樊 平,顏邦斌
(南充職業(yè)技術(shù)學(xué)院,四川南充 637103)
在畜禽養(yǎng)殖中濫用或不規(guī)范地使用抗生素已會導(dǎo)致耐藥性細菌產(chǎn)生,同時,肉類產(chǎn)品中的藥物殘留對消費者健康構(gòu)成威脅,因此,我國已經(jīng)實施飼料全面禁抗。仔豬斷奶后由于飼料物理形態(tài)、環(huán)境和生理等方面發(fā)生了巨大變化,仔豬承受了較大的應(yīng)激,導(dǎo)致采食量下降、生長性能下降及疾病和死亡率增加。隨著抗生素的限用,研究其他增強免疫系統(tǒng)的方法具有了新的重要性。中國藥典描述了許多草藥配方用于治療各種疾病,許多中藥具有提高免疫系統(tǒng)效率的作用(張海棠等,2011)。Liu等(2010)報道,淫羊藿、黃芪皂苷、人參皂苷和甘草顯示了免疫增強活性,主要是因為它們含有多酚、黃酮類化合物、多糖、凝集素等成分。因此,龐大的中草藥原料在替代抗生素方面有巨大的潛力。此外,關(guān)于替抗產(chǎn)品中也報道了一種基因表達產(chǎn)物,抗菌肽被認為是理想的候選物之一,因為它具有天然抗菌特性、廣譜活性、作用速度和細菌耐藥性較低的特點(潘行正等,2010)。Marr等(2006)推測,與目前使用的抗生素不同的是,細菌不可能對抗菌肽產(chǎn)生耐藥性,因為抗菌肽的作用目標很多,但消除一個目標的意義不大。由于抗菌肽的快速和廣譜特性,可以用于治療微生物感染,特別是由抗生素耐藥細菌引起的感染(Hadley和Hancock,2010),但目前關(guān)于其安全性還有待考察。因此,本研究旨在評估日糧添加中草藥添加劑和抗菌肽對斷奶仔豬生長性能、血清生化和免疫指標的影響。
1.1 試驗設(shè)計 試驗選擇21 d斷奶、平均體重為(5.90±0.03)kg的仔豬450頭,隨機分為3組,每組5個重復(fù),每個重復(fù)30頭。對照組飼喂基礎(chǔ)日糧(表1),抗菌肽組飼喂基礎(chǔ)日糧+45 mg/kg抗菌肽,中草藥組飼喂基礎(chǔ)日糧+200 mg/kg中草藥添加劑,試驗共進行42 d。中草藥添加劑購自某生物科技公司,其主要成分為甘草、淫羊藿等。
表1 日糧組成及營養(yǎng)水平
1.2 生長性能指標 分別在試驗第1、21和42 d早上飼喂前按照重復(fù)對仔豬進行稱重,每周統(tǒng)計1次采食量,每天記錄豬只死淘情況,試驗結(jié)束后計算平均日增重、平均日采食量和料重比。
1.3 血清指標 在42 d時,仔豬禁食12 h,每個重復(fù)隨機選擇5頭體重接近的仔豬頸靜脈采血10 mL,血液在室溫放置30 min后,3000g離心15 min,分離血清,-20℃保存。采用南京某生物研究所的試劑盒測定血清生化指標,血清免疫球蛋白IgG、CD3+、CD4+和CD8+濃度采用ELISA試劑盒測定。同時每個重復(fù)選擇2頭仔豬,注射綿羊紅細胞2 mL,之后參考李洱花等(2017)的方法測定綿羊紅細胞(SRBC)抗體滴度,參考Morrow-Tesch和Anderson(1994)的方法分析中性粒細胞活性。
1.4 數(shù)據(jù)分析 試驗數(shù)據(jù)采用SPSS軟件單因素方差分析,采用Duncan’s法進行多重比較,P<0.05表示差異顯著。
2.1 中草藥添加劑對斷奶仔豬生長性能的影響 由表2可知,對照組與處理組對仔豬斷奶后各階段體重、采食量及22~42 d料重比的影響無顯著差異(P>0.05)。對照組斷奶仔豬在1~21 d日增重較其他兩組分別顯著降低3.57%和5.86%(P<0.05),而中草藥組仔豬在22~42 d的日增重較對照組和抗菌肽組分別顯著提高3.64%和3.37%(P<0.05),同時該組1~42 d日增重較對照組顯著提高4.54%(P<0.05)。與對照組相比,中草藥組仔豬在1~21 d和1~42 d的料重比分別顯著降低5.52%和3.47%(P<0.05)。對照組仔豬死亡率較其他兩組分別顯著提高137.75%和126.21%(P<0.05)。
表2 中草藥添加劑對斷奶仔豬生長性能的影響
2.2 中草藥添加劑對斷奶仔豬血清生化指標的影響 由表3可知,對照組與處理組對斷奶仔豬血清球蛋白、總蛋白、極低密度脂蛋白、低密度脂蛋白和高密度脂蛋白濃度的影響無顯著差異(P>0.05)。中草藥組仔豬血清膽固醇含量較對照組和抗菌肽組分別顯著降低35.78%和33.43%(P<0.05),但該組血清甘油三酯濃度分別顯著提高19.09%和11.96%(P<0.05)。
表3 中草藥添加劑對斷奶仔豬血清生化指標的影響
2.3 中草藥添加劑對斷奶仔豬免疫指標的影響 由表4可知,對照組與處理組對仔豬SRBC抗體滴度、中性粒細胞活性、TNF-α、CD3+、CD4+、CD8+濃度及CD3+/CD4+、CD4+/CD8+的影響無顯著差異(P>0.05)。中草藥組仔豬血清IgG濃度較對照組顯著提高12.74%(P<0.05),而對照組和中草藥組血清IL-6濃度較抗菌肽組分別顯著提高34.04%和23.89%(P<0.05)。中草藥組血清CD3+/CD8+較抗菌肽組顯著提高7.36%(P<0.05)。
表4 中草藥添加劑對斷奶仔豬免疫指標的影響
生產(chǎn)上為了提高斷奶仔豬采食量,通常會在飼料中添加一些提高飼料風(fēng)味或適口性的添加劑。本試驗結(jié)果表明,在斷奶仔豬日糧中添加中草藥提取物后在一定程度上可以提高斷奶仔豬各階段采食量,但無顯著差異。中草藥添加劑通??梢灾委熛篮秃粑到y(tǒng)疾病,其中甘草具有甜美的味道,可以改善食欲(Deep和David,2001)。
血清生化指標顯示,日糧添加中草藥添加劑可以降低血清膽固醇,提高甘油三酯濃度,這與Anthony等(1996)報道的結(jié)果類似。血清球蛋白含有抗體,包括免疫球蛋白M、A、E、D、G,其中以IgG為主,血清球蛋白濃度無顯著差異,但免疫指標結(jié)果顯示,中草藥添加劑組IgG濃度顯著高于對照組,提示中草藥組仔豬免疫反應(yīng)良好。IL-6主要由單核細胞產(chǎn)生,是一種多功能細胞因子,參與系統(tǒng)性炎癥反應(yīng)的多個方面,它還能刺激β-細胞和巨噬細胞的增殖和分化,并促進抗體的產(chǎn)生,誘導(dǎo)免疫增強性能(Chang等,1995)。
CD3+、CD8+是一組抑制因子/細胞毒性T細胞,可刺激T細胞分化和細胞免疫,同時它也是一個與防御病毒和細菌感染相關(guān)的T細胞毒亞群。結(jié)果顯示,中草藥添加劑顯著提高了CD3+/CD8+,這意味著細胞介導(dǎo)的免疫增強。綜上所述,在豬飼料中添加中草藥添加劑可以達到與藥物類添加劑如抗菌肽類似的預(yù)防疾病的目的,這可能是由于中草藥中的多酚和黃酮類化合物可能對免疫和抗氧化活性有影響(Gladine等,2007)。
綜上所述,日糧添加200 mg/kg中草藥添加劑對豬的生長性能、血清性狀及免疫反應(yīng)均有有益影響。中草藥功能成分包括多酚和黃酮類化合物,具有潛在的藥物替代品功能。