shù)要求國(guó)際協(xié)調(diào)會(huì)（ICH）并與國(guó)際制藥行業(yè)發(fā)展不斷融合，建議修改為槳法，與原研制劑一致。其次，膠囊劑有關(guān)物質(zhì)檢查法未控制特定雜質(zhì)，且有關(guān)物質(zhì)的限度過(guò)寬，應(yīng)對(duì)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行提升。

2.2 質(zhì)量分析法定檢驗(yàn)結(jié)果雖然均合格，但從均勻度、含量、溶出度等多項(xiàng)統(tǒng)計(jì)結(jié)果來(lái)看，原研制劑數(shù)據(jù)的離散性明顯小于國(guó)產(chǎn)制劑。以溶出度結(jié)果為例，測(cè)定結(jié)果的統(tǒng)計(jì)結(jié)果見(jiàn)圖1。由圖1 可知，本品溶出完全，在15 min 時(shí)，片劑已完全溶出（近100%）說(shuō)明進(jìn)口制劑的工藝水平優(yōu)于國(guó)產(chǎn)制劑。從有關(guān)物質(zhì)的數(shù)據(jù)來(lái)看，國(guó)產(chǎn)片劑的雜質(zhì)水平優(yōu)于或與原研制劑相當(dāng)。膠囊劑的雜質(zhì)水平明顯偏大，提示存在一定安全性風(fēng)險(xiǎn)。

圖1 溶出度檢查頻數(shù)分布圖

3 探索性研究

本研究以風(fēng)險(xiǎn)控制的理念，結(jié)合法定檢驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)的問(wèn)題，從藥品的安全性、有效性以及標(biāo)準(zhǔn)的科學(xué)、合理性三個(gè)方面，對(duì)貫穿于藥物全生命周期中可能存在的高風(fēng)險(xiǎn)因素展開(kāi)與原研制劑的對(duì)比研究，以期最大程度保障人民群眾用藥安全。

3.1 安全性評(píng)價(jià)安全性評(píng)價(jià)基于與原研制劑的對(duì)比研究并考察了貫穿于藥品整個(gè)生命周期的高風(fēng)險(xiǎn)因素。在風(fēng)險(xiǎn)因素的設(shè)置上，重點(diǎn)考慮到我國(guó)國(guó)情及監(jiān)管方向，同時(shí)關(guān)注美國(guó)食品藥品監(jiān)督管理局（FDA）、歐洲藥品管理局（EMA）近年來(lái)重點(diǎn)警示的內(nèi)容。

3.1.1 基因毒性雜質(zhì)的研究 基因毒性雜質(zhì)本身能直接或間接損傷細(xì)胞DNA，產(chǎn)生基因突變或體內(nèi)誘變，具有致癌可能或者傾向。由于毒性強(qiáng)烈，應(yīng)進(jìn)行嚴(yán)格控制〔8〕。近期，業(yè)內(nèi)爆出“纈沙坦”事件，其原料中存在基因毒性雜質(zhì)N-亞硝基二甲胺。

本品從合成工藝的理論上分析，也可能存在該基因毒性雜質(zhì)。因此，開(kāi)展了可能存在的基因毒性雜質(zhì)的研究。據(jù)文獻(xiàn)〔9〕報(bào)道，N-亞硝基二甲胺可采用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用（GC-MS）法，以特征離子m∕z74，選擇m∕z15、42、43作為限定離子，進(jìn)行定量分析。

氣相色譜：色譜柱：SH-RXI-5sil（30 m × 0.25 mm×0.25 μm），甲基（5%苯基）聚硅氧烷為固定相；程序升溫，初始溫度為150 ℃，保持5 min，再以40 ℃∕min 升至220 ℃，保持15 min。進(jìn)樣口280 ℃，流速1.0 mL∕min，電離方式EI，溶劑延遲5 min，分流進(jìn)樣，進(jìn)樣量1 μL。

質(zhì)譜條件：電子轟擊離子源，電離能力70 eV，離子源溫度250 ℃，四級(jí)桿溫度150 ℃。

測(cè)定法：分別取國(guó)產(chǎn)片劑，加N，N-二甲基甲酰胺（DMF）制成濃度為1 mg∕mL的溶液。

結(jié)果：原料中未發(fā)現(xiàn)該基因毒性雜質(zhì)。

結(jié)論：本品國(guó)產(chǎn)片劑原料未發(fā)現(xiàn)N-亞硝基二甲胺。通過(guò)工藝、結(jié)構(gòu)分析，本品工藝及產(chǎn)品中不存在其他警示性結(jié)構(gòu)基團(tuán)。原料未發(fā)現(xiàn)安全性風(fēng)險(xiǎn)。

3.1.2 有關(guān)物質(zhì)研究 依據(jù)法定檢驗(yàn)，國(guó)產(chǎn)制劑有關(guān)物質(zhì)檢查方法存在諸多不足：雜質(zhì)控制不嚴(yán)、定量方法不先進(jìn)。在探索性研究中，以問(wèn)題為導(dǎo)向，開(kāi)展針對(duì)性的探索性研究，建立了新的有關(guān)物質(zhì)檢查方法，同時(shí)測(cè)定制劑（片劑、膠囊劑）中4種已知雜質(zhì)的含量。在擬定條件下，有關(guān)物質(zhì)色譜圖見(jiàn)圖2，在此條件下分離出更多的雜質(zhì)，并實(shí)現(xiàn)了4 種已知雜質(zhì)的控制。

圖2 擬定條件下膠囊劑有關(guān)物質(zhì)色譜圖

對(duì)比研究數(shù)據(jù)結(jié)果見(jiàn)表1。由表1可知，國(guó)產(chǎn)片劑質(zhì)量較好，與原研制劑雜質(zhì)譜一致；國(guó)產(chǎn)膠囊劑的雜質(zhì)水平相對(duì)較高。

表1 對(duì)比研究結(jié)果

3.2 有效性評(píng)價(jià)有效性評(píng)價(jià)研究?jī)?nèi)容見(jiàn)表2。經(jīng)文獻(xiàn)調(diào)研本品為BCS1類(lèi)或3類(lèi)的藥物。在現(xiàn)行質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中，溶出度檢查法是以水為介質(zhì)，并規(guī)定在15 min 內(nèi)釋放85%以上。通過(guò)進(jìn)一步研究，本品片劑以水為介質(zhì)，槳法50 轉(zhuǎn)的條件下迅速崩解，基本在5 min 內(nèi)可釋放85%以上。膠囊劑在小杯法中的釋放稍慢，但是在15 min 內(nèi)也可達(dá)到80%的溶出量。依據(jù)FDA〔10〕發(fā)布的相關(guān)指導(dǎo)原則，本品可視為速釋制劑，溶出不為本藥物吸收的“限速步驟”。因此，本研究將溶出度檢查項(xiàng)視為中低風(fēng)險(xiǎn)因素。但是為更好反應(yīng)制劑廠家工藝水平，我們開(kāi)展了3 種條件下溶出曲線的對(duì)比研究，發(fā)現(xiàn)基本一致。由于膠囊劑檢查法為小杯法，我們又開(kāi)展了與槳法的對(duì)比研究，發(fā)現(xiàn)槳法同樣適合本品溶出度檢查，因此建議更改為槳法，即與原研制劑溶出方法一致。對(duì)于本類(lèi)藥物，晶型與粒度均為低風(fēng)險(xiǎn)因素。對(duì)于晶型，經(jīng)文獻(xiàn)調(diào)研，未檢索到晶型與藥效之間的報(bào)道。

3.3 標(biāo)準(zhǔn)的科學(xué)、合理性

3.3.1 原料藥標(biāo)準(zhǔn) 在項(xiàng)目的設(shè)置上，我國(guó)鹽酸奧洛他定原料質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)與國(guó)外藥典標(biāo)準(zhǔn)基本一致。在限度的設(shè)立上，我國(guó)標(biāo)準(zhǔn)與國(guó)外標(biāo)準(zhǔn)主要差別在重金屬和有關(guān)物質(zhì)項(xiàng)。重金屬檢查項(xiàng)，國(guó)外藥典如《美國(guó)藥典》〔11〕限度均為10 ppm，嚴(yán)于我國(guó)20 ppm的限度。對(duì)于口服片劑品種，20 ppm 的限度符合我國(guó)現(xiàn)階段對(duì)口服制劑的技術(shù)要求?；陲L(fēng)險(xiǎn)控制的理念，從安全性、劑型、給藥途徑等綜合考慮，我們認(rèn)為基本合理〔12〕。

表2 有效性評(píng)價(jià)研究?jī)?nèi)容

3.3.2 制劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) 我國(guó)制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的缺陷有：

（1）片劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)：?jiǎn)蝹€(gè)雜質(zhì)限度較寬；定量方法采用主成分自身對(duì)照法。其次，含量測(cè)定項(xiàng)下檢測(cè)波長(zhǎng)設(shè)置不合理。

（2）膠囊劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)：?jiǎn)蝹€(gè)雜質(zhì)限度較寬，未控制特定雜質(zhì)；溶出度方法為小杯法。含量測(cè)定方法采用四氫呋喃、離子對(duì)試劑等多種試劑，繁瑣復(fù)雜，耐用性差。檢測(cè)波長(zhǎng)混亂，如含量測(cè)定采用206 nm（流動(dòng)相為四氫呋喃含離子對(duì)試劑），溶出度采用300 nm（介質(zhì)為水），有關(guān)物質(zhì)采用245 nm，而主藥及雜質(zhì)的最大吸收波長(zhǎng)均在270～299 nm處。

4 結(jié)論

本研究開(kāi)展了鹽酸奧洛他定口服制劑國(guó)家評(píng)價(jià)性抽驗(yàn)。按法定標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)，該品種合格率為100.0%?；陲L(fēng)險(xiǎn)控制的理念開(kāi)展探索性研究，內(nèi)容包括基因毒性雜質(zhì)研究，有關(guān)物質(zhì)研究、晶型和粒度的調(diào)研等。經(jīng)詳實(shí)的研究，結(jié)果表明我國(guó)片劑總體質(zhì)量較好，膠囊劑質(zhì)量需進(jìn)一步提高，并建議廠家提升原料和制劑的有關(guān)物質(zhì)控制方法，修改膠囊劑的溶出度檢查法。