白子菜鮮、干品寒涼藥性差異的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究

韋乃球，韋美夢(mèng)，覃洪乾，柳俊輝，李 琦，薛中峰，李 莉

（1.廣西中醫(yī)藥大學(xué) 藥學(xué)院，廣西 南寧 530200；2.廣西壯族自治區(qū)獸藥監(jiān)察所，廣西 南寧 530001 ）

鮮藥是相對(duì)于干藥而言的，即新鮮采集的中藥，是中藥的一種原始狀態(tài)，主要以新鮮的植物藥為主。換而言之，鮮藥一般是在采收其藥用部位后，經(jīng)凈制即行使用的中藥，藥材成分未發(fā)生明顯改變，是我國(guó)傳統(tǒng)用藥特色之一。

藥性理論是中藥理論的核心，是中醫(yī)辨證論治、處方遣藥的重要依據(jù)，主要包括四氣、五味、歸經(jīng)、升降浮沉、毒性等內(nèi)容，而四氣藥性是中藥的首要藥性，正如陶弘景所言“藥物甘苦之味可略，唯冷熱須明”。四氣，即寒、熱、溫、涼四種藥性，其中溫和熱、寒和涼并沒有本質(zhì)差異，只是程度上有所不同，即溫次于熱、涼次于寒。中藥寒、熱、溫、涼藥性主要是指從藥物作用于人體獲得不同療效所總結(jié)出來(lái)的理論，但是傳統(tǒng)中藥寒、熱、溫、涼藥性理論在其形成、發(fā)展和應(yīng)用的過程中，由于受當(dāng)時(shí)的認(rèn)識(shí)水平所限，其認(rèn)知和表述存在模糊性和主觀性。因此，中藥在臨床應(yīng)用中往往缺少可供參考的客觀化、定量化的指標(biāo)，影響中藥的安全性和有效性。如何揭示中藥寒、熱、溫、涼藥性的科學(xué)內(nèi)涵，實(shí)現(xiàn)中藥寒、熱、溫、涼藥性的相對(duì)客觀化和定量化，成為中藥現(xiàn)代研究亟待解決的問題。

白子菜Gynura divaricata （L.）DC.為菊科多年生草本植物, 又名白背三七、白仔菜、神仙草等[1]?！吨兴幋笤~典》認(rèn)為白子菜根味甘、性涼，有清熱涼血、散瘀消腫之功效[2]；而莖葉味咸、性涼，有清熱、舒筋、接骨、止血、祛痰的作用[3]。但是，《中華本草》認(rèn)為白子菜味甘、淡，性寒，具有清熱涼血、解毒消腫、活血散瘀、止痛的功效[3]。由此可見，白子菜在不同文獻(xiàn)中標(biāo)定的寒涼藥性有程度差異。

因此，本課題基于動(dòng)物宏觀行為、能量代謝等指標(biāo)的觀察和測(cè)定，考察白子菜鮮、干品對(duì)機(jī)體的作用，并對(duì)相關(guān)指標(biāo)的變化進(jìn)行共性分析，初步探討白子菜鮮、干品的寒涼藥性差異，為白子菜鮮、干品的區(qū)別應(yīng)用提供依據(jù)。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 儀器

756MC 型紫外可見分光光度計(jì)（上海精密科學(xué)儀器有限公司）；MDF-U7386S 型超低溫保存箱（日本SANYO）；ELX800 型酶標(biāo)儀（美國(guó)BIOTEK）；ST16R 型臺(tái)式高速冷凍離心（德國(guó) Thermo Fisher 公司）；UPT 型優(yōu)普特實(shí)驗(yàn)室超純水器（法國(guó) MilliPORE）；K30 型干式恒溫器（杭州爽盛儀器）。

1.2 試劑

琥 珀 酸 脫 氫 酶（SDH） 測(cè) 試 盒（ 批 號(hào)：20171201）；鈉/ 鉀-ATP 酶（Na+/K+-ATPase） （ 批號(hào)：20171201） ，南京建成生物工程研究所；蛋白質(zhì) Marker （批號(hào)：26634） ，Thermo；聚偏二氟乙烯膜（PVDF） （批號(hào)：IPVH00010）、化學(xué)發(fā)光試劑（批號(hào)：WBKLS0010） ，Millipore； RIPA（強(qiáng)）組織細(xì)胞快速裂解液（批號(hào)：PAB180006）、BCA 蛋白濃度測(cè)定試劑盒（增強(qiáng)型）（批號(hào)：PAB180007）、PBS 磷酸鹽緩沖液（批號(hào)：PAB180003）、GoatAnti-Rabbit IgG （批號(hào)：PAB160011），bioswamp；瞬時(shí)受體電位通道家族M8 型受體（TRPM8）（批號(hào)：ab3243）、瞬時(shí)受體電位香草酸受體1（TRPV1）（批號(hào)：ab6166），abcam；甘油醛-3-磷酸脫氫酶（GAPDH）（批號(hào)：2118），CST。其它常用生化試劑均為國(guó)產(chǎn)分析純。

1.3 藥材

實(shí)驗(yàn)藥材采集于廣西貴港，經(jīng)廣西中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院藥用植物教研室郭敏副教授鑒定為菊科植物白子菜Gynura divaricata（L.）DC.的全草。分別取白子菜鮮8 kg、干品1kg（因?yàn)? kg 鮮品經(jīng)曬干可得干品1 kg），加10 倍量的水，浸泡1 h 后回流提取1.5 h，趁熱過濾，藥渣加8 倍量水回流提取1.0 h，趁熱過濾，將兩次濾液混合并搖勻，濃縮藥液，分別制成相當(dāng)于生藥16 g/mL 、2 g/mL 的浸膏，置4 ℃冰箱備用。

1.4 動(dòng)物

KM 小鼠，雄性，體質(zhì)量為（20±2） g，SPF 級(jí)，由廣西醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物中心提供，許可證號(hào)：SCXK（桂）2014-0002。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 模型復(fù)制

2.1.1 體盛組模型 每日正常飲水，同時(shí)飼喂足量高蛋白飼料至毛色光亮，日飲水量明顯增多，喜動(dòng)，食欲大增，體質(zhì)量、肛溫明顯升高，出現(xiàn)典型的“熱盛證”特點(diǎn)，即為體盛組造模成功。

2.1.2 體虛組模型 每日正常飲水 ，同時(shí)控制飼喂普通飼料（ 0.1 g /1 g），每日測(cè)試前 1 h 于水深 20 cm、水溫 （ 20 ±5） ℃中進(jìn)行游泳訓(xùn)練，至自然沉降，毛易脫落，日飲水量明顯減少，并且出現(xiàn)精神萎靡、食欲不振、體質(zhì)量明顯降低，游泳時(shí)間縮短，尾巴和四肢冰冷，出現(xiàn)典型的“虛寒證”特點(diǎn)，即為體虛組造模成功。

2.2 分組與給藥

將小鼠隨機(jī)分為空白組、體盛組、體虛組、體盛+白子菜鮮品組、體盛+白子菜干品組、體虛+白子菜鮮品組、體虛+白子菜干品組，每組10 只，連續(xù)灌胃給藥15 d。

2.3 檢測(cè)指標(biāo)

2.3.1 一般指標(biāo) 分別于給藥第0、7、14 天早7時(shí)測(cè)量小鼠體質(zhì)量，并記錄小鼠飲水量、飲食量。

2.3.2 小鼠肛溫測(cè)定 分別于給藥第0、7、14 天測(cè)量小鼠肛溫，各組動(dòng)物平行交替進(jìn)行測(cè)試。

2.3.3 小鼠溫度趨向性測(cè)定 每次給藥 1 h 后，將小鼠依次放入自動(dòng)溫控系統(tǒng)（低溫板 25 ℃，高溫板 45℃）的冷熱板各通道內(nèi)，并對(duì)活動(dòng)軌跡進(jìn)行30 min 全程監(jiān)測(cè)并計(jì)數(shù)。

2.3.4 小鼠肝組織SDH、Na+/K+-ATPase 活性測(cè)定 分離肝臟，用生理鹽水清洗血污，鋁箔紙包好，-80 ℃保存待測(cè)。按照試劑盒說明書進(jìn)行操作，采用化學(xué)比色分光光度法測(cè)定肝組織SDH、Na+/ K+-ATPase 活性。

2.3.5 Western blot 檢測(cè)小鼠下丘腦TRPV1 和 TRPM8 的蛋白水平 從下丘腦組織中提取蛋白，用Bradford 蛋白質(zhì)定量方法，進(jìn)行蛋白定量。采用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為12%的十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳（SDS-PAGE）檢測(cè)，濕法轉(zhuǎn)移至 PVDF 膜，脫脂奶粉室溫封閉2 h，分別加入一抗（ 兔抗 TRPV1 或兔抗 TRPM8，1 ∶100） ，在 4℃下孵育過夜。洗滌緩沖液洗膜后加入二抗（ HRP 標(biāo)記山羊抗兔二抗，1 ∶3 000），室溫孵育2 h。使用兔抗 GAPDH 特異性抗體作為內(nèi)參對(duì)照檢測(cè)。將膜放置在暗室中，根據(jù)用量取 ECL 發(fā)光液 A 和 B 等量混勻，加在膜的正面與之充分接觸。然后將膜置于全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光分析儀中檢測(cè)，通過上海天能Tanon 2 500/R 凝膠圖像處理系統(tǒng)軟件讀取相關(guān)條帶灰度值。

2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS22.0 軟件對(duì)實(shí)驗(yàn)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示。兩組間比較采用t 檢驗(yàn)，多組間比較采用方差分析。以P ＜0.05 為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

3.1 小鼠體質(zhì)量的變化

與空白組比較，體盛組小鼠體質(zhì)量顯著升高，體虛組小鼠體質(zhì)量顯著或極顯著降低；給藥14 d 后，與體盛組比較，體盛+白子菜鮮、干品組小鼠體質(zhì)量極顯著降低；與體虛組比較，體虛+白子菜鮮、干品組小鼠體質(zhì)量略降低，但無(wú)顯著性差異；同時(shí)，體盛/體虛 +白子菜干品組小鼠體質(zhì)量變化趨勢(shì)較體盛/體虛+白子菜鮮品組小鼠明顯，結(jié)果見表1。

表1 小鼠體質(zhì)量的變化（±s，n = 10）Tab. 1 Changes of body weight in mice（±s，n = 10）

表1 小鼠體質(zhì)量的變化（±s，n = 10）Tab. 1 Changes of body weight in mice（±s，n = 10）

注:與空白對(duì)照組比較，1）P ＜0.05，2）P ＜0.01；與體盛組比較，3）P ＜0.05，4）P ＜0.01；與體虛組比較，5）P ＞0.05，6）P ＜0.01（表2-7 同）。

組別 劑量/（g/kg）體質(zhì)量/g F P給藥前 7 d 14 d空白組 - 30.46 ± 4.61 33.48 ± 3.69 35.79 ± 4.74 4.360 0.024體盛組 - 34.51 ± 3.441） 37.82 ± 4.631） 39.42 ±2.241） 3.229 0.059體虛組 - 26.10 ± 3.481） 25.83 ± 3.252） 28.93 ± 3.382） 1.937 0.173體盛+白子菜鮮品組 32 28.15 ± 3.644） 28.76 ± 3.311）4） 30.11 ± 4.451）4） 0.344 0.713體盛+白子菜干品組 4 29.53 ±5.123） 29.51 ±5.141）4） 31.08 ±6.621）4） 0.152 0.860體虛+白子菜鮮品組 32 24.01 ± 2.612）4） 26.29 ± 4.132）4） 28.11 ± 2.452）4） 3.592 0.045體虛+白子菜干品組 4 22.86 ± 3.302）4） 24.17 ± 3.382）4） 27.37 ± 3.312）4） 1.774 0.203 F 7.581 9.806 8.932 P 0.000 0.000 0.000

3.2 小鼠飲水量的變化

與空白組比較，體盛組小鼠飲水量極顯著升高，體虛組小鼠飲水量顯著或極顯著降低；給藥14 d 后，與體盛組比較，體盛+白子菜鮮、干品組小鼠飲水量略降低，但無(wú)顯著性差異；與體虛組比較，體虛+白子菜鮮、干品組小鼠飲水量略降低，但無(wú)顯著性差異；體盛/體虛 +白子菜干品組小鼠飲水量變化趨勢(shì)較體盛/體虛+白子菜鮮品組小鼠明顯，結(jié)果見表2。

3.3 小鼠飲食量的變化

與空白組比較，體盛組小鼠飲食量略增加或顯著增加，體虛組小鼠飲食量顯著降低；給藥14 d 后，與體盛組比較，體盛+白子菜鮮、干品組小鼠飲食量顯著或極顯著降低；與體虛組比較，體虛+白子菜鮮、干品組小鼠飲食量變化無(wú)顯著性差異；體盛/體虛 +白子菜干品組小鼠飲食量變化趨勢(shì)較體盛/體虛+白子菜鮮品組小鼠明顯，結(jié)果見表3。

3.4 小鼠肛溫的變化

與空白組比較，體盛組小鼠肛溫顯著升高，體虛組小鼠肛溫略降低或顯著降低；給藥14 d 后，與體盛組比較，體盛+白子菜鮮、品組小鼠肛溫顯著或極顯著降低；與體虛組比較，體虛+白子菜鮮、干品組小鼠肛溫略降低，但無(wú)顯著性差異；體盛/體虛 +白子菜干品組小鼠肛溫變化趨勢(shì)較體盛/體虛+ 白子菜鮮品組小鼠明顯，結(jié)果見表4。

表2 小鼠飲水量的變化（±s，n = 10）Tab. 2 Changes of water consumption in mice（±s，n = 10）

表2 小鼠飲水量的變化（±s，n = 10）Tab. 2 Changes of water consumption in mice（±s，n = 10）

組別 劑量/（g/kg） 飲水量/mL F P給藥前 7 d 14 d空白組 - 2.26 ± 0.17 2.84 ± 0.20 3.12 ± 0.25 43.146 0.000體盛組 - 2.68 ± 0.242） 3.35 ± 0.382） 4.27 ± 0.532） 39.934 0.000體虛組 - 2.01 ± 0.231） 1.86 ± 0.252） 1.77 ± 0.202） 2.889 0.073體盛+白子菜鮮品組 32 2.77 ± 0.162）6） 3.02 ± 0.34 4.04 ± 0.312）6） 57.081 0.000體盛+白子菜干品組 4 2.63 ± 0.152）6） 2.92 ± 0.513） 3.93 ± 0.262）6） 39.816 0.000體虛+白子菜鮮品組 32 1.95 ± 0.212）4） 1.81 ± 0.242）4） 1.72 ± 0.202）4） 2.859 0.075體虛+白子菜干品組 4 2.21 ± 0.154）5） 1.76 ± 0.232）4） 1.69 ± 0.472）4） 16.021 0.000 F 31.172 43.118 182.912 P 0.000 0.000 0.000

表3 小鼠飲食量的變化（±s，n = 10）Tab. 3 Changes of diet in mice（±s，n = 10）

表3 小鼠飲食量的變化（±s，n = 10）Tab. 3 Changes of diet in mice（±s，n = 10）

組別 劑量/（g/kg） 飲食量/g F P給藥前 7 d 14 d空白組 - 4.48 ± 0.36 5.02 ± 0.33 5.86 ± 0.41 33.563 0.000體盛組 - 4.73 ± 0.19 5.56 ± 0.202） 6.23 ± 0.171） 154.850 0.000體虛組 - 4.01 ± 0.312） 3.82 ± 0.292） 3.56 ± 0.282） 5.558 0.010體盛+白子菜鮮品組 32 4.74 ± 0.456） 5.12 ± 0.413）6） 5.99 ± 0.273）6） 25.947 0.000體盛+白子菜干品組 4 4.70 ± 0.302） 5.04 ± 0.254）6） 5.83 ± 0.274）6） 41.820 0.000體虛+白子菜鮮品組 32 3.95 ± 0.541）4） 3.71 ± 0.342）4） 3.64 ± 0.352）4） 0.382 0.269體虛+白子菜干品組 4 4.13 ± 0.361）4） 3.66 ± 0.312）4） 3.55 ± 0.152）4） 10.742 0.000 F 9.026 60.417 182.912 P 0.000 0.000 0.000

表4 小鼠肛溫的變化（±s，n = 10）Tab. 4 Changes of anal temperature in mice（±s，n = 10）

表4 小鼠肛溫的變化（±s，n = 10）Tab. 4 Changes of anal temperature in mice（±s，n = 10）

組別 劑量/（g/kg） 肛溫/℃ F P給藥前 7 d 14 d空白組 - 37.44 ± 0.32 37.49 ± 0.70 37.87 ± 0.56 1.831 0.179體盛組 - 38.58 ± 1.011） 38.24 ± 0.721） 38.38 ± 0.351） 0.459 0.637體虛組 - 37.11 ± 0.42 37.08 ± 0.53 37.33 ± 0.351） 0.932 0.408體盛+白子菜鮮品組 32 38.41 ± 0.692）6） 38.13 ± 0.561）6） 37.84 ± 0.503）5） 2.092 0.145體盛+白子菜干品組 4 38.11 ± 0.895） 37.43 ± 0.323） 37.38 ± 0.301）4） 4.160 0.030體虛+白子菜鮮品組 32 37.13 ± 0.444） 37.11 ± 0.454） 37.26 ± 0.391）4） 0.297 0.745體虛+白子菜干品組 4 37.07± 0.614） 37.01 ± 0.564） 36.96 ± 0.412）4） 0.081 0.922 F 0.081 6.712 11.163 P 0.922 0.000 0.000

3.5 小鼠溫度趨向性行為的比較

與空白組比較，體盛組在高溫區(qū)的停留比例顯著減少，體虛組小鼠在高溫區(qū)的停留比例顯著增加；給藥14 d 后，與體盛組比較，體盛+白子菜干品組小鼠在高溫區(qū)的停留比例顯著減少，體盛+白子菜鮮品組小鼠在高溫區(qū)的停留比例無(wú)顯著變化；與體虛組比較，體虛+白子菜鮮、干品組小鼠在高溫區(qū)的停留比例略減少，但無(wú)顯著性差異；體盛/體虛 +白子菜干品組小鼠指標(biāo)變化趨勢(shì)較體盛/體虛+白子菜鮮品組小鼠明顯，結(jié)果見表5。

3.6 小鼠肝組織中的SDH、Na+/K+-ATPase 活性

與空白組比較，體盛組小鼠肝組織中SDH、Na+/K+-ATPase 活性顯著升高，體虛組小鼠肝組織中SDH、Na+/K+-ATPase 活性顯著或極顯著降低；給藥14 d 后，與體盛組比較，體盛+白子菜鮮、干品組小鼠肝組織中SDH、Na+/K+-ATPase 活性顯著或極顯著降低；與體虛組比較，體虛+白子菜鮮、干品組小鼠肝組織中SDH、Na+/K+-ATPase 活性略升高，但無(wú)顯著性差異；同時(shí)，體盛/體虛 +白子菜干品組小鼠指標(biāo)變化趨勢(shì)較體盛/體虛+白子菜鮮品組小鼠明顯，結(jié)果見表6。

表5 小鼠在各溫區(qū)的總停留時(shí)間比例（±s，n = 10）Tab. 5 Proportion of total stay time of mice in each temperature zone（±s，n = 10）

表5 小鼠在各溫區(qū)的總停留時(shí)間比例（±s，n = 10）Tab. 5 Proportion of total stay time of mice in each temperature zone（±s，n = 10）

溫區(qū)/ %25 ℃ 45 ℃空白組 - 55.43 ± 1.92 44.57 ± 2.73體盛組 - 61.46 ± 2.122） 38.54 ± 1.392）體虛組 - 35.88 ± 1.542） 64.12 ± 2.212）體盛+白子菜鮮品組 32 62.32 ± 1.862）6） 37.68 ± 1.162）6）體盛+白子菜干品組 4 63.56 ± 1.602）3）6） 36.44 ± 0.862）4）6）體虛+白子菜鮮品組 32 37.87 ± 2.262）4） 62.13 ± 2.222）4）體虛+白子菜干品組 4 35.82 ± 1.632）4） 64.18 ± 2.152）4）F 445.807 401.059 P 0.000 0.000組別 劑量/（g/kg）

表6 小鼠肝組織SDH、Na+/K+-ATPase 活性（±s，n = 10）Tab. 6 Activities of SDH and Na+/ K+- ATPase in mice liver（±s，n = 10）

表6 小鼠肝組織SDH、Na+/K+-ATPase 活性（±s，n = 10）Tab. 6 Activities of SDH and Na+/ K+- ATPase in mice liver（±s，n = 10）

組別 劑量/（g/kg） SDH / （U/gprot） Na+/K+-ATPase / [μmolPi/（mgprot·h）]空白組 - 12.30± 1.15 1.12 ± 0.03體盛組 - 13.46 ± 0.731） 1.34 ± 0.212）體虛組 - 11.07 ± 1.161） 1.06 ± 0.032）體盛+白子菜鮮品組 32 11.29 ± 0.673）6） 1.16 ± 0.123）體盛+白子菜干品組 4 11.17 ± 0.891）4） 1.12 ± 0.133）體虛+白子菜鮮品組 32 11.15 ± 1.984） 1.13 ± 0.133）體虛+白子菜干品組 4 11.98 ± 0.834） 1.07 ± 0.041）4）F 5.075 5.365 P 0.000 0.000

3.7 Western blot 檢測(cè)小鼠TRPV1 和 TRPM8 的蛋白水平

與空白組比較，體盛組小鼠TRPV1 蛋白表達(dá)極顯著升高及TRPM8 蛋白表達(dá)極顯著降低，體虛組小鼠TRPV1 蛋白表達(dá)極顯著降低及TRPM8 蛋白表達(dá)極顯著升高；給藥14 d 后，與體盛組比較，體盛+白子菜鮮、干品組小鼠TRPV1 蛋白表達(dá)極顯著降低及TRPM8 蛋白表達(dá)極顯著升高；與體虛組比較，體虛+白子菜鮮、干品組小鼠TRPV1 蛋白表達(dá)極顯著升高及TRPM8 蛋白表達(dá)極顯著降低；同時(shí)，體盛/體虛 +白子菜干品組小鼠指標(biāo)變化趨勢(shì)較體盛/體虛+白子菜鮮品組小鼠明顯，結(jié)果見表7、圖1。

表7 小鼠TRPV1 和 TRPM8 蛋白水平（±s，n = 10）Tab. 7 Protein levels of TRPV1 and TRPM8 in mice（±s，n = 10）

表7 小鼠TRPV1 和 TRPM8 蛋白水平（±s，n = 10）Tab. 7 Protein levels of TRPV1 and TRPM8 in mice（±s，n = 10）

組別 劑量/（g/kg） TRPV1/ GAPDH TRPM8/ GAPDH空白組 - 0.48 ± 0.01 0.52 ± 0.00體盛組 - 0.70 ± 0.012） 0.35 ± 0.002）體虛組 - 0.41 ± 0.002） 0.74 ± 0.012）體盛+白子菜鮮品組 32 0.63 ± 0.012）4）6） 0.42 ± 0.012）4）6）體盛+白子菜干品組 4 0.59 ± 0.012）4）6） 0.44 ± 0.012）4）6）體虛+白子菜鮮品組 32 0.46 ± 0.012）4）6） 0.67 ± 0.012）4）6）體虛+白子菜干品組 4 0.45 ± 0.012）4）6） 0.69 ± 0.002）4）6）F 855.043 3189.488 P 0.000 0.000

圖 1 小鼠TRPV1 和 TRPM8 蛋白水平（±s，n = 10）Fig.1 Protein levels of TRPV1 and TRPM8 in mice（±s，n = 10）

4 討論

中藥寒熱藥性是中藥基礎(chǔ)理論的核心內(nèi)容，也是中藥與西藥之間最本質(zhì)的區(qū)別。因此，大量開展中藥寒熱藥性研究，可以促進(jìn)中藥藥性理論的發(fā)展和完善。相關(guān)文獻(xiàn)表明[4-13]，在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物給藥后，通過觀察體質(zhì)量、飲水飲食量、肛溫、毛發(fā)顏色等一般情況，以及溫度趨向性、能量代謝指標(biāo)、瞬時(shí)感受器電位離子通道蛋白含量變化等，可探究中藥鮮、干品的寒熱藥性差異，為運(yùn)用現(xiàn)代科學(xué)語(yǔ)言闡述中藥藥性理論固有的科學(xué)內(nèi)涵提供參考。

本研究發(fā)現(xiàn)，與空白組比較，體虛組小鼠呈現(xiàn)體質(zhì)量下降、飲水飲食量減少、肛溫降低、對(duì)高溫趨向性增強(qiáng)等典型“虛寒證”特點(diǎn)；體盛組小鼠呈現(xiàn)體質(zhì)量升高、飲水飲食量增加、肛溫升高、對(duì)高溫的趨向性減弱等典型“熱證”特點(diǎn)。在此模型上，白子菜鮮、干品干預(yù)之后，小鼠一般能量代謝指標(biāo)（體質(zhì)量、飲水飲食、肛溫等）均降低，這與寒涼藥性使一般能量代謝降低的理論一致。同時(shí)，白子菜鮮、干品對(duì)小鼠“趨熱性”增強(qiáng)的順序與上述數(shù)據(jù)改變規(guī)律基本一致，提示通過動(dòng)物溫度趨向性實(shí)驗(yàn)可以分辨白子菜鮮、干品藥性的細(xì)微差別，同時(shí)也從實(shí)驗(yàn)水平驗(yàn)證了傳統(tǒng)藥性理論認(rèn)識(shí)的客觀存在性。

此外，本實(shí)驗(yàn)還考察了白子菜鮮、干品對(duì)SDH和ATP 酶活性的影響。結(jié)果表明，體虛小鼠的SDH和ATP 酶活性均下降，而經(jīng)白子菜鮮、干品干預(yù)后，SDH 和ATP 酶活性均進(jìn)一步下降，提示白子菜鮮、干品的“寒性”使小鼠SDH 和ATP 酶活性進(jìn)一步受到抑制；在體盛小鼠也得到類似結(jié)果。本實(shí)驗(yàn)也觀察到，體盛小鼠給予白子菜鮮、干品干預(yù)后，隨著肛溫下降，小鼠下丘腦 TRPV1 表達(dá)明顯降低、TRPM8 表達(dá)明顯升高。根據(jù)《素問至真要大論》提出“寒者熱之，熱者寒之”的重要治則，白子菜鮮、干品可能通過下調(diào)下丘腦中 TRPV1 表達(dá)水平、上調(diào)TRPM8 表達(dá)從而起到糾正熱證動(dòng)物模型發(fā)熱癥狀的作用。在以上各數(shù)值變化中，白子菜鮮品改變的幅度要小于白子菜干品，從而驗(yàn)證了白子菜鮮、干品寒涼藥性程度差異的客觀存在。

5 結(jié)論

中藥藥性不僅是藥物的固有屬性，亦受外界因素影響，比如中藥進(jìn)行相應(yīng)加工炮制后化學(xué)成分會(huì)有所改變，會(huì)使其寒涼之性逐漸減弱，甚者藥性由寒轉(zhuǎn)溫；或使其溫?zé)嶂灾饾u減弱，甚者藥性由溫轉(zhuǎn)寒。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，白子菜鮮品經(jīng)曬干后藥性由涼轉(zhuǎn)為寒，顯然是受加工炮制后化學(xué)成分改變的影響，但具體與哪些化學(xué)成分的改變有關(guān)，還需進(jìn)一步研究，以便確切闡釋白子菜的藥性理論，為其臨床合理應(yīng)用提供理論依據(jù)。