山東地區(qū)工廠化栽培的雙孢菇品種篩選及優(yōu)化

姚 強，宮志遠，司洪宇，黃春燕，韓建東，梁曉輝，張元祺，楊 鵬，李 瑾

(1.山東省農(nóng)業(yè)科學院農(nóng)業(yè)資源與環(huán)境研究所，農(nóng)業(yè)部廢棄物基質化利用重點實驗室，山東 濟南 250100；2.山東省科學院能源研究所，山東省生物質氣化技術重點實驗室，山東 濟南 250000)

1 引言

當前利用人工栽培分布最廣的食用菌是雙孢菇，因其產(chǎn)量高、地域廣，被稱為“世界菇”[1～4]，是我國現(xiàn)階段最大宗的出口創(chuàng)匯食用菌[5,6]，我國雙孢菇總產(chǎn)量占全球食用菌約70%左右[7～9]。雙孢菇蛋白質含量為35%～38%，含有人體必須的6種氨基酸，還含有豐富的維生素B1、維生素B2、維生素P、核苷酸、煙酸、抗壞血酸和維生素D等，其營養(yǎng)價值是蔬菜和水果的4～12倍，享有“保健食品”和“素中之王”美稱[10～13]。深受國內市場，尤其是國際市場的青睞[14,15]。目前，市場上對雙孢菇的需求不斷擴大[16,17]，因此，為滿足山東地區(qū)雙孢菇工廠化栽培的需求，擴大產(chǎn)能，提高企業(yè)經(jīng)濟效益。依據(jù)“南種北繁”重大基礎理念，從國內外雙孢菇主栽地區(qū)收集引進10個雙孢菇品種，對其菌絲、產(chǎn)量、商品性狀等進行對比試驗，以期篩選出適宜山東地區(qū)栽培的雙孢菇工廠化優(yōu)質栽培品種。為解決區(qū)域食用菌產(chǎn)業(yè)結構調整和多元化品種品質需求提供基礎。

2 試驗材料與方法

2.1 供試菌種

從國內外雙孢菇主栽地區(qū)通過購買、野外采集、合作等多種方式收集引進雙孢菇品種10個，品種來源及編號見表1。

表1 雙孢菇品種編號及來源

2.2 供試培養(yǎng)基

母種培養(yǎng)基：普通市售PDA培養(yǎng)基。

液體菌種培養(yǎng)基：白砂糖3%，豆粕0.3%，磷酸二氫鉀(KH2PO4)0.05%，硫酸鎂(MgSO4)0.05%，余量用純凈水補齊，pH值自然。

栽培培養(yǎng)基：草菇菌渣45%，金針菇菌渣15%，稻草23%，水洗牛糞20%，石膏5%，過磷酸鈣1.5%，尿素0.5%。栽培料需進行二次發(fā)酵。

2.3 不同雙孢菇品種菌絲活性檢測

為確保菌齡和接種塊大小一致，在超凈工作臺上，無菌環(huán)境下打孔器打孔后將菌種接種于平板培養(yǎng)基中，25 ℃恒溫培養(yǎng)箱中避光培養(yǎng)，每個品種設置3個重復。觀察并記錄菌絲生長情況。

2.4 不同雙孢菇品種液體菌種生長情況檢測

嚴格按照比例稱取液體培養(yǎng)基原料，加水混合均勻，于500 mL三角瓶中裝入200 mL，121 ℃高壓滅菌40 min，滅菌好的培養(yǎng)基移入超凈工作臺上。生長好的平板菌種無菌條件下接種于冷卻后的液體培養(yǎng)基中，25 ℃、150 r/min避光條件下培養(yǎng)7 d，每個品種設3次重復。觀察并記錄每個品種菌絲球大小形態(tài)、菌液澄清度、菌絲球多少以及菌絲濕重等指標[18]。

2.5 雙孢菇品種農(nóng)藝性狀檢測

將經(jīng)二次發(fā)酵培養(yǎng)料倒入出菇房中，設置10個處理，每個處理3個重復，共劃分30個小區(qū)，每個小區(qū)10 m2。出菇房內24 ℃恒溫培養(yǎng)，待菌絲長至2/3時進行覆土，土層厚約4 cm[19，20]，土質為草炭土。覆土后，菇房溫度控制在20 ℃左右，每隔2 h噴水使土面保持濕潤，空氣相對濕度保持在80%～90%，每天觀察并記錄菌絲生長情況。待土縫中看見菌絲，當土層中菌絲開始紐結成絨毛狀，形成球狀大小的白點時需要重噴結菇水，同時加大通氣量。出現(xiàn)菇蕾后，保持空氣相對濕度90%左右，控制溫度在15～18 ℃，每天開窗通風約30 min，見菇蕾長至黃豆大小時噴出菇水，分2 d噴水，總水量為2.5 kg/m2左右[21～23]。觀察各菌株在培養(yǎng)料上的長勢，仔細記錄不同菌株由播種到菌絲封面期間覆土時間、原基形成期及子實體采收期所需時間，菌絲在培養(yǎng)料中的生長時間與相對吃料深度，以及在整個采收期間內子實體的累積產(chǎn)量，不同菌株的觀測均為30筐的平均值。

2.6 不同品種雙孢菇品種生物學性狀觀測

原基形成后計數(shù)原基數(shù)量，當子實體快成熟時，觀測不同菌株的生物學性狀，包括菌蓋顏色、菌蓋直徑、菌柄長度、菌柄直徑、單個子實體重、子實體韌性及產(chǎn)量。 生物學效率按常規(guī)方法計算，記錄料干重、產(chǎn)菇量，計算生物學效率的平均值。生物學效率=(子實體的鮮重/培養(yǎng)料的干重)×100%。

3 結果與分析

3.1 菌絲萌發(fā)能力的測定

將菌株接種于培養(yǎng)料中，從每天觀測菌絲萌動生長情況并記錄，其結果如表2所示。試驗結果表明：播種后菌株萌動除A4需要6 d時間，A6需要5 d時間，A5、A7需要4 d外，其余的均3 d就開始萌動；萌動后A4、A10需要4 d才能恢復生長；A1、A6需要2 d時間完全恢復生長，而其余品種僅需要1 d時間；播種后恢復生長A3需要時間最短，為4 d，A4最長，為7 d，其余菌株均為5 d。

表2 菌株萌發(fā)能力的測定

3.2 子實體鱗片檢測

雙孢菇子實體表面鱗片數(shù)量的多少直接影響著雙孢菇的產(chǎn)品外觀和商業(yè)價值。采集各菌株子實體，觀察記錄子實體表面鱗片數(shù)量的多少，其結果如表3所示。10個菌株子實體鱗片含量各有差異，其中A2、A3基本不產(chǎn)生鱗片，菇體外觀最佳。其次為A8、A9兩個品種，有鱗片菇體數(shù)量較少，A1、A4、A5、A10有鱗片菇數(shù)量稍多，但整體不影響菇體外觀和商品價值，A6、A7有鱗片子實體數(shù)量較多，對菇體美觀和產(chǎn)品價值有一定的影響。

表3 不同品種雙孢菇菇體鱗片情況

3.3 不同雙孢菇品種貨架期的測定

影響雙孢菇的商業(yè)價值和貨架期的一個重要指標是雙孢菇褐化，采集各品種子實體于室溫和冷藏條件下儲藏，觀察并記錄子實體褐化的情況，其結果如表4所示。常溫下A2表現(xiàn)最佳，褐變時間為6天，其次為A3、A4兩個品種，褐變時間為4 d，其他7個品種褐變時間均為3 d；在冷藏條件下大部分雙孢菇子實體的褐變時間為12 d，A2貨架期最長，為16 d，A3、A4、A7貨架期略長，為13 d。A2品種更耐儲存，適合遠距離運輸銷售。

表4 貨架期測定

3.4 產(chǎn)量分析

各雙孢菇品種總產(chǎn)量如表5所示，10個雙孢菇菌株產(chǎn)量差異較大， A2、A3總產(chǎn)量最高，均超過13 kg/m2，生物轉化率在37%以上，其中A3總產(chǎn)量最高達13.57 kg/m2，吃料速度為8.27 mm/d，生物轉化率達38.7%。A2產(chǎn)量可達13.14 kg/m2、，生物轉化率為37.5%。而A5、A8產(chǎn)量最低，生物轉化率在25%以下。A5產(chǎn)量為8.53 kg/m2，而A8產(chǎn)量僅為8.03 kg/m2，生物轉化率為22.9%。試驗結果表明，A2、A3可作為區(qū)域雙孢菇規(guī)模化栽培的主推品種。

表5 雙孢菇栽培產(chǎn)量結果

4 結論與討論

綜合各種試驗結果和綜合評價，從國內外引進品種中篩選出高產(chǎn)優(yōu)良品種2個，編號為A2、A3，其主要特征表現(xiàn)為：雙孢菇品種A2，平均菌蓋直徑4.55 cm，菌蓋厚度2.37 cm，菌柄長度3.05 cm，單菇重27.75 g，鮮菇含水量92.84%，吃料速度8.19 mm/d，菌絲最佳生長溫度23 ℃，品種商品性狀優(yōu)良，A級菇占比為91%，尤其耐儲存，適合遠距離運輸銷售，生物轉化率為37.5%，平均產(chǎn)量可達13.14 kg/m2。雙孢菇品種A3子實體平均直徑4.47 cm，菌蓋厚度4.10 cm，菌柄長度2.95 cm，單菇重30.2 g，鮮菇含水量93.3%，吃料速度8.27 mm/d，菌絲最佳生長溫度24 ℃，該品種產(chǎn)量最高，為13.57 kg/m2，菇體密度較大，A級菇占比為90.2%。試驗所篩選的兩個雙孢菇品種，作為鮮銷的工廠化栽培品種可作為山東地區(qū)雙孢菇栽培所用引進品種。試驗為進一步篩選及優(yōu)化適宜北方地區(qū)栽培的高產(chǎn)、高值雙孢菇品種奠定了基礎。