肖 穎,耿曉桐,龔 靜,董 翠*
(1.信陽農(nóng)林學(xué)院制藥工程學(xué)院,河南信陽 464000;2.信陽農(nóng)林學(xué)院水產(chǎn)學(xué)院 河南信陽 464000)
近年來,由于抗生素的濫用導(dǎo)致其在動物體內(nèi)會產(chǎn)生殘留和使病原微生物產(chǎn)生耐藥性,因此,水產(chǎn)食品安全性引起了人們的極大關(guān)注。2020年7月1日,我國禁止將抗生素作為促生長類飼料添加劑(劉公言等,2020年)。中草藥以其無殘留、毒副作用小、來源廣、價格低廉、療效好等優(yōu)點備受關(guān)注,越來越受到研究者的重視(蘭時樂等,2010)。近年來的研究表明,中草藥及其提取物被廣泛應(yīng)用于魚類、雞和豬等動物飼料中,可全方位提高畜牧業(yè)產(chǎn)品質(zhì)量(徐海平,2020;洪梅毅,2020;邱時秀,2020),但在鯉魚飼料中的研究較少,因此,本試驗旨在探討中草藥對鯉魚生長性能、血清生化指標(biāo)和抗氧化功能的影響,為中草藥在魚類生產(chǎn)中的應(yīng)用提供理論依據(jù)。
1.1 試驗設(shè)計符合試驗要求所用的中草藥均購自河南仲景中草藥有限公司,主要成分為魚腥草、蒲公英、枸杞、當(dāng)歸、茯苓等,取相同重量混合后在烘箱中55℃干燥,充分粉碎后過3號篩,再將其混合物與基礎(chǔ)日糧充分混合,以制備直徑為0.3 cm顆粒物后置于干燥器中備用。將240尾無疾病周齡相近、體重相仿(31~35 g)的鯉魚(購于河南省信陽市某水產(chǎn)養(yǎng)殖廠)隨機分為4組,每組5個重復(fù),每個重復(fù)12尾,分別為對照組(基礎(chǔ)飲食組)、試驗A組(基礎(chǔ)飲食+5 g/kg中草藥制劑),試驗B組(基礎(chǔ)飲食+8 g/kg中草藥制劑)和試驗C組(基礎(chǔ)飲食+10 g/kg中草藥制劑)?;A(chǔ)飼料原料組成及營養(yǎng)水平參考見表1。
表1 鯉魚日糧組成及營養(yǎng)水平
1.2 樣品采集各組飼料管理應(yīng)保持一致。在試驗過程中,水溫控制在(22±2.0)℃,溶解氧設(shè)為(6.05±0.14)/L,pH=(7.53±0.02),并 注 意亞硝酸鹽含量,每天更換水族箱中的水并清洗過濾器。每日提供2次飼料(每天上午10:00和下午3:00),保持自然光周期(光照約13 h和暗照約11 h)。試驗結(jié)束后將魚禁食12 h,然后隨機采集樣本。樣本采集方法參照從每組隨機抽取12尾鯉魚,采集血液,并在4℃靜置2 h。血液凝固純化后用冷凍離心機離心8000 r/min,離心20~30 min,分離血液后測定血清生化指標(biāo)及抗氧化指標(biāo)。
1.3 試驗方法
1.3.1 測定生產(chǎn)性能指標(biāo) 試驗魚應(yīng)禁食24 h,計算每組剩余活魚數(shù)量,測量每組標(biāo)記魚的重量和體長,記錄飼料量和采食量,計算生長率指數(shù)的公式為:
體重增加率/%=(最終體重-初始體重)/初始體重×100;
存活率/%=飼養(yǎng)尾數(shù)/結(jié)束時尾數(shù)×100;
生長率/%=(最終體重-初始體重)/喂養(yǎng)天數(shù)×100;
飼料系數(shù)=飼料攝入量/(總最終重量/總初始重量)。
1.3.2 測定血清生化指標(biāo) 在全自動生化分析儀(型號:日立702)上對血清中總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂質(zhì)蛋白(HDL)和低密度脂質(zhì)蛋白(LDL)的生化數(shù)值進行測定。
1.3.3 測定血清抗氧化活性 總抗氧化能力(T-AOC)、谷胱甘肽過氧化物(GSH-Px)、超氧化物歧化酶活性(SOD)和丙二醛含量(MDA)在UV-2450分光光度計上測定,使用南京建成生物工程研究所試劑盒。
1.4 數(shù)據(jù)的分析及統(tǒng)計所有數(shù)據(jù)均以“平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差”表示,用SPSS16.0軟件進行方差分析,采用Duncan's法進行多重比較。P<0.01表示差異極顯著,P<0.05表示差異顯著。
2.1 不同水平中草藥添加劑對鯉魚生產(chǎn)性能的影響在整個試驗期間,各組覓食和糞便沒有明顯的異常,且無疾病和死亡。由表2可知,B、C、D組的最終體重顯著高于試驗A組(P<0.05),C組最終體重顯著高于試驗A組(P<0.05),B組和D組的最終體重與對照組無差異。B、C、D組生長率比對照組分別提高4.69%、16.80%和7.03%,但差異不顯著(P>0.05)。B組和C組增重率顯著高于對照組(P<0.05)。
表2 不同水平的中草藥添加劑對鯉魚生產(chǎn)性能的影響
2.2 不同水平中草藥添加劑對鯉魚血清生化指標(biāo)的影響由表3可知,日糧中不同水平的中草藥添加劑對TC、TG的影響有顯著性差異(P<0.05),HDL含量均顯著低于試驗A組(P<0.05)。C、D組血清LDL顯著低于試驗A組(P<0.05),但B組與試驗A組無顯著差異(P>0.05)。
表3 不同水平中草藥添加劑對鯉魚血清生化指標(biāo)的影響 mg/dL
2.3 不同水平中草藥添加劑對鯉魚血清抗氧化能力的影響由表4可知,不同水平中草藥添加劑對T-AOC無顯著差異(P>0.05);C、D組的GSH-PX顯著高于對照組(P<0.05);B組、C組、D組的SOD顯著高于對照組(P<0.05);C組MDA含量顯著低于試驗組(P<0.05)。
表4 水平中草藥添加劑對鯉魚血清抗氧化性能的影響
3.1 不同水平中草藥添加劑對生產(chǎn)性能的影響常見中草藥添加劑對魚類具有營養(yǎng)和藥用特性,如蒲公英(彭曉玉,2010)、枸杞(Xu等,2020)、刺五加(李鳴霄等,2019)。其富含蛋白質(zhì)、氨基酸、維生素和微量元素等營養(yǎng)成分。作為飼料添加劑,它們可促進動物生長,提高生產(chǎn)性能。山楂是該復(fù)方中草藥添加劑中的一種成分,屬薔薇科山楂屬植物,具有消食化積、活血散瘀之功效,現(xiàn)代醫(yī)學(xué)認(rèn)為其可助消化、軟化血管、促進營養(yǎng)物質(zhì)的吸收,能適度提高動物生長性能。邱時秀等(2020)報道,飼糧添加桑葉、菊花、黃柏、川芎、當(dāng)歸、山楂、神曲、金銀花、陳皮、青皮等中草藥添加劑可調(diào)節(jié)斷奶新西蘭兔對飼料中蛋白質(zhì)、碳水化合物和脂類營養(yǎng)的利用,提高機體免抗氧化能力,與本文結(jié)論有相似之處。
3.2 不同水平中草藥添加劑對鯉魚血清生化指標(biāo)的影響目前關(guān)于加入藥食同源中草藥對水生動物脂質(zhì)代謝影響的研究不多見。復(fù)方中草藥添加劑成分之一蒲公英是菊科多年生草本植物,具有保肝、降血脂、降血糖等功效。近年來的研究表明,蒲公英及其提取物已廣泛應(yīng)用于多種常見家禽家畜及漁業(yè)生產(chǎn)。李美菊(2020)發(fā)現(xiàn),在飼糧中添加蒲公英提取物能改善羅非魚生長性能、身形指標(biāo)及血液生化指標(biāo),促進羅非魚生長并提高其免疫功能。彭曉玉等(2010)證明,在鯽魚飼料中添加2%和4%蒲公英水提物能促進鯽魚生長、改善肉質(zhì)、提高消化酶活性、增強免疫能力。周潔蕊等(2021)研究表明,在飲水中添加5 g/L的蒲公英多糖能降低肉雞血清中總膽固醇和甘油三酯的含量,并能提高肉雞胸肌中SOD活性,降低MDA含量。本研究結(jié)果表明,在鯉魚日糧中添加8 g/kg的中草藥添加劑能顯著降低血清膽固醇、甘油三酯、低密度脂質(zhì)蛋白和高密度脂質(zhì)蛋白。這表明,該中草藥復(fù)方能減少鯉魚血清中膽固醇沉積,優(yōu)化鯉魚體內(nèi)脂肪分布,改善鯉魚品質(zhì)及其脂質(zhì)代謝。
3.3 不同水平中草藥添加劑對鯉魚抗氧化性能的影響中草藥添加劑可以幫助動物清除體內(nèi)氧自由基,改善其抗氧化功能,并能阻止自由基的多重連接損傷(楊翠等,2021)。在鯉魚生長后期,隨著機體衰老和生殖功能的下降,丙二醛(MDA)等物質(zhì)的含量不斷增加,超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)活性逐漸減少,導(dǎo)致細胞生理功能下降,鯉魚生長速度下降。枸杞是茄科枸杞屬多年生木本植物,具有保肝、清除自由基、抗氧化等生物功能。Xu等(2020)研究發(fā)現(xiàn),羅非魚日糧中添加枸杞多糖可提高其非特異性免疫力,降低細胞凋亡率,并改善羅非魚的生長發(fā)育。在本試驗中,中草藥組鯉魚谷胱甘肽過氧化物酶有所增加,表明機體抗氧化能力有所提高;血清MDA含量降低表明復(fù)方中草藥可以減少自由基的產(chǎn)生,減弱脂質(zhì)過氧化作用,提高機體抗氧化性能。
日糧中添加適量中草藥可以提高鯉魚生長性能和抗氧化性能,降低血脂含量,考慮經(jīng)濟適用性,中草藥添加劑以8 g/kg效果為宜。